荧光定量PCR检测肝癌组织GPC3、HSP70基因表达的临床意义

目的实时定量PCR方法检测肝癌细胞系、13例肝癌组织和癌旁组织GPC3、HSP70基因的表达，探讨定量PCR方法在肝癌早期诊断中的作用。方法应用实时定量荧光RT-PCR技术检测7种不同肝癌细胞系以及13例肝癌组织和癌旁组织中HSP70、GPC3基因的表达。结果发现HSP70基因在6个肝癌细胞系中过表达：GPC3基因在正常永生化肝细胞MIHA几乎不表达，而在H2-M、HUH7、HepG2、PLC、Hep3B中过表达；13例肝癌组织中9例HSP70和7例GPC3过表达。结论HSP70、GPC3基因在肝癌中过表达，有可能作为肝癌的临床早期诊断、治疗的参考指标，实时定量PCR方法能有效用于肝癌的诊断。     

荧光定量PCR检测肝癌组织GPC3、HSP70基因表达的临床意义

目的实时定量PCR方法检测肝癌细胞系、13例肝癌组织和癌旁组织GPC3、HSP70基因的表达，探讨定量PCR方法在肝癌早期诊断中的作用。方法应用实时定量荧光RT-PCR技术检测7种不同肝癌细胞系以及13例肝癌组织和癌旁组织中HSP70、GPC3基因的表达。结果发现HSP70基因在6个肝癌细胞系中过表达：GPC3基因在正常永生化肝细胞MIHA几乎不表达，而在H2-M、HUH7、HepG2、PLC、Hep3B中过表达；13例肝癌组织中9例HSP70和7例GPC3过表达。结论HSP70、GPC3基因在肝癌中过表达，有可能作为肝癌的临床早期诊断、治疗的参考指标，实时定量PCR方法能有效用于肝癌的诊断。     

GPC3和AFP联合检测对原发性肝癌的诊断价值

目的观察和分析磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)和甲胎蛋白(AFP)联合检测对原发性肝癌(PHC)的诊断价值。方法选取60例PHC患者、70例肝硬化患者和50例其它原因致肝破裂患者作为研究对象,对各类患者的血清GPC3和AFP水平和PHC患者的肝组织标本中的GPC3表达水平进行检测。结果肝破裂患者的血清GPC3水平显著低于肝硬化患者(P0.05),肝硬化患者的血清GPC3水平显著低于PHC患者(P0.05);应用血清GPC3和AFP联合检测诊断PHC的敏感度为90%,显著高于单独应用血清GPC3检测或血清AFP检测(P0.05);肿瘤组织的GPC3表达水平显著高于癌旁组织(P0.05),癌旁组织的GPC3表达水平显著高于正常组织(P0.05),具有不同Edmondson病理分级或TMN临床分期的PHC患者的肝组织GPC3表达水平的差异有显著性(P0.05)。结论PHC患者的血清和肿瘤组织中的GPC3均呈现高表达状态,其在肝组织中的表达水平可能与患者病情的进展具有相关性,应用血清GPC3和AFP水平联合检测可提高诊断PHC的敏感度。     

血清GPC3与AFP的检测对原发性肝癌诊断意义比较

目的检测原发性肝癌患者血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（glypican-3,GPC3）和甲胎蛋白（AFP）水平,比较二者对肝癌的诊断价值,并探讨二者的相关性。方法对120例肝癌、32例肝硬化病人及25例正常人血清标本,通过ELISA法检测标本GPC3值,电化学发光法检测标本AFP值并对结果进行分析。结果 （1）肝癌组GPC3值为22.014±36.930ng/ml,与正常对照组及肝硬化组之间差异存在显著性（P〈0.01）。（2）GPC3对肝癌诊断的敏感度及特异度分别为85.83%和50.00%;AFP对肝癌诊断的敏感度及特异度分别为83.33%和62.50%,GPC3与AFP之间差异没有显著性（P〉0.05）;二者联合检测敏感度及特异度分别为95.83%和46.88%,敏感度有所提高。（3）肝癌组GPC3与AFP之间无相关性（P〉0.05）。结论 GPC3作为一种新的肿瘤标志物对肝癌诊断的敏感性较高,GPC3与AFP联合诊断更能提高肝癌的检出率,但二者之间并无相关性。     

血清GPC3联合AFP检测对肝癌患者诊断与肝功能评估的价值

目的探讨血清磷酸酯酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)联合甲胎蛋白(AFP)检测对原发性肝癌(PHC)患者诊断与肝功能的评估价值。方法选择52例PHC患者纳入研究组;同时选择肝硬化患者18例,慢性乙型肝炎患者16例,脂肪肝患者10例及肝血管瘤患者8例纳入病例对照组(52例);选择同期参加体检的健康人52例纳入健康对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清GPC3水平,电化学发光法检测血清AFP水平。结果研究组患者GPC3、AFP水平高于病例对照组和健康对照组,差异有统计学意义(P0.05);病例对照组GPC3、AFP水平高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。PHC组患者AFP水平与GPC3呈正相关(r=0.579,P0.05);以血清GPC3≥20ng/mL、AFP≥200ng/mL为诊断阳性值,GPC3诊断PHC的敏感度为65.38%,特异度为92.31%;AFP诊断PHC的敏感度为71.15%,特异度为84.62%;二者结合诊断PHC的敏感度为90.38%,特异度为88.46%。GPC3联合AFP检测诊断敏感度高于单纯GPC3检测及AFP检测(P0.05)。PHC患者组GPC3阳性患者AST、ALT、PT水平明显高于GPC3阴性患者,ALB水平明显低于GPC3阴性患者,差异有统计学意义(P0.05)。结论血清GPC3水平与原发性肝癌关系密切,GPC3和AFP联合检测有助于提高诊断敏感度并有助于判断患者肝功能。     

抗GPC3/CD3双特异性重链抗体的制备及其抗肝癌作用评价

目的:设计并制备抗GPC3/CD3双特异性重链抗体(BiHcAb),分析其与双特异性T细胞衔接子(BiTE)在体内外抗肿瘤活性的差异.方法:通过全基因合成抗GPC3和抗CD3单域抗体(sdAb)序列,克隆至携带IgG4 Fc段的表达载体中,同时利用KIH技术形成稳定的双特异性重链抗体.2种质粒共转染HEK-293F细胞...     

血清GPC3联合AFP对原发性肝癌的诊断价值探讨

原发性肝癌早期诊断是改善预后的关键。AFP联合肝脏超声筛查和随访是早期诊断的主要途径，但对慢性肝病基础上较为常见的良性病变与小肝癌的鉴别仍较困难。AFP≥200μg／L作为诊断肝癌临界值（cut-off值），敏感度仅为20％～45％ AFP异质体（AFP-13）检测等对肝癌有很好的特异度，但是敏感度也低H0。磷脂酰肌醇硫酸类肝素蛋白聚糖3（glypican-3，GPC3）是通过磷脂酰肌醇（GPI）锚定于细胞膜表面脂质的硫酸类肝素蛋白聚糖，参与调节胚胎生长发育。国外研究显示，GPC3在80％～90％肝癌组织中表达水平显著上调，[第一段]     

荧光纳米探针在肝癌早期诊疗的研究进展

肝癌的早期诊疗一直是医学领域试图攻克的难题,而纳米技术的发展为肝癌早期诊疗带来新的机遇。目前,荧光纳米探针凭借其良好的靶向性及高敏感度等优势已广泛应用于肝癌成像与诊疗领域。本文将分别从特异性靶向肝癌探针、近红外荧光成像及多模态荧光成像、诊疗一体化三个方面归纳总结荧光纳米探针在肝癌早期诊疗领域的研究进展,提出纳米探针发展亟待解决的问题,并对诊疗一体化纳米体系在肝癌中的应用进行预测。     

血清GPC3与TGF-β1联合检测对AFP阴性原发性肝癌的诊断价值

目的探讨血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)、转化生长因子-β1(TGF-β1)2种肿瘤标志物在甲胎蛋白(AFP)阴性原发性肝癌(PHC)中的诊断价值及联合检测的意义。方法 PHC组90例,肝硬化组30例,良性肝病组30例,对照组健康体检者30例,检测血清中AFP、GPC3、TGF-β1的浓度,并进行比较。结果 PHC组患者血清AFP、GPC3、TGF-β1水平及阳性率均明显高于肝硬化组、良性肝病组及对照组,差异有统计学意义(P0.05)。AFP阴性PHC患者血清AFP、GPC3、TGF-β1水平与AFP阳性PHC患者比较差异均无统计学意义(P0.05)。AFP阴性PHC患者血清GPC3、TGF-β1水平及阳性率均明显高于肝硬化组、良性肝病组及对照组,差异有统计学意义(P0.05)。GPC3与TGF-β1联合检测对AFP阴性PHC诊断的灵敏度及准确度明显高于单独检测。结论 GPC3与TGF-β1联合检测对PHC的诊断具有重要价值。     

双探针实时荧光定量检测HCV RNA的研究

目的建立双探针荧光定量HCV RNA检测方法,探讨解决HCV RNA定量灵敏度和特异性问题。方法对89例抗HCV抗体阳性和220例阴性样本用双探针荧光定量法和两种商品荧光定量试剂方法进行检测。结果双探针荧光定量法阳性率分别为91.0%(81例)和2.72%(6例)。两种商品荧光定量试剂方法阳性率分别为82.0%(73例)和0.9%(2例);79.7%(71例)和2.27%(5例)。结论双探针荧光定量提高了HCV RNA检测的灵敏度和特异性。     

荧光定量两探针法检测HCV RNA的研究

目的 建立荧光定量两探针检测HCV RNA方法.方法 对105例抗HCV抗体阳性和220例阴性样本,用荧光定量两探针法和2种商品荧光定量试剂进行检测,并对检测结果进行比较.结果 荧光定量两探针法阳性率分别为89.5%（94/105）和2.3%（5/220）.两种商品荧光定量试剂阳性率分别为71.4%（75/105）和0.45%（1/220）;69.5%（73/105）和1.8%（4/220）.结论 荧光定量两探针法检测HCV RNA有较高的敏感性和特异性.     

AFP-L3、GP73、GPC3联合检测在原发性肝癌诊断中的应用价值

目的：探讨3项血清肿瘤标志物甲胎蛋白异质体3（AFP-L3）、高尔基体蛋白73（GP73）和磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（GPC-3）联合检测在原发性肝癌（PHC）诊断中的临床价值。方法采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测PHC组34例,肝硬化组20例,慢性乙型肝炎组20例,其他肿瘤组37例血清AFP-L3、GP73、GPC-3的表达水平,同期选择20例门诊健康体检者作为对照组。对各指标表达情况进行比较和分析。结果 PHC组AFP-L3、GP73、GPC-3表达水平明显高于对照组和其他肿瘤组,差异有统计学意义（P＜0．05）;3项标志物单项检测PHC的ROC曲线下面积分别为0．909、0．832、0．817;两两联合检测ROC曲线下面积分别为0．935、0．945、0．912,3项指标联合检测PHC的ROC曲线下面积可高达0．960。结论联合检测AFP-L3、GP73和GPC-3可提高PHC的检出率,对PHC的早期诊断具有重要的临床意义。     

新型荧光免疫层析技术对Miltenberger血型抗体检测的实验研究

目的Miltenberger血型抗体的发生率在东南亚地区很高,临床报告已证实该血型抗体会导致输血不良反应、新生儿溶血病等疾病。但由于缺少相关的试剂和技术,且目前多数医疗机构使用的抗体筛查细胞中并没有包含Miltenberger血型抗原,常规检测无法鉴定抗体的特异性,导致对存在该抗体的患者漏检。考虑到抗-Mur在临床上的重要性,我们     

基于MGB探针法荧光PCR检测手足口病病原的研究

目的建立一种能同时检测EV71型、CA16型及其它肠道病毒的荧光PCR检测方法,主要用于手足口病病原的快速检测。方法针对肠道病毒的保守基因设计特异性引物和探针序列,优化荧光RT-PCR反应体系,构建标准的阳性质控模板,建立标准曲线,研究产品的检测限、重复性、特异性;同时对2015年6月份收集的26份阳性样品和10份阴性样品进行检测。结果试验得到了阳性重组质粒,线性范围在8×10~2 copies/μl~8×10~8 copies/μl范围内检测结果良好;优化后肠道病毒EVUN上下游引物和MGB探针浓度分别为0.50,0.50,0.30μmol/L,RT-PCR反应条件为:42℃30min,95℃3min;95℃5s,60℃35s,45个循环。检测限达到800copies/μl,变异系数CV≤5%,重复性好,特异性良好,与其他传染病毒无交叉反应;用该检测方法检测26份临床阳性样本和10份阴性样本,阳性检出率为100%(26/26),阴性检出率为100%(10/10)。结论试验所建立的荧光PCR检测方法,可用于临床对手足口病病原的快速检测。     

带有温自身抗体病人体内的同种抗体的检测

自身抗体的存在往往掩盖同种抗体的检测,而同种抗体引起的溶血性输血反应常常很严重,甚至可导致死亡。所以用一定的方法检测带有自身抗体病人体内的同种抗体是十分必要的。常用的检测技术有稀释法、自身吸收、同种吸收等。本文介绍并比较上述三种检测技术,期望这些实用技术得以广泛而合理的应用。     

带有温自身抗体病人体内的同种抗体的检测

自身抗体的存在往往掩盖同种抗体的检测,而同种抗体引起的溶血性输血反应常常很严重,甚至可导致死亡。所以用一定的方法检测带有自身抗体病人体内的同种抗体是十分必要的。常用的检测技术有稀释法、自身吸收、同种吸收等。本文介绍并比较上述三种检测技术,期望这些实用技术得以广泛而合理的应用。     

血清GPC3、GP73、AFP水平联合检测对肝细胞肝癌患者早期诊断效能的影响

目的分析血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)、高尔基体蛋白73(GP73)、甲胎蛋白(AFP)水平联合检测对肝细胞肝癌(HCC)患者早期诊断效能的影响。方法选取2016年8月～2018年6月我院34例HCC患者为HCC组、20例慢性乙型肝炎(CHB)患者为CHB组,并选取38例同期健康体检者为健康对照组。以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清GPC3;以蛋白印迹法检测检测GP73水平;以免疫化学发光法检测血清AFP水平,分析对比GP73、GPC3、AFP联合诊断的准确性、敏感性、特异性。结果 HCC组患者血清GP73、GPC3、AFP水平高于CHB组和对照组,差异有统计学意义(P0.05);GPC3、AFP、GP73联合检查的准确性、敏感性均高于单独检查,差异有统计学意义(P0.05);而GPC3、AFP、GP73联合检查的特异性与单独检查比较,无显著性差异(P0.05)。结论血清GPC3、GP73、AFP水平联合检测应用于HCC患者早期诊断,可有效提高诊断效果,为临床诊治提供重要参考。     

血清AFP、GP73和GPC3联合检测在原发性肝癌诊断中的应用

目的探讨甲胎蛋白(AFP)、高尔基体蛋白73(GP73)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)联合检测在原发性肝癌(PHC)诊断中的临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测148例PHC患者、73例肝硬化(LC)患者、57例慢性乙型肝炎(CHB)患者及85名健康人(正常对照组)血清GP73、GPC3含量,同时采用免疫化学发光法检测血清AFP含量,并对检测结果进行比较。结果 PHC组GP73、GPC3、AFP血清水平分别为346.9±208.7、143.1±66.9和(690.3±402.5)μg/L,与LC组、CHB组和正常对照组血清水平比较差异具有统计学意义(P均0.01);血清AFP、GP73、GPC3联合检测诊断PHC的敏感性为95.9%,准确性为89.2%。结论血清AFP、GP73、GPC3联合应用能弥补单项肿瘤标志物临床应用的不足,对提高PHC的阳性检出率及鉴别诊断具有重要的临床意义。     

体内含有自身抗体时流行性出血热抗体的检测方法

取病人血清0.5ml,加入未被出血热病毒感染的新鲜鸡肝(或其他动物肝)0.5g(先捣碎用PBS盐水洗涤三次),37℃60′后取上清液待检.因为鸡肝细胞能吸附抗核抗体和抗线粒体抗