肝细胞癌变过程中HSPgp96表达特点及基因的扩增分析

目的：探讨肝细胞癌变过程中热休克蛋白（HSP）gp96及基因的动态表达与变化.方法：以2-乙酰氨基芴（2-FAA,0.05%）喂饲SD大鼠诱发肝癌,观察肝组织病理组织学（HE染色）改变,以巢式逆转录聚合酶链反应扩增HSPgp96基因片段;以免疫组化分析肝细胞癌变过程中HSPgp96的动态表达.结果：SD大鼠在喂饲2-FAA后,在诱癌早期肝细胞发生颗粒样变性,中期出现不典型增生,后期见大量癌巢结节.正常肝HSPgp96表达较少,肝细胞癌变过程中HSPgp96表达增加.结论：HSPgp96参与肝细胞的癌变过程,其在癌变初期的过表达有助于肝癌的早期诊断.     

肝细胞癌变过程中磷脂酰肌醇蛋白多糖-3mRNA扩增及临床价值

目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)在肝细胞性肝癌(HCC)形成过程中的表达特点及对HCC的早期诊断价值.方法 以2-乙酰氨基芴(2-FAA)喂饲雄性SD大鼠诱发肝细胞癌变,观察肝组织病理学改变,并从肝组织中提取总RNA,将GPC-3 mRNA以随机引物经逆转录合成GPC-3cDNA,再以巢式聚合酶链反应扩增GPC-3基因片段.结果 肝细胞在癌变过程中,形态学上呈肝细胞变性、癌前病变到肝癌形成三个发展阶段,肝组织总RNA表达水平呈动态梯度表达,表现为癌变组＞癌前组＞变性组;肝组织GPC-3 mRNA扩增阳性率在癌前组和癌变组均为100%,肝细胞变性组为83.3%,正常对照组未见阳性;肝组织GPC-3 mRNA阳性率与肝总RNA表达水平,两者呈明显的正相关(r=0.475,P＜0.01).结论 GPC-3参与肝细胞的癌变过程,GPC-3 mRNA异常表达是HCC早期诊断有价值的分子标志物.     

肝细胞癌变过程中IGF-Ⅱ及IGFBP-3的动态表达特征

目的 观察肝细胞癌变过程中胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)及IGF结合蛋白3(IGFBP-3)的动态表达特征.方法 以2-乙酰氨基芴(2-FAA)喂饲雄性SD鼠诱发肝细胞肝癌(HCC)发生,分别观察肝细胞形态学、肝脏及血清IGF-Ⅱ的动态变化和肝细胞浆IGFBP-3蛋白水平变化.以免疫组织化学法观察鼠肝组织中IGF-Ⅱ表达,分析IGF-Ⅱ表达与IGFBP-3蛋白水平变化及其病理学特征在HCC发生过程中的关系.结果 诱癌过程肝细胞出现颗粒样变性、不典型增生到HCC的形成过程中IGF-Ⅱ呈梯度表达,表现为癌变组明显高于正常组和变性组(P＜0.01).癌变过程中IGF-Ⅱ呈阳件表达和胞内分布,肝脏和血清IGF-Ⅱ呈显著正相关.肝细胞浆IGFBP-3的表达水平随肝组织学形态的改变旱降低趋势,表现为癌变组明显低于变性组和正常组(P＜0.01),且有低于癌前病变组(癌前组)趋势.结论 IGF-Ⅱ及IGFBP-3过表达与HCC的发生、发展有关,可成为HCC早期诊断的标志.     

NF-κB、Survivin与Ki-67在肝癌组织中的表达及其意义

目的 检测肝组织中Survivin、NF-κB与Ki-67的表达情况,分析其临床病理学意义.方法 应用免疫组化SP法检测44例肝细胞癌(HCC)组织、25例癌旁相应组织、9例正常肝组织中Survivin、NF-κB、Ki-67蛋白的表达情况.结果 NF-κB蛋白在HCC组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为81.82%、28.00%.9例正常肝组织未见表达,3组比较差异有统计学意义(P<0.01);Hcc组织学分级Ⅲ、Ⅳ级患者NF-κKB表达率显著高于Ⅰ、Ⅱ级者(P<0.05);HCC组织中Survivin蛋白阳性表达率为68.18%,癌旁组织、正常肝组织中均无表达;3组比较差异有统计学意义(P<0.01);Survivin表达与脉管内瘤栓(P<0.05)、组织学分级(P<0.05)显著相关.Ki-67蛋白在HCC组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为54.55%、12.00%.9例正常肝组织未见表达,3组比较差异有统计学意义(P<0.01);在HCC组织中组织学分级Ⅲ、Ⅳ级患者Ki-67表达率高于Ⅰ、Ⅱ级者(P<0.05),有脉管内瘤栓患者高于无脉管内瘤栓者(P<0.05).NF-κB、Survivin与Ki-67的表达均呈显著正相关(P<0.05).结论 联合检测NF-κB、Survivin与Ki-67的表达对于预测肝细胞癌的恶性潜能、判断预后和为肝癌治疗提供新的靶点有一定的临床价值.     

NF-κB和Cx32在肝细胞癌中的表达

目的探讨细胞间隙连接蛋白CX32和NF-κB在肝细胞癌及其癌周组织中的表达和意义。方法应用免疫组化技术检测48例HCC和12例正常肝组织中NF-κB和Cx32的表达情况。结果 Cx32蛋白表达定位于肝细胞胞浆和/(或)细胞膜,在HCC及正常肝组织中阳性率分别为37.50%、88.91%。Cx32在HCC中的表达明显低于正常肝组织的水平(P<0.01)。并与HCC分化程度相关;NF-κB在肝组织、HCC中的表达分别为21.34%、71.28%(P<0.05)。CX32和NF-κB在HCC中的表达呈负相关。结论 Cx32表达的缺失可能与HCC的发生有重要关系。     

沙利度胺抑制血管内皮生长因子表达对肝细胞癌变的影响

目的动态观察沙利度胺对血管内皮生长因子（VEGF）表达干预对肝细胞癌变的影响。方法将SD大鼠分为诱癌组、诱癌干预组和正常对照组进行动态观察VEGF的表达。诱癌组及诱癌干预组以含2-乙酰氨基芴（2-FAA,0．05％）的颗粒饲料喂饲诱发肝癌。诱癌干预组同时以沙利度胺（100mg/kg体重）灌胃。诱癌鼠及诱癌干预鼠每两周处死一组。并以正常鼠作对照。以病理组织学（HE染色）观察肝细胞形态学变化、免疫组织化学和EHSA法分析VEGF表达变化。结果诱癌组肝细胞出现颗粒样变性、不典型增生、大量癌巢结节,而诱癌干预组形态变化明显受抑;正常肝仅有较低水平VEGF表达,诱癌组肝VEGF表达进行性增加,与肝组织学改变一致,显著高于正常组：在诱癌干预组VEGF表达则显著低于诱癌组的同期水平：且癌变干预组鼠肝癌发生率明显低于诱癌组。结论沙利度胺抑制肝VEGF表达、可推迟肝细胞癌变的发生。     

骨桥蛋白、核因子-κB p65在非小细胞肺癌中的表达

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)和核因子-κB p65(NF-κB p65)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及两者与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化检测80例NSCLC和21例正常肺组织中OPN和NF-κB p65的表达,并分析OPN和NF-κB p65的表达与NSCLC临床病理特征及患者生存时间之间的关系.结果 OPN和NF-κB p65在NSCLC中表达阳性率分别为63.75%、61.25%,在正常肺组织中表达阳性率分别为23.81%、9.52%.NSCLC中OPN和NF-κB p65表达显著高于正常组织(P＜0.05).OPN和NF-κB p65的表达率与患者的淋巴结转移、TNM分期有密切关系;OPN表达还与患者组织学类型有关(P＜0.05).OPN和NF-κB p65为负性预后冈子;OPN和NF-κB p65之间呈正相关.结论 OPN和NF-κB p65在肺癌巾高表达,OPN和NF-κB p65阳性表达提示预后不良.     

NF-κB在结直肠癌中的表达及与凋亡的关系

目的探讨核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在结直肠癌组织中的表达及与凋亡的关系。方法采用免疫组织化学SP法、TdT介导的dUTP缺口末端标记技术原位观察65例结直肠癌组织及其对照癌旁正常黏膜组织中NF-κB的表达情况和细胞凋亡情况。结果结直肠癌中NF-κB的阳性率为58.46%(38/65),显著高于对照组(P<0.05)。癌旁和癌组织凋亡指数(AI)分别为(8.23±1.57)%和(3.25±1.82)%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。NF-κB的表达与癌组织的分化程度、淋巴结转移和Dukes分期相关(P<0.05)。结论 NF-κB在结直肠癌组织中高表达,NF-κB表达可抑制结直肠癌的细胞凋亡,并与病理分期、有无淋巴结转移等恶性临床病理特征有密切相关性,提示NF-κB在结直肠癌的发生、发展及预后中发挥重要作用。     

褪黑素对烧伤脓毒症大鼠肝脏核因子-κB表达的影响

目的 了解褪黑素对烧伤脓毒症大鼠肝脏NF-κB表达的影响,从而探讨其对肝脏的保护作用.方法 采用30%Ⅲ度烫伤加内毒素攻击大鼠模拟临床烧伤脓毒症,将36只大鼠随机分为3组(每组12只):正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症褪黑素治疗组.用sABC免疫组织化学方法 测定肝组织中NF-κB的表达,观察肝脏组织形态学改变.结果 烧伤脓毒症组肝组织巾NF-κB的表达明显增强,肝细胞形态学损害明显,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01);烧伤脓毒症褪黑素治疗组与烧伤脓毒症组比较肝组织中NF-κB的的表达明显减弱(P<0.01),肝细胞形态学损伤减轻.褪黑素可以降低NF-κB活性,同时明显降低血清ALT、AST含量.结论 褪黑素能下调肝组织巾NF-κB的表达,减轻烧伤脓毒症时肝脏的急性损伤.     

核因子κB活性与环氧化酶2在胃癌及增生性息肉组织中的表达研究

目的 研究胃癌及增生性息肉组织中核因子κB(NF-κB)的DNA结合活性,NF-κB p65及环氧合酶2(COX-2)的表达,通过比较两者表达的差异,从而探讨NF-κB及 COX-2在胃癌病程中的意义.方法 收集65例外科手术胃癌及癌旁组织标本,48例消化内镜下增生性息肉组织标本.采用凝胶迁移滞留试验EMSA检测其NF-κB DNA结合活性,免疫组化SABC法测定其NF-κB p65及 COX-2蛋白表达水平.结果 胃癌标本NF-κB DNA结合活性更高,可见明显核移位现象,与癌旁组织及增生性息肉组织比较具有统计学差异(P<0.01),NF-κB p65在胃癌组织,癌旁组织及增生性息肉中表达阳性率分别为87.7%、10.8%和6.3%,COX-2在胃癌组织,癌旁组织及胃炎中表达阳性率分别为100%,12.3%和10.4%.相关性分析显示胃癌组织中NF-κB p65和COX-2表达呈明显正相关(r＝0.6,P<0.01).结论 NF-κB DNA结合活性及NF-κB p65和COX-2在胃癌组织中阳性表达及DNA显著高于癌旁组织和增生性息肉组织,两者存在明显正相关,推测可能通过干预其活性和表达对胃癌的发生发展过程研究有一定帮助.     

NFκB和MMP-9在胰腺癌中的表达及意义

目的探讨核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在胰腺癌侵袭转移中的表达。方法应用免疫组织化学法检测60例胰腺癌、26例正常胰腺组织中NF-κB和MMP-9的表达情况。结果 NF-κB和MMP-9在胰腺癌组织中表达阳性率分别为71.7%和63.3%,明显高于癌旁正常胰腺组织(P<0.01);NF-κB和MMP-9的表达与胰腺癌浸润转移均呈正相关(P<0.05);胰腺癌组织中NF-κB和MMP-9的表达呈正相关(P<0.05)。结论 NF-κB可能通过上调MMP-9的表达来促进胰腺癌的浸润、转移。检测两者表达有助于胰腺癌浸润转移的判断。     

肝癌及癌周组织核转录因子-kB表达的免疫组织化学分析

目的:研究核转录因子(NF)-κB在肝癌和癌周组织中的表达及其临床病理学关系。方法:以自身配对法分别收集经手术切除患者的肝癌及其癌周组织各35份,以免疫组化染色法检测肝癌及其癌周组织NF-κB表达、胞内分布,以及病理学特征。结果:NF-κB阳性表达物呈棕黄色颗粒状染色,癌组织中NF-κB点灶状表达,定位于胞浆和细胞核;而癌周组织NF-κB阳性表达主要定位于胞浆,未见细胞核阳性。定性观察肝癌组织中NF-κB表达强度明显高于癌周组织,癌组织NF-κB表达阳性率为100%,癌周组织为68.6%,二者比较差异有非常显著性(χ2=13.1,P<0.01)。肝癌组织中NF-κB的表达强度与分化程度、肿瘤数目、HBsAg和肿瘤直径无关。结论:肝癌组织中NF-κB过表达,与肝癌的发生、发展密切相关。     

核因子κB活性与环氧化酶2在胃癌及胃炎病变中的表达研究

目的研究胃癌及慢性浅表性胃炎组织中核因子κB（NF-κB）的DNA结合活性,p65及环氧合酶2（COX-2）的表达,通过比较两者表达的差异,从而探讨NF-κB及COX-2在胃癌病程中的意义。方法收集我院65例外科手术胃癌及癌旁组织标本,58例消化内镜慢性浅表性胃炎钳夹组织标本。采用凝胶迁移滞留试验EMSA检测其NF-κBDNA结合活性,免疫组化SABC法测定其NF-κBp65及COX-2蛋白表达水平。结果胃癌标本NF-κBDNA结合活性更高,可见明显核移位现象,与癌旁组织及胃炎组织比较具有统计学差异（P〈0.01）,NF-κBp65在胃癌组织,癌旁组织及胃炎中表达阳性率分别为87.7%,10.8%和55.2%,COX-2在胃癌组织,癌旁组织及胃炎中表达阳性率分别为100%,12.3%和53.4%。相关性分析显示胃癌组织中NF-κBp65和COX-2表达呈明显正相关（r=0.6,P〈0.01）。结论NF-κB和COX-2在胃癌组织中阳性表达显著高于癌旁组织和慢性浅表性胃炎组织,且两者存在明显正相关,推测可能通过干预其活性和表达对胃癌的发生发展过程研究有一定帮助。     

白芍总苷对免疫性肝纤维化大鼠肝组织NF-κB和TGF-β1蛋白表达的影响

目的研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织中核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和转化生长因子β1(trans-forming growth factor beta1,TGF-β1)的变化以及白芍总苷(TGP)对两者蛋白表达的影响。方法采用猪血清诱导建立大鼠肝纤维化模型,肝组织HE染色和V-G染色观察肝组织损伤及胶原表达变化;免疫组化S-P法观察NF-κB p65和TGF-β1蛋白表达;显微摄像及图像分析检测胶原、NF-κBp65和TGF-β1蛋白的表达量。结果与正常组比较,模型组大鼠肝组织明显破坏,胶原合成增加,NF-κB p65和TGF-β1表达增强(P<0.01);与模型组比较,TGP治疗组肝组织破坏减轻,纤维化程度也明显改善,胶原面积、NF-κB p65和TGF-β1表达均明显减少(P<0.01),三者呈相关性。结论NF-κB介导TGF-β1产生或活化在免疫性肝纤维化过程中可能发挥着重要作用,而TGP抑制纤维化大鼠肝组织NF-κB和TGF-β1的表达可能是TGP的抗肝纤维化主要作用机制之一。     

丹参多酚酸盐对肝纤维化大鼠NF-κB和IκBα表达的影响

目的观察丹参多酚酸盐的抗肝纤维化作用及其机制。方法将36只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和给药组。50%CCl_4花生油溶液(1 mL·kg~(-1))灌胃诱导建立肝纤维化模型。给药组同时每日一次腹腔注射丹参多酚酸盐20 mg·kg~(-1)。6 wk后观察大鼠肝脏大体形态、肝重-体重比;运用HE和Masson三色染色检测肝纤维化的变化;全自动生化分析仪检测丙氨酸转氨酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST);放射免疫法测定血清Ⅳ型胶原(CIV)、层黏蛋白(LN)含量;Western blot检测肝脏组织中NF-κB和IκBα蛋白的表达。结果与模型组相比,给药组肝纤维化大鼠肝脏病理组织学结构改善,血清中ALT、AST、CIV、LN表达降低(P<0.05)。与模型组相比,给药组胞质中NF-κB和lκBα蛋白的表达上调,胞核中NF-κB蛋白表达下调(P<0.01)。结论丹参多酚酸盐可通过调节大鼠肝脏NF-κB和lκBα的表达来抑制肝纤维化的进展     

NIBP和NF-κBp65在胃癌中的表达及其临床意义

目的研究NIBP(NIK-IKKβ支架蛋白)和NF-κB p65(NF-κB核转录因子p65)在胃癌中表达的临床价值。方法回顾分析我院自2012年5月~2015年5月以来实施手术切除治疗的87例胃癌患者临床资料,对胃癌标本、癌旁组织、正常组织进行免疫组化染色,分别以荧光PCR定量法、Western blot法检测NIBP、NF-κB p65的表达情况。结果胃癌组织NIBP、NF-κB p65 m RNA表达、蛋白表达、免疫组化表达阳性率与癌旁组织、正常组织对比,均有统计学意义(P0.05)。结论胃癌组织中NIBP、NF-κB p65均呈高表达状态,减少NF-κB p65转导途径的激活、抑制NIBP表达,可作为治疗胃癌切入点的依据,进行进一步的深入研究。     

非小细胞肺癌组织中PTEN、NF-κB的表达及临床意义

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)和核因子κB(NF-κB)的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法运用免疫组织化学法检测PTEN、NF-κB在肺癌组织以及癌旁正常肺组织中的表达情况。结果 PTEN蛋白在肺癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁正常肺组织(P<0.05);而NF-κB蛋白在肺癌中的阳性表达率,明显高于癌旁正常肺组织(P<0.05)。PTEN、NF-κB的阳性表达率与临床病理分期、组织分化程度及术后生存期有关(P<0.05),而与性别、年龄、吸烟史、肿瘤大小及病理类型无关(P>0.05);临床病理分期低、组织分化好的患者生存时间较长,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,肺癌中PTEN与NF-κB呈负相关(rs=-11.30,P<0.05)。结论PTEN基因的失活、NF-κB基因的活化可能促进了肺癌的发生、发展和侵袭转移的进程,可作为临床评价肿瘤恶性程度及预后的指标。     

PKR及NF-κB在子宫颈癌中的表达

目的:探讨双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)及核因子-κB(NF-κB)在子宫颈癌中的表达水平及临床意义.方法:采用免疫组化SABC法检测37例子宫颈癌、10例正常子宫颈组织中PKR和NF-κB表达水平,并分析其与子宫颈癌临床病理特征间的相关性.结果:子宫颈癌组织中PKR阳性表达率为64.9%(24/37),正常子宫颈组织为10.0%(1/10),PKR在子宫颈癌中的表达水平较正常子宫颈组织增高(χ<'2>=9.52,P<0.01).子宫颈癌组织中NF-κB阳性表达率为72.97%(27/37),而正常子宫颈组织中无NF-κB阳性表达,子宫颈癌组织中NF-κB表达较正常子宫颈组织增高(P=0.00).PKR表达与子宫颈癌患者年龄、病理类型、临床分期、肿瘤组织分化及患者预后无关;而NF-κB表达与临床分期、肿瘤组织分化有关,而与患者年龄、病理类型及患者预后无关.结论:NF-κB异常表达与子宫颈癌的发生、发展有关.     

核因子κB活化在脓毒血症急性肝损伤发病中的作用机制

目的 探讨核因子κB(NF-κB)活化在脓毒血症所致大鼠急性肝损伤发病中的作用机制.方法 采用盲肠结扎穿孔(CLP)制作脓毒血症急性肝损伤模型,将大鼠随机分为3组:CLP组、二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC) CLP组、假手术组,观察术后24 h肝组织的病理损伤及肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(STB)、非结合胆红素(UCB)的变化,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织中NF-κB p65的表达和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量变化.结果 CLP可致大鼠肝急性病理损伤,模型组ALT、AST、STB、UCB显著高于假手术组,NF-κB p65的表达及TNF-a含量明显高于假手术组,PDTC干预组肝组织NF-κB p65的表达及TNF-a含量明显下降,ALT、AST、STB、UCB相应降低.结论 CLP所致脓毒血症能显著增强肝组织NF-κB的表达进而启动TNF-a等炎症因子表达增加而参与大鼠急性肝损伤发生;用PDTC抑制NF-κB活性能够降低肝组织中TNF-a表达,且能改善脓毒血症所致大鼠急性肝损伤.     

NF-κB与Bcl-xl在非小细胞型肺癌中的表达及关系

目的:探讨细胞核因子NF-κB的表达在肺癌发生发展中的作用及其与凋亡调控基因Bcl-xl相互关系.方法:对8例正常支气管粘膜上皮,43例肺癌(其中10例有淋巴结转移)的石蜡切片组织,应用免疫组织化学链霉素抗生素蛋白-过氧化酶法检测NF-κB和Bcl-xl蛋白的表达.结果:43例肺癌和10例有淋巴结转移的肺癌中NF-κB阳性率分别为67.44%和60.00%,显著高于正常支气管粘膜上皮阳性率12.50%(P均＜0.05);低分化、中分化肺癌中阳性率分别为81.25%、77.78%,较高分化阳性率28.57%明显升高(P均＜0.01).TNM分期Ⅲ期病例中NF-κB表达阳性率93.75%高于Ⅰ Ⅱ期病例的51.85%(P＜0.01),NF-κB表达与Bcl-xl蛋白表达呈正相关(P＜0.01).结论:肺癌组织中NF-κB的表达明显增强,提示NF-κB活性上调与肺癌的发生有关.NF-κB与凋亡抑制基因Bcl-xl的共同表达可能在肺癌中起协同作用,在肺癌癌变发生、发展中起重要作用.