外源性硫化氢对海洛因依赖大鼠海马长时程增强的影响

目的:观察外源性H2S供体NaHS对海洛因依赖大鼠学习记忆能力及海马LTP的影响。方法:SD大鼠随机分成3组:正常对照组、heroin组、heroin+NaHS组。先通过跳台实验检测大鼠学习记忆能力,然后记录高频刺激(HFS)前后在体海马CA1区群体峰电位(PS)变化,诱导长时程增强(LTP)的产生,最后通过Nissl染色观察海马神经元的损伤情况。结果:与对照组比较,heroin组和heroin+NaHS组学习记忆成绩均降低(P<0.05),PS幅值变化率减小(P<0.01),且形态学观察可见海马神经元损伤;与heroin组比较,heroin+NaHS组学习记忆成绩提高(P<0.05),PS幅值变化率增大(P<0.01),海马神经元损伤较轻。结论:(1)海洛因依赖导致大鼠海马神经元损伤,抑制海马CA1区LTP的产生,从而降低正常学习记忆能力;(2)外源性H2S可减轻海洛因依赖对大鼠海马神经元的损伤,易化海马CA1区LTP的产生,改善海洛因依赖导致的正常学习记忆能力的降低。     

在脑片水平上突触可塑性长时程增强的研究进展

长时程增强(LTP)是突触效能的重要表现形式,是研究学习与记忆突触机制的客观指标.近年来随着脑片技术的发展,很多关于LTP的实验研究都在脑片水平上进行.介绍了海马脑片CA1区LTP的调节表达机制的研究,海马脑片上诱导产生的LTP的特征和脑片条件的关系,多巴胺转运蛋白阻断剂通过活化D3多巴胺受体增强海马脑片CA1区LTP,以及激活大鼠海马脑片CA1区突触β-肾上腺素能受体增强联合LTP的研究,综述了在脑片水平上研究LTP的诱导表达维持及调节等方面的研究动态和进展.     

铅暴露对大鼠学习记忆功能和海马CA1区LTP的影响

目的 本研究观察铅对大鼠学习记忆功能和海马CA1区LTP的影响,探讨铅对学习记忆功能影响的可能机制.方法 22只大鼠随机分为2组.铅暴露组每天通过饮水饲以浓度为0.05g/L醋酸铅水溶液,对照组大鼠饮用蒸馏水.28天后开始水迷宫实验.之后,通过电生理实验比较强直刺激前后海马CA1区PS幅度变化.结果 在水迷宫实验中,铅暴露组大鼠寻找平台时间的缩短速度明显低于对照组,在搜索实验中错误次数明显增多.电生理实验中.铅暴露组强直刺激后平均PS幅值增至强直刺激前的(120.48±4.67)%,明显低于对照组(181.71±3.86)%.结论 铅暴露明显损伤了大鼠的空间学习和记忆能力.并明显抑制了大鼠海马CA1区LTP,铅对海马LTP的抑制是其损伤学习记忆功能的可能机制之一.     

慢性给予应激水平的糖皮质激素对海马神经元和突触的影响

为探讨慢性给予应激水平糖皮质激素对大鼠海马的影响,在实验组大鼠饮用水中加入皮质醇,使动物皮质醇吸收量达每日10mg/kg,从而引起与应激动物相同的皮质醇水平,共21d,然后用免疫组织化学和免疫印迹法观察海马内caspase-3、synap-tophysin(Syn)和neurogranin(Ng)表达的变化。结果显示:(1)实验组大鼠海马结构中可见较多细胞出现核固缩的病理改变,但未见或偶见极个别caspase-3免疫反应阳性细胞;(2)与正常组Syn表达水平(1.2197±0.3443)和Ng表达水平(1.9330±0.3450)相比,实验组大鼠海马结构中Syn和Ng的表达明显减少(P<0.05),其表达水平分别为0.5512±0.0540和1.3375±0.3317。上述结果表明慢性给予应激水平的糖皮质激素可损伤海马功能,引起不依赖caspase-3的海马神经细胞退变、使海马突触数量减少以及改变海马突触效能可能是其作用的部分机制。     

姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用及机制

目的:观察姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用并探讨其机制。方法:应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),给予Schaffer侧支高频刺激(HFS)诱发长时程增强(LTP),观察不同药物处理组EPSP起始斜率的变化情况。结果:与对照组相比,TNF-α和NMDA(N-甲基D-天冬氨酸)对大鼠海马脑片LTP产生明显的抑制作用(P0.05);而姜黄素可以部分拮抗TNF-α和NMDA对海马脑片LTP的抑制作用,与对照组相比无显著差异(P0.05);TNF-α、姜黄素和NMDA对大鼠海马神经元的基础突触传递没有显著影响。结论:姜黄素对TNF-α损伤的大鼠海马神经元有功能性保护作用,其机制可能是姜黄素部分拮抗TNF-α诱导的神经元细胞膜上的NMDA受体过度激活,维持神经元的长时程增强。     

应激对海马形态和功能影响的研究进展

近年来 ,应激对机体的损伤 (神经系统、心血管系统、消化系统、免疫系统 )引起广泛的关注 ,并在应激对海马形态和功能的影响研究方面取得了进展。本文旨在对应激引起的海马树突损伤 ,海马神经元的脱落及其机制以及由此引起动物和人的认知功能的损伤进行综述。     

杏仁核与创伤后应激障碍发病机制的相关性

创伤后应激障碍(PTSD)是指由于异常威胁性或灾难性心理创伤导致延迟出现和长期持续的精神障碍。杏仁核是大脑中的"恐惧中枢",与创伤性记忆和应激时HPA轴的激活联系密切。PTSD患者有强烈的恐惧和惊吓反应,血中糖皮质激素浓度反常低下,下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)轴调节紊乱。杏仁核可通过糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(MR)调节激活HPA轴,增加糖皮质激素的释放。PTSD导致杏仁核神经元细胞凋亡,凋亡相关基因Bax和Bcl-2比值增大时,神经细胞出现凋亡。PTSD引发杏仁核神经元长时程增强(LTP),杏仁核是恐惧形成和表达的关键中枢。在恐惧条件反射的形成过程中,杏仁核发生LTP,表明LTP是反应PTSD发生机制的重要指标。PTSD引致乙酰胆碱酯酶(AChE)活性降低,乙酰胆碱增多,恐惧增强;PTSD导致杏仁核神经元MR、GR及MR/GR发生改变,激活HPA轴,导致HPA轴调节紊乱。     

催产素抑制外周刺激诱发的大鼠海马LTP及Fos蛋白表达

 目的 探讨催产素对外周刺激诱发的大鼠海马LTP及Fos蛋白表达的影响。方法 单刺激诱发海马CA1区场电位；强直刺激坐骨神经，诱发海马CA1区长时程增强场电位（LTP）。在强直刺激前于侧脑室内微量注入催产素(Oxytocin，OT)及催产素受体拮抗剂－Atosiban，观察其对LTP的影响。用免疫组化法检测海马Fos蛋白表达。结果 单刺激坐骨神经在海马CA1区诱发出潜伏期固定(171.9±33.1) ms且可重复出现的以正波为主的场电位，平均幅度(25.7±8.4) μV。强直刺激诱导LTP产生，催产素可抑制海马LTP的诱导，但预先注射Atosiban后，海马CA1区仍能出现LTP，但持续时间比对照组短。强直刺激前，海马内c-fos表达为阴性；强直刺激后，表达增强，催产素组表达则较弱，催产素加拮抗剂组也呈强阳性表达。结论 催产素抑制海马LTP的诱导，减弱c-fos的表达，而Atosiban对该效应有一定的抑制作用。提示催产素可能是通过其受体发挥作用的。     

局灶性脑缺血再灌注后大鼠血浆和海马皮质醇含量变化

目的:探讨脑缺血再灌注后糖皮质激素与海马神经元损伤的关系,以及糖皮质激素对卒中后痴呆发病的影响。方法:采取大脑中动脉阻塞模型,通过放射免疫方法测定脑缺血再灌注后模型大鼠再灌注2h、6h、12h和24h不同时点的血浆和海马皮质醇含量变化。结果:模型组在再灌注4个时点糖皮质激素含量都有增高,同假手术组、正常组相比有显著差异(P<0.05)。血浆、海马中皮质醇含量都以再灌注6h最高。HE染色海马神经元损伤随再灌注时点的延长,呈进行性加重。结论:脑缺血再灌注后24h内存在血浆、海马皮质醇含量的增高,这可能是加重海马神经元损伤,引发卒中后痴呆发生的原因之一。     

体力运动和心理应激对大鼠海马去甲肾上腺素和五-羟色胺水平的影响

目的：研究长期体力运动和慢性心理应激对大鼠中枢海马去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)和五-羟色胺(serotonin，5-HT)水平的影响，并进一步探讨这2种神经递质在运动减缓应激性海马损伤效应中的作用。方法：采用了4周自愿跑轮运动(运动组)、3周束缚应激（应激组）和预先进行4周运动再施3周应激（运动-应激组）的实验动物模型，高效液相电化学法检测实验大鼠海马的NE和5-HT水平。结果：长期运动大鼠海马的NE和5-HT水平明显升高(P<0.01)，慢性应激大鼠的5-HT水平明显降低（P<0.05）；并且，先运动再应激组的海马NE水平维持正常并显著高于单纯应激组（P<0.01），而以上2组的5-HT水平并无显著差异，且均低于单纯运动组（P<0.05）。结论：在运动益于海马的正性作用中，NE和5-HT可能是重要的调控因素；在应激损伤海马的负性作用中，5-HT可能是重要的调控因素；而在运动减缓应激性海马损伤的作用途径中，NE可能是更重要的调控因素；并且，海马NE可能对运动更敏感，而5-HT可能对应激更敏感。     

产前应激对发育海马神经元及其超微结构的影响

目的:观察产前应激(PS)对子鼠海马神经元和神经元超微结构是否有损伤作用, 以及这种损伤是否与氧化物的过度生成有关。方法:采用束缚应激模型, 观察出生后1个月雄性子鼠的海马神经元数量、神经元超微结构及神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的变化。结果:晚期应激(LS)引起子鼠海马CA1和CA4区的细胞数量明显减少;电镜可见PS使子鼠海马CA1区神经元超微结构发生改变, 表现为线粒体肿大、边界不清、电子密度不均, 脂褐素增多, 偶见核变形;中期应激(MS)使子鼠海马CA1、CA2、CA3区和DG内nNOS阳性表达量显著升高, LS使子鼠海马CA1、CA2、CA3、CA4区和DG内nNOS阳性表达量也显著升高。结论:结果提示, PS对子鼠海马神经元及神经元超微结构有损伤作用, 这种损伤可能由氧化物过度生成引起。     

gp120mAb对gp120抑制大鼠海马脑片CA1区LTP作用的研究

目的探讨人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)的包膜糖蛋白gp120特异抗体gp120mAb对gp120引起大鼠海马脑片CA1区的突触传递及可塑性变化的影响.方法应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),研究gp120mAb对gp120抑制高频电刺激Schaffer侧支引起的鼠海马长时程增强效应(LTP)作用的影响.结果gp120对高频电刺激(HFS,100 Hz,1 000 ms×2,串间隔20秒,共2次)Schaffer侧支引起的大鼠海马CA1区LTP产生抑制作用,而对其基础EPSP没有影响.用浓度为200 pmol/L的gp120灌流脑片,可引起LTP的维持发生抑制.这种抑制作用可被gp120特异抗体gp120mAb(50 ng/ml)所拮抗.结论gp120mAb可能是通过拮抗gp120抑制海马CA1区的LTP诱发和维持而参与艾滋病痴呆(HIV-1 associated dementia,HAD)的形成.     

尼氟酸抑制慢性内脏痛大鼠海马CA1区突触长时程增强

目的:探讨尼氟酸(HCN2特异性阻断剂)对慢性内脏痛大鼠海马CA1(cornu ammonis 1)区突触长时程增强(LTP)的影响。方法:选用新生SD大鼠(雌雄不分)出生后8～14 d内,每天固定时间给予1次60 mmHg压力的结直肠扩张刺激建立慢性内脏痛模型,大鼠成年后通过测量腹外斜肌对结直肠扩张引起的放电反应来评估肠道痛觉的敏感性。采用离体脑片场电位的记录方法,观察慢性内脏痛大鼠海马CA1区场电位LTP的变化,并观察不同浓度(25～75 mg/L)的尼氟酸对慢性内脏痛大鼠海马CA1区场电位LTP的影响。结果:慢性内脏痛大鼠海马基础场电位的幅值及斜率与正常大鼠比较无显著性差异,但高频刺激后模型大鼠诱导出的LTP幅值及斜率的变化率与正常大鼠比较均显著增加(P<0.05);尼氟酸对正常大鼠离体海马场电位LTP的峰值和斜率没有任何影响,但是不同剂量(25～75 mg/L)的尼氟酸可剂量依赖性显著降低慢性内脏痛大鼠离体海马场电位LTP的峰值及斜率。结论:HCN2通道可能参与慢性内脏痛大鼠海马场电位LTP的易化过程。     

皮质发育障碍大鼠模型学习记忆行为和海马长时程增强的研究

目的：研究皮质发育障碍（DCD）大鼠模型空间学习记忆及离体海马长时程增强（LTP）变化,探讨DCD大鼠模型认知功能损伤的机制。方法：建立DCD大鼠模型,采用Morris水迷宫实验对DCD大鼠模型和正常对照组进行空间学习、记忆的行为学检测,应用膜片钳技术研究DCD大鼠模型海马脑片CA1区LTP的改变。结果：Morris水迷宫实验中DCD大鼠与正常对照组相比逃避潜伏期延长,穿过原平台位置次数和在原平台象限探索时间百分率下降;DCD大鼠模型海马脑片CA1区LTP诱出率、幅值增加百分率与正常对照组相比均明显降低[（40％vs100％,P〈0．05;（108±5．6）％vs（132±15．4）％,P〈0．05）]。结论：DCD大鼠模型的空间学习记忆能力降低,海马突触可塑性也发生降低。     

Aβ25-35伤害大鼠空间学习记忆和在体海马长时程增强的联合研究

目的:探讨海马内注射β-amyloid protein 25-35(Aβ25-35)所致Alzheizer’s病(AD)模型大鼠空间学习记忆功能障碍的海马突触可塑性长时程增强(LTP)机制,为联合开展AD动物行为学和在体电生理学研究提供实验证据。方法:在脑立体定位仪上给予大鼠双侧海马分别注射4 nmol/L Aβ25-35或等体积生理盐水每侧2μl,手术后恢复2周,每只大鼠依次进行行为学和电生理两部分实验。首先,利用Morris水迷宫进行空间学习、记忆功能测试;之后,进行在体海马CA1区场兴奋性突触后电位(fEPSP)引导记录实验,观察突触可塑性指标长时程增强(LTP)的改变。结果:与对照组相比,海马内注射Aβ25-35大鼠的空间学习记忆功能和在体海马突触可塑性LTP均有改变,其中:逃避潜伏期和逃避距离明显增加(P<0.01);目标象限内游泳时间和距离明显缩短(P<0.01);在体海马LTP幅度显著降低(P<0.01)。结论:海马内注射Aβ25-35可导致大鼠空间学习记忆功能障碍;联合实验中Aβ25-35同样可引起在体海马LTP改变。提示同批动物先后进行行为学和电生理学测试的方法是可行的,行为学实验不会影响后续LTP的实验结果。因此,本实验为行为学改变后进行在体LTP机制探讨提供了实验依据,为有效开展行为学和电生理学实验提供了思路。     

慢性复合应激对大鼠学习和记忆的影响

本文观察慢性复合应激对海马长时程增强(LTP)和一氧化氮合酶1(NOS1)表达变化的影响,并探讨了其在学习与记忆中的作用。将Wistar大鼠随机分为对照组和慢性复合应激组,每组各10只。应激组动物采用4种应激原无规律、交替性地进行长达6周的慢性复合应激试验。实验过程中测定动物血清皮质酮(CORT)水平,采用Morris水迷宫和Y迷宫测试大鼠学习和记忆成绩,记录海马齿状回LTP群体峰电位(PS)幅值的变化,同时观察海马CA1及齿状回区NOS1阳性神经元数目的变化。结果显示:(1)与对照组比较,慢性复合应激组动物在应激第4周和第6周时,血清皮质酮浓度的比值显著增高(P<0.05,P<0.01);(2)高频刺激(HFS)后各时间点的PS幅值增高更为明显(P<0.01);(3)Morris水迷宫和Y迷宫实验后慢性复合应激组动物的学习和记忆成绩优于对照组(P<0.05,P<0.01);(4)慢性复合应激组和对照组大鼠海马齿状回NOS1阳性神经元个数分别为8.80±3.91和5.44±1.14,两者间有统计学差异(P<0.05)。以上结果提示,慢性复合应激对大鼠的学习和记忆有一定的影响,可能与齿状回群体峰电位幅值增强和NOS1表达增强有关。     

睫状神经营养因子对应激引起海马CA3神经元损害的作用

目的;探讨睫状神经营养因子对应激引起海马ＣＡ３区神经元损害的作用。方法：采用Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ－Ｇｒｏｓ－Ｌａｗｒｅｎｔｊｅｗ染色法和常规透射电镜技术,观察急性和慢性足底电击大鼠的海马ＣＡ３区神经元开矿的变化,及双侧海马注射睫状神经营养因子对其影响。结果;急性应激大鼠海马神经元形态无明显变化;慢性应激大鼠海马神经元出现明显的损伤性形态变化;睫状神经营养因子对正常大鼠和急性应激大鼠的海马神经元     

BDNF对慢性应激性大鼠海马神经元损伤的保护作用

目的研究脑源性神经营养因子(BDNF)对大鼠海马神经元的保护作用。方法40只成年Wistar大鼠随机分为对照组、应激组、BDNF低剂量组和高剂量组,每组10只。用电击足底结合噪声建立慢性应激大鼠模型,Morris水迷宫观察动物的空间学习和记忆能力,Nissl染色观察和计数海马神经元数量,Fara-2荧光法测海马突触体内游离钙浓度。结果在双海马注射BDNF后,对于因慢性应激引起的空间学习和记忆能力下降,海马神经元数量减少,海马突触体内游离钙浓度增高有明显保护作用。结论BDNF对应激海马损伤有保护作用,其机制可能是通过调节海马细胞内的钙浓度,防止海马神经细胞丢失有关。     

Exendin-4对Aβ_(1-42)所致大鼠在体海马长时程增强抑制的拮抗作用及机制

目的:研究2型糖尿病(T2DM)治疗药物Exendin-4拮抗β-淀粉样蛋白(Aβ)抑制大鼠在体海马长时程增强(LTP)的作用及机制。方法:将SD大鼠随机分为对照、Aβ1-42、Exendin-4、Exendin-4+Aβ1-42四组(n=8)。利用自制的刺激/记录/给药一体化装置记录大鼠在体海马CA1区LTP;通过免疫组化实验观察大鼠海马CA1区p-CREB、p-Ca MKIIα和p-Akt的表达情况。结果:(1)海马CA1区注射Aβ1-42能显著抑制LTP的诱导和维持,高频刺激(HFS)后场兴奋性突触后电位(f EPSPs)平均幅度较对照组明显降低(P0.05);(2)与单独给予Aβ1-42相比,预先给予Exendin-4处理的f EPSPs平均幅度明显增加(P0.05);(3)Aβ1-42引起海马CA1区p-CREB、pCa MKIIα和p-Akt的表达降低,预先给予Exendin-4部分抑制了Aβ1-42诱导的p-CREB、p-Ca MKIIα和p-Akt表达下降。结论:海马内注射Exendin-4能够拮抗Aβ1-42引起的海马LTP损伤,其可能机制是通过改变c AMP/PKA/CREB信号通路、NMDA受体信号通路和PI3K/Akt/m TOR信号通路相关蛋白而实现。     

大鼠减压应激损伤时脑和肝胞液糖皮质激素受体的改变

目的探讨大鼠减压应激损伤时大脑和肝胞液糖皮质激素受体结合量的变化。方法大鼠２４只,随机分为５组,置于加压舱内,进行加减压实验。出舱后,以~３Ｈ地塞米松为配体,测定了动物脑、肝胞液糖皮质激素受体结合量的改变,同时还监测了动物心前区减压气泡的变化。结果减压应激损伤后,动物肝、脑胞液糖皮质激素受体结合量均下降,尤其以脑胞液中糖皮质激素受体减少为明显（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。动物在高压下暴露时间愈长,脑、肝胞液糠皮值激素受体减少愈明显。这一结果与动物减压后气泡音及ＤＣＳ发病率相吻合。实验还观测到出现减压应激损伤的动物,若不采取救治措施,可随着时间迁移糖皮质激素受体结合量进一步减少。结论脑和肝胞液糖皮质激素受体结合量改变与ＤＣＳ损伤密切相关,可作为评价急性ＤＣＳ损伤的指标之一。