电转入IL—6受体基因在大鼠急性髓细胞白血病模型中的表达

应用平方波脉冲电转法将编码人ＩＬ－６受体的ｃＤＮＡ转入不表达ＩＬ－６Ｒ的ＢＮＭＬ大鼠急性早幼粒细胞白血病ＩＬ１２细胞中，转染细胞经含６００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８半固体－液体二步法培养，筛出Ｇ４１８抗性细胞；ＦＡＣＳ检测显示该细胞与ＦＩＴＣ标记的抗ＩＬ－６Ｒ单抗呈显的荧光强度，＾１２５Ｉ－ＩＬ－６受体结合实验表明，ｋｄ＝４．７ｎｍ，每个细胞ＩＬ－６Ｒ数为４０００左右，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－Ｂｌｏｔ发现该     

白细胞介素6基因转染的白血病细胞克隆株的建立及其生物学…

作将人白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转汾至ＦＢＬ－３红白血病细胞，建立了高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３细胞克隆株，并观察了其生物学特性，采用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法将ＩＬ－６表达载体ＢＣＭＧＮｅｏ－ＩＬ－６转移至ＦＢＬ－３细胞中，通过Ｇ４１８抗性筛选，有限稀释法和上清中ＩＬ－６活性的测定，从多株阳性克隆中筛选到一株高分泌ＩＬ－６的克隆株，体外观察表明，ＩＬ－６基因转染的ＦＢＬ－３细胞体外生长能力，集落形成     

三株体外长期培养的骨髓造血细胞系的建立及其生物学特性研究

用长期骨髓培养（ＬＴＢＭＣ）的方法培养了１２例急性白血病患者和５例正常人骨髓，获得三株能在体外增殖的造血细胞株（ＸＧ＿（２９）、ＸＧ＿（３４）、ＸＧ＿（３９）），它们均为ＣＤ＿（３４）。其中，ＸＧ＿（３９）在ＩＬ－１／ＩＬ－６刺激下增加Ｂ淋巴细胞抗原表达，倍增时间缩短；在Ｇ－ＣＳＦ／ＧＭ－ＣＳＦ刺激下抑制Ｂ淋巴细胞抗原表达，倍增时间延长。另外，ＸＧ＿（２９）经培养核型由异常转为正常，ＸＧ＿（２９）、ＸＧ＿（３９）亦大量分泌肿瘤坏死因子α结果提示：ＬＴＢＭＣ可以使急性白血病骨髓中的白血病细胞染色体核型由异常转变为正常，而且该三株细胞对研究造血细胞的分化发育具有重要价值。     

再生障碍性贫血患者细胞免疫功能与造血细胞因子的研究

目的：进一步探讨再生障碍性贫血（再障）的免疫发病机制，阐明细胞免疫、造血细胞因子在再障患者中发生变化的基础与临床意义。方法：用单抗试剂盒，采用改良ＡＰＡＡＰ法及酶联免疫试剂盒，采用ＥＬＩＳＡ法对３８例再障患者及２０名正常人外周血Ｔ细胞亚群，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达以及外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）培养上清诱生Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平进行测定。结果：再障患者外周血ＣＤ４细胞减低、ＣＤ８细胞增高、ＣＤ４／ＣＤ８降低或倒置，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达率增高。再障患者ＰＢＭＮＣ培养上清中Ｇ－ＣＳＦ阳性率减低，ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平增高。相关分析发现Ｇ－ＣＳＦ与ＣＤ４细胞及ＣＤ４／ＣＤ８呈正相关，而与ＩＦＮα呈负相关；ＩＬ－６与白细胞数及ＣＤ４细胞呈负相关；ＴＮＦα与ＣＤ８细胞呈正相关而与ＣＤ４／ＣＤ８呈负相关；ＩＬ－８与ＣＤ８细胞及ＨＬＡ－ＤＲ呈正相关。结论：细胞免疫功能异常及细胞因子网络失调在再障发病中起一定的作用。     

重组人单链白细胞介素12融合基因的构建、真核表达及生物学活性测定

目的 探讨用生物学技术获取具有生物学活性的重组人白细胞介素１２（ｒｈＩＬ－１２）的方法。方法 从经佛波醇酯（ＰＤＢｕ）刺激的ＥＢ病毒转化的人Ｂ淋巴母细胞株ＮＣ－３７中提取ｍＲＮＡ,经逆转录－聚合酶链反应分别获得ｈＩＬ－１２ｐ４０和ｐ３５亚单位编码序列的ｃＤＮＡ,运用重组聚合酶链反应技术。将两段基因通过多肽接头（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３ＤＮＡ序列连接后进行基因重组,构建了重组人单链ＩＬ－１２融合基因（ｒｈ－ｓｃＩＬ－１２）。进一步将ｒｈｓｃＩＬ－１２融合基因插入ｐｃＤＮＡ３．１（＋）真核表达载体中,构建ｒｈｓｃＩＬ－１２真核表达载体「ｐｃＤＮＡ３．１（＋）－ｒｈｓｃＩＬ－１２」,转染ＣＯＳ－７细胞,结果 经Ｇ４１８筛选获ＣＯＳ－ｒｈｓｃＩＬ－１２融合蛋白稳定表达株,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ显示该融合蛋白相对分子质量为７     

重组IL-6和维甲酸诱导肾癌细胞凋亡的研究

目的：探讨重组白细胞介素６（ＩＬ－６０在体外对肾癌细胞ＧＲＣ－１（ＲＣＣ ＧＲＣ－１）凋亡的诱导作用。方法：在ＲＣＣ ＧＲＣ－１细胞培养体系中加入ＩＬ－６诱导，反式维甲酸（ＲＡ）作为对照药物，琼脂糖凝胶电脉和流式细胞仪观察ＩＬ－６和ＲＡ对细胞ＤＮＡ电泳和细胞周期动力学的影响。结果：ＩＬ－６诱导肾癌细胞ＤＮＡ出现典型的梯状改变，ＲＡ有轻度诱导肾癌细胞凋亡作用。流式细胞仪ＤＮＡ直方图上ＩＬ－６诱导肾癌     

白细胞介素6基因转染的白血病细胞克隆株的建立及其生物学特性的观察

作者将人白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转染至ＦＢＬ－３红白血病细胞，建立了高分泌ＩＬ６的ＦＢＬ－３细胞克隆株，并观察了其生物学特性。采用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法将ＩＬ－６表达载体ＢＣＭＧＮｅｏ－ＩＬ－６转移至ＦＢＬ－３细胞中，通过Ｇ４ｌ８抗性筛选、有限稀释法和上清中ＩＬ－６活性的测定，从多株阳性克隆中筛选到一株高分泌ＩＬ－６（２２５．６Ｕ／ｍｌ）的克隆株。体外观察表明，ＩＬ－６基因转染的ＦＢＬ－３细胞体外生长能力、集落形成能力均减弱，且其生长抑制程度与分泌ＩＬ－６水平呈正相关。给小鼠皮下接种后肿瘤结节形成率降低，生长速度减慢，荷瘤小鼠存活期延长。以上结果表明，ＩＬ－６基因转染的ＦＢＬ－３细胞致瘤性下降，这为将该细胞制备成新型瘤苗治疗白血病打下了基础。     

用流式细胞仪测定小儿急性白血病细胞DNA及其临床意义研究

应用流式细胞仪（ＦＣＭ）对９４例急性白血病（ＡＬ）骨髓单个核细胞（ＭＮＣ）进行了ＤＮＡ含量测定。在４７例初诊／复发ＡＬ中，５０％（１７／３４）的急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）及３８．５％（５／１３）的急性非淋巴细胞白血病（ＡＶＬＬ）检出ＤＮＡ异倍体；４７例ＡＬ完全缓解（ＣＲ）期患儿异倍体检出率为１０．６％。１４例非白血病患儿无异倍体检出。ＡＬ初诊病例的Ｃ＿０／Ｇ＿１％高于ＣＲ及对照组，Ｓ％及（Ｓ＋Ｇ＿２）／Ｍ％低于ＣＲ及对照组；复发病例（Ｓ＋Ｇ＿２）／Ｍ％高于初诊组；在ＡＬ－ＣＲ组，Ｓ％和（Ｓ＋Ｇ＿２）／Ｍ％均与对照组无显著性差异。２０例ＡＬ的自身对照发现，１１例初诊、复发时的异倍体在ＣＲ期消失。     

血清白细胞介素12水平与干扰素α—1b治疗慢性乙型肝炎？…

目的：探讨血清白细胞介素１２（ＩＬ－１２）水平与干扰素α－１ｂ（ＩＦＮα－１ｂ）治疗慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）疗效的关系,方法：采用双抗体夹心法检测啊６３例接受ＩＦＮα－１ｂＣＨＢ患者血清ＩＬ－１２水平。结果：完全应答者治疗前后血清ＩＬ－１２水平均显著高于部分应答和无应答者。在ＩＦＮ治疗过程中动态观察发现,血清ＩＬ－１２水平与ＨＢＶＤＮＡ含量呈负相关;而与血清ＡＬＴ、ＴＢｉｌ、ＡＬＢ含量无明显相关,与     

白血病患者纤溶活性的测定

目的：为了解白血病患者血浆纤维蛋白原（ＦＩＢ）、纤溶酶原（ＰＬＧ）和Ｄ－二聚体（Ｄ－ｄｉｍｅｒ）的活性变化。方法以ＳＴＡ Ｃｏｍｐａｃｔ全自动血凝仪及ＡＣＬ－２００型自动血凝仪测定２０例正常健康人、１２例急性原始粒细胞白血病（Ｍ１、Ｍ２）、１０例急性早幼粒细胞白血病（Ｍ３）、８例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）、６例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）患者血浆的纤维蛋白原含量（ＦＩＢ）、纤溶酶原活性（ＰＬＧ）及