HIF-1α mRNA在寻常型银屑病及脂溢角化病皮损表皮中的表达及意义

[目的]研究低氧诱导因子-1α（HIF-1α） mRNA在寻常型银屑病及脂溢性角化病皮损表皮中的表达,探讨其在银屑病及脂溢性角化病中的作用机制.[方法]应用原位杂交法检测HIF-1α mRNA在寻常型银屑病、脂溢性角化病及正常皮肤组织各25例皮损表皮中的表达和分布.[结果]在25例寻常型银屑病皮损表皮的中下层可见HIF-1α mRNA阳性表达,在25例脂溢性角化病皮损表皮的全层可见HIF-1α mRNA阳性表达,在正常皮肤的表皮未见HIF-1α mRNA的表达;银屑病、脂溢性角化病皮损表皮中HIF-1α mRNA的表达阳性率均为100%（25/25）,均显著高于正常对照组,其差异有统计学意义（P〈0.01）.[结论]HIF-1α mRNA在寻常型银屑病及脂溢性角化病皮损的表皮中表达均增高.     

脂溢性角化病108例临床、病理及误诊分析

目的探讨脂溢性角化病的临床、病理特征及误诊原因、防范措施。方法对经皮肤活组织病理检查证实为脂溢性角化病108例的临床资料进行回顾性分析。结果本组108例,曾误诊43例,误诊率为39.81%。根据临床表现明确诊断为脂溢性角化病46例,脂溢性角化病待排除19例,误诊43例。误诊为痣(黑色素细胞痣和皮内痣各8例)16例(37.21%),疣(寻常疣12例、病毒疣3例)15例(34.88%),皮肤肿物4例(9.30%),皮脂腺囊肿和基底细胞癌各2例(各占4.65%),皮脂腺痣、化脓性肉芽肿、纤维瘤和皮肤溃疡各1例(各占2.33%)。108例均经皮肤活组织病理检查确诊脂溢性角化病,皆予以手术切除,术后创面愈合良好。对误诊情况分析发现,50岁和≥50岁者、皮损分布于暴露部位与非暴露部位者误诊情况比较差异无统计学意义(P0.05);而病理分型乳头瘤型、棘层增厚型和激惹型3型误诊情况比较差异有统计学意义(P0.05)。结论脂溢性角化病临床及病理表现多样,易误诊。临床医师有必要提高对该病认识,临床接诊类似本文患者时要仔细辨别皮损,及时采取相关检查手段,必要时行皮肤活组织病理检查,以早期明确诊断。     

脂溢性角化病误诊原因分析及防范措施

正1误诊原因分析1.1缺乏对该病认识脂溢性角化病误诊原因主要是缺乏对该病认识,加之其临床和病理组织学表现分为多种类型,疾病本身缺乏特异性症状和体征,易导致误诊。脂溢性角化病误诊为各类疾病的主要原因:(1)误诊为色素痣:多数脂溢性角化病皮损均有色素异常,病程越长,色素越深,易误诊为色素痣,可能是因皮损中肿瘤坏死因子、内皮素转换酶mRNA和蛋白质表达水平高于正常,从而致内皮素-1增加,内皮素-1是角质形成细胞分泌的具有刺激黑素细胞增殖和产生黑色素能力的因子,可使脂溢性角化皮损颜色加深,导致脂溢性角化病与色素痣表现极为相似而误诊。(2)误诊为其他良性皮肤病:各型脂溢性角化病在色素增加不明显时,     

人脑胶质瘤组织中P21WAF/CIP1的异常表达及其病理学意义

目的探讨人脑胶质瘤组织P21WAF/CIP1的表达水平与胶质瘤恶性度的关系。方法免疫组化方法检测人脑胶质瘤标本41例,并对其表达水平进行评价。结果P21WAF/CIP1表达水平随胶质瘤恶性程度的升高呈下降趋势,但与组织学分级无相关性,全部受检标本P21WAF/CIP1染色强度无差异。结论胶质瘤组织P21WAF/CIP1表达呈异质性,与胶质瘤分级无相关性,但可参与胶质瘤的发生、发展。     

喉癌患者的p21WAF1/CIP1和p53表达情况及其临床病理价值研究

目的探讨喉癌患者的p21WAF1/CIP1和p53表达情况并对其临床病理价值进行研究。方法采用回顾性研究方法,选取2015年1月至2017年1月接收治疗的100例喉癌患者作为研究组,另外选取100例未患有喉癌的急性喉炎患者作为对照组。使用免疫组织化学方法(即S-P法)检测两组患者p21WAF1/CIP1和p53的表达情况,观察研究组p21WAF1/CIP1、p53表达同临床病理参数之间的关系,以及p53蛋白的表达与p21WAF1/CIP1表达的相关性。结果随着分化程度的增加,p21WAF1/CIP1的阳性表达率逐渐增加,高分化患者的阳性表达率明显高于低分化患者(P0.05);患者p21WAF1/CIP1、p53的阳性表达率与性别、临床分型、T分期以及临床分期之间的差异无显著性(P0.05);p21WAF1/CIP1在对照组及研究组中的阳性表达率分别为94.0%、64.0%,对照组明显高于研究组,p53在对照组中的阳性表达率为0,研究组为62.0%,研究组明显高于对照组,两组差异有显著性(P0.05);p53蛋白的表达同p21WAF1/CIP1表达不存在相关性。结论 p21WAF1/CIP1蛋白受到抑制、p53基因表达均与喉癌的发生存在密切的关系,但p21WAF1/CIP1的表达同p53基因的表达之间不存在相关性,明确二者在喉癌患者体内的表达对于临床诊治有重要意义。     

高功率微波对兔眼晶状体上皮细胞P21WAFl及Cyclin E表达的影响

目的 观察高功率微波(high power microwave,HPM)对实验动物兔眼晶状体上皮细胞P^21WAF1、Cyclin E表达水平的影响,以探讨防护HPM眼损伤的机理及方法。方法 采用功率密度为800mW／cm^2的微波持续照射青紫兰兔眼组织20min,并于微波照射后30d,90d,180d及360d时应用免疫组化、原位杂交及图像分析技术对兔眼晶状体上皮细胞P^21WAF1、Cyclin E蛋白及其mRNA表达水平进行检测。结果 HPM照射可影响晶状体上皮细胞的正常增殖过程;当HPM照射后30d时,P^21WAF1表达明显升高,对细胞增殖周期抑制作用增强;Cyclin E表达则明显降低,其正性调节细胞生长作用减弱;当HPM照射后90,180及360d时,微波照射组上述各指标与对照组比较,差异均无显著性意义,而且各项指标的mRNA表达均与其蛋白表达同步且一致。结论 HPM照射可干扰细胞正常的牛长增殖周期进程,而晶状体上皮细胞增殖异常可能是导致白内障的重要原因之一。     

苯丁酸钠通过上调p21 WAF1/CIP1基因抑制白血病细胞系的细胞周期

目的研究组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂苯丁酸钠(PB)对白血病细胞系细胞周期的影响,探讨其分子机制.方法PB处理白血病细胞系Kasumi-1、U937和NB4细胞,分别于处理后24,48和72 h收集细胞.碘化丙锭DNA染色,流式细胞术分析细胞周期的变化.半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析细胞周期相关基因p21WAF1/CIP1表达的变化.在人肾上皮细胞系293T细胞用荧光素酶报告基因分析PB对p21WAF1/CIP1基因启动子活性的影响.结果PB可以抑制Kasumi-1、U937和NB4细胞的细胞周期,作用呈时间和剂量依赖关系.3 mmol/L PB作用72 h,分别使Kasumi-1、U937和NB4细胞的G0/G1期细胞比例增加42.03%、44.36%和26.82%,S期细胞比例减少31.86%、38.91%和26.77%.PB使Kasumi-1、U937和NB4细胞p21WAF1/CIP1表达增高.PB处理后,p21WAF1/CIP1的表达水平较处理前增高(2.06±0.27),(2.78±0.40)和(1.78±0.20)倍.PB可以上调p21WAF1/CIP1启动子的转录活性,且呈剂量依赖关系.3 mmol/L PB处理48 h使转录活性增高(5.74±0.93)倍.PB上调p21WAF1/CIP1启动子转录活性主要是依赖于转录起始位点上游101 bp的序列.结论PB可以抑制白血病细胞系的细胞周期,这种作用可能是通过上调细胞周期相关基因p21WAF1/CIP1的表达实现的.     

脂溢性角化病

正脂溢性角化病是因角质形成细胞成熟迟缓所致的一种良性表皮内肿瘤,部分病例诊断困难,易误诊。1病因和发病机制脂溢性角化病病因现尚不清楚,可能与日光暴晒、年龄及人乳头瘤病毒感染等因素有关。日光对脂溢性角化病形成有影响,且脂溢性角化病与年龄相关,年龄越大,光老化对皮肤累积作用越大。脂溢性角化病发病机制可能与细胞周期调控因子及其他相关因子表达异常和细胞染色体异常所致的角质形成细胞增殖加快、凋亡     

AML1-ETO对p21 WAF1/CIP1启动子转录活性作用的研究

目的观察AML1-ETO融合基因对p21WAF1／CIP1基因启动子转录活性的影响，探讨AML1-ETO促进白血病发生的机制。方法构建p21WAF1／CIP1基因启动子的报告质粒，与AML1-ETO、AML1b和AML1a的表达质粒共转染非洲绿猴肾细胞系CV—1细胞，测定荧光素酶的活性，分析AML1-ETO、AML1b和AML1a对p21WAF1／CIP1基因启动子转录活性的影响。结果在CV—1细胞中，AML1-ETO对p21WAF1／CIP1基因启动子的转录具有明显的抑制作用，在pCMV5-AML1-ETO的剂量为1000ng时，p21WAF1／CIP1启动子的转录活性下降为对照组的（19±4）％，这种作用具有序列特异性和剂量依赖性；AML1b和AML1a对p21WAF1／CIP1基因启动子转录活性的抑制作用不明显，在剂量为1000ng时，p21WAF1／CIP1启动子的转录活性分别下降为对照组的（61±16）％和（594-16）％。结论AML1在与ETO形成融合基因后，其产物由于ETO蛋白能够更有效地募集转录共抑制复合物，其转录抑制活性要比AML1a和AML1b更强；外源的AML1-ETO对p21WAF1／CIP1的作用可能也与细胞系有关。     

丙戊酸钠对Kasumi-1细胞细胞周期的阻滞作用及其机制探讨

目的 研究组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂丙戊酸钠(VPA)对白血病细胞系Kasnmi-1细胞周期的影响并探讨其分子机制.方法 不同浓度VPA处理Kasumi-1细胞不同时间,碘化丙锭染色流式细胞术分析细胞周期的变化.RT-PCR及Western blot方法 分析细胞周期蛋白D1(cyclin D1)及周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21 WAF1/CIP mRNA或蛋白水平变化.结果 ①VPA抑制Kasumi-1细胞的细胞周期,使其阻滞于G0/G1期.3 mmol/L VPA处理3 d,G0/G1期细胞由(50.7±2.8)%上升至(80.7±1.7)%.②以3 mmol/LVPA处理Kasumi-1细胞不同时间,与对照组比较,3 mmol/L VPA组cyclin D1 mRNA表达水平下调;以不同浓度VPA处理Kasumi-1细胞3 d,结果 发现随着VPA药物浓度增加cyclin D1 mRNA表达水平降低,呈现剂量依赖性.③VPA诱导p21WAF1/CIP mRNA表达明显增加,呈现时间及剂量依赖性.不同浓度VPA处理细胞3 d时,随着用药浓度的增加,p21WF1/CIP蛋白相对表达水平增加,3 mmol/L VPA处理细胞2 d与0 d比较,p21 WAF1/CIP蛋白相对表达水平明显增加(2.498±0.240对0).结论 VPA可以通过对cyclin D1及周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21WAF1/CIP调节使Kasumi-1细胞周期阻滞于G0/G1期.     

Posttranscriptional stabilization underlies p53-independent induction of p21WAF1/CIP1/SDI1 in differentiating human leukemic cells.

p21WAF/CIP1/SDI1 is a recently identified gene expressed in cells harboring wild-type but not mutant p53 gene. It encodes a nuclear protein of 21 kD which inhibits cyclin-dependent kinase activity. Constitutive p21WAF1/CIP1/SDI1 mRNA expression was detected in neoplastic cells from patients with various hematological malignancies as well as in normal bone marrow mononuclear cells and in myeloid and lymphoid cell lines independent of their p53 status. Induced differentiation of the p53-deficient promyelocytic HL-60 cells along the monocytic lineage by phorbol ester or 1a,25 dihydroxyvitamin D3 resulted in a marked increase of both p21WAF1/CIP1/SDI1 mRNA and protein expression due to enhanced mRNA stability. Differentiation towards the granulocytic lineage by all-trans retinoic acid or dimethylsulfoxide failed to produce this effect. p21WAF1/CIP1/SDI1 is an immediate early gene since its upregulation occurred independently of de novo protein synthesis. The induction of p21WAF1/CIP1/SDI1 expression and its regulation in p53-deficient differentiating leukemic cells support the idea of an additional, p53-independent role of p21WAF1/CIP1/SDI1 in human hematopoiesis.     

高功率微波对兔眼晶状体上皮细胞P21WAF1及Cyclin E表达的影响

目的　观察高功率微波 (highpowermicrowave ,HPM)对实验动物兔眼晶状体上皮细胞P2 1WAF1 、CyclinE表达水平的影响 ,以探讨防护HPM眼损伤的机理及方法。方法　采用功率密度为 80 0mW cm2 的微波持续照射青紫兰兔眼组织 2 0min ,并于微波照射后 3 0d ,90d ,180d及 3 60d时应用免疫组化、原位杂交及图像分析技术对兔眼晶状体上皮细胞P2 1WAF1 、CyclinE蛋白及其mRNA表达水平进行检测。结果　HPM照射可影响晶状体上皮细胞的正常增殖过程 ;当HPM照射后 3 0d时 ,P2 1WAF1 表达明显升高 ,对细胞增殖周期抑制作用增强 ;CyclinE表达则明显降低 ,其正性调节细胞生长作用减弱 ;当HPM照射后 90 ,180及 3 60d时 ,微波照射组上述各指标与对照组比较 ,差异均无显著性意义 ,而且各项指标的mRNA表达均与其蛋白表达同步且一致。结论　HPM照射可干扰细胞正常的生长增殖周期进程 ,而晶状体上皮细胞增殖异常可能是导致白内障的重要原因之一。     

p53 suppression of arsenite-induced mitotic catastrophe is mediated by p21CIP1/WAF1

Arsenic trioxide, an acute promyelocytic leukemia chemotherapeutic, may be an efficacious treatment for other cancers. Understanding the mechanism as well as genetic and molecular characteristics associated with sensitivity to arsenite-induced cell death is key to providing effective chemotherapeutic usage of arsenite. Arsenite sensitivity correlates with deficient p53 pathways in multiple cell lines. The role of p53 in preventing arsenite-induced mitotic arrest-associated apoptosis (MAAA), a form of mitotic catastrophe, was examined in TR9-7 cells, a model cell line with p53 exogenously regulated in a tetracycline-off expression system. Arsenite activated G1 and G2 cell cycle checkpoints independently of p53, but mitotic catastrophe occurred preferentially in p53- cells. Cyclin B/CDC2(CDK1) stabilization and caspase-3 activation persisted in arsenite-treated p53- cells consistent with MAAA/mitotic catastrophe. N-Benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethyl ketone, a pan-caspase inhibitor, completely abolished arsenite-induced MAAA/mitotic catastrophe and greatly increased the mitotic index. WEE1 and p21CIP1/WAF1 inhibit cyclin B/CDC2 by CDC2 tyrosine-15 phosphorylation and direct binding, respectively. CDC2-Y15-P was transiently elevated in arsenite-treated p53+ cells but persisted in p53- cells. Arsenite induced p53-S15-P and p21CIP1/WAF1 only in p53+ cells. P21CIP1/WAF1-siRNA-treated p53+ cells were similar to p53- cells in mitotic index and cell cycle protein levels. p53-inducible proteins GADD45alpha and 14-3-3sigma are capable of inhibiting cyclin B/CDC2 but did not play a p53-dependent role in mitotic escape in TR9-7 cells. The data indicate that p53 mediates cyclin B/CDC2 inactivation and mitotic release directly via p21CIP1/WAF1 induction.     

MTDH、Ets-1及p21WAF1蛋白在咽喉癌组织中的表达及临床意义

目的分析异黏蛋白(MTDH)、转录调节因子-1(Ets-1)及细胞周期调控蛋白(p21WAF1)在咽喉癌组织中的表达及临床意义。方法收集66例咽喉癌患者的临床资料,手术留取咽喉癌细胞癌组织66例(研究组)及42例癌旁黏膜组织(对照组)。比较两组MTDH、Ets-1及p21WAF1蛋白表达情况,分析上述蛋白与咽喉癌临床病理特征的关系。采用多元Logistic回归分析影响咽喉癌患者预后死亡的独立危险因素。结果研究组MTDH、Ets-1及p21WAF1阳性表达率分别为63.64%、72.73%、42.42%,对照组分别为16.67%、23.81%、78.57%,对照组MTDH、Ets-1阳性表达率显著低于研究组,p21WAF1阳性表达率显著高于研究组,差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移者MTDH、Ets-1阳性表达率明显高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、高分化及无淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.05)。中低分化者p21WAF1阳性表达率明显高于高分化者,差异具有统计学意义(P<0.05)。术后对患者进行1年随访,预后死亡12例(18.18%)。经非条件多因素logistic回归模型分析得,临床分期Ⅲ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移、MTDH、Ets-1阳性表达及p21WAF1阴性表达是影响咽喉癌患者预后死亡的独立危险因素(P<0.01)。结论 MTDH、Ets-1及p21WAF1蛋白在咽喉癌组织中表达异常,并可能参与咽喉癌发生、病情进展。     

肝癌中cyclin D1和cyclin E的表达及其意义

目的 :研究cyclinD1和cyclinE蛋白在肝癌中的表达和意义。方法 :用免疫组化方法检测肝癌组织 5 0例 ,癌旁组织 2 2例 ,正常肝组织 9例中cyclinD1和cyclinE蛋白的表达。结果 :cyclinD1和cyclinE只在肝癌中有过度表达 ,其过度表达与肿瘤分化程度和有无肝内转移相关。结论 :本试验表明 :cyclinD1和cyclinE过度表达可反应肝癌的侵袭力 ,它们与肝癌的发生发展密切相关。