加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释系统的生物相容性

背景：聚酸酐材料具有表面溶蚀性、生物可降解性和释药速率可调性,已被美国食品和药物管理局批准用于人体药物缓释材料。 目的：研究加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释系统的制备及生物相容性。 方法：采用熔融缩聚的方法制备聚癸二酸酐,将加替沙星与聚癸二酸酐充分混合,制成载药量20%的加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释药棒。切开6只新西兰大耳白兔背部皮肤,随机分组：实验组在脊柱两旁椎旁肌肌袋内植入聚癸二酸酐棒,对照组未植入任何材料。术后第5周取材,观察皮下组织和肌肉组织变化,以及心、肝、肾及肺的变化。 结果与结论：聚癸二酸酐生物相容性良好,植入期间兔未出现任何食欲和行为改变,植入部位未见明显红肿、出血及糜烂,植入材料表面呈多孔状,表明材料在皮下已发生降解吸收,但未发生脆裂和崩解,与周围组织形成轻微粘连;兔肝、肾、肺、心组织结构未发生改变。表明加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释制剂无毒、无致畸作用,组织相容性好。     

加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释系统预防兔骨髓炎

背景：聚酸酐材料具有表面溶蚀性、生物可降解性和释药速率可调性,为人体药物缓释材料,但关于聚癸二酸酐缓释系统的应用至今少有报道。 目的：观察加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释系统对兔股骨骨髓炎感染模型的预防作用。 方法：按Norden法将30只兔制作股骨金黄色葡萄球菌骨髓炎兔模型,分别用加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂和加替沙星进行干预,并与模型组作对照,共分3组,每组10只,观察建模后兔一般情况、解剖学观察、X射线片表现、骨培养及细菌计数、组织学检查。 结果与结论：建模后8周,模型组兔建模后,食欲差,皮毛不光滑,体质量减轻,3只兔于3周内死亡,其他7只X射线片上骨膜反应较重,可见小块死骨形成,解剖学检查均可见脓肿形成,骨培养及组织学检查均可见骨髓炎表现;加替沙星组建模后体质量减轻,2只兔于建模后3周内死亡,解剖学检查可见有4只动物有脓肿形成,X射线片上可见8只动物骨膜反应较轻,未见死骨形成,骨培养及组织学检查6只兔有骨髓炎表现;加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂治疗组兔一般情况好,解剖学检查未见异常,X射线片检查、骨培养和细菌计数、组织学检查均未见骨髓炎表现。结果证实,加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释制剂预防股骨骨髓炎感染效果较好。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

聚乳酸-羟基乙酸共聚物-壳聚糖单向缓释膜制剂的研究

目的研制一种可以携带药物单向作用患处的膜型缓释制剂,避免对周围正常组织产生不良影响。方法昆明小鼠30只,鼠龄6周,雌性,体质量20 g左右。利用聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)和壳聚糖分别制作外层膜和释放膜,通过交联层将2层结合,利用单向释放实验、蛋白释放、淫羊藿苷释放(测定其光密度值)确定膜的单向缓释放性。分别取不同释放时期的膜做扫描电子显微镜观察,确定其在不同释放时期膜微观结构的变化。利用降解率确定膜的物理性质,通过细胞实验和动物实验[苏木精-伊红(HE)染色],了解材料的生物相容性和载药后对治疗的有效性。结果通过释放实验、载药实验,证明单向膜可以包载不同溶解性质(水溶性、脂溶性)的药物,具有单向缓释作用。在释药过程中膜微观结构有明显变化,15 d后降解率达到96%左右。生物相容性实验和HE染色实验证明单向膜具有良好的生物相容性。细胞实验证明包载淫羊藿苷的膜可以使骨髓间充质干细胞产生一定量的碱性磷酸酶,发生分化。结论通过以上实验,确定单向膜具有良好的生物相容性、单向释放性和缓释性,载药后有一定疗效。     

加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释系统的体内释药特性CSCD

背景:全身大剂量应用抗生素治疗骨感染的不良反应较多,效果不是十分理想,因此探索一种以可降解材料为载体预防骨感染的方法具有很好的应用价值。目的:分析加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释系统的体内释药特性。方法:在新西兰大耳白兔右侧膝关节制作3mm×6mm大小的骨窗,植入加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂,术后1,2,3,6,9,12,15,18,25,30d取心脏血、骨组织及骨髓组织标本,以高效液相色谱法测定各组织内加替沙星浓度;扫描电镜观察加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂植入前后的结构变化。结果与结论:加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂植入后,骨髓组织内药物浓度逐渐降低,在第1天出现了一个较高的高峰,第3-15天药棒释放较平稳,15-30d逐渐降低,但在30d末时的药物浓度仍大于对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度0.1mg/L;骨组织内的药物浓度高峰出现于第3天,其余时间的浓度较平稳,并且均大于0.1mg/L;在同一时间点,血标本中药物浓度小于骨髓组织和骨组织内药物浓度。加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂是表面溶蚀降解,降解残留物为小球状,其内部结构未发生变化,在药物持续释放过程中药棒未发生崩解和碎片化。表明加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释制剂具有良好的载药及药物缓释能力。     

盐酸多柔比星缓释植入剂体外释药与体外降解的研究

以聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物(PLGA)为载体制备盐酸多柔比星缓释植入剂,测定植入剂的释放度和PLGA失重率,结果表明PLGA体外降解曲线呈“S”形,起初的迟缓期后降解速率加快,5周时失重率达80％.植入剂表现出趋于零级的药物释放模式(r=0.9880),在0～25d日均释放度达3.26％,35 d时累积释放度达90％...     

不同降解材料制备的分解食道支架体外降解研究

采用磷酸盐缓冲溶液(PBS)(pH =7.4)和人工胃液(pH=1.5)为降解介质,37℃下对由PLLA和PGLA丝线缝合的分解食道支架进行了体外降解实验.通过测试降解过程中支架的径向支撑力及丝线的特性粘度、熔点、结晶性及表面形貌等变化,对支架体外降解行为进行研究.结果表明,上述降解介质中由PL-LA丝线缝合的支架的径向支撑力及丝线的各性能变化不明显;由PGLA丝线缝合的支架在PBS中6周时分解,丝线的特性粘度保留率随降解时间的延长线性下降,而在人工胃液中9周时分解,特性粘度保留率随降解时间的延长呈“Z”字型变化,即初期和后期变化平缓,中期迅速下降;SEM显示在上述介质中,支架分解时PGLA丝线均以横向方式断裂.因此,PGLA丝线制备的支架可用于治疗良性食道狭窄,而PLLA丝线制备的支架分解时间大于2个月,不适于良性狭窄的治疗.     

利福平/聚乳酸-聚羟基乙酸缓释微球的制备及特性

背景：虽然国内外有很多制备利福平/聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(poly lactic acid-glycolic acid copolymer,PLGA)微球的报道,但这些微球粒径多在10 μm左右,不适合与磷酸钙骨水泥复合制备成具有良好降解性的抗结核修复材料。 目的：制备大粒径利福平/PLGA缓释微球,观察其理化特性和体外缓释特性。 方法：以PLGA为载体,将利福平分散于PLGA的有机溶剂中,采用复乳溶剂挥发法制备利福平/ PLGA缓释微球。光镜和扫描电镜下观察微球的形态特征,测定微球平均直径和跨距,高效液相色谱法测定载药量和包封率,以溶出法和高效液相色谱法观察其体外释药特性,并拟合药物体外释放曲线建立曲线方程。 结果与结论：利福平/PLGA微球电镜观察呈圆球形,分散性好,粘连少,粒径分布集中,平均粒径(80.0±9.4) μm。载药量、包封率分别为(33.18±1.36)%,(54.79±1.13)%。体外缓释试验显示突释期内微球释放度为(14.66±0.18)%,前3 d累计释放度(18.09±0.45)%,到42 d体外累积释放度达到(92.17±1.23)%。提示利福平/PLGA微球具有良好的缓释效果,是一种较为理想的抗结核药物的载体材料和释放系统;PLGA是良好的药物缓释载体,可以用来制备载药缓释微球。     

抗阿尔茨海默症单链抗体的制备与体外活性研究

目的:制备靶向β-淀粉样蛋白(Aβ)的单链抗体(scFv),探究其体外活性。方法:原核表达系统对scFv进行表达。ELISA、免疫组化法检测scFv与Aβ的结合活性;Western blot、硫黄素-T法检测scFv对Aβ寡聚体、纤维形成的抑制作用;MTT法检测scFv对Aβ寡聚体产生细胞毒性的保护作用。结果:成功获得12B4-scFv,该抗体能与各种形式的Aβ结合,并有效抑制Aβ寡聚体及纤维的形成,对Aβ寡聚体产生的细胞毒性起到保护作用。结论:成功制备靶向Aβ的scFv具有良好的生物活性。     

rhBMP-2／PLGA缓释支架的制备及对MSCs细胞成骨活性的体外研究

目的探讨骨形态发生蛋白（rhBMP-2）的聚乳酸聚乙醇酸共聚物（PLGA）体外缓释生物支架对人骨髓间充质干细胞（MSCs）细胞的影响。方法采用粒子沥滤-冷冻干燥复合工艺制备了附载rhBMP-2的PLGA生物支架,并检测了在PLGA的降解过程中rhBMP-2的释药规律;同时分离培养人骨髓间充质干细胞,体外培养后分别接种于附载和未附载rhBMP-2的PLGA支架上。扫描电镜观察不同时间段MSC在支架上的生长情况;MTT法测定细胞增殖情况。结果rhBMP-2能被包裹进PLGA支架中,而且可以在PLGA支架降解过程中持续释放出来并诱导骨发生。结论骨形态发生蛋白的PLGA复合载体是一种较为理想的新型生物支架。     

犬骨髓基质干细胞与聚羟基烷酸酯体外相容性的实验研究

目的：评价聚羟基烷酸酯（PHBV）作为组织工程支架与犬骨髓基质干细胞（BMSCs）的生物相容性。方法:原代培养犬BMSCs，传至3-4代后，接种至PHBV膜和泡沫样三维支架上，以接种至培养板上细胞为对照组，倒置显微镜下观察细胞形态；于培养1、2、3周分别采用4%多聚甲醛固定，常规组织切片，HE染色；在5、10、14 d用Hoechst33258荧光法定量测定细胞内DNA含量，BCA法测定蛋白质含量。结果:倒置显微镜观察PHBV 纤维较粗，且透光性差，在相差显微镜下不易观察。第3-4代BMSCs接种至PHBV膜上2 h后即大部黏附，3 d后伸展良好，呈纺锤形或梭形，在三维支架的孔隙内立体生长，1周开始细胞间连接，3周广泛连接，分泌大量基质；培养接种1周后，取二个膜状PHBV固定，HE染色后，见骨髓基质干细胞增殖。培养接种2周后，骨髓基质干细胞增殖明显，呈梭形密布于膜状PHBV上。培养接种3周后，骨髓基质干细胞增殖较第二周无明显变化。定量测定接种的细胞内DNA含量和蛋白质含量与对照组相比无显著差异。结论:PHBV作为BMSCs的组织工程支架材料，具有良好的生物相容性。     

生物降解材料聚乳酸－聚乙二醇共聚物体内外降解

本文对ＤＬ－聚乳酸－聚乙二醇共聚物（ＰＥＬＡ）体内外降解进行了研究。采用凝胶渗透色层法（ＧＰＣ）测定分子量，扫描电镜（ＳＥＭ）观察。ＰＥＬＡ在最初第５天出现降解，２月时分子量丧失体内外分别为９７．２８％和９２．０％，而重量仅丧失８％。对其原因进行了讨论，同时将ＰＥＬＡ与ＤＬ－聚乳酸（ＰＬＡ）进行了比较，探讨分析了二者的降解机理。结果表明ＰＥＬＡ是一种新型生物降解材料。     

聚乳酸/聚乙二醇-聚乳酸新型亲水支架的制备与研究

利用热致相分离/粒子沥滤结合法,制备了聚乳酸(PDLLA)以及聚乳酸与聚乙二醇-聚乳酸共聚物(PELA)复合的PDLLA/PELA组织工程支架。讨论了聚乙二醇(PEG)分子量、PELA含量及组成比对于支架内部结构、力学性能、降解行为和细胞毒性的影响。结果表明,热致相分离/粒子沥滤结合法制备的支架,具有100~250μm大孔与5~40μm小孔兼备的特殊内部结构,PEG含量愈高、PEG分子量愈小,支架的孔隙率愈大。PDLLA/PELA比率的减小,PEG/PLA比率的增大会引起支架力学性能的下降和降解的加速。材料无细胞毒性。当支架中PDLLA/PELA为3∶1,PEG 5000/PLA为25∶75时,其内部孔形态最为理想。     

PGLA降解产物对材料降解性能影响的体外研究

为了探讨PGLA材料的降解产物对材料本体降解性能的影响，本研究设计了体外两种浸泡体系——磷酸缓冲液（PBS）和人工血浆，分别在替换和不替换浸泡介质两组不同条件下，分析材料的质量损耗情况，并将不替换组的各时间段降解液进行pH值的测定，以判断环境的酸碱度对材料本体降解的作用。实验降解周期分别为2、3、4、6、8、10周。结果显示：在浸泡初期，人工血浆和PBS降解液中的质量损耗两者间无显著性差异（P〉0．05）；大约从2周到6周，不替液组中材料在两种介质内的降解速度显著快于相对应的同期换液组（P〈0．01）；不替换液组材料在PBS液中的降解快于在人工血浆中的降解，而且在整个降解周期内PBS降解液的pH值基本保持稳定（pH≈7．0～7．4），而人工血浆降解液中的pH值随着降解过程的不断进行，其pH值由7．5逐渐降到5．7左右，两种降解液pH值变化之间的差异具有显著的统计学意义（P〈0．01）。由此提示：在不替换浸泡介质的条件下，降解液中持续存在的降解产物显然影响材料本体的降解速度，PGLA材料的降解产物具有加速材料质量损耗的作用；环境的酸碱度对材料的降解会产生一定的影响，pH值越低，材料的降解速度越缓慢。     

国产与进口安克(ANKE)干糖浆体外抗菌作用比较

本文主要测定了安克干糖浆(ANKE)国产与进口制剂对临床分离致病菌的药敏试验,结果表明:国产与进口ANKE干糖浆对金葡菌、大肠杆菌、沙门氏菌、变形杆菌有较好的抑制作用,对阴沟杆菌、沙雷氏菌在药物浓度较高时有一定的抑制作用,对绿脓杆菌耐药,同时测定了不同接种菌量对MIC的影响,结果显示接种菌量对国产与进口安克干糖浆MIC值影响甚微。     

天冬氨酸—谷氨酸共聚物的合成、表征及性质研究

制备了L－天冬氨酸－L－谷氨酸共聚物（摩尔比为8：2）,将3－氨基丙醇接入材料母体,制得聚－（3－羟丙基）－L－天冬氨酸－谷氨酸材料（PHPAG）。对材料用核磁共振、X-ray衍射、DSC差热分析及元素分析等作了表征,以葡聚糖标准品为相对分子量,用凝胶色谱法测定材料的分子量。材料注入小鼠体内后进行了急性毒性、血液参数、微核等生物相容性检测,结果表明材料为无毒材料。用不同水解酶对材料作了体外酶解实验,实验显示酶对共聚材料有一定程度的酶解。对材料在不同pH值、光照、湿度等条件下进行了稳定性实验,结果表明材料的在实验条件下是稳定的。     

姜黄素/聚乳酸—乙醇酸共聚物复合薄膜的制备及抗凝血研究

血管支架内再狭窄是血管支架临床应用中最突出的问题,药物洗脱支架的问世成为冠心病介入治疗的一个重要里程碑。但是目前的药物洗脱支架还存在抗凝血不足的问题,药物洗脱支架植入晚期血栓形成的病例在临床上有所报道。姜黄素具有抗增生以及抗凝血等多种药理活性,有望成为药物洗脱支架的新颖药物。我们以可降解高分子材料聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)为载体分别制备了三种浓度(3wt%、5wt%、8wt%)的姜黄素复合薄膜。采用傅立叶变换红外光谱研究了复合薄膜的组成成分,结果显示:姜黄素与PLGA的特征峰在复合薄膜的红外图谱中均有出现;体外血小板黏附实验结果显示姜黄素复合薄膜表面的血小板黏附数量减少,较少团聚、变形和激活;复合薄膜的部分凝血活酶时间(APTT)长于纯PLGA薄膜的APTT,这都表明姜黄素/聚乳酸-乙醇酸共聚物复合薄膜的抗凝血性能得到改善,且复合薄膜的抗凝血性能在实验药物浓度范围内随着药物含量的增加,材料的抗凝血性能进一步提高。     

Lipopolysacchride-Treated Mammary Carcinomas Secrete Proinflammatory Chemokines and Exhibit Reduced Growth Rates In Vivo,But Not In Vitro

Toll-like receptors (TLR) are pattern recognition receptors that play a pivotal role in the initiation of immune responses. Here we report that the murine mammary carcinoma 4T1 constitutively expressed genes encoding TLR2, 3, 4 and 5. Moreover, treatment of the 4T1 cell line with peptidoglycan (PGN), polyinosinic-polycytidylic acid (Poly(I:C)) or lipopolysaccharide (LPS), agonists for TLR2, 3 or 4 respectively, induced nuclear translocation of NFκB and secretion of CCL2, CCL5 and CXCL1 in a dose dependent manner. Although treating the tumor cells with the TLR agonists did not modulate growth or viability of the tumor cells in vitro, 4T1 exhibited a decreased growth rate in vivo following treatment with LPS that was dependent upon the presence of CD8⁺ T cells. Analysis of 3 additional murine mammary carcinomas revealed that they also secreted CCL2, CCL5 and CXCL1 in response to TLR agonist treatment, and LPS treated 168 and SM1 tumors exhibited decreased growth rates in vivo, but not in vitro. These data indicated that 4 out of 4 murine mammary carcinomas secreted proinflammatory chemokines following treatment with TLR agonists, and 3 out of 4 of the mammary carcinomas responded to LPS treatment in a manner that decreased tumor growth in vivo.     

利用不同成孔剂制备快速响应型pH敏感水凝胶

本实验利用5种成孔剂制备了可用作泪点栓子材料的快速响应型pH敏感聚丙烯酸凝胶,这五种成孔剂分别是聚乙二醇400(PEG-400)、壳聚糖、壳聚糖明胶聚合物、CaCO3和Na2CO3。试验测定了添加成孔剂对凝胶溶胀速率的影响,并讨论了各种成孔剂的作用机理及效果,最后研究了作用效果较好的三种成孔剂添加量对凝胶溶胀速率即溶胀比的影响。结果证明PEG-400作用效果最好,使凝胶在5 min左右即可完成95％以上的形变,在30 ml的体系里PEG-400、聚合物及Na2CO3的最适添加量分别为1、0．8、1 ml,可以满足用做泪点栓子材料的要求。     

体外PLGA三维支架上诱导小鼠骨髓干细胞向胰岛样细胞分化

目的 研究聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）三维支架在骨髓干细胞向胰岛样细胞诱导分化中的作用.方法 分别在平面和PLGA三维支架上对小鼠骨髓干细胞向胰岛样细胞进行诱导分化,对2组诱导分化的胰岛样细胞进行形态学观察和功能检测,对照组为小鼠胰岛细胞.结果 2组诱导分化的胰岛样细胞均呈双硫腙（DTZ）染色阳性,胰岛素、C肽双染阳性,胰高血糖素阳性和生长抑素阳性;在高糖刺激下,PLGA三维支架组的胰岛素分泌量较平面组显著提高（P＜0.01）.电镜提示诱导分化的胰岛样细胞具有类似β细胞的超微结构且与支架有良好的相容性.结论 PLGA三维支架有益于提高骨髓干细胞诱导分化的胰岛样细胞功能,且与胰岛样细胞具有良好的相容性.     

聚乳酸、乳酸乙醇酸共聚物的制备及其体外降解

以外消旋乳酸、左旋乳酸和乙醇酸为原料,制备高纯度交酯单体丙交酯和乙交酯,以辛酸亚锡引发在高真空条件下本体熔融开环聚合,制得一系列不同分子量的聚乳酸均聚物和不同配比的乳酸乙醇酸共聚物,并用核磁共振氢谱、凝胶渗透色谱、差示扫描量热仪等手段对聚合产物的结构和性能进行分析表征.将溶液涂膜法制备的聚乳酸均聚物和乳酸乙醇酸共聚物薄膜置于Hank's人工模拟体液中降解试验,记录聚合物薄膜的失重和黏度及表面形貌变化,考察其体外降解规律,筛选适合作为冠脉支架表面载药涂层的聚合物,以推测其在人体内的降解行为.