一株适合红天麻伴栽的蜜环菌菌株筛选

为了筛选适宜红天麻伴栽的蜜环菌菌株,该研究通过对不同产区伴栽天麻的蜜环菌菌株的分离鉴定、蜜环菌菌株的生长特征比较及伴栽天麻实验,筛选出了1株适宜红天麻伴栽的高卢蜜环菌菌株。收集4个天麻产区伴栽天麻使用的菌材,分离菌材上的蜜环菌菌株(G、Y、S、H),采用形态学鉴定与系统发育树相结合的方法,对蜜环菌菌株进行鉴定,确定栽培天麻常用的蜜环菌菌株种类;基于课题组的前期研究对蜜环菌菌株蔗糖酶基因型进行鉴定,以确定蜜环菌菌株的基因型特征;通过对蜜环菌菌株菌索生长速度、直径、干重及多糖含量的测定确定蜜环菌菌株的生长特征;结合蜜环菌菌株的生物学特性和蔗糖酶基因型特征,选择了2株不同的菌株进行天麻伴栽实验,测定天麻产量、天麻素和对羟基苯甲醇含量,筛选出最适合红天麻伴栽的菌株。该研究发现4株蜜环菌菌株均为高卢蜜环菌Armillaria gallica;同一蔗糖酶基因型的菌株G、H菌索总长度、生长速度、直径、分支数、干重和多糖含量均高于同一蔗糖酶基因型的菌株S、Y;分别使用菌株H、S伴栽天麻,发现使用生长速度更快、分支数更多的菌株H伴栽天麻的产量为6.528 kg·m^-2、天麻素和对羟...     

不同来源蜜环菌对天麻产量影响的研究

目的：研究不同来源的11个蜜环菌菌株对天麻产量的影响。方法：有性繁殖,采用菌枝加新材的播种方法,一年半收获,结果：蜜环菌A9,A10伴栽的天麻产量最高,为16．14和15．23kg/m^2。结论：不同来源蜜环菌对天麻产量具有不同的作用。     

野生、退化、复壮蜜环菌对天麻产量及天麻素量的影响

目的 通过复壮已退化的蜜环菌,恢复其促进天麻生长及天麻素积累的作用.方法 将相同来源的蜜环菌Arrmillearia mellea野生菌种、该野生菌种连续无性繁殖退化的后代菌种以及退化后复壮的黹种接种到同一品种的天麻Gastrodia elata上进行栽培试验,测定大麻的生物产量和天麻素质量分数.结果 野生菌种组与退化菌种组相比较、复壮菌种组与退化菌种组相比较在天麻产量、天麻素质量分数上有显著性差异(P<0.01).结论 采用诱导子实体方法可以使退化的蜜环菌复壮,其促进天麻生长、天麻素积累的作用也得以恢复.     

高温胁迫对蜜环菌生长特性的影响

目的:探究高温胁迫对不同蜜环菌生长特性的影响,为筛选耐高温的优良蜜环菌菌株提供指导。方法:以14株不同天麻产区的蜜环菌为实验材料,观察各蜜环菌菌株的生长特性并进行表型分类;采用rDNA-IGS序列分析进行分子鉴定,进一步确定供试菌株的亲缘关系;以23℃条件为对照(CK),30℃为高温胁迫,记录各菌株生长速度,生物量,菌索长度等指标。结果:14株蜜环菌均与高卢蜜环菌Armillaria gallica相似性最高,亲缘关系最相近;但不同天麻产区的蜜环菌菌株生长特性存在明显差异,将14株蜜环菌分为Ⅳ个类群,其中生长状态:第Ⅰ类群第Ⅱ类群第Ⅲ类群第Ⅳ类群;高温胁迫后,各菌株对高温的耐受性也存在明显差异,表现在菌索平均生长速度GZ16SX1GZ1;相对菌索长度GZ16SX1GZ3;相对生物量GZ16SX4GZ1HB1AH2;生长状态GZ16SX1GZ1。结论:高温胁迫下,GZ16在生长速度,相对菌索长度,相对生物量及生长状态等均最优,SX1,GZ1菌株次之。表明菌株GZ16,SX1,GZ1耐高温能力较强,且这3个菌株在正常温度下生长特性也优良,适宜全国主要天麻产区生产。     

蜜环菌对天麻生长的影响(简报)

<正> 我所在1968年利用蜜环菌材伴栽天麻首次获得成功后,于1978和1979年进行了室内利用高山野生蜜环菌材伴栽天麻试验,获得了下种量的12.9倍和13.5倍的增产效果。但在1980和1981年我们又发现,采用经过10年低海拔(600米)人工培养的原高山野生蜜环菌菌材伴栽天麻,收获量却只有下种量的74%和10%。为了搞清造成这种现象的原因,我们在1982和1983年进行了此项研究,现将获得的初步结果报道如下:     

蜜环菌耐低温菌株的筛选及生理机制探讨

目的：探究低温胁迫对不同蜜环菌生长的影响,为高海拔地区天麻种植选育耐低温的优良蜜环菌菌株提供科学依据。方法：以不同天麻产区的24株蜜环菌为实验材料,采用rDNA-基因间隔区（IGS）序列进行分析鉴定,确定供试菌株的亲缘关系;以23℃为对照（CK）、15℃为低温胁迫,利用赋值法综合评价各菌株生长速率、生物量、菌索长度,筛选耐低温的优良菌株,采用蒽酮硫酸法检测可溶性糖含量,利用SPSS 26.0分析低温胁迫可溶性糖含量与生长特性的相关性。结果：24株蜜环菌均与高卢蜜环菌Armillaria gallica亲缘关系较相近。低温胁迫后,各菌株的生物量、菌索长度、生长速率均受到不同程度的抑制,根据赋值法综合评价,有4株菌株的耐低温能力较强、可溶性糖含量均增加,而对于低温较为敏感的菌株可溶性糖含量均降低。相关性分析结果表明,可溶性糖含量与生物量、菌索长度、生长速率呈强正相关。结论：高卢蜜环菌为天麻生产中常用伴生菌种,YN4、GZ7、GZ17、SX2菌株的耐低温能力较强,推测蜜环菌通过累积可溶性糖抵御低温胁迫。     

高卢蜜环菌PCR-RFLP快速鉴别方法研究

蜜环菌是名贵中药天麻、猪苓栽培过程中必备的共生菌,蜜环菌的菌索侵入天麻块茎或猪苓菌核后被后者消化利用,成为它们重要的营养源。不同性质的蜜环菌影响天麻、猪苓的生长。作者收集了13个地区的市售蜜环菌,经过IGS鉴定均为高卢蜜环菌。在基因水平和代谢水平上筛选出了蔗糖含量具有显著差异的2种高卢蜜环菌,命名为A型和B型,并建立了简单、准确的高卢蜜环菌DNA分子标记鉴定方法。通过比较高卢蜜环菌A型和B型蔗糖酶基因序列差异,根据差异片段设计聚合酶链反应-限制性内切酶酶切长度多态(PCR-RFLP)鉴别方法,即引物ZTM.F/ZTM.R可扩增高卢蜜环菌A型和B型,产生约304 bp长度条带,限制性内切酶EcoR V可以识别高卢蜜环菌A型和B型的差异序列,仅高卢蜜环菌B型可以被酶切形成2个片段,从而特异性鉴别高卢蜜环菌为B型。该实验建立的PCR-RFLP可以作为高卢蜜环菌A型和B型的DNA鉴别方法。在天麻和猪苓的栽培过程中,可根据品种、生长阶段、生态环境等不同需要,选择合适的菌株,因地制宜提升它们的产量和品质。     

栽培条件对无土袋栽天麻种麻质量的影响

目的：探讨栽培条件对无土袋栽天麻种麻质量的影响。方法：采用正交试验考察了无土培养基不同配方对袋栽天麻天麻素含量及产量的影响，观察了海拔、萌发菌种类等因素对天麻种麻质量的影响。结果：无土培养基最佳配方比为叶2：枝2：菌种1。树叶是影响天麻种麻质量的主要因素。结论：树叶是影响无土袋栽天麻种麻质量的主要因素，大白栓菌是一种优良的萌发菌。     

栽培条件对无土袋栽天麻种麻质量的影响

目的：探讨栽培条件对无土袋栽天麻种麻质量的影响。方法：采用正交试验考察了无土培养基不同配方对袋栽天麻天麻素含量及产量的影响，观察了海拔、萌发菌种类等因素对天麻种麻质量的影响。结果：无土培养基最佳配方比为叶2：枝2：菌种1。树叶是影响天麻种麻质量的主要因素。结论：树叶是影响无土袋栽天麻种麻质量的主要因素，大白栓菌是一种优良的萌发菌。     

菌材物种调查及其与天麻产量和质量相关性分析

目的:作为蜜环菌和天麻能量获得的来源,菌材物种基原多样并在天麻产业发展中发挥着重大作用。为了探讨不同基原菌材物种对天麻质量的影响,该文通过文献和实践生产基地调查,系统分析了天麻生产用菌材的基原、木质纤维素含量以及单位面积天麻产量和质量。方法:对贵州、云南、湖北和陕西4个主要产区天麻及其菌材进行收集,并通过DNA特征片段鉴定菌材物种基原;分别利用高效液相色谱法和灼烧法对菌材木质纤维素含量进行测量;采用苯酚-硫酸法对各产区天麻的多糖含量进行测定;比较使用不同基原菌材所产单位面积天麻质量和多糖含量,并分析其与栽培菌材状况之间的关系。结果:栽培天麻使用的菌材物种基原多样,且桦木科树种利用最为广泛。各基原菌材的木质纤维素组成比例存在差异,其中蓝果树科纤维素含量最高、桑科半纤维素含量最高、蔷薇科木质素含量最高。菌材基原不同对天麻产量和多糖含量具有一定影响,产量最高可达1 285.51 g,最低仅379.30 g;多糖平均质量分数为241.1 mg·g-1,变化幅度为87.95～411.2 mg·g-1。天麻产量和多糖含量与菌材纤维素含量具有极强的正相关性、与木质素含量具有强负相关性。结论:栽培天麻使用菌材基原不同将影响天麻的产量和质量,选择合适的基原将有利于蜜环菌营养物质的吸收、提高天麻的产量,上述结果将为天麻栽培过程中菌材物种的选择提供依据。     

不同等级昭通乌天麻与其他产地天麻的天麻素含量测定及比较

目的:测定不同等级、不同产地天麻中天麻素的含量。方法:采用HPLC测定天麻中天麻素含量。Inert Sustain C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%磷酸(3∶97);流速:1.0 m L·min-1;检测波长:220 nm;柱温为室温。结果:不同等级的乌天麻中,天麻等级越高天麻素含量越高。一等乌天麻中天麻素含量为0.82%,而四等乌天麻含量仅为0.32%。而不同产地同一等级的红天麻中天麻素含量差异较大。其中,安徽大别山天麻中天麻素含量最高,为0.94%;湖北宜昌、陕西洋县两个产地天麻中天麻素含量分别为0.66%、0.60%,云南丽江和大姚天麻中天麻素含量较低,仅为0.45%和0.44%。结论:不同的等级和不同的产地对天麻中天麻素的含量均有影响。     

天麻无棒代料高产栽培技术

天麻(Gastrodia elata)传统栽培方法是利用蜜环菌(Armillaria mellea)菌索和木材培养菌材,进行菌材伴栽。这不仅消耗大量木材,而且,由于菌材培养和天麻栽培过程中发菌缓慢、易遭杂菌污染,缩短了天麻生长时对土壤温度有效期(10cm土温15～25℃)的利用和水热条件的有效控制。特别是低海拔地区     

杨树菌材栽培天麻的质量研究

目的:对杨树菌材与传统菌材栽培天麻的质量进行比较与评价。方法:通过测定天麻的含水量、天麻素含量、多糖含量,分析与比较杨树菌材与传统菌材栽培天麻的质量。结果:杨树菌材与传统栎树、栗树菌材栽培天麻的含水量与天麻素含量没有显著差异;杨树菌材栽培的天麻多糖含量显著高于传统栎树、栗树菌材,分别为:38.00g/100 g、27.67g/100 g、25.43 g/100 g。结论:杨树菌材栽培天麻的质量符合中国药典的要求,与传统菌材栽培的天麻质量相当,并有天麻多糖含量高的优势。     

HPLC法对不同产地天麻药材的质量分析

目的 :对天麻样品中的天麻素进行含量测定,为制定天麻药材质量标准提供依据。 方法 :采用高效液相色谱法对不同产地天麻样品中的天麻素进行含量测定。 结果 :不同产地天麻中天麻素成分的含量有较大差别。 结论 :天麻药材质量与产地、采收时间密切有关,种内变种、野生或栽培也是影响天麻质量的因素。     

天麻第二营养应用研究——Ⅰ.第二营养与天麻的产量

研究表明,窖栽天麻分别施用N、P、K、B、Zn等对产量的影响是不稳定的。用无土盆栽法观察天麻生长及施肥效果,证实天麻只有在与蜜环菌结合良好的基础上,施肥才可能增产。     

天麻不同变异类型药材中天麻素含量比较

目的比较四种天麻不同变异类型药材中天麻素的含量。方法高效液相色谱法。结果四种天麻不同变异类型中天麻素的平均含量分别为:乌天麻1.440%,绿天麻1.697%,黄天麻0.904%,红天麻1.519%。结论以乌天麻和绿天麻作为重点保护和种植品种。     

天麻蜜环菌质量标准的建立

目的 建立天麻蜜环菌的质量标准。方法 采用薄层色谱法（TLC）建立天麻蜜环菌鉴别方法,按照《中华人民共和国药典》2020年版（四部）通则2331测定天麻蜜环菌中二氧化硫的残留量,并建立天麻蜜环菌中染料木素、麦角甾醇高效液相色谱法（HPLC）测定方法。结果 建立的TLC色谱图中,天麻蜜环菌样品与天麻蜜环菌对照药材在相同位置上显示相同颜色的斑点。3批天麻蜜环菌样品中二氧化硫残留量为9.477 ~15.905 mg·kg^–1,均低于《日本药局方》第17版与《美国药典》43版要求。建立的天麻蜜环菌HPLC测定方法,染料木素、麦角甾醇线性关系良好（r分别为0.999 5、0.999 8）,平均加样回收率分别为102.90%、101.29%,RSD均小于2%。结论 建立的天麻蜜环菌测定法具有方法简单、稳定性好、专属性强的优点,能够用于天麻蜜环菌质量评价。     

天麻的化学和药理研究概况

天麻又名赤箭、定风草、独摇芝,为兰科天麻属植物天麻Gastrodia elata Blume的根茎。有平肝熄风,通络止痛之功能,主要用于治疗头晕目眩、肢体麻木、惊风、癫痫、高血压、耳源性眩晕症等。天麻主产于云南、四川、陕西及贵州等地,是我国名贵中药材,市场上供应的天麻有野生品和栽培品,冬麻和春麻之别。传统经验以采收季节来评价天麻质量,认为冬麻质坚体重优于春麻。现多以天麻素的含量来评价天麻的质量。天麻需与蜜环菌(Armillaria mellea)共生,使其在生长过程中与蜜     

一种大豆秸秆蜜环菌培养基及其生产条件的优化

目的 为了解决天麻栽培中对木材的大量使用造成的森林资源破坏及栽培成本增加问题,该研究对农作物余料替代木材（或木屑）培养蜜环菌的可行性进行了探讨,以期降低天麻的栽培成本,同时使农作物余料得到有效利用,进而保护林木资源。方法 观察蜜环菌的生长情况,划线法测量蜜环菌生长速度;苯酚浓硫酸法测定不同培养基中蜜环菌的总多糖含量;为了进一步优化大豆秸秆培养基配比,对主料配比、蔗糖含量、无机盐含量及含水量进行四因素三水平L₉（3⁴）正交优化试验。结果 通过比较不同培养基培养中蜜环菌的生长情况,发现大豆秸秆培养基培养的蜜环菌从接种第4天就开始生长,菌丝长势好,生长速度为0.352 cm·d^-1,是桦木屑培养基生长速度0.283 cm·d^-1的1.48倍;大豆秸秆培养基培养的蜜环菌总多糖含量最高,为39.260 mg·g^-1,远远高于桦木屑培养的蜜环菌总多糖含量17.028 mg·g^-1,大豆秸秆培养基优势明显;主料（大豆秸秆与麦麸）配比为8∶2,蔗糖含量为主料的1%,无机盐含量为主料含量的0.5%,含水量50%时,蜜环菌生长速度稳定为0.392 cm·d^-1。结论 该研究结果为天麻栽培中使用大豆秸秆培养基替代木材（或木屑）培养基培养的蜜环菌提供了依据,为天麻在栽培中减少林木资源浪费、保护自然环境提供了参考。     

蜜环菌代天麻的研究概况

天麻系兰科植物,本身无根无叶,不具植物营养器官,必须借助蜜环菌提供养料才能生长发育。蜜环菌是白蘑料的一种食用真菌。在自然环境中常常伸展到天麻块茎上,侵入块茎表层细胞内,并不断分泌其内含物,成为天麻的营养物质来源,进而促进天麻生长开花结果。离开了蜜环菌,天麻的种子将不发芽,块茎也将萎缩退化。根据天麻、蜜环菌的这种共生关系,中国医学科学院药物研究所开展了培养利用蜜环菌以代替天麻的研究。采用发酵法生产蜜环菌,液体发酵和固体发酵均获得成功。药理实验证明在所用剂量下天麻与蜜环菌发酵物具有同样的生物活性,临床试验证明二者