峨参提取物抗肿瘤活性及对细胞凋亡机制研究

目的:探讨5-(3-甲氧基-1-丙烯)-1,3-苯并二氧杂茂(13号)和鬼臼苦素(15号)抗Hep G2、A549、Hela及MG-63 4种肿瘤细胞活性和13号、15号对4种肿瘤细胞周期及凋亡的影响,以及对Bcl-2、Bax作用。方法:采用MTT比色法检测不同浓度13号、15号对肿瘤细胞增殖抑制作用;采用Elisa试剂盒检测13号、15号对肿瘤细胞Bcl-2、Bax作用及Bcl-2、Bax的变化;采用流式细胞仪检测细胞周期进程及细胞凋亡。结果:13号、15号对4种肿瘤细胞均有增殖抑制作用,且随着药物浓度增加,其抑制率越高,呈药物浓度依赖性。通过ELISA试剂盒检测表明,13号与空白对照组比较,Hela、MG-63细胞48h后Bcl-2/Bax比值明显降低,且有显著性差异(P0.05);15号与空白对照组比较,Hep G2、MG-63及A549细胞的Bcl-2/Bax比值明显降低,且有显著性差异(P0.05)。通过流式细胞术检测13号、15号对4种肿瘤细胞周期进程及凋亡表明,随着作用时间的增加,G0/G1期细胞百分数逐渐降低,G2/M期细胞百分数变化不大,而S期细胞百分数逐渐上升,且细胞亚二倍体凋亡峰随着时间的增加而增多,阻滞4种肿瘤细胞于S期。结论:13号、15号具有明显抗肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡的作用。     

峨参内酯对4种肿瘤细胞的抑制作用及机制研究

目的:探讨峨参内酯对4种肿瘤细胞凋亡的影响及其相关机制研究。方法:采用流式细胞仪检测峨参内酯对肿瘤细胞周期进程的影响及对细胞凋亡的观察;阳性对照组采用紫杉醇处理、峨参内酯组采用峨参内酯处理,空白对照组采用0.1%DMSO处理;采用ELISA试剂盒检测峨参内酯对4种肿瘤细胞Bcl-2、Bax影响;采用western blot法检测峨参内酯对STAT3、P53、NF-κB蛋白表达。结果:峨参内酯对4种肿瘤细胞周期进程及凋亡,随着作用时间的增加,G0/G1期细胞百分数逐渐降低,G2/M期细胞百分数变化不大,而S期细胞百分数逐渐上升;阳性对照组、峨参内酯组与空白对照组比较,Bcl-2/Bax比值明显降低,且有显著性差异(P0.05),峨参内酯组比值显著低于阳性对照组,且有显著性差异(P0.05);阳性对照组和峨参内酯组与空白对照组比较,STAT3和NF-κBP65表达明显降低,而P53表达明显上升。结论:峨参内酯阻滞4种肿瘤细胞于S期且具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,其机制是通过上调Bax、P53表达,下调Bcl-2、STAT3、NF-κBP65表达而实现的。     

青蒿琥酯对人结肠癌细胞HCT-8细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:研究青蒿琥酯对人结肠癌HCT-8细胞凋亡和细胞周期的影响.方法:实验分为10,20,30 μmol·L-1青蒿琥酯处理组,阴性对照组和空白对照组.采用透射电镜和流式细胞仪检测青蒿琥酯对HCT-8细胞的凋亡诱导效果;采用流式细胞仪分析青蒿琥酯对HCT-8细胞周期的影响;采用Western blot印迹法检测青蒿琥酯对细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响.结果:经青蒿琥酯处理后,电镜下可见HCT-8细胞膜皱缩、染色质凝聚、核碎裂、凋亡小体形成.10,20,30 μmol·L-1青蒿琥酯处理组凋亡率分别为17.1％±3.8％,29.5％±5.1％,41.4％±5.8％,显著高于空白对照组5.1％±1.4％.P＜0.05.在20 μmol· L-1青蒿琥酯处理组,HCT-8细胞G0/G1期所占比例随着药物作用时间延长而增加,S期与G2/M期细胞所占比例则下降.10,20,30 μmol·L -1青蒿琥酯处理组Bax蛋白表达水平分别为0.20±0.03,0.40±0.05和0.50±0.08显著高于空白对照组(0.06 ±0.02),P＜0.05;Bcl-2蛋白表达水平未见明显变化,Bcl-2/Bax呈下降趋势.结论:青蒿琥酯可以抑制人结肠癌细胞HCT-8增殖,诱导细胞凋亡,其诱导凋亡作用机制可能与其阻滞结肠癌细胞周期和上调促癌基因Bax表达有关.     

康莱特注射液对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的观察康莱特注射液对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期人乳腺癌MCF-7细胞,分为对照组和康莱特不同浓度组(10、20、40μL/mL)。RPMI-1640培养基培养24 h后药物处理,采用MTT法检测康莱特注射液对MCF-7细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,Hochest荧光染色法检测细胞核变化,ELISA及Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果康莱特注射液作用12、24、48 h对MCF-7细胞增殖均有显著的抑制作用(P0.05,P0.01);与对照组比较,康莱特注射液作用48 h后G1/G0、G2/M期细胞比例增加(P0.001,P0.01),S期细胞比例下降(P0.01),细胞凋亡率升高(P0.05,P0.001),Bcl-2蛋白表达明显降低、Bax蛋白表达明显升高(P0.01,P0.001)。结论康莱特注射液能抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,其机制与降低Bcl-2蛋白表达和增加Bax蛋白活性有关。     

熊果酸诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的作用及机制

目的研究熊果酸(Ursolicacid,UA)抑制人食管癌Eca-109细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用及机制。方法MTT比色法检测熊果酸对Eca-109细胞的增殖抑制作用;透射电镜观察经熊果酸处理后Eca-109细胞超微结构的改变;流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡率;Westernblot法检测P27kip1蛋白、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果20～50μmol/L熊果酸对Eca-109细胞具有显著的抑制作用(P<0.01);电镜下,18.32～36.65μmol/L熊果酸处理过的Eca-109细胞可见典型的凋亡形态及坏死形态;流式细胞检测显示细胞凋亡率及G0/G1期细胞随着熊果酸浓度的增加而增多,S期细胞逐渐减少;Westernblot检测结果提示熊果酸能使Bcl-2表达下降而Bax、P27kip1增加。结论熊果酸对人食管癌细胞系Eca-109具有显著的增殖抑制、诱导细胞凋亡作用。其作用与提高P27kip1蛋白的表达,将细胞阻滞在G0/G1期,下调Bcl-2的表达和增加Bax的表达有关。     

紫草素诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡及其机制的研究

目的:研究紫草素诱导体外培养的子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡作用及其机制。方法:流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率变化;免疫组化法(SABC法)检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:紫草素可诱导细胞凋亡,改变细胞周期分布,多数细胞周期阻滞于G1期,细胞凋亡率差异有统计学意义(P<0.05);紫草素可上调Bax和下调Bcl-2基因蛋白的表达,与空白组对照差异有统计学意义(P<0.05)。结论:紫草素能够诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡,其凋亡机制可能与促进Ishikawa细胞中Bax上调,Bcl-2下调相关。     

胃复春胶囊通过调节Bcl-2/Bax号通路诱导胃癌细胞凋亡

目的 研究胃复春胶囊对人胃癌细胞的作用,为胃复春胶囊在抗消化道肿瘤方面的应用提供依据。方法 NCI-N87人胃癌细胞与不同浓度的胃复春胶囊提取物共孵育,采用Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞活力;流式细胞术Annexin V/PI双染色检测细胞凋亡及细胞周期;Western blot法检测与细胞凋亡相关的蛋白表达情况。结果 胃复春胶囊提取物能够剂量和时间依赖地抑制NCI-N87细胞生长,诱导NCI-N87细胞产生凋亡,且使细胞周期阻滞在G0/G1期;经过胃复春胶囊提取物处理24 h后,实验组NCI-N87细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-w表达量下调;促凋亡蛋白Bax、Bad表达量上调,呈剂量依赖性。结论 胃复春胶囊提取物能抑制胃癌细胞的增殖、阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡,其作用机制推测与Bcl-2/Bax信号通路有关。文章为临床上胃复春胶囊治疗胃癌提供了依据。     

冬凌草甲素对骨肉瘤细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的机制研究

目的研究冬凌草甲素对人骨肉瘤细胞株MG-63细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的分子机制。方法以流式细胞仪检测细胞周期变化;Western印迹检测CyclinD1、P21以及凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2和Bax表达的变化;TRAP-PCR-ELISA方法检测MG-63细胞端粒酶活性的变化;Z-IETD-fmk阻断试验检测Caspase-8阻断前后,冬凌草甲素对MG-63细胞凋亡影响的变化。结果冬凌草甲素增加G0/G1期MG-63细胞百分率,降低S期MG-63细胞百分率;浓度依赖性抑制MG-63细胞的CyclinD1、Survivin和Bcl-2蛋白表达,上调P21和Bax蛋白表达;浓度依赖性抑制MG-63细胞端粒酶的活性;Z-IETD-fmk阻断Caspase-8活性后,能部分逆转和减弱冬凌草甲素对MG-63细胞的凋亡诱导作用。结论冬凌草甲素通过影响细胞周期调节蛋白、阻断细胞周期G1/S期"稽查点";抑制Survivin、Bcl-2,上调Bax;抑制端粒酶活性以及活化Caspase-8等途径抑制MG-63细胞增殖及诱导MG-63细胞凋亡。     

赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤细胞凋亡的影响

目的探讨赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤生长及肿瘤细胞凋亡的影响及其机制。方法60只健康昆明小鼠,随机分5组,分别为模型组,环磷酰胺(100mg/kg)组,赤芍总苷(240、120mg/kg)组,环磷酰胺(100mg/kg) 赤芍总苷(240mg/kg)组。复制小鼠HepA肝癌皮下移植模型后,第2天ig给药,连续给药7d,第8天处死,取肿瘤组织,计算抑瘤率,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率和分析细胞周期,以及免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果赤芍总苷高、低剂量明显抑制HepA肝癌小鼠肿瘤的生长;肿瘤细胞凋亡指数增加;抑制肿瘤细胞G0/G1期比例,向S期细胞转化,凋亡率增高;下调肿瘤细胞中Bcl-2蛋白的表达,同时明显提高肿瘤细胞中Bax蛋白的表达。结论赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤生长有明显抑制作用,并诱导肿瘤细胞凋亡,其主要机制与调节Bcl-2和Bax蛋白表达有关。     

熊果酸诱导HL-60细胞凋亡机制的探讨

目的：本实验拟用熊果酸干预处理人急性早幼粒白血病HL-60细胞,体外培养实验,证实其对HL-60细胞的增殖抑制和促进诱导凋亡作用,并通过免疫细胞化学方法检测bcl-2,survivin在熊果酸与该细胞株作用后表达,探讨熊果酸诱导HL-60细胞调亡可能的分子机制。方法：荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞周期相分布及细胞凋亡率：琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA;免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Survivin蛋白。结果：荧光显微镜下观察,80gmol／LUA作用24h的HL一60细胞可看到典型的细胞凋亡形态学变化;40umol／L、80umol／LuA可使G0／G1期细胞增多,出现G0／G1期阻滞,S期和G2／M期细胞数减少,凋亡细胞峰（sub-G1）及凋亡率逐渐增高,Bcl-2、Survivin蛋白表达降低,当UA浓度为40gmol／L时,P〈0．01,有显著性差异。结论：UA呈浓度和时间依赖性抑制HL．60细胞增殖,诱导其凋亡机制可能与下调Bcl-2、Survivin蛋白表达有关。     

4-色酮类和4-色满酮类化合物生物活性研究概况

 目的　综述4-色酮类和 4-色满酮类化合物生物活性的研究概况。方法　以国内外有代表性的论文为依据 ,进行分析、整理和归纳。结果与结论 4-色酮类和4-色满酮类化合物具有抗炎和抗变态反应、抗血小板聚集、抗癌和抗精神病等生物活性 ,随着人们对这两类化合物研究的深入 ,将会有更多的有关新药被开发。     

4-氧和4-羟四甲基哌啶氮氧自由基及衍生物抗脂质过氧化作用研究

 目的:对6种四甲基哌啶氮氧自由基及衍生物(4-TEMPO)抗脂质过氧化作用进行了实验研究,为其进一步研究及应用于临床作为抗自由基损伤药物提供依据。方法:用Fe²⁺-VitC引发大鼠肝细胞膜、心肌细胞膜、肝线粒体的脂质过氧化,通过TAB比色法测定丙二醛(MDA)含量观测了4-TEMPO抗脂质过氧化作用。结果:OTMPO(4-氧-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧自由基)、HTMPO(4-羟-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧自由基)、HTMPOH(4-羟-2,2,6,6-四甲基羟哌啶)、OTMPOH(4-氧-2,2,6,6-四甲基羟哌啶)有较强的剂量依赖性抑制MDA产生的作用,且OTMPOH,HTMPOH较OTMPO,HTMPO作用强,而OTMP(4-氧-2,2,6,6-四甲基哌啶)、HTMP(4-羟-2,2,6,6-四甲基哌啶)无效。结论:4-TEMPO有较明显的对抗脂质过氧化作用,作为一种临床抗自由基引起的脂质过氧化损伤的药物研究及开发利用,可能有广泛的前景。     

Safety of 4-week indirect-moxibustion therapy at CV4 and CV8

PurposeMoxibustion therapy is a commonly used treatment in Oriental medicine. Here, we provide evidence for the safety of long-term moxibustion therapy.Subjectsand design: Forty-five subjects (10 men and 35 women) who complained of chronic fatigue were divided into control (5 men and 15 women) and experimental groups (5 men and 20 women) in a randomized double-blind setting. The experimental group was treated with moxibustion to CV4 and CV8 for 4 weeks (administered three times per week); the control group was exposed to simulated burning of moxibustion. Complete blood counts, blood chemistry, and urinalysis results were analyzed before and after each trial.ResultsThe absolute and relative number of peripheral blood cells did not differ between the pre- and posttreatment measurements of either group. No significant changes in blood chemistry or urinalysis data were observed in either group.ConclusionsThese results suggest that indirect moxibustion has no effect on blood chemistry or urine and is safe for clinical use. These data could be used as reference data for further moxibustion studies.     

探索游戏疗法在儿童自闭症康复中的应用

对自闭症儿童的治疗一直是自闭症研究的重要课题之一,也是该领域研究的热点和难点.文章通过对自闭症儿童的异常行为表现及游戏疗法对儿童发展的影响进行分析,探讨游戏疗法对自闭症儿童康复训练的重要性.通过游戏能够满足儿童的愿望、使受压抑的情绪、冲动得到发泄,以促进自闭症儿童认知、语言、情感等方面的健康发展,并还能增加患儿对康复治疗的兴趣,发挥主动性,积极配合治疗和训练.     

验案4则

1 阳虚外感 张某,女,59岁,1999年4月12日初诊。患者清明节外出受凉,出现怕冷自汗、周身疲倦、头晕、口苦、口渴不欲饮等症状。自服百服宁、VC银翘片、炖服红参等5天,症状不减而就诊。察其舌淡红、苔中薄腻,脉沉。此乃太阳证未解,寒邪传人少阳经脉,居留于半表半里。治以发表解肌,和解少     

验案4则

蓝某,男,40岁,马来西亚人,1999年7月21日初诊。数月来夜间(7pm-6am)恶寒发热,汗出热退。伴身倦,左手腕关节肿胀疼痛,双下肢可见散在暗红色结节、压痛,心烦易怒,迭进中西药(不详),诸症不减。诊见:面黄,舌淡、苔薄,脉弦滑,乙肝病毒标志物阳性,血沉70mm/1h。     

心包经郄门穴及其旁开非经穴电特性初探

目的:探测郄门穴与非经穴体内电特性,验证经穴体内电信号探测的可行性,以期能为今后经穴体内电特性研究及临床应用提供理论依据。方法:采用可在体使用的同心圆电极针及与其相配套的函数发生器和示波器探测13名健康志愿者皮下5 mm、15 mm、25 mm郄门穴与非经穴的电信号大小并对其进行比较。结果:13例志愿者在皮下5 mm探测均出现较清晰电信号波形,5例志愿者在皮下15 mm探测出现信号,随着探测深度的增加电压幅值变小。在皮下5 mm、15 mm郄门穴及非经穴电压幅值比较尚未发现显著差异(P>0.05)。结论:初步验证了经穴体内电信号探测的可行性,为经穴体内电特性进一步研究提供了新方法。     

六种苦豆子生物碱对炎症介质白三烯的影响

目的：研究苦参碱(matrine MT)、氧化苦参碱(oxymatrine OMT)、槐果碱(sophocarpine SC)、氧化槐果碱(oxysophocarpine OSC)、槐定碱(sophoridine SRI)、氧化槐定碱(oxysophoridine OSRI)6种苦豆子类生物碱对炎症介质白三烯巴和白三烯134的影响，来研究其抗炎作用机制。方法：以大鼠腹腔白细胞为材料，采用高效液相色谱法(HPLC)测定白细胞内白三烯C4和白三烯B4水平。结果：SRI对LTC4的生物合成影响很小，但对LTB4的生物合成有明显的抑制作用。其余5种生物碱对LTC4和LTB4的生物合成均有明显的抑制作用，且有良好的剂量-效应关系。结论：6种苦豆子生物碱对白三烯(LTC4和LTB4)的生物合成均具有不同程度的抑制作用，这可能是它们抗炎作用的机制之一。