脑缺血再灌流时〔^3H〕—三磷酸肌醇放射活性及突触体游离Ca^2…

研究大鼠脑血再灌流时〔＾３Ｈ〕－ＩＰ３放射活性及突触体（Ｃａ＾２＋）ｉ的变化，结果示缺血１ｍｉｎ就启动了肌醇脂质信使系统，引起〔＾３Ｈ〕－ＩＰ３显著增高，缺血２０ｍｉｎ突触体（Ｃａ＾２＋）ｉ增高，且持续至再灌流７ｄ，磷脂酶Ｃ抑制剂ＰＭＳＦ治疗能显著地抑制突触体（Ｃａ＾２＋）ｉ的升高，减轻海马ＣＡ１区缺血性神经元损伤。     

中长期模拟失重大鼠骨骼肌线粒体钙含量和肌浆网Ca~（2＋）－ATP酶活性变化

为探讨失重对肌肉功能的影响，观察了中长期模拟失重时大鼠骨骼肌细胞内Ｃａ２＋转运功能变化，测定了比目鱼肌、腓肠肌线粒体钙含量和肌浆网（ＳＲ）Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性。结果是悬吊１５、３０ｄ大鼠比目鱼肌和腓肠肌线粒体Ｃａ＋２含量增加，肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性降低，说明中长期模拟失重肌细胞内Ｃａ２＋转运功能发生了改变，这可能是影响肌肉收缩特性的因素之一。     

缺氧对体外培养的猪肺动脉内皮细胞分泌内皮素和细胞内Ca~（2＋）的影响

目的探讨内皮素的释放机制，为研究防治缺氧性肺动脉高压提供新的线索。方法取体外培养的１２－１７代肺动脉内皮细胞，随机分为低氧１２ｈ组和２４ｈ组，每组分别设常氧对照组。低氧组放入３％Ｏ２、５％ＣＯ２的低氧培养箱，对照组放入２１％Ｏ２、５％ＣＯ２的常氧培养箱，分别于１２ｈ和２４ｈ取出检测细胞内Ｃａ２＋和培养液中内皮素含量的变化。结果常氧条件下不同时间培养液中的内皮素含量有所不同，培养２４ｈ组明显高于１２ｈ组。缺氧过程中，１２ｈ组和２４ｈ组的内皮素含量均明显高于各自的对照组。与此同时，细胞内的Ｃａ２＋无论是缺氧１２ｈ组，还是２４ｈ组也都高于对照组。结论细胞内Ｃａ２＋含量的变化可能参与内皮素的释放机制。     

急性兔脑缺血再灌注时ET的变化特征

为探讨急性脑缺血再灌注时血浆内皮素（ET）的变化规律,阻断新西兰白兔脑部血流,造成急性全脑缺血及再灌注实验模型,经放免方法观察了血管内皮素及血栓环素B_2（TXB_2）的动态变化。结果:脑缺血时ET比对照组显著升高,实验后ET渐进性升高;ET与TXB_2有同步性升高趋势,两者的变化显著正相关（r=0.9704）。实验表明血管内皮的缺血性损害和神经组织缺血后的ET合成与释放增加是血浆ET增高的主要原因,其病理过程主要是由缺氧和低灌注引发的。ET合成及释放有赖于血栓素和环化酶的激活,提示TXB_2在内皮依赖性血管舒缩障碍中亦有重要作用,而血浆ET的动态变化可能是经过内皮细胞-血小板-白细胞激活环路完成的。     

高压氧对脑缺血后再灌流大鼠海马组织三磷酸肌醇的作用

目的：研究高压氧（ＨＢＯ）对脑缺血及缺血后再灌流大鼠海马组织三磷酸肌醇（ＩＰ＿３）的作用。方法：实验用ＳＤ大鼠，制作四动脉闭塞脑缺血模型，应用Ａｍｅｒｓｈａｍ公司的ＩＰ＿３测定系统，观察脑缺血１０分钟和３０分钟时与缺血１０分钟后再灌流（不吸氧、吸氧及ＨＢＯ作用）后ＩＰ＿３的改变，并以０．２５ＭＰａ空气作为高压对照。结果：脑缺血后，海马组织中ＩＰ３明显升高，其中缺血１０分钟较３０分钟改变更明显；缺血１０分钟后经不同处理，ＩＰ＿３浓度均明显恢复，其中经常压纯氧和０．２５ＭＰａＨＢＯ处理动物的ＩＰ＿３浓度的恢复不及单纯再灌流８０分钟和０．２５ＭＰａ高压空气作用者明显。结论：ＩＰ＿３在脑缺血早期改变明显，它参与细胞内游离Ｃａ￣（２＋）浓度的调控，但它在ＨＢＯ恢复胞浆内游离Ｃａ￣（２＋）的浓度过程中，未显示有重要作用，且发现氧可能有促进ＩＰ＿３产生的作用。     

Na~＋通道阻滞剂R56868对缺血再灌注心肌Ca~（2＋）负荷过重的影响

采用家兔离休心脏缺血模则，评价Ｎａ￣＋通道阻滞剂Ｒ５６８６５对缺血再灌注心肌的保护作用。药物浓度为０．２５×１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ。结果表明Ｒ５６８６５组心功能恢复程度优于对照组、普蒂洛尔组、维拉帕米组及消黄灵组。在Ｒ５６８６５组中，ＬＶＰ、ＬＶｄｐ／ｄｔｍａｘ和ＣＯ都得到改善，大部分心肌细胞结构及Ｃａ２＋分布趋于常态。说明Ｒ５６８６５具有保护心肌和防止细胞内Ｃａ￣（２＋）负荷过重的作用。     

代谢和代谢产物抑制肌浆网Ca~（2＋）的释放和［~3H］Ryanodine的结合

代谢和代谢产物抑制肌浆网Ｃａ２＋的释放和［３Ｈ］Ｒｙａｎｏｄｉｎｅ的结合肌肉疲劳是指肌肉重复收缩时肌力降低，不能完成某种特定任务而言。能量物质的耗尽、终产物的积累、离子成分的改变或兴奋—收缩偶联的改变，都可能影响肌膜动作电位、Ｔ管电活动、Ｔ管与肌浆网...     

1,25（OH）2D3对人血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子表达的抑制作用

目的探讨1,25（OH）2D3（1,25-dihydroxyvitamin D3）对人主动脉血管平滑肌细胞（human aortic vascular smooth muscle cell,HA-VSMC）果蝇样受体（Toll like receptor 4,TLR4）基因及其下游炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用。方法不同浓度1,25（OH）2D3干预HA-VSMC后,采用实时荧光定量PCR法检测细胞TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mR-NA的表达水平。结果 1,25（OH）2D3在浓度为1-20nmol/L之间抑制TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mRNA水平的表达且具有明显的剂量依赖关系。在浓度为1nmol/L时1,25（OH）2D3下调TLR4和MCP-1mRNA表达的作用最明显,浓度为10nmol/L时,1,25（OH）2D3下调IL-6mRNA表达的作用最明显,浓度为20nmol/L时,1,25（OH）2D3下调IL-8mRNA表达的作用最明显。TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1mRNA表达的最大下调幅度分别为对照组的3.08、2.39、3.19、2.23倍（均P〈0.05）。结论 1,25（OH）2D3通过下调TLR-4信号抑制了人主动脉血管平滑肌细胞的炎症反应。     

大鼠缺血后脑磷脂酶A2,线粒体磷脂含量及线粒体膜流动性的改变

采用高效液要色谱仪及荧光分光光度计等技术测定脑缺血再灌流时脑磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）、脑线粒体磷脂含量及线粒体膜流动性改变，结果发现脑缺血２０ｍｉｎ及再灌流早期ＰＬＡ２的活性显著增强，随着再灌流时间延长，ＰＬＡ２活性明显下降；缺血２０ｍｉｎ再灌注１ｈ组线粒体卵磷脂（ＰＣ）、脑磷脂（ＰＥ）、心磷脂（ＣＬ）含量与流动性降低，提示：线粒体磷脂含量与膜注动性密切相关，ＰＬＡ２在与缺血性脑线粒体功能损伤。     

力竭性游泳对大鼠心肌线粒体基质游离Ca~(2+)及Na~+/Ca~(2+)交换的影响

应用荧光Ｃａ２＋指示剂Ｆｕｒａ－２ＡＭ测定大鼠心肌线粒体基质游离Ｃａ２＋浓度变化，观察到力竭性游泳后心肌线粒体内游离Ｃａ２＋浓度下降（Ｐ＜０．０５），在介质中加０．５μｍｏｌ／　Ｌ　Ｃａ２＋时，表现出摄钙能力（Ｐ＜０．００１），但能力下降（Ｐ＜０．０５），对线粒体外Ｃａ２＋浓度变化的应答敏感性下降。在线粒体负载Ｃａ２＋条件下，Ｎａ＋依赖性Ｃａ２＋释放（Ｎａ＋／Ｃａ２＋交换）能力下降（Ｐ＜０．０５），因此线粒体不能及时反映心肌需能的变化，表现出氧化磷酸化的失调。文中探讨了线粒体Ｃａ２＋转动变化的机制和生理意义。     

缺血再灌流损伤致脊髓传导功能的变化及2氨基膦酸基戊酸的影响

为探讨缺血再灌流损伤脊髓传导功能的变化及２氨基膦酸基戊酸（ＡＰＶ）的影响，１２只家兔随机均分为缺血６０ｍｉ组和缺血６０ｍｉｎ＋ＡＰＶ治疗组，以选择性腰动脉阻断法模拟脊髓缺血再灌流损伤，观测各组在缺血前、缺血时及再灌流时皮层体感诱发电位（ＣＳＥＰ）和运动诱发电位（ＭＥＰ）的变化。     

Ca2+、Mg2+对心肌肌球蛋白ATP酶活性的影响

目的研究Ca2 +、Mg2 +对心肌肌球蛋白ATP酶活性的影响。方法采用一种简便、快速的方法从心肌组织中提取肌球蛋白 ,根据酶反应ATP分解释放的无机磷含量检测Ca2 +、Mg2 +激活肌球蛋白ATP酶的Km值及最大反应速度Vmax,以及不同浓度的Ca2 +、Mg2 +、pH值对肌球蛋白ATP酶活性的影响。 结果Ca2 +、Mg2 +-肌球蛋白ATP酶Km值为 5 .2 7± 2 .1 0mmol、7.0 4± 2 .0 6mmol,Vmax分别为 :1 .1 0± 0 .1 3μmol·mg- 1 ·min- 1 、0 .61 7± 0 .0 9μmol·mg- 1 ·min- 1 ;Ca2 +较Mg2 +具有较大的酶激活能力 (P <0 .0 1 ) ,但Mg2 +的浓度影响着肌球蛋白ATP酶对Ca2 +的敏感性 ,当Mg2 +浓度大于 6mmol/L时 ,酶对Ca2 +的存在无反应 ;不同的pH值 ,对Mg2 +激活的酶反应影响较小。结论Ca2 +、Mg2 +对肌球蛋白ATP酶的作用机理不同 ,Mg2 +是维系肌球蛋白具有酶活性构象所必需 ,而Ca2 +在肌肉收缩过程中可能主要充当的是信号传导功能及调控功能     

白细胞介素-1β转化酶基因在脑缺血再灌注后的表达

为了解白细胞介素－1β转化酶（ICE）基因在脑缺血再灌注后的表达情况，利用沙土鼠全脑缺血再灌注模型研究ICE mRNA在缺血再灌注时的诱导情况和丹参作用前后ICE的蛋白表达情况。结果发现，脑缺血再灌注后1－4天均有ICE mRNA表达；胶质细胞中ICE的表达在缺血再灌注后1－4天逐渐增加；应用丹参预防性干预后ICE的表达明显受到抑制（P＜0．01）。提示ICE可能在脑组织因缺血再灌注而发生的凋亡过程中发挥间接调节作用。     

体外循环中心肌磷脂酶A2的变化及其对心肌细胞膜磷脂的影响

在动物模型上观察体外循环（CPB）缺血再灌注过程中心肌细胞磷脂酶A2（PLA2）的变化规律及其对细胞膜磷脂组份的影响,并评价两种心肌保护方法对心肌细胞膜的保护效果。结果发现,心肌细胞膜总磷脂、卵磷脂、脑磷脂出现降解前先有PLA2的激活;主动脉阻断60min期间,各心肌保护组PLA2I活性、总磷脂、卵磷脂和脑磷脂含量无明显变化;再灌注早期,PLA2活性迅速升高,总磷脂、卵磷脂和脑磷脂含量则迅速减少,均于再灌注30～60min后出现程度不一的恢复;CPB期间,常温体外循环温血停搏液持续灌注PLA2活性、总磷脂、卵磷脂和脑磷脂含量变化幅度较小。提示CPB中心肌细胞膜的损伤可能是PLA2激活的结果,常温体外循环温血停搏液持续灌注对心肌细胞膜的保护效果较佳,但仍需进一步改进。     

糖尿病大鼠胃窦平滑肌细胞内钙离子的变化及意义

目的　探讨糖尿病大鼠胃窦平滑肌细胞内钙离子(Ca2 + )的改变及其意义。方法　 5 0只大鼠随机分为对照组 (n =2 0 )和糖尿病模型组 (n =30 ) ,用链尿佐菌素建立大鼠糖尿病模型 ,3个月后测定胃排空时间 ,并用流式细胞仪测定平滑肌细胞凋亡发生率 ,用激光共聚焦方法测定细胞内Ca2 + 浓度。结果　与对照组大鼠相比 ,模型组大鼠胃排空时间明显延长(P <0 0 1) ,平滑肌细胞凋亡发生率及细胞内Ca2 + 浓度明显增加 (P <0 0 1)。结论　糖尿病大鼠胃窦平滑肌细胞内Ca2 + 增加 ,从而使平滑肌细胞受损 ,平滑肌功能发生相应改变。     

缺氧对大鼠心肌细胞钙通道的影响

目的 :研究缺氧对急性分离的大鼠心肌细胞L型钙通道电活动的影响 ;方法 :运用膜片钳技术的细胞吸附式方式记录心肌细胞L型钙通道的单通道电流 ;结果 :缺氧后 ,心肌细胞L型钙通道平均开放时间由 ( 2 .5 1± 1 .3 8)ms增加到 ( 6.42± 1 .97)ms,平均关闭时间由 ( 42 .83± 1 0 .92 )ms减为 ( 3 0 .3 4± 5 .1 1ms) ;平均开放概率由 0 .0 5 4± 0 .0 1 8变为 0 .2 2 1± 0 .0 2 7;结论 :缺氧后心肌细胞L型钙通道开放时间延长 ,开放概率增大 ,Ca2 +大量内流引起细胞内钙超载也将成为心肌缺氧损伤的机制之一     

肝细胞内糖原拮抗肝脏缺血—再灌注损伤及相关机制的临床研究

为探讨阻断肝血流施行肝脏手术前,增加矸细胞糖原含量能否减轻肝脏缺血－再灌注损伤及其相关机制。将17例患者分为对照组及实验组（术静滴高浓度葡萄糖）,均采阻断第一肝门行病变肝脏切除术,术中获取肝组织标本测定组织中ATP含量及丙二醛,超氧化物歧化酶的变化情况,并对两组患者术前及术后1、5天的肝功能进行检测,结果发现,于肝脏缺血后及再灌注1h,实验组肝组织ATP含量显著高于对照组,且术后第1、5天,实验组肝功能改善程度也显著优于对照组;外引,氧自由基及其引发的脂质过氧化反应明显参与了肝脏缺血－再灌注损伤过程,但在程度上实验组显著轻于对照组,提示临床上在阻断肝脏血流前,增加肝细胞糖原含量可有效地减轻肝脏缺血－再灌注损伤程度;其间,肝细胞糖原能显著抗原自由基的损伤作用,可能是其内在机制。