套式聚合酶链反应扩增胆固醇结石中细菌DNA及其临床意 …

为探讨细菌在胆固醇结石病机理中的作用，从３０例胆汁细菌培养阴性的胆囊胆固醇结石中提取ＤＮＡ，应用套式聚合酶链反应扩增细菌１６ＳｒＲＮＡ基因片段作为有细菌存在的分子证据。结果显示，２６例胆固醇结石中有细菌ＥＮＡ存在。     

套式聚合酶链反应扩增胆固醇结石中细菌DNA及其临床意义研究

为探讨细菌在胆固醇结石发病机理中的作用，从３０例胆汁细菌培养阴性的胆囊胆固醇结石中提取ＤＮＡ，应用套式聚合酶链反应扩增细菌１６ＳｒＲＮＡ基因片段作为有细菌存在的分子证据。结果显示，２６例胆固醇结石中有细菌ＤＮＡ存在。提示细菌可能在胆固醇结石的形成中具有一定的作用。     

聚合酶链反应对胆囊癌组织中细菌DNA片段的检测研究

目的　研究胆囊癌组织及相应胆汁中的细菌菌谱,以探讨胆囊癌的发生与细菌感染的关系。方法　采用聚合酶链反应（ＰＣＲ） ,对３７ 例胆囊癌组织标本及９ 例相应胆汁中的细菌ＤＮＡ 片段进行分子生物学扩增。结果　３７ 例胆囊癌组织标本中细菌ＤＮＡ 片段检出率为７８－３７％ （２９／３７）,９ 例相应胆汁中细菌ＤＮＡ检出率为７７－８％ （７／９）。结论　胆囊粘膜癌变可能与厌氧菌尤其是产气荚膜梭菌感染存在联系,厌氧菌与需氧菌协同作用,长期刺激胆囊粘膜可能是引起癌变的主要因素。     

应用聚合酶链反应探讨慢性乙型肝炎与胆石症的关系

作者应用敏感而特异的聚合酶链反应对我院 1989～ 1994年 17例慢性乙肝病人的胆囊标本和 35例非慢性乙肝病人的石蜡包埋的胆囊标本中的ＨＢＶ ＤＮＡ进行了检测 ,以探讨慢性乙型肝炎在胆石症发病中的作用。一、材料 :(1)我院 1989年至 1994年慢性乙型肝炎病人行胆囊切除术的石蜡包埋胆囊标本 17例 ,其中伴胆石症 13例。另取非慢性乙型肝炎 (乙肝标志物阳性 )病人行胆囊切除术的石蜡包埋胆囊标本 35例做对照 ,其中伴胆石症 19例。 (2 )试剂 :采用华美生物工程公司生产的ＰＣＲ扩增试剂盒。用来检测ＨＢＶ ＤＮＡ的一对引物选自ＨＢＶＣ区基因…     

聚合酶链反应检测结核杆菌DNA对骨结核病诊断的临床价值

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ），分别对２０例骨结核患者标本用两种方法检查的阳性率分别为：培养法２０％，ＰＣＲ６５％，经统计学处理二种方法有显著性差别，ＰＣＲ阳性率显著高于培养法，而且２天即可报告，显著缩短了报告时间。３０例非骨结核中患者标本两种方法均为阴性。盲法结核杆菌和对照菌ＰＣＲ结果表明具有较高的特异性。只要标本中有结核杆菌ＤＮＡ即可扩增其特异的ＤＮＡ片断，即使经福尔马林固定２－４周的酝酿也可检测     

应用聚合酶链反应检测乙肝患者肾组织中的HBV DNA

应用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１１例乙肝患者石蜡包埋的肾、肝组织中的ＨＢＶ ＤＮＡ进行了检测，并与其免疫组化及原位杂交结果作了比较。二组引物检测的结果表明：肾组织中ＨＢＶ ＤＮＡ的检出率为８／１１（７２．７％），８例中包括膜性肾炎和膜增生性肾炎各１例，均不存在有ＨＢＶ的复制；在肝组织中均有ＨＢＶ感染，其中５例有ＨＢＶ复制。ＨＢＶ可以感染肾组织但并不在肾组织中复制这一结果支持乙肝患者肾脏出现的     

反向聚合酶链反应检测肝细胞癌中乙型肝炎病毒DNA整合

目的应用反向聚合酶链反应(inverse polymerase chain reaction,IPCR)法检测肝细胞癌(HCC)中乙型肝炎病毒(HBV)DNA整合.方法提取手术切除石蜡包埋人肝癌组织中DNA,根据IPCR原理,选用HBV DR1区无酶切位点的限制性内切酶酶切,通过连接反应形成环化DNA分子,以此作为模板进行PCR扩增得到已知序列的旁侧序列.琼脂糖凝胶电泳观察PCR扩增产物片段.结果 19例HCC标本中有14例检出整合型HBV DNA,2例同时存在游离型HBV DNA.结论 IPCR可以准确测定肝细胞中HBV DNA的整合.该方法为研究HBV DNA在肝细胞中的整合机制提供一简单、快速、经济途径.     

单个与多发胆固醇结石患者胆道细菌感染状况及与免疫球蛋白相关性的对照研究

目的 多发胆固醇结石患者胆囊炎症程度较高,可能与结石形成有关.对多发和单个胆固醇结石患者胆道细菌感染状况及与免疫球蛋白含量的相关性进行对照研究.方法 :用半定量PCR法测定分析38例胆囊结石患者胆石、胆汁和粘膜的细菌DNA阳性率和菌落数,并测定相应胆汁和粘膜IgA、IgG、IgM含量.结果 :单个和多发胆石组的胆汁细菌DNA阳性率分别为75.0%和73.7%,胆囊粘膜细菌DNA阳性率分别为66.7%和64.0%,结石核心的细菌DNA阳性率分别为57.1%和85.7%,结石外周细菌阳性率分别为71.4%和85.7%,两组间差异均无显著性.两组间胆汁和粘膜IgA、IgG、IgM含量差异无显著性,菌落数与免疫球蛋白含量不相关.多发胆石组粘膜细菌DNA阳性者的胆囊粘膜IgA、IgG含量高于阴性者(P<0.05).单个和多发胆石组胆汁胆固醇饱和指数(CSI)差异无显著性,各组内胆汁细菌阳性与阴性者的CSI差异也无显著性.结论 :多发和单个胆固醇结石患者胆囊细菌感染率相似,细菌感染不是多发胆固醇结石患者胆囊炎症严重的原因.多发胆固醇结石患者胆囊粘膜细菌与IgA、IgG含量增高有关,可能间接参与胆固醇结石的形成过程.     

应用聚合酶链反应探讨乙肝病毒感染与胆石症的关系

目的探讨乙肝病毒感染在胆石症发病中的作用。方法应用聚合酶链式反应技术（ＰＣＲ）,对３２例血清乙肝标志物阳性的胆石症患者和２０例乙肝标志物阳性的非胆石症患者的石蜡包埋胆囊标本进行ＨＢＶ－ＤＮＡ检测。结果３２例胆石症患者的胆囊标本ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性检出率为４０．６３％,２０例非胆石症患者的胆囊标本ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性检出率为１５％。结论提示乙肝病毒感染与胆石症发生有关。用ＰＣＲ技术检测石蜡包埋胆囊组织中的ＨＢＶ－ＤＮＡ是一种简便、可靠的方法。     

套式序列特异引物聚合酶链反应技术的建立及其在HLA配型中的应用

磁式序列特异引物聚合酶链反应方法，用于ＨＬＡ－ＤＲ基因分型。利用一对外引物扩增ＨＬＡ－ＤＲＢ１第２外显子部分片段，作为第２次扩增的模板，ＰＣＲ循环参数；     

胆固醇结石患者胆囊细菌感染的研究

目的 比较胆固醇类结石患者和非胆石症患者胆道细菌感染情况.方法 用不依赖细菌培养的半定量PCR和16SrRNA序列对照法,检测76例胆固醇类结石患者胆囊黏膜、胆汁和胆石中细菌DNA,与34例非胆石患者对照.结果 胆石组和非胆石组胆汁细菌DNA阳性率分别为77%和67%,胆囊黏膜细菌DNA阳性率分别为64%和69%,两组间差异均无统计学意义(P＞0.05).胆石组细菌种类主要为大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、不动杆菌、链球菌、鞘氨醇单胞菌、脆弱类杆菌和痤疮丙酸杆菌,胆石组菌种比非胆石组丰富,非胆石组菌种基本上均能在胆石组中找到.结论 胆固醇结石与非胆石症患者胆道细菌感染率相似,胆固醇结石中存在细菌不足以证明细菌参与胆固醇结石的形成.     

利用逆转录聚合酶链反应及DNA印迹杂交技术检测乳腺癌腋窝淋巴结微转移

目的　评价检测原发性乳腺癌腋窝淋巴结微转移的方法。方法　用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Southern杂交方法,检测腋窝淋巴结中CK-19基因表达。同时与免疫组织化学(组化)方法比较其检测敏感性。结果　RT-PCR、Southern杂交及免疫组化方法的检测敏感性分别为1∶5×10     

聚合酶链式反应对胆囊结石患者胆汁,粘膜,结石和门静脉血细 …

研究胆结石患者胆汁，粘膜，结石和门静脉血中细菌ＤＮＡ；探讨胆结石核心的发生与细菌感染关系。方法 采用聚合酶链式反应对７０全胆结石患者胆汁，粘膜，结石，门静脉血中肠杆菌，克雷伯氏杆菌，变形杆菌，伤寒杆菌，幽门螺杆菌ＤＮＡ进行同步研究。     

聚合酶链反应用于肝硬变门静脉高压症病原学研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检查发现：肝硬变门静脉高压症处于乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染状态的比率分别为８０．７％及３７．８％；处于ＨＢＶ、ＨＣＶ活跃复制状态的比率分别为３１．６％及２９．８％。ＨＢＶ、ＨＣＶ感染指标至少有一项阳性的比率为８６．７％。手术治疗组及内科治疗组病人的乙型肝炎血清标志及丙型肝炎感染状态比较均无显著性差异。ＨＣＶＲＮＡ及Ｈ     

用聚合酶链反应诊断男性淋菌性尿道炎

采用聚合酶反应（ＰＣＲ），对１５０例男性淋菌性尿道炎病人进行检测。与直接涂片检查的结果相比较，ＰＣＲ具有快速、特异和敏感的特点。     

突变体富集聚合酶链反应检测胰腺癌K-ras基因突变的研究

胰腺癌是一种恶性程度极高，早期难以诊断，预后极差的恶性肿瘤，临床确诊者大多属于晚期癌，5年生存率总体低于5％。我们采用突变体富集聚合酶链反应（PCR）检测胰腺癌细胞系K—ras基因点突变，以期为早期诊断胰腺癌提供一种简便、灵敏而有效的检验方法。     

肾穿刺活检石蜡组织切片DNA的提取和PCR扩增

目的建立从肾穿刺活检石蜡组织切片提取DNA并进行PCR扩增的方法。方法肾脏病理诊断为乙肝病毒相关性肾小球肾炎、原发性IgA肾病和膜性肾病各2例的肾活检组织蜡块，包埋时间1个月-5年。提取方法包括清洁切片、融蜡、消化及DNA的提取。紫外分光光度计测定DNA浓度。应用聚合酶链反应（PCR）扩增血管紧张素转换酶（ACE）和乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）基因片段。结果2张2Ixm厚石蜡切片获取的DNA总量为10-30μg。ACE基因的PCR扩增结果显示，6例标本均在490bp和（或）190bp处显示清晰条带。HBcAg的PCR扩增结果显示，2例乙肝病毒相关性肾小球肾炎标本在132bp处显示清晰条带，其余4例阴性。结论本方法可以从肾穿刺活检石蜡切片中获取足够高质量DNA并进行PCR扩增，方法简便，结果稳定，不受包埋时间长短的限制，为肾脏疾病的辅助诊断、肾活检组织的大宗遗传学分析提供了可能。     

应用聚合酶链反应检测生殖道溶脲脲原体的研究

采用培养法和聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了溶脲脲原体（Ｕｕ）标准菌株纯培养物、模拟临床生殖道Ｕｕ感染样本和５２例不育症病人的精液样本。结果培养法阳性的样本ＰＣＲ亦为阳性，并比培养法高出２～３个稀释度。若以培养法作为标准，ＰＣＲ的敏感性为１００％，特异性为８８％，准确性为９０％，提示ＰＣＲ是一种特异、灵敏和快速检测Ｕｕ感染的诊断方法。