穿孔素和Fas配体在柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌浸润细胞中表达

目的探讨穿孔素（ＰＦＰ）和Ｆａｓ配体（Ｌ）介导的细胞毒作用在病毒性心肌炎发病中的作用。方法将４０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机等分为实验组和对照组，分别用柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）及不含病毒的病毒稀释液经腹腔接种，于接种后７天处死，取其心脏。应用免疫组化、逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和原位杂交等方法，检测细胞介导的细胞毒作用的主要效应分子ＰＦＰ和ＦａｓＬ在心肌浸润细胞中的表达。结果（１）实验组小鼠的心肌组织中均有ＰＦＰ和ＦａｓＬ抗原阳性细胞浸润，对照组则无；（２）ＲＴ－ＰＣＲ检测发现实验组鼠的心肌组织中ＰＦＰ和ＦａｓＬｍＲＮＡ的阳性率均为１００％，明显高于对照组的２０％和３０％（Ｐ均＜０．０１）；（３）原位杂交检查显示，实验组小鼠心肌组织中均可见ＰＦＰ和ＦａｓＬｍＲＮＡ阳性的浸润细胞，而对照组则均未发现。结论ＣＶＢ３小鼠心肌炎急性期，其心肌浸润细胞中有ＰＦＰ和ＦａｓＬ表达，提示它们在病毒性心肌炎发病机制中可能有重要作用     

穿孔素和Fas配体在柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌…

探讨穿孔素和Ｆａｓ配体介导的细胞毒作用在病毒性心肌炎发症中的作用。方法将４０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机等分为实验组和对照组，分别用柯萨奇Ｂ３病毒及不含病毒的病毒稀释液经腹腔接种，于接种后７天处死取其心脏。     

黄芩提取物对柯萨奇B3m病毒性心肌炎病毒复制及Fas配体表达的影响

病毒性心肌炎（MV）严重危害人类健康，现代研究证实，病毒的直接损伤与细胞介导的细胞毒作用（CMC）是MV心肌细胞损伤的主要原因.CMC致靶细胞损伤主要有两条途径——穿孔素和Fas／FasL途径。黄芩提取物具有明显的抗病毒和调节免疫的作用，但其对MV鼠心肌中柯萨奇病毒嗜心肌株CVB3m的复制及浸润细胞中Fas配体表达的影响，迄今尚未见文献报道，本研究对此作初步探讨。     

参冬心宝口服液对柯萨奇病毒B3病毒性心肌炎小鼠的 …

目的 探讨参冬心宝口服液在小鼠体内免疫促进作用，为该药的临床应用提供理论依据。方法 以柯萨奇病毒Ｂ３型病毒感染１０日龄乳鼠为模型，观察了参冬心宝口服液对病毒感染急性期不同阶段心肌炎小鼠自然杀伤细胞活性及干扰素（ＩＦＮ）水平的影响。     

小鼠柯萨奇病毒性心肌炎模型的优化

在两种品系小鼠中建立、优化和规范B组3型柯萨奇病毒(CVB3)诱导的病毒性心肌炎小鼠模型。首先以100TCID50-10 000TCID50之间剂量的CVB3Nancy株病毒经腹腔感染易感BALB/c雄性小鼠,通过体重减轻率、死亡率和心脏病理及心肌CK-MB水平,评估建立最佳病毒性心肌炎的最佳剂量;而后摸索了在C57BL/6小鼠建立病毒性心肌炎的CVB3剂量。通过精细比较发现雄性BALB/c小鼠致心肌炎的最佳CVB3病毒滴度数量级在1000TCID50;进一步确定1500TCID50是在雄性BALB/c小鼠中诱导病毒性心肌炎的最佳剂量;C57BL/6小鼠不是易感小鼠,但在1500TCID50CVB3感染下也可诱导轻微可见的病毒性心肌炎,便于在多数基因敲除鼠内的病毒性心肌炎研究。本研究为规范病毒性心肌炎模型的建立、为后续病毒性心肌炎机制的深入研究奠定了重要的基础模型。     

IL-17在小鼠柯萨奇B病毒性心肌炎不同时期的变化

＜0.01);(2)VMC小鼠在2-8周时脾细胞IL-23 mRNA水平均明显高于对照组(P＜0.01),在6周和8周时脾细胞IL-23 mRNA水平均明显高于2周和4周时(P＜0.01);(3)VMC小鼠在2周时心室肌组织无IL-17表达,4周时心室肌组织IL-17表达最高,6-8周呈明显下降趋势(P＜0.01).结论 小鼠CVB心肌炎4周时,心肌组织中出现IL-17表达,同时脾组织IL-17 mRNA以及IL-23 mRNA水平升高,可能与Th17细胞亚群分化有关.     

柯萨奇B3病毒心肌株与非亲心肌株感染小鼠心肌细…

柯萨奇Ｂ３非亲心肌株病毒（ＣＶＢ３ｏ）是否引起心肌炎还缺乏直接的实验依据。我们采用柯萨奇Ｂ３亲心肌株（ＣＢＶ３ｍ）和ＣＶＢ３ｏ感染鼠培养心肌细胞，对两株病毒感染细胞的特性进行了比较，结果表明，ＣＶＢ３ｏ与ＣＶＢ３ｍ在乳鼠心肌细胞培养液中的滴度，１２小时和２４小时无明显差别，４８小时后ＣＶＢ３ｍ的滴度变化不大，面ＣＶＢ３ｏ有所下降；两株病毒均能使鼠心肌细胞死亡，但随着时间的延长ＣＶＢ３ｍ感染后心肌细     

汉黄芩苷对柯萨奇B3病毒诱导的病毒性心肌炎小鼠炎症反应的影响

目的:探讨汉黄芩苷对柯萨奇B3病毒(CVB3)诱导的病毒性心肌炎小鼠炎症反应的影响及其可能的调控机制。方法:用CVB3感染BALB/c小鼠构建病毒性心肌炎动物模型。取40只BALB/c小鼠将其随机分为4组:正常对照组、CVB3感染的病毒性心肌炎组、CVB3感染后给予汉黄芩苷处理的治疗组以及CVB3感染后同时给予汉黄芩苷和AKT激动剂处理的激动剂组,每组10只。于药物治疗7 d后处死各组小鼠。用HE染色检测前3组小鼠心肌组织内炎症细胞浸润情况。用ELISA检测前3组小鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6含量。用Western blot实验检测前3组小鼠心脏组织中炎症因子蛋白表达水平以及AKT/NF-κB通路的活化情况。最后,通过Western blot实验检测全部4组小鼠心肺组织中AKT/NF-κB通路的活化情况。结果:与正常组相比,病毒性心肌炎小鼠心脏组织内存在大量炎症细胞浸润,而汉黄芩苷治疗显著降低CVB3病毒诱导的心脏组织炎症细胞浸润(P<0.05)。CVB3病毒感染后小鼠血清中IL-1β和IL-6含量较正常组显著升高(P<0.05),而给予汉黄芩苷治疗后小鼠...     

NF-κB蛋白在柯萨奇病毒B3诱导的病毒性心肌炎小鼠心肌细胞焦亡过程中的调控作用

目的:探讨NF-κB蛋白对柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎小鼠心肌细胞焦亡的调控作用.方法:将编号后的45只雄性BALB/c小鼠根据随机数表法平均分为3组,分别为对照组(normal组)、病毒性心肌炎组(CVB3组)和NF-κB蛋白抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸(PDTC)处理组(CVB3+PDTC组),每组各...     

病毒性心肌炎小鼠心肌中MMP-2和NF-κB的表达

目的:初步探讨基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65在柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的小鼠病毒性心肌炎心肌中的表达。方法:6周龄近交系雄性BALB/c小鼠随机分为对照组和病毒性心肌炎组,分别给予0.1 m L PBS和10-5.69TCID50/m L CVB3注射,第4天和第10天各随机取8只小鼠处死并取血和心脏标本。Reed-Muench法测定接种病毒滴度;苏木素伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色后光镜观察心肌组织病理学改变;应用免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测MMP-2和NF-κB p65在心肌组织表达的分布和含量;用Western blot法检测MMP-2、NF-κB p65和IκBα在心肌组织的表达,用ELISA检测血清TNF-α含量的变化。结果:与对照组相比,免疫组化和Western blot实验结果提示病毒性心肌炎小鼠心肌中MMP-2和NF-κB p65的表达显著升高(P0.05);感染组IκBα的表达呈下降趋势(P0.05);ELISA结果提示血清TNF-α含量在感染组显著升高,差异有统计学显著性(P0.05)。结论:病毒性心肌炎小鼠心肌组织中TNF-α、NF-κB p65和MMP-2表达显著上调,可能通过相关机制参与疾病的发生。     

柯萨奇病毒B3感染HeLa细胞后Bax和Bim的表达*

 目的：观察HeLa细胞感染柯萨奇病毒B3 (CVB3)后Bax和Bim mRNA和蛋白的表达。方法：将HeLa细胞分为未予以CVB3感染的对照组和予以CVB3感染的病毒组,取3 h、6 h、9 h、12 h和24 h 的细胞,采用RT-PCR和Western blotting分别检测Bax和Bim mRNA和蛋白的表达。结果：Bax和Bim　mRNA在对照组和病毒组HeLa细胞中均有表达,在病毒组和对照组中Bax和Bim mRNA的表达在各自组内均无显著差异（P＞0.05）,但在24 h Bax和Bim在病毒组mRNA的表达低于对照组（P＜0.05）。Bax和Bim蛋白表达在对照组中各时点均有表达,但无显著差异（P＞0.05）。病毒组Bax蛋白在24 h表达下降,差异有统计学意义（P＜0.05）,且病毒组表达明显低于对照组（P＜0.05）;Bim蛋白的表达随感染时间延长而下降（P＜0.05）,9 h、12 h和24 h表达病毒组低于对照组（P＜0.05）。结论:Bax和Bim在CVB3感染诱导的HeLa细胞凋亡早期发挥作用。     

单克隆抗体治疗预防小鼠急性柯萨基B3病毒性心肌炎

作者曾发现淋巴细胞在小鼠病毒性心肌炎发生、发展中有意义，因此，本研究探讨T细胞单抗对小鼠柯萨基B3病毒性心肌炎的作用。     

卡维地洛和美托洛尔对急性柯萨奇病毒性心肌炎小鼠治疗机理探讨

卡维地洛作为第三代非选择性B受体阻滞剂,具有多种神经激素拮抗特性,并拥有抗氧化、抗凋亡、抗纤维化以及免疫调节特性1.卡维地洛显著降低慢性心衰患者的死亡率,并在心肌缺血再灌沣损伤中有抗炎症抗氧化的活性.     

柯萨奇B3病毒亲心肌株与非亲心肌株感染小鼠心肌细胞的实验比较

柯萨奇Ｂ３非亲心肌株病毒（ＣＶＢ３ｏ）是否引起心肌炎还缺乏直接的实验依据。我们采用柯萨奇Ｂ３亲心肌株（ＣＶＢ３ｍ）和ＣＶＢ３ｏ感染鼠培养心肌细胞，对两株病毒感染细胞的特性进行了比较，结果表明，ＣＶＢ３ｏ与ＣＶＢ３ｍ在乳鼠心肌细胞培养液中的滴度，１２小时和２４小时无明显差别，４８小时后ＣＶＢ３ｍ的滴度变化不大，而ＣＶＢ３ｏ有所下降；两株病毒均能使鼠心肌细胞死亡，但随着时间的延长ＣＶＢ３ｍ感染后心肌细胞死亡率明显高于ＣＶＢ３ｏ；ＣＶＢ３ｏ不能阻断ＣＶＢ３ｍ对心肌细胞的感染。因此我们认为，ＣＶＢ３ｏ能感染心肌细胞，但其程度低于ＣＶＢ３ｍ。     

聚合酶链反应检测心肌炎石蜡包埋组织柯萨奇病毒B3RNA

报道从心肌炎石蜡包埋组织单一切片(6～8μm)中提取RNA,使用定位于柯萨奇病毒B_3特异编码区(VP_1)的一对引物、通过聚合酶链反应(PCR)进行基因扩增。对PCR扩增产物,采用3′末端生物素标记的柯萨奇病毒B_3的特异寡核苷酸探针进行斑点杂交。结果表明,两例检查的心肌炎标本都是柯萨奇病毒B_3感染引起的病毒性心肌炎。本实验说明,从石蜡包埋的组织标本中提取RNA,进行PCR检测是可行的,为临床病理进行分子生物学研究开辟了一条新途径。     

用Mac ELISA法检测病毒性心肌炎患者血清中柯萨奇B组病毒IgM抗体

目的 了解北京地区病毒性心肌炎的病毒感染状况。方法 用ＩｇＭ抗体捕捉ＥＬＩＳＡ（Ｍａｃ ＥＬＩＳＡ）,检测１９３例临床诊断为病毒性心肌炎患者血清中的Ｃｏｘ Ｂ１～６型病毒特异性ＩｇＭ抗体。结果 ＣｏｘＢ病毒ＩｇＭ抗体阳性检出率为６９．９％（１３５／１９３）,其中阳性检出率最高为Ｂ３型,占４０％（５４例）;其余依次为Ｂ２型,占２９．６％（４０例）;Ｂ４型占１８．５％（２５例）;Ｂ１型占７．４％（１０例）;Ｂ５型占３．０％（４例）;Ｂ６型占１．５％（２例）。而１８１例同年龄组非心肌炎患者ＩｇＭ抗体阳性检出率为２０．４％（３７／１９３）。病毒性心肌炎患者血清中的ＣｏｘＢ ＩｇＭ抗体阳性检出率明显高于非心肌炎患者,两者差异有显著性,Ｕ＝９．５６,Ｐ〈０．０１。结论 Ｃｏｘ Ｂ感染是病毒性心肌炎的主要病因。