10kHz～100MHz人血液细胞介电性能

目的 研究正常人血液细胞介电性能的数据特征.方法 在射频段使用阻抗分析仪测量了30例正常人血液样本的交流阻抗,通过介电谱、复平面图、介电损耗因子、电导率虚部和损耗角正切的频谱分析,明确了正常人血液细胞介电性能的频率特性.结果 正常人血液细胞介电常数和电导率具有频率依从性;正常人血液细胞介电性能具有两个特征频率:第1特征频率f1＝0.59MHz,第2特征频率f2＝2.12MHz.结论 通过频域阻抗分析法可以确定血液细胞频率特性.     

肿瘤组织的低温介电特性

目的：研究以人鳞癌细胞移植的裸中瘤组织在低温、低频条件下的介电特性，方法：使用低温生物介电谱测试仪和两针电极系统进行测试。结果：在低温下肿瘤组织仍具有高介电常数现象，且随着温度的降低，会发生一个介电常数ε的突变下降过程，介质损耗角正切ＴＧ迅速变化并出现峰值；同时还发现，冻融速率对肿瘤组织的介电温谱有一定的影响。结论：从介质物理的角度解释了肿氏温介电谱的成因、降温和复温曲线不复合的原因以及冻融速率     

谐振法在生物组织介电特性测量中的应用

谐振法在生物组织介电特性测量中的应用刘婉华陈香才河南医科大学医用物理学教研室郑州４５００５２关键词谐振；介电特性；电容；频率生物组织的介电特性测量是８０年代才活跃起来的，采用的方法有多种，如谐振法、电桥法和传输线法等。作者利用自制的谐振装置，采取谐振...     

阻抗谱分析法测量红细胞聚集特性

目的 依据Maxwell-Wagner理论和血液的电特性模型,导出计算红细胞聚集体半径R的公式,从而建立了一种评价红细胞聚集特性的新方法——阻抗谱分析法。新方法采用多频率技术测量血液阻抗谱,经拟合得到被测血液的阻抗一频率曲线并从中提取时间常数T,获得红细胞聚集体半径R,以红细胞聚集过程中R的变化实现对红细胞聚集特性的测量与评价。阻抗谱分析法可为研究红细胞聚集特性提供一种新的简便有效的血液学检测手段。     

家兔全血细胞电阻抗频率特性

目的：建立家兔全血细胞复阻抗谱的数据特征参数。方法：在0．01～100MHz频率范围,利用4294A阻抗分析仪,测量了10只家兔30个血液样本的交流阻抗,通过Bode图、Nyquist图、Nichols图谱的数据分析,建立家兔血液细胞电生理的频率特性。结果：①家兔血液细胞阻抗幅模量和相位角具有频率依从性;②家兔血液细胞阻抗谱具有两个特征频率：第一特征频率fc1=2．58MHz,第二特征频率fc2=5．21MHz。结论：通过阻抗谱分析法可以确定血液细胞频率特性。     

细胞电旋转理论分析

本言语介绍介电单球体浮在电场中旋转力矩的公式推导和两种条件下的频率特征，此理论是分析细胞电旋转的基础。     

家兔全血细胞电阻抗频率特性

目的:建立家兔全血细胞复阻抗谱的数据特征参数.方法:在0.01～100 MHz频率范围,利用4294A阻抗分析仪,测量了10只家兔30个血液样本的交流阻抗,通过Bode图、Nyquist图、Nichols图谱的数据分析,建立家兔血液细胞电生理的频率特性.结果:①家兔血液细胞阻抗幅模量和相位角具有频率依从性;②家兔血液细胞阻抗谱具有两个特征频率:第一特征频率fC1＝2.58 MHz,第二特征频率fC2＝5.21 MHz.结论:通过阻抗谱分析法可以确定血液细胞频率特性.     

开端同轴探头法测量组织介电特性的感应范围

目的 研究开端同轴探头法测量介电特性参数的感应范围。方法 利用介电特性参数分层模型结合微距测量装置的方式建立开端同轴探头法感应范围的测量模型,以感应深度表示垂直方向感应范围,以感应直径表示水平方向感应范围。利用介电特性参数存在差异的多种材料（特氟龙、去离子水、乙醇、梯度浓度氯化钠溶液）,设置了介电特性差异化分层模型。为标定不同输出功率下介电特性测量系统的误差范围,我们测定了不同输出功率环境下的合成不确定度（TCU）,确定测量实验最佳可变功率范围。感应范围测量实验中,根据可能对感应范围造成影响的测量参数设置对照组,包括功率（-10、-5、0、3、6、9 dBm）、频率（1~500 MHz）、特氟龙与去离子水、乙醇形成介电常数[ε]差异高低对比组、特氟龙与不同浓度氯化钠溶液形成电导率[σ]差异高低对比组,上述分组均被设置在感应深度与感应直径测量实验中。结果 合成不确定度测量结果表明测量功率大于-10 dBm（0.10 mW）可以得到相对准确的测量结果（TCU<2%）。感应深度测量结果表明感应深度与功率正相关（P<0.05）随着测量功率上升感应深度在去离子水与乙醇溶液中逐渐增大,差异达到70 μm;感应深度与被测物电导率负相关（P<0.05）,随着氯化钠溶液浓度的上升,对应感应深度逐渐下降,差异达到270 μm;高介电常数的去离子水测量组感应深度在不同测量参数环境下均大于低介电常数的乙醇测量组。测量参数变化对感应直径影响不显著,不同测量参数环境下感应直径稳定在固定范围内（1.0~1.8 mm）,介于在探头内导体直径与绝缘层直径之间,小于探头直径。结论 开端同轴探头法测量介电特性感应范围受测量参数与被测物介电特性参数共同影响,其中感应深度受影响较大。     

血液稀释阻抗法测心输出量的模拟实验研究

本文根据阻抗血流图理论和稀释原理导出用血液稀释阻抗法测定心输出量的计算公式。经模拟实验验证,计算流量值与实测值之间有很好的相关性(γ=0.98)。     

人胚神经干细胞及人脐血干细胞治疗大鼠脑缺血的实验研究

目的:观察人胚神经干细胞(hNSCs)?人脐血干细胞(hUCBCs)治疗脑缺血大鼠的效果及其在缺血大鼠脑内的增殖?分化情况?方法:从自然流产的孕10~13周的人胚脑组织中分离?培养hNSCs;采集足月新生儿脐带血60~100 ml,分离出其中的单个核细胞;治疗前hNSCs?hUCBCs均经5-溴脱氧嘧啶尿苷(BrdU)标记48 h?采用线栓法制作大鼠脑缺血模型,1天后经尾静脉注射未分化的hNSCs?hUCBCs至脑缺血大鼠体内,对治疗后大鼠进行神经损害严重程度评分(NSS),用免疫组化方法观察hNSCs?hUCBCs的存活?迁移?分化状况?结果:从人胚脑中成功培养出hNSCs,培养条件下呈悬浮状态生长,形成神经球;hUCBCs在体外也具有增殖能力?两治疗组大鼠均自治疗后21天起其NSS显著低于对照组(P < 0.05),两治疗组间比较各时间点NSS无显著性差异(P > 0.05)?治疗后14?21?28?35天脑组织切片中均可见BrdU染色阳性细胞,缺血侧明显多于对侧(P < 0.05),治疗后21?28?35天明显多于治疗后14天(P < 0.05);hNSCs组BrdU染色阳性细胞数多于hUCBCs组(P < 0.05);治疗组各时间点脑组织切片中均可见nestin染色阳性细胞;在BrdU阳性细胞群中,hNSCs组73.8%为胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性细胞,16.7%为2,3-环核苷酸磷酸二脂酶(CNPase)染色阳性细胞,9.5%为神经元特异性烯醇化酶(NSE)染色阳性细胞;hUCBCs组74.5%为GFAP染色阳性细胞,15.4%为CNPase染色阳性细胞,10.1%为NSE染色阳性细胞;两组间差异无显著性(P > 0.05)?结论:hNSCs?hUCBCs均具有多分化潜能,受缺血部位微环境信号的影响分化成3种主要类型的神经细胞;静脉注射hNSCs?hUCBCs能有效改善脑梗死大鼠的神经功能评分;除了hNSCs外,hUCBCs也是治疗缺血性脑血管病的一种可能手段?     

人外周血造血干细胞低温保存方法的实验研究

目的：观察－196℃程控降温冻存方法和－80℃直接冻存方法中单用二甲基亚砜（DMSO）与DMSO加羟乙基淀粉（HES)两种浆存保护剂对人外周血造血干细胞体外冻存的效果。方法：对5例经Cs-3000Plus血细胞分离机分离所得的外周血单个核细胞分别加入10％DMSO和5％DMSO加6％HES冻存保护剂。并分别以－196℃程控降温冻存方法和－80℃直接冻存方法保存15d，以快速复温法复苏细胞，检测冻存前后细胞活率及有核细胞、CD34^ 细胞、粒单系集落形成单位（CFU－GM）、红系集落形成单位（CFU－E）回收率。结果：在－196℃程控降温冻存方法时，单用DMSO和DMSO加HES两组在细胞活率、有核细胞回收率、CD34^ 细胞回收率、CFU－E回收率方面差别无显著性意义；在－80℃直接冻存方法时，MDSO加HES组有核细胞回收率、CFU－E回收率高于单用DMSO组。结论：－196℃程控降温冻存时10％DMSO和5％DMSO加6％HES两种冻存保护剂均可有效应用于外周血造血干细胞保存；一80℃直接冻存方法适合5％DMSO加6％HES冻存保护剂，也可有效用于外周血造血干细胞保存。     

2450 MHz复介电常数测量系统的研究

目的 研究2450MHz频率下复介电常数测量系统的可靠性。方法 分别测量低损耗介质和高损耗介质的复介电常数，对比测量值和标称值的差异，检验测量结果的可靠性和可重复性。结果 对低损耗和高损耗介质的测量精度都较高，测量误差较小。结论 此测量系统能准确地测量2450MHz频率下介质的复介电常数。     

人脐血单个核细胞的体外培养观察

目的对脐血间充质干细胞进行体外培养，以进一步阐明其生物学特性，为今后的基础研究和临床应用打好基础。方法采用DMEM培养基培养脐血单个核细胞，流式细胞仪检测细胞表面标志。结果脐血单个核细胞在体外培养24d时，细胞表面CD11b、CD34、CD44和CD45表达阴性，GFAP和nestin表达也为阴性。结论培养所得的单个核细胞区别于脐血中的造血干细胞。     

Conversion of mononuclear cells from human umbilical cord blood into hepatocyte-like cells

Objective: To evaluate the differentiation of human umbilical cord blood cells into hepatocyte-like cells. Methods: Mononuclear cells (MNCs) derived from human umbilical cord blood were isolated using Ficoll. The experiment was derived into 3 categories:(1) MNCs co-cultured with 50 mg minced liver tissue separated by a trans-well membrane and then collected at 0 h,24 h,48 h and 72 h; (2) MNCs cultured along supplemented with 100 ml/L FBS. 100μ/ml penicillin, 100μg/ml streptomycin. 4. 7μg/ml linoleic acid, 1×ITS, 10-4 mol/L L-Ascorbic acid 2-P and a combination of FGF4 (100 ng/ml) and HGF (20 ng/mL). Cells were then collected at 0 d and 16 d to examine the expression profile of hepatocyte correlating markers;(3) 0. 2-0. 3 ml of MNCs with a cell density of 2×107/ml were transplanted into prepared recipient mice [n = 12, injected with 0. 4 ml/kg (20%) CCl4 and 150 ng/kg 5-fluorouracil (5-Fu) prior the transplant 24 h and 48 h, respectively] via injection through tail vein. Mice were sacrificed 4 weeks after transplantation. The hepatocyte correlating mRNAs and proteins were determined by RT-PCR, immunohistochemical analysis and immunoflurence technique. Results: (1) After 72 h. a number of glycogen positive stained cells were observed with MNCs co-cultured with damaged mouse liver tissues. The expression of hepatocyte markers, human albumin (ALB),α-fetal protein (AFP) and human GATA4 mRNA and proteins were detected by RT-PCR and immunohistochemistry as well. For the confirmation, the DNA sequencing of PCR products was performed. In control groups, MNCs co-cultured with normal mouse hepatocytes or MNCs cultured alone, all markers remained negative. (2) In growth factor supplemented culture system, MNCs developed into larger volume with richer cytoplasm and binucleation after 16 d. Positive expression of ALB, AFP, CK18 and CK19 mRNA were detected with RT-PCR, and ALB positive staining was observed by immunocytochemistry as well. In contrast. MNCs cultured without exogenous growth factors scarcely attached to the culture dish and ALB mRNA was not detected. (3) In transplantation experiment, both of ALB and AFP mRNA were detected by RT-PCR and HSA, PCNA and ALB positive staining were observed in the livers of recipient mice by immunocytochemistry. Conclusion: MNCs from human umbilical cord blood could convert into hepatocyte-like cells in 3 different ways, indicating their potential use in the clinic applications for the treatment of human liver diseases.     

人脐带血内皮祖细胞的分离、培养与鉴定

目的:分离、培养、鉴定人脐带血内皮祖细胞（EPCs）,为获取大量血管内皮祖细胞提供方法。方法:脐带血采集后,采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法获取脐带血单核细胞,再将单核细胞接种于铺设有纤维连接蛋白的培养瓶中,经过体外诱导、培养、分化,完成传代扩增;通过免疫组织化学、免疫荧光染色、流式细胞术对细胞进行鉴定。结果:细胞培养第5天呈现集落样生长,单个细胞呈圆形或梭形,2周后细胞长满瓶底,呈鹅卵石样外观。免疫组织化学检测显示,CD31兔抗人单克隆抗体阳性率91.5%,Anti-Von Willebrand factor antibody（vWF）相关抗原兔抗人单克隆抗体的阳性表达率为72.4%;细胞免疫荧光染色检测显示,吞噬Dil标记的乙酰低密度脂蛋白（+）,发出红色荧光;结合FITC标记的荆豆凝集素Ⅰ（+）,发出绿色荧光;双染（+）,呈黄色荧光。流式细胞术检测CD34阳性率93%,血管内皮细胞生长因子受体2阳性率88.5%,CD133阳性率84.8%。结论:从脐带血中可获取大量CD34+、VEGFR-2+及CD133+血管内皮祖细胞。     

人脐血单个核细胞诱导分化为神经元样细胞

目的 探讨人脐血单个核细胞体外向神经元样细胞定向诱导分化的条件。方法 无菌条件下采集正常人脐血,分离单个核细胞。用DMEM/F12培养基进行纯化和扩增培养。取扩增5代的间充质干细胞(MSC),分别用β-巯基乙醇(β-ME)、二甲基亚砜(DMSO)、神经条件培养液诱导脐血MSC向神经元样细胞分化。免疫组化法检测脐血MSC的Nestin表达和神经元样细胞特异性标志。结果 脐血原代和2、5代MSC的Nestin表达阳性率分别为6.7%、12.4%和20.8%。神经条件培养液诱导神经元样细胞阳性率最高达36%,β-ME、DMSO分别为33%和25%。结论 脐血MSC具有神经干/祖细胞的特性,在一定条件下能向神经元样细胞分化。     

人脐血间充质干细胞向肝细胞样细胞的分化

目的 从脐血中获得间充质干细胞（MSC）,探索体外诱导MSC向肝细胞分化的实验条件。方法 无菌采血,分离脐血单个核细胞。以贴壁培养法获得MSC,采用流式细胞术检测细胞表面标志。分别用联合诱导法(联合诱导组)以及阶段诱导法(阶段诱导组)诱导MSC向肝细胞分化。采用RT-PCR检测ALB、AFP及CK19mRNA的表达情况。结果 MSC呈长梭形,第三代（P4）后增殖较快。流式细胞术检测表明：CD29及CD44阳性,而CD34及CD45阴性。诱导6周后,联合诱导组无变化,而阶段诱导组细胞由长梭型变为不规则型,并检测到AFP mRNA的阳性表达,而未见ALB、CK19 mRNA的表达。继续诱导2周,检测到AFP、ALB、CK19 mRNA的表达。结论 脐血中的MSC对高密度、高血清的依赖性高。在体外,阶段诱导方法可将MSC诱导成肝细胞。     

人类脐带血间充质干细胞的培养及鉴定

目的对人类脐带血中的有核细胞进行分离培养及鉴定,观察能否得到间充质干细胞。方法抽取人类脐带静脉血,进行细胞分离和培养,并进行荧光激活细胞分析。结果脐带血中间充质干细胞与骨髓中的类似,其外表呈纤维样;流式细胞术鉴定结果表明这种细胞能表达CD29、CD44、CD90、CD95、CD105、CD166以及MHCⅠ(组织相容性抗原复合体Ⅰ),但不能表达CD14、CD34、CD40、CD45、CD80、CD86、CD117、CD152以及MHCⅡ(组织相容性抗原复合体Ⅱ);并且具有分化成骨细胞和脂肪细胞的潜能。结论可以从人类脐带血中成功分离培养得到间充质干细胞。     

脐血单个核细胞体外分离和定向分化为神经干细胞的实验研究

目的 探讨人脐血单个核细胞的分离培养和诱导后神经干细胞(NSCs)标志物mRNA的表达.方法 使用密度梯度离心法得到脐血单个核细胞,用体外贴壁生长的方法获得脐血间质干细胞(MSCs),观察培养过程中脐血MSCs形态的变化,通过流式细胞仪检测干细胞表面抗原的表达,使用NGF和RA联合诱导后,用RT-PCR方法鉴定诱导前后NSCs标志物巢蛋白(nestin)及Musashi-1蛋白mRNA的表达.结果 脐血单个核细胞贴壁生长后大部分细胞呈梭形,诱导后可分化为神经元样细胞.流式细胞仪检测该细胞不表达CD34、CD11a、CD11b和强表达CD29,符合MSCs特征.诱导后,NSCs表面标志Nestin及Musashi-1表达明显增强,48h达高峰,然后逐渐减弱.结论 脐血中存在间质干细胞,分离后可以体外扩增,诱导后分化为神经元样细胞,并表达NSCs表面标志.脐血能够成为NSCs的新来源.