高原低氧家兔肝细胞超微结构的体视学研究

本文对低氧环境下的家兔肝细胞超微结构的变化进行了体视学研究。通过测试和计算家兔肝细胞超微结构各密度参数，发现进入高原后第1周的肝细胞内线粒体数量明显减少（P＜0．05），但在第3周有回升的趋势。线粒体的体积普遍增大，特别是高原第8周组的线粒体平均体积增加显著，线粒体体积密度（Vv）与高原1周组比较有显著意义（P＜0．01）。本文对上述变化进行了讨论。     

新生小鼠肝细胞的体外培养

目的：探讨体外培养新生小鼠肝细胞的方法。方法：采用肝组织块外植培养和肝组织块胶原酶消化法培养新生小鼠肝细胞，并比较两种方法，结果：运用这两种方法成功地培养出原代肝细胞，并能够传代，光镜证实培养细胞为肝细胞，结论：这两种方法为广泛开展肝细胞培养奠定了基础。     

体外培养树鼠句肝细胞的初步观察

目的 探讨体外培养的树Qu肝细胞形态结构与生物合成功能。方法 采用体外两步灌流法分离肝细胞,以L15培养基予以培养,光电镜下动态观察细胞形态结构,同时检测不同时相点培养上清中蛋白及甲胎蛋白含量。结果 采用简易体外两步灌流法分离的肝细胞,经台盼蓝拒染试验证实肝细胞的存活率为90％,体外培养的肝细胞在第3－10天具有良好的增殖分化功能,维持此形态和功能至培养第18天。结论 体外培养的树Qu肝细胞具有良好的形态结构和生物合成能力,能够满足肝炎病毒体外研究培养的需要。     

丹参注射液对体外培养家兔关节软骨细胞的影响

采用家兔关节软骨细胞体外培养的方法，观察丹参注射液对软骨细胞增殖以及对软骨细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响。结果表明丹参注射液可促进软骨细胞的增殖，显提高SOD的活性，降低iNOS的活性，从而保护软骨细胞免受肿瘤坏死因子等细胞因子的损害。其机制可能是丹参通过提高自由基清除水平，调节软骨细胞的合成代谢，达到治疗骨性关节炎的目的。     

以培养肝细胞为基础的体外生物人工肝支持系统

肝脏是人体的重要器官之一 ,具有解毒、生物合成和生物转化等多种功能。由于多种原因所致肝衰竭必然导致机体的代谢紊乱和毒性物质的大量堆积 ,这二者又进一步影响肝细胞功能 ,形成肝衰竭的恶性循环。尽管传统对症支持疗法有了长足进步 ,肝衰竭的病死率仍居高不下。国外报道暴发性肝衰竭 (FHF)病死率在80 %左右 ,为此 ,国内外学者一直致力于人工肝和肝移植治疗的研究。肝移植 (OL Tx)被认为是此类患者最有效的治疗手段 ,但由于受供肝来源限制、价格昂贵及必须长期应用免疫抑制剂等原因 ,多数患者难以通过肝移植而达到长期存活的目的。生…     

改良原代大鼠肝细胞的体外分离培养和功能研究

目的建立经济有效且功能良好的原代肝细胞体外分离培养系统。方法采用0.02%胶原酶和Percoll分离液分离纯化大鼠肝细胞,光镜和电镜下观察HepatoZYME-SFM培养的肝细胞形态,自动生化仪定期检测培养肝细胞功能,RT-PCR半定量方法检测白蛋白mRNA,高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析安定代谢能力。结果分离纯化的大鼠肝细胞总数(2～3)×108cells/整肝,活力和纯度大于95%,生长良好形态正常。培养3d后ALT、AST显著下降,加入NH4Cl后8d内BUN保持相对稳定高水平,白蛋白合成在第3～4天达到高峰,培养的2～5d内肝细胞可有效清除安定。结论通过使用低浓度胶原酶灌流、Percoll分离液纯化以及HepatoZYME-SFM无血清培养基培养,肝细胞可有效保持良好形态结构和一定的生物合成代谢能力。     

体外肝细胞损伤模型构造

目的为进一步研究药物对肝细胞损伤的保护作用，建立一个有效的体外肝细胞受损伤的模型。方法采用L-02肝细胞株，用双氧水（H2O2）体外诱导L-02肝细胞的损伤，检测培养细胞上清液的丙氨酸氨基转移酶（Alanine Aminotransferase，ALT），肝细胞丙二醛（Maleic Dialdehyde，MDA）含量的测定，四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测。结果H2O2体外诱导L-02肝细胞株损伤的最适浓度为0.6 mmol/L，体外诱导L-02肝细胞株损伤的最适时间为1 h。结论利用H2O2诱导L-02肝细胞株损伤，在其最适浓度和最适时间可以很好的构造体外肝细胞受损模型。     

猪骨髓来源内皮祖细胞体外培养条件的优化

目的 优化选择猪骨髓来源内皮祖细胞(endothelial progenitor cell, EPC)体外培养条件,为后续研究奠定基础。方法 从猪髂骨抽取骨髓,利用密度梯度离心法分离得到单个核细胞(MNC),体外培养分化为EPC。在其他培养条件相同的前提下,分别比较不同的细胞接种密度(2×103/cm2、5×103/cm2、1×104/cm2、2×104/cm2),不同基础培养液(EGM、M199、DMEM),不同FBS浓度(5%、10%、20%、30%),以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)与不同细胞因子[碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质细胞衍生因子（SDF）、胰岛素样生长因子（IGF）和表皮生长因子（EGF）]组合(VEGF+bFGF、VEGF+SDF、VEGF+bFGF+SDF、VEGF+bFGF+IGF+EGF、VEGF+bFGF+SDF+IGF)对EPC细胞增殖及迁徙功能的影响;采用细胞形态观察、双荧光染色法及免疫细胞化学染色方法对培养的EPC进行鉴定。结果 猪骨髓EPC以1×104/cm2密度接种在盛有M199,并添加10% FBS和VEGF+bFGF+SDF+IGF细胞因子的培养液时,细胞的增殖能力和迁徙率最高。每组细胞经结合Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)和FITC标记的荆豆凝集素(FITC-UEA-1)双色荧光染色鉴定双阳性率>76%,免疫细胞化学检测CD133、CD34、KDR均为阳性。结论 通过优化猪骨髓来源EPC的体外培养条件,可使细胞数量增多及功能增强,为后续研究奠定了基础。     

高原康胶囊对大部队急进高原急性高原病预防作用的观察

急性高原病(acute high altitude disease, AHAD)是人们由平原进入高原(海拔3 000 m以上)或由高原进入更高海拔地区的常见病,是严重影响急进高原者劳动能力及部队战斗力的重要原因.高原康胶囊是我院研制的一种专用于防治AHAD的药物,为了探讨其在大部队急进高原后AHAD 预防中的作用,我们通过试验对2 150名快速进入高原的新兵AHAD发病情况进行了对照研究,现报告如下.     

高原藏族酒精性肝纤维化的电镜观察

近年来研究发现 ,在各种致病因素作用下 ,脂肪肝与肝纤维化、矸硬化常常相继发生或同时存在 ［１］。为了研究高原藏族酒精性脂肪肝与肝纤维化的关系及其机制 ,我们收集了２０例嗜酒患者经活检肝穿标本作光镜和电镜观察。现报道如下。１对象与方法１．１对象２０例嗜酒患者均为世界高原（（海拔３６５８ｍ））男性藏族 ,年龄２８～６１岁 ,平均４３岁。所有患者作ＨＢｓＡｇ,两对半检测均为阴性 ,每日摄入酒类折合成酒精１００～３５０ｇ,平均２２５ｇ。饮酒时间５～４５年 ,平均２１年。并除外其它原因所致的肝病 ,作为研究对象。１．２方…     

高原军人抑郁及其相关因素调查

目的了解高原军人抑郁状况及相关因素.方法采用抑郁自评量表、自动思维问卷、简易应对方式问卷、青少年生活事件量表、社会支持评定量表和艾森克个性问卷对267名高原军人进行测评.结果抑郁检出率51.56%;抑郁与自动思维、消极应对、生活事件、精神质和神经质呈显著正相关,与积极应对、社会支持和内外向呈显著负相关;多因素回归分析表明:自动思维、积极应对、消极应对、生活事件、社会支持、精神质、内外向和神经质对高原军人抑郁均有预测性,其中生活事件、神经质、积极应对和内外向直接影响抑郁,自动思维、精神质、社会支持和消极应对间接导致抑郁.结论高原军人抑郁发生率较高,对高原军人抑郁的发生,自动思维、积极应对、消极应对、生活事件、社会支持、精神质、内外向和神经质均有预测力.     

Tear break-up time in high altitude areas

Background: In high altitude areas, patients report with irritation, redness and foreign body sensation in their eyes suggesting tear film abnormality due to low humidity and windy environmental conditions.     

高海拔地区健康军人唾液指标测定

目的探讨高海拔地区健康军人唾液指标正常参考范围。方法受试者按海拔高度分为3 700m组（n=49）、4 300m组（n=57）、4 500m组（n=36）、5 300m组（n=21）及平原对照组（1 400m组,n=20）,采集其唾液标本,应用高效液相色谱分析法测定唾液多项生化指标。结果随海拔高度增加,各项指标水平有不同程度增高;与平原对照组比较,除Mg2＋、K＋以外,5 300m组各项指标均显著增高,差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。结论初步确定了不同海拔地区唾液指标正常参考范围,为高原地区兵员作训标准的制定提供了参考。     

家兔腰椎纤维环细胞的培养与鉴定

目的:建立家兔腰椎纤维环细胞体外培养模型并对其进行鉴定,为进一步研究椎间盘退变提供理论依据。方法:用酶消化法得到家兔原代纤维环细胞,再用差速贴壁法及自然消化法得到传代后纯化的细胞,观察纤维环细胞的细胞学特征,MTT法绘制细胞生长曲线,用间接免疫荧光法联合Hoechst核染法、免疫组织化学法分别检测纤维环细胞特征性表达产物Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白,进行细胞鉴定。结果:初贴壁的细胞呈类圆形,很快伸展为短梭形,传代后细胞逐渐伸展为长梭形或多角形,第四代后细胞开始老化;纤维环细胞表达Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白。结论:成功在体外培养出家兔腰椎纤维环细胞,为研究椎间盘退变的发生发展机制提供基础。     

平原人进驻藏北高原地区不同时期的肾脏影响分析

目的观测藏北高原环境对健康人肾脏的影响。方法随机选择由平原进驻藏北(海拔4507m)当兵6个月、1a、2a的健康军人各80名,均留晨尿测定pH值、比重、尿糖、尿蛋白、尿胆元、尿胆红素、尿潜血、尿酮体、亚硝酸盐和白细胞。取静脉血以苦味酸法测定血尿素氮、血肌酐,根据肌酐值推算内生肌酐清除率(Ccr)。结果进藏6个月的尿潜血、尿蛋白、低尿比重阳性率分别为22.5%、27.5%、23.8%,总阳性率35.0%;进藏1年的阳性率分别为23.8%、28.8%、26.3%,总阳性率38.8%;进藏2年的阳性率分别为25.0%、30.0%、28.8%,总阳性率41.3%。所有被测者尿素氮、肌酐均在正常范围,进藏6个月、1a、2a的Ccr(mL/min)分别为(93.78±4.86)、(92.56±4.69)、(91.96±5.02)。结论藏北高原低氧环境对肾小球、肾小管有不同程度的损害,主要表现尿潜血、尿蛋白、低尿比重的检测异常。     

高原军人睡眠状况调查

目的研究探讨高原军人睡眠质量状况。方法采用匹兹堡睡眠质量指数量表（PSQI）分别对驻守在海拔3700m的103名和海拔4300m的105名军人进行问卷调查并进行统计学处理。结果海拔越高,PSQI总分和各因子得分越高（P〈0.05或P〈0.01）,睡眠质量越差,主要表现为,主观睡眠质量差、入睡时间延长、睡眠效率下降、睡眠障碍增多和日间功能障碍等。结论高原低氧环境军人睡眠质量下降,有必要采取一定的干预措施。     

自动思维、生活事件、社会支持对高原军人抑郁的影响

目的: 了解高原地区军人抑郁状况及相关因素,为心理教育和部队管理提供依据和措施.方法: 采用抑郁自评量表、自动思维问卷、青少年生活事件量表对267名高原地区军人进行测评.结果: ①高原地区军人的抑郁水平显著高于全国正常人常模(P<0.01),256名军人中137人 (53.5%)无抑郁,64人 (53.8%)有轻度抑郁,51人(42.9%)有中度,4人(3.4%)重度抑郁;②相关分析表明: 抑郁与自动思维、生活事件呈显著正相关(r=0.397,r=0.420),与军龄和社会支持呈显著负相关(r=-0.151,r=-0.324),而与海拔高度无显著相关(r=-0.033);③路径分析表明: 自动思维、生活事件、社会支持和军龄对高原地区军人抑郁水平均有预测性.结论: 高原地区军人有较高的抑郁水平,且高于中国常人.军龄、生活事件、社会支持和负性思维与高原军人的抑郁水平有关,并直接预测其抑郁的水平.