田基黄水煎剂对Ⅱ型单纯疱疹病毒复制的抑制作用

作者在细胞培养中发现田基黄对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)的复制有明显的抑制作用。它对 Vero-E6细胞的无毒浓度为7.5mg/ml(即相当于每毫升7.5mg 生药),最小有效抑制 HSV-2复制的浓度为2.5mg/ml。抑制指数[即病毒时照的滴度(对数)减去药物处理过的病毒滴度(对数)]为3.25,抑制明显。有效浓度的田基黄(2.5mg/ml)在细胞外对 HSV-2无直接灭活作用。HSV-2在复制周期中的早期即病毒的吸附或穿入阶段对田基黄敏感。此药在2.5mg/ml 的浓度下,抗 HSV-2的作用不亚于环胞苷(5ug/ml)或疱疹净(100ug/ml).因此,提出了用此药预防宫颈癌或与无环乌苷合用治疗HSV-2感染的可能性。     

大黄提取液体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型作用的实验研究

目的:研究大黄提取液在体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用。方法:用hela细胞做体外培养实验,以不同剂量的大黄提取液作用于病毒复制周期的各个阶段,以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变(CPE)、MTT染色细胞保护率(MTT法)作为评价指标,判断药效,对大黄提取液抗HSV-Ⅱ作用进行评价。结果:大黄提取液对hela细胞的增殖无明显作用,且对hela细胞毒性极低,对病毒有直接灭活作用;可干扰病毒向宿主细胞吸附,还可有效抑制病毒复制。结论:大黄提取液在体外对HSV-Ⅱ有显著的抑制和杀伤作用,并且有效抑制病毒复制。     

荔枝核提取物体外抗病毒活性及其机制研究

目的:研究荔枝核提取物(LSE)的体外抗病毒活性,并初步研究其抗病毒的作用机制.方法:采用细胞病变效应(CPE)减少法和MTY法检测LSE对柯萨奇B3病毒(Cox B3)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1和HSV-2)的体外抗病毒活性,并通过观察直接杀病毒作用、对宿主细胞的保护作用、抑制病毒吸附作用以及在病毒感染后不同时间加入实验,对LSE抑制HSV-1的作用机制进行探讨.结果:LSE有一定的细胞毒性,它不能抑制Cox B3在宿主细胞内的增殖,但对RSV、HSV-1和HSV-2表现出明显的浓度依赖性抗病毒活性,其IC<,50>值分别为32.3,27.9和20.4μg/mL.该提取物预培养Vero细胞后不能保护细胞免受HSV-1感染,但它对HSV-1有直接的灭活作用.LSE可影响HSV-1对Vero细胞的吸附,当浓度为31.3μg/mL时对病毒吸附的抑制率为51%.ISE对HSV-1在细胞内的增殖表现出很强的抑制活性.结论:LSE具有较强的体外抗RSV和HSV活性,它对HSV的抑制作用可能通过多种方式和途径实现.     

热毒宁注射液抗CBV3及ECHO11的体外实验研究

目的 探讨热毒宁注射液体外抗肠道病毒(EV)的效果.方法 采用细胞培养技术观察不同浓度热毒宁、炎琥宁、利巴韦林及不同给药方式下EV攻击后各组的细胞病变效应(CPE),并采用MTT法测定及蚀斑抑制实验,计算药物的TC50、TI及蚀斑抑制率.判断3种药物的抗病毒活性并进行前两者病毒吸附前后的药效比较.结果 ①热毒宁、炎琥宁、利巴韦林的TC50分别为52.0、2.0及2.0 mg/mL.热毒宁在1.3 mg/mL时即有抑制CBV3和ECH011的活性,且与药物浓度成正相关;炎琥宁、利巴韦林分别在0.4～1.2 mg/mL及1.0～1.5 mg/mL之间有抑制CBV3和ECHO11的活性.②26.0 mg/mL热毒宁对CBV3及ECHO11蚀斑抑制率分别为79.8％及88.6％.0.8 mg/mL炎琥宁为67.0％及76.6％.1.5 mg/mL利巴韦林为44.2％及41.9％.③热毒宁在病毒吸附前用药蚀斑抑制率高于吸附后用药(P<0.05),炎琥宁的差异则不显著(P>0.05).结论 3种药物均有体外抗CBV3及ECHO11的作用,但热毒宁的病毒抑制活性优于炎琥宁和利巴韦林,且毒性最小.热毒宁在病毒吸附前用药抗病毒活性优于病毒吸附后,有一定预防作用.     

扇贝糖胺聚糖对Ⅰ型单纯疱疹病毒的抑制作用

目的 研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)不同浓度及不同作用时间对Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)的抑制作用.方法 以HSV-Ⅰ SM44株感染非洲绿猴肾细胞(Vero细胞),观察病毒感染后的细胞变性反应(CPE),并检测不同浓度SS-GAG及不同作用时间对HSV-Ⅰ复制的抑制作用.结果 与病毒对照组相比,SS-GAG各浓度组(100、50、25 mg/L)能有效保护经HSV-Ⅰ感染的Vero细胞,使细胞活性增强(F=27.54,P<0.01);并减弱HSV-Ⅰ导致的病变效应,抑制病毒的复制,并且随着药物作用时间的延长,药物抗病毒效应逐渐增加, 最高达88.64%.结论 SS-GAG体外具有明显的抗HSV-1病毒作用.     

荔枝核黄酮体外抗单纯疱疹病毒的作用

目的:探讨荔枝核黄酮类提取物(FLC)体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用。方法:以阿昔洛韦为阳性药物对照,以不同剂量的荔枝核黄酮类提取物分别作用于HSV-1病毒复制周期的各个环节分成3个实验组,以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变效应(CPE)、MTT染色细胞存活率(MTT法)作为评价指标,判断的FLC抗病毒效果。结果:FLC对HEp-2细胞的半数细胞毒浓度(TC50)为239.25 mg/L,FLC对HSV-1病毒有直接杀伤作用和抗HSV-1生物合成作用,其直接杀伤HSV-1的半数有效浓度(IC50)为32.76 mg/L,治疗指数(TI)为7.30,抗HSV-1生物合成作用的半数有效浓度(IC50)为12.72 mg/L,治疗指数(TI)为18.81。结论:荔枝核黄酮类化合物在HEp-2细胞中对单纯疱疹病毒1型有明显抑制作用。     

猪脾细胞干扰素在细胞中对疱疹病毒的抑制作用

目的:体外评价猪脾细胞干扰素抗疱疹病毒的活性,为疱疹病毒感染寻找新的治疗手段。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率和病毒抑制率来评价猪脾细胞干扰素体外对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和2型(HSV-2)的抑制作用。结果:猪脾细胞干扰素对HeLa细胞的半数毒性浓度(TC50)为535.3 IU/ml,对HSV-1和HSV-2的半数有效浓度(IC50)分别为24.6×103IU/L和25.9×103IU/L,治疗指数(TI)为21.8和20.7;其抗病毒效果与人白细胞干扰素及喷昔洛韦一致。结论:猪脾细胞干扰素具有很好的体外抗疱疹病毒作用。     

红树林淡紫拟青霉胞外多糖体外抗HSV-1 的实验研究

目的 探讨红树林淡紫拟青霉胞外多糖体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-1）感染的活性,为开 发新型抗病毒药物提供实验基础。方法 以Vero 细胞为病毒感染靶细胞,以不同浓度淡紫拟青霉胞外多糖 作用于HSV-1 感染的各个阶段,以细胞病变程度测定病毒半数感染量,MTT 法检测淡紫拟青霉胞外多糖对 Vero 细胞的毒性作用、对HSV-1 的直接灭活作用、对病毒吸附和生物合成的影响。结果 淡紫拟青霉胞 外多糖对Vero 细胞的半数有毒浓度（CC50）为1 724.2μg/ml,该多糖浓度<900μg/ml 时,细胞存活率仍> 90%,且对细胞无增殖作用;在25 ～ 1 000μg/ml 浓度范围内,该多糖可在一定程度上抑制病毒吸附,并表 现出一定的量效关系,半数抑制浓度（IC50）为650.7μg/ml ;该多糖还具有抑制HSV-1 生物合成的作用, 其IC50 为547.7μg/ml,在25 ～ 1 000μg/ml 浓度范围内,抑制率与药物浓度呈量效关系,未发现该多糖对 HSV-1 有直接灭活作用。结论 淡紫拟青霉胞外多糖对Vero 细胞毒性较小,是一种非常安全的多糖;该多 糖具有一定的抗病毒作用,在一定浓度范围内可抑制HSV-1 吸附和生物合成,且表现出一定的量效关系。     

邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的活性研究

摘要：目的研究邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白（3-Hydroxyphthalic anhydride-modified ovalbumin, HP-OVA）体外对抗单纯
疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）的活性。方法采用化学修饰的方法将3-羟基-邻苯二甲酸酐（HP）修饰卵清蛋白（OVA）,合成酸酐
修饰蛋白HP-OVA;选用HSV-2 333病毒株及非洲绿猴肾细胞（Vero 细胞）靶细胞,采用MTT比色法检测HP-OVA的体外
抗HSV-2病毒活性及其对Vero细胞的体外细胞毒性;镜检观察HP-OVA对17株阴道收集的乳酸杆菌的抑菌作用。结果
酸酐修饰卵清蛋白HP-OVA对HSV-2病毒具有明显抑制作用,其IC50为23.56±8.33 μg/ml,且其对病毒作用靶细胞毒性较
低,CC50>1 mg/ml,对17株阴道乳酸杆菌均无明显抑制作用,MIC>1 mg/ml。结论酸酐修饰蛋白HP-OVA体外有较好的
抗HSV-2病毒的活性,有望被开发为预防性传播性疾病的候选杀微生物剂。     

紫草多糖抗疱疹病毒地方株实验研究

作者从11名树枝状角膜炎患者中,分离出可疑疱疹病毒6株,经鉴定为单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ),用100μg/ml的紫草多糖维持液对该病毒进行敏感性试验,其抑病毒指数为3—5,证明紫草多糖有抗疱疹病毒地方株的作用。     

藏药甘青乌头生物碱抗单纯疱疹病毒Ⅱ型体内外作用

目的探讨藏药甘青乌头脂溶性生物碱（ALA）和水溶性生物碱（AWA）抗单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）的作用和机制。方法四甲基偶氮唑蓝法测定细胞毒性,细胞病变作用法和蚀斑法测定甘青乌头生物碱体外抗HSV-2活性,以半数有效浓度和治疗指数为评价指标;荧光定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）和蚀斑法考察ALA和AWA体外抗HSV-2作用机制。用HSV-2建立小鼠脑炎模型,对AWA体内抗HSV-2的活性进行评价。结果 ALA和AWA对Vero细胞的半数中毒浓度分别为3.57和7.87mg/mL。ALA和AWA半数有效质量浓度分别为4.99和2.81 mg/mL,治疗指数分别为0.72和2.80。ALA和AWA均能直接灭活HSV-2,能够显著抑制HSV-2的感染性。ALA对吸附到非洲绿猴肾细胞的HSV-2没有抑制作用,能微弱抑制HSV-2大分子的增殖,对HSV-2 DNA的复制没有作用。AWA能够抑制HSV-2吸附,抑制HSV-2大分子的增殖,抑制HSV-2 DNA的合成,抑制倍数达10~2。AWA对小鼠的半数中毒质量浓度为0.28mg/kg。AWA延长了小鼠的平均存活时间,对小鼠的死亡显示出10%的保护率。结论 AWA抗HSV-2的活性大于ALA,ALA主要通过直接灭活HSV-2,AWA通过抑制HSV-2复制循环的各个环节起作用。     

知母宁抗乙肝病毒作用的实验研究

目的 观察知母宁抗乙肝病毒的作用.方法 观察不同浓度知母宁对体外培养的2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用及对乙肝模型鸭DHBV-DNA的影响.结果 知母宁浓度为4mg/ml时对2.2.15细胞分泌HBeAg有明显的抑制作用;以200mg/kg治疗乙肝模型鸭10d后DHBV-DNA水平明显降低.结论 知母宁有抗乙肝病毒的作用,其机制可能与抑制HBV-DNA的复制有关.     

rhIFNα2a、IFNα2b和IFNα1b、IFNα1b突变体的抗病毒效应的对比分析

目的 进一步研究不同亚型不同品牌基因工程干扰素的抗病毒效应。方法 采用微量细胞病毒（CPE）抑制法进行抗病毒试验。结果 不同品牌IFNα2a或IFNα2b500、50、5IU／ml在Vero细胞上分别可抗1000、100、10TCID50的I型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染细胞;500、50、5IU／ml IFNα1b或IFNα1b突变体,在Vero细胞上分别也可抗8、4、2TCID50的I型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染细胞。结论 进口和国产不同品牌的IFNα2a或IFNα2b对上述2种病毒具有同等抗病毒作用。IFNα1b突变体抗病毒效果和IFNα1b无明显差别。     

荔枝核黄酮类化合物对小鼠Ⅰ型单纯疱疹病毒性脑炎的作用及机制

目的 探讨荔枝核黄酮类化合物(FLCS)对体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)的作用及其可能机制,进一步验证该药对小鼠病毒性脑炎的治疗效果,从而为HSV-1感染的治疗提供新的手段.方法 采用微量细胞培养法和MTT比色法观察FLCS对HSV-1感染细胞的保护作用,通过检测细胞病变效应(CPE)以及病毒抑制率确定该药体外抗病毒活性.进一步利用小鼠病毒性脑炎模型,设计治疗方案(FLCS 3个剂量组,疗程5 d),观察小鼠生存率、平均存活时间、组织中病毒滴度,评价FLCS对小鼠病毒性脑炎的治疗作用.结果 FLCS不仅对HSV-1有直接灭活作用,而且还可阻止HSV-1的生物合成,表现为各剂量组FLCS通过不同方式和病毒作用后,HSV-1感染细胞的PE则随药物浓度的增加而减少,病毒抑制率明显升高.FLCS对HSV-1直接灭活作用和抑制生物合成作用的细胞半数抑制有效浓度(IC50)分别为32.76μg/mL和12.72μg/mL,相应作用方式的治疗指数(TI)分别为7.3和18.8.但是FLCS不能阻止HSV-1吸附细胞,表现为各剂量组FLCS作用细胞后,HSV-1再感染细胞,均出现典型CPE.对于小鼠来说,其体征大多数都会从厌食、呆滞以及嗜睡等症状,逐渐转变为颤抖、抖毛、背弓、抽搐、打转、体重下降等神经系统感染症状,直至死亡,FLCS治疗组小鼠组织病变程度减轻.结论 FLCS虽不能阻止病毒吸附与穿入易感细胞,但能直接杀灭病毒以及抑制HSV-1的生物合成或(和)以后环节发挥其抗病毒作用.FLCS能降低HSV-1感染小鼠死亡率,延长平均生存期,加快组织中病毒的清除,缓解小鼠脑炎症状.     

微量元素硒体外抗单纯疱疹病毒1型活性的初步研究

初步研究微量元素硒体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的活性及可能的机制。方法以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定硒化合物SeO2的最终作用的质量浓度和采用终点滴定法测定HSV-1的感染滴度,并通过观察细胞病变效应和细胞凋亡情况初步研究硒化合物SeO2体外抗HSV-1的活性。结果当SeO2药物质量浓度为0.382mg.L-1时,SeO2能明显地抑制病毒感染Vero细胞病变(CPE)以及促进细胞凋亡,其作用具有浓度依赖性;当SeO2药物质量浓度超过2.034mg.L-1时,细胞存活率下降。结论微量元素硒具有体外抗HSV-1的活性,且可通过抑制细胞病变和促进细胞凋亡而发挥作用。     

板蓝根体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型作用

目的探讨板蓝根5个化学部位体外抗单纯疱疹病毒型(HSV-Ⅰ)的活性及作用机制。方法利用Hep-2细胞体外培养系统,通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,测定板蓝根不同化学部位抑制HSV-Ⅰ对Hep-2细胞感染的作用;以治疗指数(TI)为评价指标,比较各部位抗病毒活性强弱。结果板蓝根各部位均有抑制HSV-Ⅰ生物合成作用,其中部位活性最强,TI为8.2;部位对HSV-Ⅰ有直接灭活作用;各部位均不能阻止HSV-Ⅰ侵入细胞。结论板蓝根在体外主要通过抑制生物合成而发挥抗HSV-Ⅰ作用。     

钝顶螺旋藻多糖抗单纯疱疹病毒2型的作用

 【目的】探讨钝顶螺旋藻多糖(PSP)抗单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的作用及可能机制,为进一步开发该药提供理论依据。【方法】实验选用HSV-2标准株(333株),以不同剂量的PSP作用于HSV-2复制周期的不同阶段,终点以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变效应(CPE)、MTT染色细胞保护率(MTT法)及荧光定量PCR(FQ-PCR)作为评价手段,判断PSP的抗病毒效果。【结果】PSP对Vero细胞毒性极低(TC50为1750μg/mL),对HSV-2无直接灭活作用,可抑制病毒吸附和感染细胞内病毒的复制,其中50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL浓度的PSP对病毒复制的抑制率分别为63.94%、81.41%、85.63%;FQ-PCR结果显示随着PSP浓度及作用时间的增加,PSP对HSV-2DNA的抑制作用明显增强,具有良好的剂量和时效关系。【结论】PSP在体外具显著的抗HSV-2病毒作用,此作用发生在病毒吸附、病毒基因复制等多个环节上。     

钝顶螺旋藻多糖抗单纯疱疹病毒2型的作用

【目的】探讨钝顶螺旋藻多糖（PSP）抗单纯疱疹病毒2型（HSV-2）的作用及可能机制,为进一步开发该药提供理论依据。【方法】实验选用HSV-2标准株（333株）,以不同剂量的PSP作用于HSV-2复制周期的不同阶段,终点以病毒半数感染量（TCID50）、细胞病变效应（CPE）、MTT染色细胞保护率（MTT法）及荧光定量PCR（FQ-PCR）作为评价手段,判断PSP的抗病毒效果。【结果】PSP对Vero细胞毒性极低（TC50为1750μg/mL）,对HSV-2无直接灭活作用,可抑制病毒吸附和感染细胞内病毒的复制,其中50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL浓度的PSP对病毒复制的抑制率分别为63.94%、81.41%、85.63%;FQ-PCR结果显示随着PSP浓度及作用时间的增加,PSP对HSV-2DNA的抑制作用明显增强,具有良好的剂量和时效关系。【结论】PSP在体外具显著的抗HSV-2病毒作用,此作用发生在病毒吸附、病毒基因复制等多个环节上。     

穿心莲水提取物的抗Ⅰ型单纯疱疹病毒作用

目的观察穿心莲水提取物体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)的作用。方法以无环鸟苷(ACV)为阳性对照,将不同稀释浓度的穿心莲水提取物在兔肾细胞上进行治疗、预防及中和实验,通过观察细胞病变(CPE),观察穿心莲水提取物抗HSV-Ⅰ的作用效果。结果穿心莲水提取物半数毒性浓度(TC50)为2.50g/L,有效抑制浓度为0.63g/L,对Ⅰ型疱疹病毒的感染有抑制病毒生长和对病毒颗粒有直接杀伤作用。结论穿心莲水提取物体外有明显的抗Ⅰ型疱疹病毒的作用。     

黄芩茎叶活性部位抗病毒作用的研究

目的：研究黄苓茎叶活性部位（SLSBGAF）的抗病毒作用。方法：体外细胞培养观察1：2～1：256不同稀释度SLSBGAF对柯萨奇B族病毒（CoxB3、CoxB4、Cox B5）、流感病毒、副流感病毒、腺病毒（Adv3、Adv7）、呼吸道合胞病毒（RSV）．疱疹病毒（HSV-1、HSV-2）等10种病毒致细胞病变（CPE）的抑制作用；流感病毒感染小鼠模型，分别观察SLSBGAF对小鼠肺指数、间接荧光染色观察肺内病毒增殖的影响，并以小鼠存活时间和死亡率为指标观察药物的保护作用。结果：SISBGAF对CoxB3等10种病毒所致细胞病变有明显的抑制作用，有效浓度为0．20～1．56mg／mL，IC50值为0．08～0．34mg／mL，治疗指数（TI）值分别为4和8；sLSBGAF（54．3，108．5，217mg／kg）灌胃给药对流感病毒引起的小鼠肺炎有治疗作用，肺指数和病毒的肺内增殖低于对照组，并呈一定的量效相关性；此外对流感病毒所致小鼠死亡有不同程度的保护作用，217mg／kg剂量组作用明显，死亡保护率为40％，生命延长率为39．08％。结论：SLSBGAF可用于流感病毒、副流感病毒、柯萨奇病毒等相关感染性疾病的预防和治疗。