血培养阳性标本污染情况的回顾性分析

目的：分析血培养阳性标本污染情况,为血培养标本质量管理提供参考。方法：回顾性分析2021年1月—2022年12月肇庆市怀集县人民医院送检的9 072例血培养样本阳性病原菌分布情况、污染菌分布情况、污染菌样本来源分布情况。结果：9 072例血培养送检样本中,共检出463例阳性样本,占比5.10%,其中革兰阴性菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌为主;革兰阳性菌以尿肠球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌为主;真菌则以白色念珠菌为主。9 072例血培养送检样本中,共有161例污染样本,占比1.77%。污染菌前三名为表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、革兰阳性杆菌。161例血培养污染样本中,内科占比最高,其次分别为重症监护病房、外科、门诊。结论：血培养阳性标本以革兰阴性菌为主,样本污染以表皮葡萄球菌为主,污染标本来源以内科为主,临床需重视血培养标本污染问题,积极采取干预措施,保证血培养标本质量。     

基因芯片技术在检测临床致病菌中的应用

细菌感染性疾病严重威胁人类健康.以培养为基础的传统致病菌检测方法存在耗时长、检测敏感性受培养条件限制等缺点,越来越不能满足临床的需要.因此,发展快速、准确检测病原菌的方法一直是人们追求的目标.近年来发展的基因芯片技术,具有高通量、集成化、微型化及自动化等特点,已广泛用于检测基因位点差异和分析基因表达水平等领域.在临床致病菌和耐药性的检测方面,基因芯片技术因其快速高效而逐渐受到人们的关注.     

血培养标本的病原菌构成及耐药性分析

目的:分析血培养标本中的病原菌构成及耐药性.方法:收集2016年1月-2020年1月老年人群血培养标本中检测出的病原菌200例,对所有标本进行细菌构成分析及耐药性检测,分析检测结果.结果:200例病原菌中,包含金色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌、链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、其他肠...     

2008～2011年新生儿血培养致病菌分布与耐药性变迁

目的:了解新生儿血培养致病菌的构成比与耐药性的变迁,为临床抗生素的合理使用提供依据。方法:对近4年的新生儿血培养结果进行统计、分析。致病菌培养采用法国梅里埃公司的Bact/A-lert-120全自动血培养系统进行。药敏试验采用K-B法。结果:致病菌的构成比与主要致病菌的耐药性均具有不同程度的变迁。对革兰阴性杆菌敏感性较高的为亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦和美罗培南;耐药性最高的为哌啦西林。对葡萄球菌敏感性最高的为万古霉素、环丙沙星、左氧氟沙星和克林霉素;敏感性最低的为青霉素。结论:引起新生儿败血症的致病菌从2008年的肠杆菌科为主改变为2011年的以金黄色葡萄球菌为主要致病菌。     

血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏的临床应用

血流感染是重症患者最主要的死亡原因之一。美国住院患者中．血流感染从1980年的0．67％上升至1992年的0．84％[1],病死率为27％～28％。按常规法进行细菌鉴定和药敏试验耗时较长．为探讨直接细菌鉴定和药敏试验的可行性．我们选取2012年1～12月79份本院Bact／Alert血培养阳性标本．经特殊处理后直接进行VITEK2COMPACT细菌鉴定和药敏试验．报告如下。     

PDCA在提高血培养标本管理质量中的应用价值

目的：探讨戴明环(PDCA)管理法在提高血培养标本管理质量中的应用价值。方法：选取2020年1-12月江门市中心医院血液内科送检的200例患者血培养标本为研究资料,将2020年1-6月送检的96例患者血培养标本作为对照组,2020年7-12月送检的104例患者的血培养标本作为研究组。对照组血培养标本实施常规质量管理,研究组在对照组基础上融入PDCA管理模式。比较两组血培养标本污染率以及PDCA管理法实施前后科室护理人员血培养标本知识掌握情况。结果：研究组血培养标本污染率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PDCA管理法实施后,护理人员在血培养标本知识掌握方面明显优于实施前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：血培养标本管理过程中融入PDCA管理法,能够进一步提升血培养标本管理质量。     

临床2342份血培养标本分析

目的 研究惠州市两家医院在2006年12月至2008年12月间,各临床科室住院及门诊病人265株血液感染的病原菌构成和分布特点.方法 采用BACTEC 9120全自动血培养仪对血标本进行培养,MicroScan-4微生物系统对血培养阳性标本进行菌种鉴定.结果 2342份血标本中,共检出细菌265株,检出率为11.3%,其中革兰阳性球菌143株(54.0%),革兰阴性杆菌105株(39.6%),阳性杆菌14株(5.3%)真菌3株(1.1%).血液感染中内科疾病127例占47.9%,外科疾病67例占29.2%,儿科71例占26.8%.儿科检出病原菌主要为凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)77.5%(55/71).结论 内科主要为革兰阴性杆菌感染,外科与儿科主要为革兰阳性球菌感染,葡萄球菌尤其是CNS已成为血液感染的主要病原菌,应引起临床医生的重视.     

1906份小儿血标本需氧培养的结果分析

目的了解海南省人民医院住院和门诊患儿血培养病原菌的分布和药敏情况。方法取2001年1月—2004年1月海南省人民医院住院及门诊患儿血培养标本共获得细菌163株，应用VITEK-32微生物分析系统进行鉴定和药敏试验。结果163株病原菌中，革兰氏阳性球菌120株，占73．6％，阴性茵41株，占25．1％，白色念珠茵2株，占1.3％。无论是革兰氏阳性球茵或阴性杆菌，耐药性都较广，阳性球菌对万古霉素、呋喃妥因的敏感性最高。阴性菌敏感性最高的是亚胺培南和妥布霉素。结论结果显示小儿细菌耐药情况非常严重，在抗感染治疗中科学合理地用药非常重要。     

血培养242份阳性结果分析

目的 了解血培养致病菌的情况及阳性检出时间。方法 无菌采集静脉血，采用法国bio Mefieux公司产的HPD双相瓶进行细菌培养，API系统进行接种鉴定。结果 1776份标本共检出阳性致病菌38种242株，阳性率13．6％，条件致病菌占总数的 83．47％。肠杆菌科48小时内阳性检出率为95．2％，真菌检出时间为48小时后为主，占90．9％。结论 条件致病菌、真菌在血培养致病菌中有增多趋势。     

16S rRNA基因检测在新生儿败血症早期诊断中的研究进展

新生儿败血症是新生儿期的常见病及危重症,是导致新生儿期死亡的重要原因之一。由于该症早期缺乏特异性的临床症状,所以选择敏感、快速的检测细菌方法具有重要意义。近年来,国内外学者应用分子生物学技术进行细菌分类、鉴定,为新生儿败血症的早期诊断提供了极有前途的检测方法。细菌16S rRNA基因所具有的结构特征,使其成为细菌鉴定的最常用的部位。本文就该基因的特征、检测方法及临床应用与研究的新进展简要综述。     

肝癌患者肝组织中螺杆菌感染研究

目的 研究肝癌患者肝组织中螺杆菌(Hp)感染状况,进一步揭示Hp感染与肝癌的关系.方法 收集正常人、慢性肝炎、肝癌患者肝组织各30例,均经病理证实.(1)在微需氧环境37℃下应用哥伦比亚培养基分离培养肝脏组织中Hp.(2)系列生化反应和速尿素酶检测.(3)免疫组化.(4)应用PCR扩增螺杆菌属16S rRNA基因及序列测定.结果 (1)所有的肝组织培养均未见细菌生长;(2)正常人、慢性肝炎患者肝组织快速尿素酶检测阳性率为0,肝癌为3%;1例肝癌组织硝酸盐试验和过氧化氢酶检测阳性.(3)免疫组化示9例肝癌组织发现Hp,检出率为30.0%.正常肝组织、慢性肝炎患者肝组织中未观察到Hp,与癌组织差异有统计学意义(P<0.05).(4)PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳,于紫外检测仪下均可见16S rRNA基因阳性扩增带为109 bp;30例原发性肝癌标本中有18例Hp16S rRNA基因,正常人、慢性肝炎组均无检出Hp 16S rRNA基因,与癌组织差异有统计学意义(P<0.05).肝组织16S rRNA PCR扩增产物测序对比分析,与Hp 16S rRNA片段的基因有98.8%同源性.结论 肝癌患者肝组织中存在Hp感染,可能与肝细胞癌存在相关性.     

16S rRNA在检测肺炎克雷伯菌引起血流感染中的应用

目的初步建立一种对肺炎克雷伯菌引起血流感染的快速检测方法。方法应用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）,从血培养阳性瓶中提取细菌基因组DNA,以特异性引物扩增16S rRNA靶片段,同期进行细菌培养鉴定的对照。结果检测142份已知肺炎克雷伯阳性标本,65份非肺炎克雷伯阴性对照,52份双盲样本显示敏感性为100%（146/146）特异性为100%（113/113）,整个实验可在2h内完成。结论较传统的培养鉴定法而言,以16SrRNA作为实时荧光定量靶基因可快速检测肺炎克雷伯菌,具有很好的研究价值与应用前景。     

实时荧光定量聚合酶链反应在检测大肠埃希菌引起血流感染中的应用

目的 探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)在检测大肠埃希菌引起血流感染中的应用.方法 从血培养阳性瓶中提取细菌基因组DNA,以大肠埃希菌特异性引物应用实时荧光定量,扩增16S rRNA靶片段,同期进行细菌培养鉴定,对比实验结果.结果 通过对实时FQ-PCR体系特异性、敏感度、稳定性验证,结果表明具有较好的特异性...     

16S rRNA基因检测对新生儿败血症诊断价值的Meta分析

目的 16S rRNA基因检测是诊断新生儿败血症的方法之一,但是尚无研究综合评价其诊断价值,本研究拟系统评价16S rRNA基因检测在新生儿败血症中的诊断价值。方法在Cochrane图书馆、Medline、Embase、Science Di-rect、中国期刊全文数据库、万方、维普等数据库中查找利用16S rRNA基因检测诊断新生儿败血症的文献。QUADAS工具评价纳入文献的质量,Meta-Disc 1.4软件检验异质性并根据其结果选择相应效应模型计算纳入研究的合并敏感性、特异性等指标,绘制汇总受试者工作特征（SROC）曲线,综合评价16S rRNA基因检测的诊断价值。结果共有8篇文献共计2 543例新生儿纳入本次研究,Meta分析显示16S rRNA基因检测对新生儿败血症的合并诊断价值分别为：敏感度为0.93,特异度为0.97,阳性似然比为25.12,阴性似然比为0.08,诊断比值比为323.40。SROC曲线下面积为0.99。结论 16S rRNA基因检测中对新生儿败血症具有较高的诊断价值,可作为诊断新生儿败血症重要工具。     

肝硬化失代偿期患者腹水、胸水及血液中16S rRNA基因检测

为寻找诊断肝硬化失代偿期并发自发性腹膜炎、胸膜炎和败血症时检测病原菌的方法。采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增真细菌域的１６ＳｒＲＮＡ基因，与Ｇｒａｍ阴性和Ｇｒａｍ阳性特异探针杂交检测肝硬化失代偿期患者胸腹水和血液中的致病菌。结果：ＰＣＲ腹水检测病原菌的阳性率９１４％；Ｇｒａｍ阴性探针斑点杂交（Ｄｏｔｂｌｏｔ）阳性率１００％；Ｇｒａｍ阳性杂交阳性率２１７％，高于细菌培养和鲎试验。结果提示：用ＰＣＲＤｏｔＢｌｏｔ杂交法检测病原菌的１６ＳｒＲＮＡ基因是诊断肝硬化自发性腹膜炎、胸膜炎和败血症等各种细菌感染的一种新方法     

实验动物CAR杆菌16SrRNA基因PCR监测方法的建立

目的 建立CAR杆菌的PCR监测方法,筛查国内部分实验动物样本中CAR杆菌携带状况.方法 利用CAR杆菌的特有16SrRNA基因序列片段267bp设计引物,通过从日本实验动物中央研究所获取的CAR标准株DNA,建立实验动物CAR杆菌16SrRNA基因PCR监测方法.结果 利用建立的CAR杆菌16SrRNA基因PCR监测方法对国内455份实验动物样本进行筛查,未检出CAR杆菌感染.结论 建立了敏感性好,特异性高的实验动物CAR杆菌PCR监测方法,未见动物携带CAR杆菌.     

焦磷酸测序法鉴定临床常见病原菌

目的 建立高效的焦磷酸测序鉴定临床常见病原菌的方法.方法 在细菌16S rRNA的V1及V3可变区两端保守序列设计PCR扩增通用引物及焦磷酸测序引物,PCR扩增后焦磷酸测序测定V1及V3可变区序列,测序结果与数据库比对判断细菌种属.结果 在4 h内完成96株细菌的鉴定,所有菌株鉴定结果与常规鉴定结果一致.结论 焦磷酸测序技术可以用于临床分离菌株的鉴定,且具有费用相对低廉、高通量、鉴定能力强等优点.     

基于16S rRNA序列鉴定临床不常见细菌

目的以16S rRNA基因为靶序列,建立核糖体测序方法鉴定临床不常见细菌。方法利用通用引物聚合酶链反应(PCR)扩增细菌16S rRNA基因,对PCR产物进行测序,在GenBank中对测序结果进行Blastn分析。结果10株临床常见细菌测序结果与表型鉴定符合,检测出4株临床不常见细菌。结论 16S rRNA基因测序可以作为鉴定临床不常见细菌的重要方法之一。     

细菌直接PCR和双引物策略鉴定16S rRNA基因技术的建立

目的探索一种基于16S rRNA基因的快速鉴定细菌方法,为临床诊断治疗及耐药菌的分子遗传分析提供科学依据。方法对卫生部室间质评菌株和临床病人标本分离培养纯菌落,用双蒸水稀释菌落,然后直接以菌液为模板优化反应体系PCR扩增16S rRNA基因片段,再测序扩增片段。将测序结果在细菌Ribosomal数据库中进行同源性比对,根据序列同源性鉴定病原细菌。结果本实验鉴定的卫生部质评菌株结果与卫生部报告结果一致。本实验能够一次性鉴定出临床病人标本分离的菌株。结论本研究优化了一种免纯化细菌核酸直接PCR鉴定细菌16S rRNA基因的方法。本研究建立的基于病原细菌16S rRNA基因鉴定方法可用于细菌的快速诊断。