Smad分子在骨形成蛋白2调控成牙本质细胞Ⅰ型胶原基因表达中的作用

目的　研究Smad蛋白在骨形成蛋白 2 (bonemorphogeneticprotein 2 ,BMP 2 )调控小鼠成牙本质细胞系MDPC 2 3内Ⅰ型胶原α2链 [collagenα2 (Ⅰ ) ,COL1A2 ]表达中的作用。方法　细胞免疫组化观察MDPC 2 3细胞内BMP 2细胞内信号分子Smad1、Smad5和Smad6的表达。瞬时转染和报告基因检测观察Smad1、Smad5和Smad6在BMP 2调控COL1A2基因转录中的作用。结果　MDPC 2 3细胞表达Smad1、Smad5和Smad6。BMP 2能诱导含COL1A2基因启动子的荧光素酶报告基因活性。Smad1或Smad5过表达增强BMP 2诱导的COLIA2基因启动子活性 ,而Smad6过表达抑制BMP 2诱导的COL1A2基因启动子活性。过表达Smad1或Smad5突变型载体可以阻断BMP 2的诱导能力。结论　在MDPC 2 3细胞内 ,Smad信号途径存在并发挥功能 ,参与调控BMP 2对COL1A2基因的转录。Smad信号途径可能在BMP 2调控成牙本质细胞分化和牙本质形成过程中发挥重要作用     

SIP1在人舌癌Tca8113细胞中的定位和融合蛋白表达鉴定的研究

目的检测Smad相互作用蛋白1(SIP1)在人舌癌Tca8113细胞系中的定位及融合蛋白的表达鉴定。方法 PCR扩增SIP1编码序列的全长,克隆到pCMV-Flag-MAT-Tag 1载体。利用共聚焦激光扫描显微镜观察SIP1和SIP1-Flag在人舌癌Tca8113细胞系中定位,并将构建好的Flag标签SIP1(SIP1-Flag)真核表达载体转染到人舌癌Tca8113细胞系中,提取蛋白进行Western blot检测,利用Flag标签抗体进行免疫沉淀纯化SIP1-Flag融合蛋白。结果构建了SIP1-Flag真核表达载体。SIP1和SIP1-Flag融合蛋白主要定位于人舌癌Tca8113的细胞核中,Western blot检测到SIP1-Flag融合蛋白表达,且在人舌癌Tca8113细胞中成功纯化SIP1-Flag蛋白。结论成功构建真核表达载体。SIP1和SIP1-Flag主要定位于细胞核,成功鉴定融合蛋白表达并纯化SIP1-Flag融合蛋白。     

肿瘤坏死因子受体相关分子6在成牙本质细胞中表达的研究

目的 :研究肿瘤坏死因子受体相关分子 6(TRAF6)是否在成牙本质细胞中表达。方法 :通过westernblot、免疫组化染色研究TRAF6蛋白在成牙本质样细胞系MDPC 2 3中的表达。结果 :Westernblot结果显示MD PC 2 3细胞总蛋白中有大小约 60Kda的TRAF6蛋白条带 ;免疫组化法表明TRAF6在MDPC 2 3细胞浆呈阳性表达。结论 :本实验从蛋白水平证实了成牙本质样细胞MDPC 2 3表达TRAF6,提示TRAF6可能是一种新发现的影响成牙本质细胞分化的胞内信号转导分子     

口腔微生物与免疫学

戒烟初期口腔中草绿色链球菌与奈瑟菌属构成比变化／刘卫军…∥广东牙病防治．建立稳定表达Smad蛋白的MDPC—23细胞模型／何文喜…∥临床口腔医学杂志．对氨基苯甲酸对变形链球菌表面疏水性的影响／李艳红…∥华西口腔医学杂志．小鼠可溶性B淋巴细胞刺激因子真核表达载体pSecTag2B—msBlyS的构建／傅春华…∥华西口腔医学杂志．     

牙本质基质蛋白1基因反义核酸对MDPC-23细胞碱性磷酸酶活性和矿化能力的影响

目的 :观察牙本质基质蛋白 1(dentalmatrixprotein ,DMP1)基因反义寡核苷酸 (AS -ODN)对成牙本质细胞系MDPC -2 3细胞碱性磷酸酶 (ALPase)活性和矿化能力的影响 ,深入研究成牙本质细胞的分化和牙本质形成的机制。方法 :以稳定表达DMP1的MDPC -2 3细胞为靶细胞、不同浓度DMP1反义核酸为阻断剂 ,观察不同作用时间对MDPC -2 3细胞ALPase活性的影响。用Westernblot法检测 10 μmol/LAS -ODN不同作用时间细胞DMP1表达情况 ,并观察连续作用 10d对该细胞矿化能力的影响。结果 :与正常组和S -ODN组比较 ,不同浓度的AS -ODN能够降低MDPC -2 3细胞ALPase活性 ,其中 10 μmol/LAS -ODN降低ALPase活性最为显著 (作用 5d时OD值最低 ,为 0 .3 3 78± 2 .0E)。Westernblot法检测到DMP1在MDPC -2 3细胞的表达在 10 μmol/LAS -ODN加入 12h后减弱 ,2 4h后完全阻断。此浓度AS -ODN连续作用细胞 10d后 ,vonKossa染色显示细胞中出现明显的钙盐沉积 ,矿化结节的数量和大小明显少于对照组。结论 :DMP1反义核酸能够降低MDPC -2 3细胞AL Pase活性和矿化能力 ,提示DMP1参与调节成牙本质细胞矿化过程 ,可能具有启动牙本质矿化的作用。     

口腔黏膜下纤维性变组织中Smad2/3蛋白的表达研究

目的：检测Smad2／3蛋白在13腔黏膜下纤维性变（OSF）组织中的表达及分布,探讨其在OSF发病机制中的作用。方法：采用免疫组化SABC法,用Smad2／3兔抗人多克隆抗体检测20例OSF病变组织及10例正常13腔黏膜组织中的Smad2／3蛋白的表达及分布。结果：Smad2／3在OSF病变组织中为中等强度表达,在正常口腔黏膜组织中为强阳性表达,具有显著性差异（P〈0．05）。结论：Smad2／3蛋白在OSF病变组织中中等强度表达,在OSF发病机制中有重要作用。     

Smad 2/3、7蛋白在OLP CD8+T细胞中的表达

目的:观察Smad2/3、在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)CD8 T细胞中的表达。方法:采用免疫7 组化双标记法检测28例OLP组织中CD8 T细胞Smad2/3、7蛋白表达水平。设10例临床正常口腔黏膜(Normal oral mucosa,)为对照组。结果:NOMNOM组织中CD8 /Smad2/3、CD8 /Smad7双标记阳性细胞均为零。OLP组织中, CD8/Smad2、3和CD8 /Smad7双标记细胞的阳性率分别为1.020 1.24,5.524±5.074。结论:与NOM相比, OLP组织中CD8 T细胞Smad2、 3表达无明显升高。而Smad7阳性颗粒均位于细胞浆中,可能部分阻碍了TGF-β/Smad正向反馈通路,从而引起CD8 T细胞抑制不足,造成OLP慢性炎症的长期持续。     

Smads蛋白在成牙本质细胞系MDPC-23中的表达及功能

目的研究Smads蛋白在成牙本质细胞系MDPC-23作为转化生长因子(TGF)β信号分子的作用。方法常规条件下培养MDPC-23细胞,在TGF-β1刺激培养1h后,观察细胞内Smad分子的定位变化。将Smads真核表达载体分别与报告基因载体p3TP-Lux瞬时共转染至MDPC-23,在TGF-β1刺激培养24h后,裂解细胞,用双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞裂解液中的荧光素酶活性。结果MDPC-23细胞表达Smad2和Smad3蛋白分子,主要定位于细胞质,在TGF-β1刺激1h后,Smad2和Smad3从胞质向胞核转位聚集。TGF-β1可诱导p3TP-Lux基础启动子活性,约增加13倍。过表达野生型Smad3蛋白可促进TGF-β1对p3TP-Lux启动子活性的诱导,但是过表达Smad3突变体抑制TGF-β1对p3TP-Lux启动子活性的诱导。和Smad3作用相比,过表达Smad2野生型或突变型蛋白对TGF-β1诱导p3TP-Lux启动子活性无明显影响。结论在成牙本质细胞系MDPC-23内,Smad信号途径存在并参与介导TGF-β1诱导的转录调控。     

MDPG-23细胞内Smad信号途径在转化生长因子β1调控Smad7基因转录中的作用

目的研究成牙本质细胞系MDPC-23内Smad信号途径在转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)调控Smad7基因转录调控中的作用,从基因转录水平探讨成牙本质细胞内TGF-β调控Smad7基因表达的分子机制.方法培养MDPC-23细胞,通过瞬时共转染和报告基因检测方法观察Smad蛋白分子对Smad7启动子活性的影响,实验数据采用单因素方差分析.结果当Smad7启动子(-408 bp至+112bp)荧光素酶活性载体表达在MDPC-23细胞时,其基础启动子活性被TGF-β1显著诱导增加,而骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对其活性无明显影响.单独过表达Smad1、2、4、5对Smad7启动子活性无明显影响.Smad3过表达显著增强Smad7启动子活性,而Smad3与Smad4共转染进一步增强了Smad3的作用.过表达Smad3突变型载体或Smad3反义cDNA(AS-Smad3)均显著抑制TGF-β1对Smad7启动子活性的诱导作用.结论在成牙本质细胞系MDPC-23内,TGF-β通过Smad3与Smad4协同调控Smad7基因转录.     

MDPC-23细胞内Smad信号途径在转化生长因子β1调控Smad7基因转录中的作用

目的：研究成牙本质细胞系MDPC-23内Smad信号途径在转化生长因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)调控Smad7基因转录调控中的作用，从基因转录水平探讨成牙本质细胞内TGF-β调控Smad7基因表达的分子机制。方法：培养MDPC-23细胞，通过瞬时共转染和报告基因检测方法观察Smad蛋白分子对Smad7启动子活性的影响，实验数据采用单因素方差分析。结果：当Smad7启动子(-408bp至 112bp)荧光素酶活性载体表达在MDPC-23细胞时，其基础启动子活性被TGF-β1显著诱导增加，而骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein-2，BMP-2)对其活性无明显影响。单独过表达Smad1、2、4、5对Smad7启动子活性无明显影响。Smad3过表达显著增强Smad7启动子活性，而Smad3与Smad4共转染进一步增强了Smad3的作用。过表达Smad3突变型载体或Smad3反义cDNA(AS-Smad3)均显著抑制TGF-β1对Smad7启动子活性的诱导作用。结论：在成牙本质细胞系MDPC-23内，TGF-β通过Smad3与Smad4协同调控Smad7基因转录。     

柠檬精油对牙周致病菌抑制作用及其安全性初步研究

目的:探讨柠檬精油对牙周致病菌的体外抗菌活性及对细胞增殖的影响。方法:采用微量液体稀释法测定柠檬精油对Pg、Fn、Aa、Pi的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)及最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);以较低浓度的MIC为标准稀释LEO作为实验组,采用MTT法测定柠檬精油对HUVECs的毒性作用,明确抑菌浓度下LEO的安全性。结果:柠檬精油对牙周主要致病菌均有抑菌作用,Pg、Fn、Aa、Pi的MIC分别是9.0 g/L、4.5 g/L、4.5 g/L、9.0 g/L,Aa、Fn的 MBC是9.0 g/L,Pg、Pi的MBC未测得。1/2MIC、1/20MIC浓度的LEO能够抑制人脐静脉内皮细胞的生长,而低于1/200MIC浓度的LEO则对人脐静脉内皮细胞的生长没有影响,其中1/200MIC浓度的LEO作用明显优于0.02%的CHX。结论:体外环境中,柠檬精油对牙周致病菌Pg、Fn、Aa、Pi具有抗菌活性,低浓度应用对机体相对安全。     

Oral cancer: molecular technologies for risk assessment and diagnosis

Purpose: The effective biomarkers related to diagnosis, metastasis, drug resistance and irradiation sensitivity of oral cancers will help the pathologist and oncologist to determine the molecular taxonomy diagnosis and design the individualization treatment for the patients with oral cancers.     

Stimulated whole saliva components in children with Down syndrome

The authors report on the components of stimulated whole saliva from children with Down syndrome—including pH, flow rate, sialic acid and protein concentrations, and amylase and peroxidase activity. Saliva samples were collected from 35 children aged 6–10 years. Of the participants, 17 had Down syndrome and 18 did not. To stimulate saliva production, the children chewed a piece of parafilm for 10 minutes before the sample was collected. Soon after collecting the saliva sample, the authors measured pH using a portable pH-meter. Sialic acid levels were determined with a thiobarbituric acid assay. Protein content was determined with Folin's phenol reagent. Amylase was assayed and the authors measured the maltose produced by the breakdown of starch and peroxidase using ortho-dianisidine.
No statistically significant difference was observed in levels of sialic acid (free and total) between the two groups. Protein concentration was about 36% higher in the group with Down syndrome. However, the salivary flow rate, pH, and amylase and peroxidase activities were lower among the children with Down syndrome.     

Computer-assisted planning for maxillofacial prosthodontic rehabilitation

Computerized tomography (CT) planning and the use of CT derived surgical templates for implant placement have shown promise for restoring function within months after surgical reconstruction of acquired post-oncologic defects.     

牙髓再生的研究现状

目前,根管治疗术在临床上已得到了广泛的应用并成功的保存了患牙,但其仍有许多术后并发症。随着组织工程技术在口腔领域的应用,构建一种组织工程化牙髓进行牙髓-牙本质复合体的再生治疗成为可能。近年来国内外已有很多关于牙髓再生的研究,并且已经取得了一定成果。本文将对目前国内外牙髓再生的研究进展现状作一综述。     

Effect of Pingyangmycin on human venous malformation endothelial cells

Purpose: Venous malformations are common vascular anomalies with a propensity of the head and neck. Intralesional injection of Pingyangmycin (PYM, bleomycin A5 hydrochloride) is a widely used sclerotherapy method for the treatment of venous malformation.     

Oropharyngeal dysphagia in amyotrophic lateral sclerosis alters quality of life

Dysphagia is one of the most important complications encountered in amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Our aim was to determine whether oropharyngeal dysphagia impacted the quality of life (QoL) of patients with ALS. Thirty consecutive patients were recruited (31–82 years, 18 men). Swallowing function was evaluated using a standardised videofluoroscopic barium swallow. All the patients completed a specific questionnaire on quality of life in dysphagia (SWAL‐QoL) immediately after the videofluoroscopy. The results of dysphagia outcome severity scale separated 14 patients with oropharyngeal dysphagia and 16 with normal swallowing function. There was no difference in the average age, weight and body mass index of the two groups (dysphagic patients: 68 ± 11 kg versus non‐dysphagic patients: 69 ± 14 kg). Most of the dysphagic patients had a bulbar affection based on their Norris scores which determine the importance of cranial nerves illness (20 ± 8), significantly lower than those of the non‐dysphagic patients (35 ± 5) (P < 0·0001). There was no difference in the neurological peripheral symptoms evaluated by Amyotrophic Lateral Sclerosis Functional Rating Scale scores (dysphagic patients: 26 ± 7 versus non‐dysphagic patients: 27 ± 8) (ns). The swallowing quality of life questionnaire revealed that the dysphagic patients had significant burden (P < 0·001). They were affected by the necessity to applied a food selection (P < 0·01), by the increase in eating duration (P < 0·05) and described a decrease in eating desire (P < 0·05). They complained of fear regarding the risk of dysphagia (P < 0·05). They also described difficulties with oral communication (P < 0·001). All of those complained about dysphagia which impacted directly mental health (P < 0·05) and social life (P < 0·05). In conclusion, oropharyngeal dysphagia is a common symptom accompanying ALS, which alters the patient's QoL, especially social health.     

拔牙位点保存用复合温敏凝胶的构建及体外表征

目的:制备多壁碳纳米管/羟基磷灰石/壳聚糖复合温敏凝胶,探讨其作为拔牙位点保存材料的理化性能。方法:采用原位沉积方法制备多壁碳纳米管/羟基磷灰石(MWNT/ HA简称HAC)复合无机材料,将其分散至壳聚糖温敏凝胶中,制备壳聚糖/多壁碳纳米管/羟基磷灰石(CS /MWNT/HA简称CS/HAC)复合温敏凝胶,以成胶时间、孔径、孔隙率、机械强度及降解性能为指标优化配方设计,并表征复合温敏凝胶的微观形貌及理化性能。结果:以10 g/L的HAC作为补强成分加入到壳聚糖溶液中,能够在不影响成胶并保证一定孔隙率(84%)的前提下,提高材料的机械性能(抗压强度0.441 MPa),所获复合温敏凝胶具有适宜的临床操作时间(12 min),并具有可控的降解速率。结论:负载HAC的复合温敏凝胶具有良好的成型性,并具有较好的机械性能,在拔牙位点保存领域具有良好的应用前景。     

Interventional neuroradiologic procedures in the head and neck

Interventional radiology and interventional neuroradiology are evolving specialties which can aid the head and neck surgeons in the clinical management of patients with complex vascular lesions.