两种核酸提取方法对HBV DNA定量检测结果的影响

目的研究磁珠法和煮沸法两种核酸提取方法对血浆乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量检测结果的影响。方法采用磁珠法和煮沸法同步处理106例"小三阳"或"大三阳"乙型肝炎患者血浆,通过荧光定量聚合酶链反应(PCR)定量检测,比较两种方法的阳性率、定量检测结果并分析两者的关系。结果 106例乙型肝炎患者血浆经磁珠法和煮沸法处理后的HBV DNA阳性率分别为81.1%和71.7%,其中"小三阳"患者的HBV DNA阳性率分别为76.9%、66.7%,"大三阳"患者的阳性率分别为92.8%、85.7%;磁珠法中HBV DNA荧光定量PCR测得其载量为(3.93±2.43)log10copies/mL,而煮沸法为(3.35±2.76)log10copies/mL,且"小三阳"和"大三阳"患者标本经磁珠法提取均明显高于煮沸法提取的PCR检测结果;上述结果经统计学分析差异均有意义(P0.05);此外,两种核酸提取方法处理条件下的HBV DNA载量呈较好的线性关系(R2=0.869 3,P0.05)。结论磁珠法提取核酸阳性率高,检测灵敏度高,值得实验室推广,可用于临床诊断。     

江苏地区乙型肝炎患者HBV基因分型与血清HBV DNA水平研究

目的 了解江苏地区乙型肝炎病毒基因型分布特征,探讨HBV各基因型与血清HBV DNA水平、患者年龄之间的关系.方法 采用荧光定量PCR结合Taqman MGB探针技术,对江苏地区176份乙型肝炎患者血清中的HBV DNA进行基因分型和定量检测.结果 176例血清中,C型117人(66.5%),B、C型40人(22.7%),B型9人(5.1%),D型1人(0.6%),A型1人(0.6%).C型与B、C混合型在HBV DNA水平上存在显著差异(t=2.413,P＜0.05),B、C混合型的HBV DNA水平明显高于C型.C基因型在慢性乙型肝炎患者中的所占比例(71.4%)比在急性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者中所占的比例较高,但差异无显著性.HBV DNA各基因型在患者年龄水平上没有明显差异(P＞0.05).结论 江苏地区HBV基因型以C型为主、B、C混合型次之,B型较少,D型、A型极少;B、C混合型患者的HBV DNA数量水平显著高于C型.     

磁珠分离纯化技术在实时荧光定量PCR检测HBV DNA中的应用

目的 评价磁珠分离纯化技术(简称磁珠法)提取核酸的重复性、提取效率一致性、线性范围、灵敏度及抗干扰性,初步探讨其在实时荧光定量PCR检测HBV DNA中的应用价值.方法 采用磁珠法提取HBV DNA log值分别为4.16,5.23和7.04的质控血清进行重复性试验,HBV DNA阳性血清10倍梯度稀释的系列标本评价其提取效率一致性,HBV DNA强阳性血清作10倍系列稀释后检测其线性范围,HBV DNA标准血清与含干扰成分(溶血、黄疸和脂血)的HBV DNA 阴性血清,按4∶0,3∶1,2∶2,1∶3和0∶4比例分别混合成5个不同浓度标本用于干扰试验.以提取方法为沉淀煮沸法的PCR 荧光诊断试剂作对照,应用磁珠法及配套扩增试剂检测288份乙型肝炎患者血清HBV DNA含量,并比较测定结果.结果 磁珠法批内和批间平均变异系数分别为3.66%和4.75%;HBV DNA含量不同的血清提取效率均在98%以上;在1.28×102IU/L～1.28×109IU/L之间有良好的线性关系;最低检出限为60.5 IU/L;不同浓度的黄疸和脂血对扩增曲线和实验结果无明显影响;血清中血红蛋白浓度至50 g/L时,HBV DNA结果相差约0.5～1.0个数量级.磁珠法和沉淀煮沸法的阳性率分别为88.19%和82.64%.当沉淀煮沸法检测结果log值处在2.699～4.000之间时,两法检测相应标本结果差异有统计学意义.结论 磁珠法高效、快速和易于自动化,应用于HBV DNA检测对乙型肝炎患者的临床诊断和疗效监测将有十分重要的意义.     

江苏地区乙型肝炎患者HBV基因分型与血清HBV DNA水平研究

目的了解江苏地区乙型肝炎病毒基因型分布特征,探讨HBV各基因型与血清HBV DNA水平、患者年龄之间的关系。方法采用荧光定量PCR结合Taqman MGB探针技术,对江苏地区176份乙型肝炎患者血清中的HBV DNA进行基因分型和定量检测。结果176例血清中,C型117人(66.5%),B、C型40人(22.7%),B型9人(5.1%),D型1人(0.6%),A型1人(0.6%)。C型与B、C混合型在HBV DNA水平上存在显著差异(t=2.413,P<0.05),B、C混合型的HBV DNA水平明显高于C型。C基因型在慢性乙型肝炎患者中的所占比例(71.4%)比在急性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者中所占的比例较高,但差异无显著性。HBV DNA各基因型在患者年龄水平上没有明显差异(P>0.05)。结论江苏地区HBV基因型以C型为主、B、C混合型次之,B型较少,D型、A型极少;B、C混合型患者的HBV DNA数量水平显著高于C型。     

广州地区乙型肝炎患者HBV基因型和耐药突变基因的相关性研究

目的分析广州地区乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布特点、耐药突变基因状况及二者的关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测344例广州地区慢性乙型肝炎患者血清标本的HBV DNA载量,采用酶联免疫吸附试验检测HBV标志物,采用PCR和DNA反向点杂交技术检测HBV基因分型和拉米夫定、替比夫定、阿德福韦酯和恩替卡韦耐药突变基因。结果 344例慢性乙型肝炎患者中HBV基因B型179例,占52.03%;C型136例,占39.53%;D型4例,占1.16%;B、C混合型14例,占4.07%;B、D混合型2例,占0.58%;其他型9例,占2.62%。不同HBV基因型的HBV DNA载量结果差异无统计学意义(P0.05)。对拉米夫定、阿德福韦脂、恩替卡韦和替比夫定耐药例数分别是95、49、20和84例,敏感例数分别是249、295、324和260例。突变基因型以rt181T最多,且多见于C基因型(110例)。结论广州地区乙型肝炎患者HBV基因型以B型为主;HBV C基因型容易产生耐药,检测HBV基因型和耐药突变型是评价慢性乙型肝炎临床治疗疗效和选择用药的重要指标。     

昆明地区HBV DNA基因型的分布特征

目的研究云南省昆明地区乙型肝炎病毒(HBV)的基因分型特征。方法采用荧光定量PCR及基因型特异性引物PCR方法,对云南省昆明地区360例HBV感染血清进行HBV DNA定量及基因分型检测,以ELISA法检测血清乙肝标志物。结果 360例HBV感染血清中有346例(96.11%)可以直接分型,其中196例(56.65%)为C型,91例(26.30%)为B型,37例(10.69%)为C/B混合型,21例(6.07%)为D型,A型仅1例(0.29%);比较显示,C型基因分布率显著高于其他基因型(P0.01);C基因及C、B混合基因型患者HBV-DNA定量显著高于B基因及其他基因型患者(P0.01或P0.05);另除B型基因在"大三阳"模式中比例显著较低(P0.05),HBV基因型在其他各血清模式组间的分布差异无统计学意义(P0.05);14例标本未能直接分型(3.89%),其HBV-DNA定量平均水平为4.136×10~3 IU/mL显著低于其他检样(P0.05)。结论昆明地区HBV基因型的分布较为丰富,存在C型、B型、C/B混合型及D型和A型,其中以C型和B型为本区域的主要HBV基因型;当C/B混合型和C型的HBV感染时,往往伴随HBV较高水平复制,且HBV感染B基因型与HBeAg的检出呈负相关;本区域内D基因型分布率介于内地低海拔区域和拉萨高原地带之间。这些可能是本区域内HBV基因型分布的流行病学特征。未能直接分型检样的HBV-DNA定量均较低,可能说明HBV基因分型应该在一定的HBV-DNA定量水平基础上进行。     

实时荧光聚合酶链反应检测HBV基因型方法的建立和临床研究

目的 建立实时荧光聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎病毒（HBV）基因型方法并对检测的慢性乙型肝炎（CHB）患者基因型进行临床分析。方法 根据GenBank中已发表的明确分型的143株HBV全序列，设计特异的组合引物探针，建立实时荧光PCR方法，检测128例慢性乙型肝炎患者基因型；同时检测HBVDNA、HBV-M。结果 （1）128例标本中B型检出率为20．3％（26／128），C型占71．9％（92／128），D型占7．8％（10／128）；18株HBV克隆标本S基因测序结果与本分型法完全一致。（2）男性与女性的HBV基因型构成比无明显差异（P=0．561）。B型与C型比较，C基因型HBVDNA含量（P〈0．05）和HBeAg阳性率（P〈0．01）明显高于B基因型。基因型B具有更高的HBeAb水平（P〈0．05）。结论 （1）实时荧光聚合酶链反应HBV基因分型法能够简便、灵敏、快速、准确地鉴定HBV基因型。（2）HBV基因型主要以C型为主，其次为B型、D型。在CHB患者中，性别不是基因型构成差别的因素，C基因型易引起较重的肝脏病变，B型易发生免疫逃逸，致病情较轻。     

应用MGB探针检测人乙型肝炎病毒的基因型

目的检测血浆或血清样本中人乙型肝炎病毒HBV的基因型,建立了基于MGB探针的实时荧光定量PCR检测体系。方法在HBV基因组型特异性碱基的聚集区域设计荧光定量PcR引物及探针。为保证特征特异性及高分辨率,选择设计MGB探针,然后将PCR扩增的产物纯化后进行基因克隆．克隆成功后提取的质粒制备为阳性质控品,从而建立完整的MGB探针法的荧光定量PCR检测体系,最后对该检测体系进行方法学评价。结果成功建立了基于MGB探针的HBV荧光定量PCR的基因分型检测体系。方法学评价显示,该检测体系的灵敏度达50IU／mL;重复性好;特异性良好,以多种血浆病毒的核酸样品为模板进行检测时结果全为阴性。结论本研究建立基于MGB探针的HBV荧光定量PCR的基因分型检测方法,可以很好地定性的检测血浆或血清样本及血液制品中的人乙型肝炎病毒HBV的基因型及含量,对于该疾病的临床治疗具有重要的意义。     

CHB患者HBV基因型及耐药突变基因联合检测临床研究

目的研究慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)基因型分布特征,监测HBV发生耐药突变基因状况。方法随机收集CHB患者血清样本共52例,其中男性32例,女性20例。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清HBV DNA含量。通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和反向斑点(reverse dot blot,RDB)杂交技术联合检测HBV基因型以及多位点耐药突变基因,并对受检者相关资料进行分析,统计学分析所用软件为GraphPad Prism 5.0。结果男性患者平均HBV DNA含量5.38±1.15 lg IU/ml,女性患者平均HBV DNA含量5.05±1.59 lg IU/ml。不同性别组之间HBV DNA含量差异无统计学意义(t＝0.875　0,P＝0.3857＞0.05)。HBV C基因型检出率最高48.08%(25/52),其次为B基因型36.54%(19/52)。总耐药突变率30.77%(16/52),rt204位点发生突变率最高50.0%(8/16)。HBV不同基因型之间不同位点发生耐药突变频率差异无统计学意义(χ2＝7.286,P＝0.6982＞0.05)。结论C型为优势流行基因型;rt204为最易产生耐药突变基因位点;联合检测HBV基因分型和耐药突变基因具有重要临床意义。     

河源地区乙肝病毒分型和耐药突变基因检测的应用

了解河源地区乙型肝炎(HBV)基因分型和耐药基因变异特征,探讨HBV YMDD变异与基因分型、DNA载量和HBe Ag之间的关系。应用实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术对60例乙肝患者血清进行基因分型和耐药突变检测及HBV DNA定量检测。60例乙肝患者中B基因型52例(86.6%),C基因型6例(10.0%),B/C混合基因型2例(3.4%)。B基因型在乙肝患者中所占构成比最高,C基因型次之,B/C混合基因型最低,差异有显著性(P0.01)。B基因型、C基因型及B/C基因型之间HBV DNA载量及HBe Ag阳性率差异均无显著性(P0.05)。检出YMDD变异38例,变异率63.3%;各基因型间YMDD变异的差异无统计学意义(P0.05)。HBV YMDD变异的监测对乙肝患者的精准治疗和个体化抗病毒方案的知道具有重要的指导意义,HBV基因分型对病情预测和转归都有重要临床意义。     

两种前处理流程检测HBV DNA的重复性比较

目的 为乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)定量检测提供一种快速、简便、准确的新手段.方法 采用直接煮沸法和浓缩碱裂解法(试剂盒法)提取血清样本核酸模板.收集乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性患者血清70份,求出标本的均值、标准差,两种标本处理方法所得测定结果的比较采用配对t检验.结果 直接煮沸法与试剂盒法检测HBV DNA结果比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 采用直接煮沸法从血清中提取HBV DNA无需反复开盖操作,避免了交叉污染.该提取方法所获得的核酸能很好地满足荧光定量检测技术对模板的要求,既提高了工作效率,又减少了资源的浪费,省时、省电、省耗材.     

国产荧光定量PCR与COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan v 2.0检测HBV DNA结果比较

目的针对不同HBV分型,比较某国产实时荧光定量PCR试剂与Roche公司COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan v 2.0试剂检测HBV DNA的结果。方法根据HBV分型结果,抽取72份慢性乙型肝炎患者血清标本,用Roche公司COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan v 2.0(试剂A)和某国产实时荧光定量PCR(试剂B)对72份慢性乙型肝炎患者血清标本进行HBV DNA定量检测,以分析针对不同HBV分型样本,国产试剂与试剂A的相关性。结果试剂A和B测得的HBV DNA结果 (IU/mL)以10为底数取对数分别为5.67±1.67和5.72±1.75,两者结果差异无统计学意义(P0.05)。共检测72份样本,其中63例A、B两种试剂检测结果有数值。此63例总相关系数(r)为0.94(P0.01),试剂A与试剂B对63例样本中HBV基因型B型、C型和B/C混合型样本检测结果 r分别为0.94、0.95和0.92(P0.05)。对于HBV DNA定量结果 104IU/mL标本,试剂B与试剂A相关性较低(r=0.31,P=0.35)。结论对于不同的HBV基因型,试剂B与试剂A在检测HBV DNA方面有较好相关性,适用于HBV DNA的临床检测,但在低HBV载量时试剂B与试剂A相关性较低。建议结合临床诊治进程和检测的效率及检测费用等因素,选择适当的检测试剂。     

HBV基因分型和耐药突变基因检测

目的探讨东营地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布,乙型肝炎患者耐药情况,HBV基因型别与耐药以及突变位点关系。方法收集乙型肝炎患者血清300例,采用离心柱法提取HBV-DNA,聚合酶链反应(PCR)-反向点杂交法检测HBV分型和耐药突变。结果 300例HBV-DNA阳性患者中,检出B型、C型、B/C型及其他未检测出的基因型,未检出D型分型,检出结果中以C型为主,占81.8%;HBV患者耐药药物以拉米夫定和替比夫定的联合耐药为主,占43.6%;HBV耐药突变基因型主要为rt204I(24.35%)、rt204V(17.39%)及rt180M(17.39%);B型和C型的耐药突变率分别为30.77%和42.42%,差异有统计学意义(P0.05)。结论东营地区HBV基因C型多于B型,C型容易产生耐药,以rt204I,rt204V及rt180M基因突变型多见,拉米夫定和替比夫定的联合耐药多见,应根据基因分型和耐药突变结果对乙型肝炎患者选择适合的治疗方案。     

东莞地区乙型肝炎患者HBV基因分型研究

目的检测分析东莞地区乙型肝炎(下称乙肝)患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布及其与性别、HBV血清标志物和HBV DNA定量值的关系。方法用聚合酶链反应(PCR)-微板核酸杂交-酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测6种HBV基因型,ELISA法检测血清HBV标志物(两对半),荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测血清HBV DNA定量值,并对结果进行分析。结果东莞地区206例乙肝患者HBV基因型分布:C型为主69.42%(143/206)、B型11.17%(23/206)、D型7.28%(15/206)、B+C混合型5.83%(12/206)、C+D混合型5.34%(11/206)、B+D混合型0.97%(2/206)。基因型男、女性别检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。基因型C与其它各基因型检出率比较差异有统计学意义(P<0.01)。各基因型阳性组血清平均HBV DNA定量值大于1×106(copy/ml),各基因型阳性组与基因型阴性组血清平均HBV DNA定量值比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论东莞地区乙肝患者HBV基因型分布以C型为主。基因型阳性检出率从高到低依次为C、B、D、混合型(B+C型、C+D型、B+D型)。HBV基因型检出率与性别关系不明显,与HBV血清标志物和HBV DNA定量值有一定关系。东莞地区HBV基因型分布状况可能与本地区外来人群相关。     

昆明地区HBV DNA基因型的分布特征

目的 研究云南省昆明地区乙型肝炎病毒(HBV)的基因分型特征.方法 采用荧光定量PCR及基因型特异性引物PCR方法 ,对云南省昆明地区360例HBV感染血清进行HBV DNA定量及基因分型检测,以ELISA法检测血清乙肝标志物.结果 360例 HBV感染血清中有346例(96.11%)可以直接分型,其中196例(56.65%)为C型,91例(26.30%)为B型,37例(10.69%)为C/B混合型,21例(6.07%)为D型,A型仅1例(0.29%);比较显示,C型基因分布率显著高于其他基因型(P<0.01);C基因及C、B混合基因型患者HBV-DNA定量显著高于B基因及其他基因型患者(P<0.01或P<0.05);另除B型基因在"大三阳"模式中比例显著较低(P<0.05),HBV基因型在其他各血清模式组间的分布差异无统计学意义(P>0.05);14例标本未能直接分型(3.89%),其HBV-DNA定量平均水平为4.136×103IU/mL显著低于其他检样(P<0.05).结论 昆明地区HBV基因型的分布较为丰富,存在C型、B型、C/B混合型及D型和A型,其中以C型和B型为本区域的主要HBV基因型;当C/B混合型和C型的HBV感染时,往往伴随HBV较高水平复制,且HBV感染B基因型与HBeAg的检出呈负相关;本区域内D基因型分布率介于内地低海拔区域和拉萨高原地带之间.这些可能是本区域内HBV基因型分布的流行病学特征.未能直接分型检样的HBV-DNA定量均较低,可能说明HBV基因分型应该在一定的HBV-DNA定量水平基础上进行.     

昆明地区HBV DNA基因型的分布特征

目的 研究云南省昆明地区乙型肝炎病毒(HBV)的基因分型特征.方法 采用荧光定量PCR及基因型特异性引物PCR方法 ,对云南省昆明地区360例HBV感染血清进行HBV DNA定量及基因分型检测,以ELISA法检测血清乙肝标志物.结果 360例 HBV感染血清中有346例(96.11%)可以直接分型,其中196例(56.65%)为C型,91例(26.30%)为B型,37例(10.69%)为C/B混合型,21例(6.07%)为D型,A型仅1例(0.29%);比较显示,C型基因分布率显著高于其他基因型(P<0.01);C基因及C、B混合基因型患者HBV-DNA定量显著高于B基因及其他基因型患者(P<0.01或P<0.05);另除B型基因在"大三阳"模式中比例显著较低(P<0.05),HBV基因型在其他各血清模式组间的分布差异无统计学意义(P>0.05);14例标本未能直接分型(3.89%),其HBV-DNA定量平均水平为4.136×103IU/mL显著低于其他检样(P<0.05).结论 昆明地区HBV基因型的分布较为丰富,存在C型、B型、C/B混合型及D型和A型,其中以C型和B型为本区域的主要HBV基因型;当C/B混合型和C型的HBV感染时,往往伴随HBV较高水平复制,且HBV感染B基因型与HBeAg的检出呈负相关;本区域内D基因型分布率介于内地低海拔区域和拉萨高原地带之间.这些可能是本区域内HBV基因型分布的流行病学特征.未能直接分型检样的HBV-DNA定量均较低,可能说明HBV基因分型应该在一定的HBV-DNA定量水平基础上进行.     

P基因片段测序分析HBV基因分型及耐药位点

目的 建立一种高效、准确的HBV基因分型及核苷类药物相关耐药突变位点分析的新方法.方法 2011年7至8月在太原市第三人民医院收集48份乙型肝炎患者血清标本,利用商品化核酸提取试剂盒提取标本DNA,然后分别进行HBV全基因组和P基因片段扩增,最后对产物进行测序分析,通过构建系统发生树和Genotyping软件分析两种方法进行基因分型,并对两种扩增产物的分型结果进行比较.结果 共得到48条HBV全基因组序列,通过构建系统发生树和Genotyping软件分析两种方法确定12条B型序列和36条C型序列;对HBV P基因片段测序产生的序列进行分型,结果与全基因组测序分析完全一致.通过对HBV P基因序列进行分析,共发现7种核苷类药物耐药突变形式,所测标本突变比例达27.1％ (13/48),其中所有突变均与拉米夫定或阿德福韦酯相关,未检测到其他核苷类药物相关耐药突变位点.另外,利用荧光定量PCR法对同样48份标本进行分型检测,共得出B型11例,C型35例,BC混合型2例.结论 乙型肝炎病毒P基因片段测序可能是一种新型乙型肝炎病毒分型方法.同时,该方法还可对核苷类药物相关耐药突变进行分析,为乙型肝炎临床治疗提供依据.     

鲁南地区HBV基因型和HBV核心启动子双点突变与肝硬化、肝癌的关系

目的研究鲁南地区肝细胞癌(HCC)、肝硬化(LC)患者与乙型肝炎病毒(HBV)基因型及基本C区启动子(BCP)基因区A1762T/G1764A双位点变异之间的关系,探讨其相关性。方法按慢性HBV感染者111例的不同临床分型,对其中HCC、LC和慢性乙型肝炎(CHB)患者各37例,采用实时荧光定量PCR法及PCR微板核酸杂交ELLSA技术进行HBV基因定量、分型检测;采用HBV基因多态性芯片检测BCP区A1762T/G1764A双位点变异;对不同性别、年龄、病毒基因型分布、临床分型患者进行HBV基因分型、BCP区双突变,以及不同HBV基因型BCP双突变的比较。结果在CHB、LC、HCC患者中,HBeAg阴性者分别为24.3%、75.7%和83.8%;HCC患者HBeAg阴性率较CHB患者明显升高(P<0.05)。男、女性别HBV均以C基因型占优势,分别为57.3%和54.5%,性别间无统计学差异(P>0.05);年龄<30岁组HBV以B基因型(40.3%)、C基因型(51.7%)占优势,≥30岁组以C基因型(67.2%)占优势,<30岁组B基因型构成比高于≥30岁组(29.6%,P<0.05);HCC、LC患者中HBV以C基因型为主,分别占73.0%和75.6%。BCP双突变率在HCC、LC分别为64.9%和56.8%;HBVC基因型多发生BCP双突变,占63.6%(42/66)。结论鲁南地区HBV基因型以C型和B型为主,其中LC、HCC患者基因型以C型占优势,HCC患者BCP双突变率显著高于CHB患者,在慢性HBV感染者中HBVC基因型多发生BCP双突变。     

闽南地区乙肝病毒基因型与临床疾病的关系

目的 探讨闽南地区乙肝病毒基因型与临床疾病的关系.方法 采用实时荧光PCR法,对179例HBV感染者进行HBV基因分型,并检测血清HBV DNA、HBeAg及肝功能指标.结果 本地区HBV基因型以B型为主,其次为C型,少部分BC混合型.C型患者血清HBV DNA水平、HBeAg含量、HBeAg阳性率、肝功能指标均显著高于B型.结论 闽南地区HBV基因型以B型为主;C型HBV复制能力强,易引起较重肝损伤,与乙型肝炎病情加重有关.     

磁珠法测定痕量肝炎病毒的研究

目的寻求灵敏而简便的肝炎病毒临床检测新方法。方法采用氧化硅包覆的磁珠同时提取肝炎病毒的DNA及RNA,结合荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)及丙型肝炎病毒(HCV)。结果磁珠法可以同时提取HBV-DNA和HCV RNA,磁珠法提取HBV-DNA的效率高于离心柱法和煮沸法,磁珠法提取HCV RNA的效率与离心柱法相近,但提取效率都高于煮沸法。结论将磁珠的富集分离与高灵敏度的检测手段相结合,可显著提高检测的特异性和灵敏度,且方法简便可自动化操作,可以满足大批样品肝炎病毒筛选检测的要求,适用于血液中心筛查及医院检测等领域。