猕猴艾滋病模型EKM基因治疗效果观察

目的明确体外导入EKM基因的实验猕猴感染SHIV-KB9后,病毒复制和免疫反应情况,为基因治疗AIDS提供实验依据。方法用血清学方法筛选出无SIV、STLV、SRV／D和B病毒感染的猕猴7只,实验当天回输自体储备血75ml,同时采集猴外周血75m1进行CD4＋T细胞分离培养,并导入EKM基因,培养结束后收获细胞,静脉回输猴体后再进行SHIV-KB9感染。采用流式细胞术、血常规检测、病毒栽量检测和基因拷贝数检测的方法确定导入基因后的实验猕猴感染sHIV．KB9后体内病毒复制和免疫损伤情况。结果导入基因和回输细胞的实验猕猴其血浆病毒载量峰值都与已报道的推迟14d出现,比模型对照组推迟11d出现,血浆病毒载量峰值均比模型对照组峰值低。流式细胞术结果表明其CD4＋T细胞计数也稳定在一定水平,CD4／CD8比值未出现明显倒置。实验组猕猴在试验结束时均未发展为猴AIDS。结论自体回输导入EKM基因的CD4＋T细胞的猕猴AIDS模型其血浆病毒载量峰值与模型对照组峰值比较有迟后作用,且低于模型对照组峰值,与回输细胞的实验对照组没有明显区别,其更确定的效果还有待进一步的研究。     

猕猴早期内毒素血症肾脏内选择素的变化

目的 :研究选择素在猕猴早期内毒素血症肾脏内变化。方法 :将 11只猕猴随机分成 2组 :对照组 5只 ,静脉注射生理盐水 ;内毒素组 6只 ,静脉注射脂多糖 ,剂量为 2 .8mg·kg- 1 。内毒素攻击后 12 0min ,处死动物 ,光镜观察肾脏标本及行选择素免疫组织化学 (免疫组化 )检测。结果 :组织学显示 ,肾髓质、皮质结构完整 ,肾小球结构完好。免疫组化显示 ,内毒素组动物中 ,P 选择素在肾小球血管内和肾小管周围均有表达 ,有血细胞沉积 ;在肾小球的血管内见血细胞聚集附着管壁 ,L 选择素呈丝网状分布于血细胞之间。对照组无明显病变。结论 :在内毒素休克早期肾脏内发生损伤 ,选择素介导的血管损伤发挥了重要的作用。     

内毒素性休克早期猕猴肾脏超微结构的改变及酶细胞化学观察

目的：探讨内毒素休克早期猕猴肾脏的损伤.方法：11只猕猴随机分成2组：对照组5只,静脉注射生理盐水;内毒素组6只,静脉注射LPS,剂量为2.8 mg/kg.内毒素攻击后120 min,处死动物,取肾脏标本采用光镜、电镜铅离子捕获法做超微结构碱性磷酸酶（ALPase）及酸性磷酸酶（ACPase）细胞化学检查.结果：组织学观察显示肾髓质、皮质结构完整,肾小球结构完好;透射电镜可见模型组肾小球血管内皮和足突细胞损伤、血液成分渗出;肾小管上皮细胞损伤.肾实质细胞内溶酶体破坏;电镜酶细胞化学可见：模型组酸性磷酸酶活性增强,溶酶体颗粒增多.肾小管上皮细胞碱性磷酸酶活性急剧增强,在细胞器内弥散分布.对照组无明显病变.结论：在猕猴内毒素性休克早期,溶酶体增多和损伤引起了肾小球和肾小管损伤.在此同时,肾脏实质细胞内中和内毒素的作用也增强.     

急性多发性微小血栓所致犬肺栓塞时对细胞因子的影响

目前 ,肺栓塞在我国已发展为一种常见、多发的心肺血管疾病。但对本病的早期诊断及其发病机理如何 ,还缺乏广泛深入的研究。肺动脉微小血栓栓塞是肺血栓栓塞症的一种特殊病理类型 ,本项研究采用自体血栓回输法 ,试图通过动物实验 ,探讨急性多发性微小血栓所致犬肺栓塞时病理及病理生理变化情况 ,现将研究结果报告如下。一、材料与方法1 材料 :(1)动物分组 :健康成年杂种犬 13只 ,体重16～ 18ｋｇ ,雌雄不拘。随机分为 2组 ,栓塞组 7只 ,对照组 6只。 (2 )肺栓塞动物模型制备 :先经犬右前肢静脉穿刺 ,采血 10ｍｌ用于制备自体血栓 ,并留置 2 …     

术中自体血回输在脊柱手术中的应用

目的 观察在脊柱前路手术中应用自体-2000型血液回收机减少输库存血量和输血并发症的可能性.方法 用国产自体-2000型血液回收机对70例接受脊柱前路手术的患者进行术中自体血回输,并检测患者术前和术后的血常规和生化指标.结果 70例患者术中自体血回输量平均为620.50ml,术后患者的血常规和生化指标与对照组比较差异无统计学意义.结论 术中自体血回输能有效减少脊柱前路术中血液的丢失,减少库存血的使用.     

重组人白介素-11对猕猴的长期毒性实验

目的：观察重组人白介素-11（rhIL-11)对猕猴的长期毒性。方法：18只猕猴分别按体质量随机分为4组，高剂量组6只，余均为4只。低、中、高剂量分别为0.1、0.3和1.0mg/kg.每天sc给药1次,连续90d.停药观察30d.观察症状和检测项目有:一般状况、心电图、血液学及生化指标、尿液、免疫、骨髓、脏器质量、组织学检查。结果：所有给药组猴猴食量明显减少。体质量有所减轻，并有短暂性发热，低剂量组有1只猕猴肢全活动受限，震颤，高剂量组1只猕猴出现呕吐，1只死亡，给药组RBC、Hb、Hct、MCV、MCH和MCHC均明显降低，Plat则明显增高。ALT、SAT、LDH活性明显下降，TP和Alb含量明显下降，ALP活性明显升高，给药90d各给药组猕猴均出现抗IL-11抗体，免疫复合物也明显增高。高、中剂量组骨髓有核细胞增生明显活跃。给药组心、肝的绝对质量有增大的趋势，相对质量明显增大，给药90d时，给药组猕猴肝、肾出现明显的细胞变性，中、高剂量组重于低剂量组，停药后30d上述变化的均趋向恢复。结论：rhIL-11对猕猴的毒性靶器官及系统有：血液系统、肝脏、肾脏、肾脏、免疫系统、骨髓。其毒性损害均为可逆性。rhIL-11对猕猴的3个月长期毒性安全剂量为每次0.1mg/kg。     

洗涤式自体血回输安全性的实验研究

目的研究洗涤式自体血回输在休克动物中的应用价值。方法以犬股动脉放血制作失血性休克模型,实验组采用京精ZT-2000型血液回输机进行自体血回输治疗。对照组休克犬进行林格氏液输注,观察实验前后动物各项生理指标、红细胞的各项指数以及血小板数量。结果与对照组相比,实验组的动物血液中红细胞各项指数保持良好,无一例回输血过程中出现寒战、发热、溶血等不良反应,全部动物存活,两组比较差异显著。洗涤后的血液中血小板数量明显下降。结论洗涤式自体血回输对连续失血性休克的救治作用肯定,能明显提高实验动物的存活率及存活时间,可有效节约血源,特别是在经济落后以及爱滋病、传染病高发地区更有实际意义。     

猕猴血清蛋白和乳酸脱氢酶同工酶的电泳分析

随着科学技术的发展,在生物医学的研究中越来越广泛地使用猕猴(Macaca mulatta)作为实验动物,因此对正常猕猴的各项生理生化指标的测定十分必要。有关猕猴的血像国内已有一些报道,而猕猴乳酸脱氢酶同工酶谱的报道不多,本文主要报道正常猕猴血清蛋白的电泳结果和乳酸脱氢酶(LDH)同工酶谱。材料和方法 1.动物上海实验动物研究中心动物室的健康成年猕猴20只,雌雄各半,体重为4～7kg,产地为江西省官山自然保护区。 2.采血同日上午8～9点对20只猕猴     

血细胞分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞方法探讨

目的 使用COBE Spectra血液成分分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞(PBMCs),继而可从中分离得到外周血造血干细胞(PBSC),为进一步利用猕猴开展免疫学研究、基因治疗提供足够的目的 细胞,探讨采集的关键技术,建立安全、有效的采集方法.方法 体重为4-5奴的实验猕猴5只,采集前一个月内分3次进行自体或异体血液于4℃储备共120 mL,用于采集时填充管路.5只猴采集前接受rhGM-CSF 20μg/ks皮下注射动员4～5 d,麻醉动物后行股动脉穿刺,选择自动外周血干细胞收集程序(Auto-PBSC)进行采集.采集结束后管路中血液以10 mL/min回输给动物3～5 min.结果 生长因子连续注射第4天外周血白细胞数增至最高,收获细胞数量随循环血量和采集次数增加而增多.经动员的所有猴能够采集到需要的PBMC,最多达9.9×108,采集次数1～3次,循环血量达750～1420 mL,实验结束后1只猕猴因心脏衰竭死亡.结论 人用血细胞分离机可用于4～5 kg实验猕猴PBMC的大量采集.由于动物不同于人体,为保证采集成功需要选用适合于猕猴的程序,采集前做好储血和生长因子动员准备,稳定的麻醉保定,提高抗凝剂比例,积极处理并发症是关键.     

自体心包作为主动脉瓣替代材料的可行性研究

目的 探讨自体心包组织作为主动脉瓣膜替代材料的可行性及可靠性,为临床实验提供基础.方法 静脉全麻、腹主动脉阻断下行心包瓣膜材料腹主动脉内移植.进行预试验,筛选实验动物.然后监测实验中动物基本生命、生理指标;采用血管超声和 CTA方法评价其血流动力学指标;通过观察动物存活情况,判断是否有栓塞事件等,以评价其生物相容性.结果 猪是理想的实验动物,手术死亡率6.25%.实验动物无栓塞事件发生,肉眼观察可见心包瓣内有血栓形成.结论 腹主动脉阻断下心包瓣膜移植,手术安全易行,心包瓣膜模型较为可靠.建议术后应常规抗凝.