以MAGE A1-A6亚型基因mRNA为特异标记检测肺癌细胞

目的 探讨肺癌患者痰液及外周血中黑色素瘤抗原基因(MAGE)A1-A6亚型 mRNA的表达及其对早期肺癌的诊断意义.方法应用巢式RT-PCR技术,对23例肺癌病人、8例肺良性病变者和10例健康人的痰液及外周血中MAGE A1-A6亚型基因的 mRNA表达进行检测.结果 23例肺癌病人中7例检测到痰液脱落细胞中有MAGE A1-A6亚型基因mRNA表达,检出率30.4%(7/23);9例检测到外周血有表达,检出率39.1%(9/23);痰液和外周血肺癌细胞联合检出率为47.8%(11/23),大于痰液细胞学检查检出率17.4%(4/23)(P＜0.05).而肺良性病变者和健康人中均未检测到MAGE A1-A6亚型基因mRNA的表达.结论 MAGE A1-A6亚型基因的 mRNA可作为检测肺癌患者痰液和外周血癌细胞的标记物,两者联合检测有助于提高肺癌的检出率.     

MAGE mRNA和LUNX mRNA在非小细胞肺癌淋巴结的表达

目的 了解黑色素瘤抗原基因(MAGE mRNA)和肺特质性X蛋白基因(LUNX mRNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者纵膈淋巴结中的阳性率.方法 利用RT-PCR方法检测26例患者的123组淋巴结MAGE mRNA和LUNX mRNA的表达.结果 LUNX mRNA表达在NSCLC淋巴结微转移阳性率分别为42.3％ (52/123)和34.1％ (42/123),差异无显著性(P＞0.05).非MAGE肺癌患者淋巴结四种LUNX mRNA未见表达.常规病理检查和RT-PCR检测MAGE和LUNX mRNA在淋巴结微转移阳性表达率为30.1％ (37/123)和44.7％ (55/123),差异有显著性(P＜0.05).结论 MAGE mRNA是应用RT-PCR法检测NSCLC淋巴结微转移的较好的分子标志物,与LUNX mRNA联合检测可能有助于早期诊断肺癌淋巴结微转移.     

COX-2基因mRNA在非小细胞肺癌中的表达

目的 检测非小细胞肺癌COX-2基因 mRNA的表达水平并探讨其临床意义.方法 运用两步法RT-PCR技术检测83例非小细胞肺癌组织和24例支良性非癌肺组织中COX-2 基因mRNA的表达水平.结果 83例肺癌组织中检测出44例(53.01%)阳性,24例非癌肺组织中检测出2例(8.33%)阳性,其中在腺癌表达率67.31%显著高于鳞癌表达率35.48%,差异有统计学意义(P=0.005),淋巴结转移组中表达率(65.85%)显著高于无淋巴结转移组(42.86%)(P=0.036).低分化组中表达率(85.00%)显著高于高、中分化组表达率(55.56%)(P=0.018).结论 COX-2基因在肺癌组织与非癌肺组织中mRNA表达差异有统计学意义(P=0.000),COX-2 表达与肺癌病理类型密切相关,揭示了COX-2 可以作为判断病情和预后评价的指标.     

痰液脱落细胞k-ras基因检测对肺癌诊断的临床价值

目的通过痰脱落细胞k-ras基因点突变的检测探讨其对肺癌诊断的临床应用价值。方法应用多聚合酶链反应结合限制性长度片段多态性分析法(PCR-RFLP),检测50例肺癌(其中腺癌22例,鳞癌24例,小细胞癌4例)和48例肺部良性疾病患者痰标本中k-ras基因第12密码子的突变情况,检测结果进行对比分析。结果k-ras基因在肺癌组的突变检出率为24.00%(12/50),非肺癌组突变检出率为2.08%(1/48),二者有显著性差异(P<0.01)。其中腺癌突变率40.90%(9/22),鳞癌突变率12.50%(3/24),小细胞癌未检出突变。在肺癌早期(Ⅰ期和Ⅱ期)中,k-ras基因突变明显高于肺良性病变组,且肺癌组中,吸烟者k-ras基因突变率34.48%(10/29)高于非吸烟者9.52%(2/21),两者有统计学差异(P<0.05)。k-ras基因突变与年龄、性别和临床分期无明显关系。结论k-ras基因突变与肺癌的发生存在一定的相关性,痰液脱落细胞中R-ras基因检测突变有助于肺癌的临床诊断,对早期诊断亦有一定的意义。     

非小细胞肺癌组织中凋亡抑制蛋白Livin的表达及意义

目的 研究肺癌相关Livin基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达以及与p53基因的关系.方法 采用RT-PCR方法检测48例NSCLC组织Livinα mRNA的表达,用免疫组化SABC法检测livin和p53蛋白在48例NSCLC患者肺癌组织切片中的表达.结果 48例NSCLC中15例检测到Livinα mRNA表达,其阳性表达率为31.3%,而正常肺组织和癌旁及良性疾病肺组织均未检测到Livinα mRNA表达.Livin蛋白在腺癌、低分化癌、有淋巴结转移者中的表达阳性率明显高于鳞癌和大细胞癌、高中分化癌和无淋巴结转移者(P＜0.01),而癌旁组织和良性疾病肺组织未检出阳性表达.Livinα mRNA表达与p53呈正相关(r=0.457,P＜0.01);livin蛋白表达与p53呈正相关(r=0.563,P＜0.01).结论 Livin在NSCLC组织中高表达,可能成为肺癌诱导凋亡治疗的新靶点.     

非小细胞肺癌hTERT与p16基因甲基化的表达

目的 探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)和p16基因甲基化在非小细胞肺癌(NSCLC)发病中的作用.方法 应用实时荧光定量RT-PCR法和甲基化特异性PCR法检测45例NSCLC组织、21例肺正常组织hTERT和p16基因甲基化的表达.结果 NSCLC、正常肺组织hTERT mRNA的表达分别为2.854±0.728、2.042±0.378,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);NSCLC组织、肺正常组织p16基因甲基化阳性率分别为57.8%、14.3%(P<0.01).hTERT mRNA与NSCLC病理类型相关,p16基因甲基化与NSCLC细胞分化程度及淋巴结转移相关(P均<0. 05).结论 hTERT与p16基因甲基化存在相关性,hTERT和p16基因甲基化的表达与NSCLC的发生、发展有关.     

应用MAGE A1～6普通引物的逆转录巢式聚合酶链反应技术检测肺癌Sanghoon Jheon, et al. Lung cancer

背景由于肺癌患者的死亡率仍在很高水平，开发敏感的检测方法仍是一项迫切的任务。本文作者设计了普通黑素瘤抗原基因(MAGE)引物用以同时检测出MAGE A1-6亚型。这些引物应用于经痰标本检测肺癌。方法这一研究包括了53例癌症患者组和3个非癌症组(193位健康人，     

痰液中survivin、p53蛋白检测对肺癌的诊断价值

目的 探讨检测痰液中survivin、p53蛋白在肺癌诊断中的应用价值。方法 采用改良Saccomanno法收集40例肺癌患者、11例肺良性病变者和9名健康者痰液，用流式细胞技术检测痰液中survivin、p53蛋白的表达水平。结果 ①肺癌患者组痰液survivin、p53蛋白的表达量显著高于肺良性病变组和健康对照组（P〈0．05）；肺良性病变组和健康对照组痰液间无显著性差异（P〉0．05）；②痰液中p53蛋白的表达与吸烟指数有关。③痰液中survivin的表达与p53相关（r=0．575，P〈0．01）。结论 ①survivin、p53蛋白表达增高在肺癌的发生中起着重要作用。②痰或诱导痰中survivin、p53蛋白检测有可能为肺癌的诊断提供一个新的无创、安全的辅助方法。     

肺癌患者肺组织和痰标本p53基因突变检测及其临床意义

目的　探讨肺癌患者支气管肺活检组织和痰标本中p5 3基因突变检测在肺癌诊断中意义。方法　应用聚合酶链反应 (PCR) 单链多肽性 (SSCP) 银染法检测 12 0例肺癌和 40例良性肺疾病支气管肺活检组织和痰标本p5 3基因第 5～ 8外显子突变情况。结果　 60例肺癌患者癌组织、癌旁组织和对侧支气管组织p5 3基因突变检出率分别为 60 % (3 6/ 60 )、17% (10 / 60 )和 5 % (3 / 60 ) ,三组间比较差异有显著性 (P <0 .0 0 5 )。 2 0例良性肺疾病支气管肺组织p5 3基因突变检出率为 5 %。故活检组织p5 3基因突变检出肺癌的敏感性为 60 % ,特异性为 95 % ;另外 60例肺癌痰标本p5 3基因突变检出的敏感性为 43 % (2 6/ 60 ) ,特异性为 10 0 %。肺癌痰标本p5 3基因突变联合细胞学检测使肺癌的诊断率从单纯细胞学的 48% (2 9/ 60 )提高到 68% (41/ 60 )。结论　痰标本p5 3基因检测联合细胞学检查可提高肺癌的诊断率     

PPTG、Survivin和bFGF mRNA在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织中垂体肿瘤转化mRNA(PPTG mRNA)、生存素mRNA(Survivin mRNA)和碱性成纤维细胞生长因子mRNA(bFGF mRNA)的表达水平,探讨其在NSCLC中的诊断价值。方法随机选择NSCLC患者原发癌病灶组织86例为NSCLC组,其中肺鳞癌35例、肺腺癌38例、其他型肺癌13例;淋巴结转移46例、无淋巴结转移者40例;肿瘤高分化36例、中分化24例、低分化26例;TNMⅠ期22例、Ⅱ期24例、Ⅲ期20例、Ⅳ期20例,同时取癌旁正常肺组织86例为癌旁组,肺部为良性疾病肺组织80例为对照组,采用实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)检测四组患者组织的PPTG、Survivin和bFGF mRNA的表达。结果 PPTG、Survivin和bFGF mRNA在NSCLC组、癌旁组的组织表达水平高于对照组(P0.05),在NSCLC组中的表达高于癌旁组(P0.05);PPTG、Survivin和bFGF mRNA在腺癌、鳞癌组织表达均明显高于其他组,在腺癌组织中的表达高于鳞癌(P0.05),其与肺癌组织分级、TNM分期及淋巴结转移呈密切正相关性(P0.05),而与患者的性别与年龄无关(P0.05)。结论 PPTG、Survivin和bFGF mRNA基因在NSCLC中呈高表达,其表达水平有助于临床分期、组织学分级和淋巴结转移的判断。