线粒体DNA 3243、3316、3394位点突变与精神分裂症相关分析

目的分析线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点及ND1基因3316、3394位点突变对精神分裂症(SZ)发病的影响。方法采用PCR扩增、限制性内切酶消化、琼脂糖凝胶电泳分型检测、DNA测序等方法,对随机抽取的无亲缘关系的250例患者(SZ组)和292例对照组的外周血mtDNA进行3243、3316和3394位点的突变检测。结果在SZ组中发现8例3316G/A突变,对照组中3例,两组相比差异无统计学意义(P=0.138)。在SZ组中发现15例3394T/C突变,对照组中有4例,两组相比差异有统计学意义(P=0.007)。在精神分裂症患者组和对照组中均未发现3243A/G突变。结论 mtDNA3394T/C突变可能与SZ发生有一定关系,mtDNA 3243A/G、3316G/A突变可能与SZ发生无关。     

2型糖尿病线粒体基因变异的研究

目的：探索中国人２型糖尿病与线粒体变异的关系。方法针对已经报道的线粒体基因的高发突变区（ｍｔ３１５３－３５５１）近４００ｂｐ的片段在中国人正常人群、２型糖尿病群体及１２个母系遗传的２型糖尿病系中进行聚合酶链反应－单链构象多态性（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）研究,发现异常构象再进     

2型糖尿病糖化血红蛋白控制率及其与并发症的关系

目的 探讨2型糖尿病(NIDDM)患者糖化血红蛋白的控制情况及其与合并症、并发症的关系.方法 对来我院内分泌科就诊的676例2型糖尿病患者进行糖化血红蛋白(GHbA1c)检测,同时进行有关合并症、并发症的问卷调查.根据GHbA1c测定将患者分为观察组(GHbA1c>7%)和对照组(GHbA1c≤7%).结果 (1)糖化血红蛋白控制良好者(GHbA1c≤7%)占35.1%(237/676),控制不佳者(GHbA1c>7%)占64.9%(439/676).(2)观察组合并高血压病和脑血管事件的比率显著高于对照组[分别为69.9%V8 55.7%,21.8%vs 8.9%](均P<0.001).但两组合并冠心病的比率无显著性差异[18.7%vs 17.3%](P>0.05).(3)观察组并发周围神经病变和脂肪肝的比率明显高于对照组[分别为46.0%vs 35.O%,36.9%vs 25.3%](均P<0.01).但两组并发肾病、视网膜病变和糖尿病足的比率无显著性差异[分别为18.7%vs 16.5%,30.8%vs 27.4%,5.0%vs 3.8%](均P>0.05).结论 2型糖尿病患者糖化血红蛋白控制良好率低,糖化血红蛋白控制与合并症、并发症有关.应加强健康教育和糖化血红蛋白监测.     

线粒体DNA ND1基因3394 T→C突变与2型糖尿病

线粒体基因（mitochondrial DNA，mtDNA）是目前发现的除核基因以外惟一存在于人类细胞质中的DNA分子，具有自我复制、转录、和编码功能。mtDNA缺陷可导致胰岛素分泌障碍，从而参与糖尿病的发生。有关糖尿病与mtDNA基因突变的研究国内外均有报道，但结果不一。我们采用PCR-RFLP、DNA测序和结构预测的分析方法，对武汉地区95例2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）患者和168例健康对照mtDNA的ND1基因（np3307-4263）的3394（T-C）突变位点进行筛选检测。     

2 型糖尿病患者线粒体常见基因突变PCR检测的局限性

目的:研究北京地区汉族人群中线粒体DNA(m itochondrial DNA,m tDNA)多位点突变频率与2型糖尿病之间的相关性。方法:采用直接PCR、PCR-限制性片段长度多态性(restriction fragm ent length polymorph ism,RFLP)、PCR-时相温度梯度凝胶电泳(temporal temperature grad ient gel electrophoresis,TTGE)法筛查m tDNA 4977片段缺失、线粒体tRNALeu(UUR)A3243G突变和m tDNA T14577C突变。结果:在250例2型糖尿病患者及142例健康对照外周血基因组总DNA中,未发现m tDNA 4977缺失、线粒体tRNALeu(UUR)A3243G突变及m tDNA T14577C突变。结论:m tDNA 4977缺失、线粒体tRNALeu(UUR)A3243G突变及m tDNA T14577C突变在外周血中没有检出,采用常规PCR法检测2型糖尿病患者外周血线粒体DNA突变具有较大的局限性。     

浙江汉族人群线粒体DNA ND1基因G3316A突变与2型糖尿病

目的：研究与日本人2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）相关的线粒体DNA（mitochondria DNA,mtDNA）ND1基因G3316A突变在浙江汉族T2DM人群中的发生率及其临床意义。方法：采用PCR产物直接测序法对浙江籍汉族人群中无血缘关系的315名T2DM患者及158名正常对照的外周血mtDNA进行检测,并用DNASTAR和Antheprot 5.0软件分析突变位点。结果：在T2DM患者中检测到6例（占1.90%）G3316A突变,对照组中发现3例（占1.90%）突变,突变发生率在两组间差异无显著性（P＆gt;0.05）。携带G3316A位点突变的T2DM组与无该突变的T2DM组之间的临床特点（发病年龄、体重指数和血糖水平等）比较差异亦无显著性。蛋白二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角和不规则卷曲的构成比没有发生改变。结论：线粒体DNA ND1基因G3316A突变可能与浙江汉族人群T2DM的发生无关,仅为人群中的基因多态性。     

线粒体DNA突变和疾病的关系研究进展

线粒体是细胞能量生成的场所,人类线粒体DNA(mtDNA)上有37个编码基因,其中有13个蛋白质基因,2个rRNA基因和22个tRNA基因。mtDNA突变是引起多因素疾病和部分遗传疾病的重要原因之一,本文就线粒体基因组学、mtDNA疾病模型,mtDNA疾病的临床特征以及mtDNA疾病的防治进展进行综述。     

胰腺癌线粒体DNA突变研究

目的研究线粒体DNA（mtDNA）突变在胰腺癌发病中的作用。方法用PCR与直接测序相结合的方法,对比分析2株胰腺癌细胞株（SW1990、JF-305）和1株原代培养的正常胰腺细胞mtDNA D环区的突变位点。结果 2株胰腺癌细胞和1株正常的胰腺细胞的mtDNA D-loop区均存在不同程度的点突变,SW1990共检测到8个突变位点,JF-305共检测9个突变位点。其中73位A-G、16223位C-T和16358位C-T这3个突变位点在2株癌细胞和正常胰腺细胞中均检测到,考虑为多态性变化;16211位C-T和16311位T-C2个相同的突变位点在2株胰腺癌细胞中均检测到,考虑为特征性突变。结论胰腺癌细胞mtDNAD环区具有多态性和突变性,其突变可能与胰腺癌的发生、发展密切相关。     

97例线粒体肌病/脑肌病患者的线粒体DNA突变分析

目的 探讨我国不同临床类型的线粒体脑肌病的线粒体DNA(mtDNA)突变特点以及基因型和表型之间的相关性.方法 对经临床和病理诊断为线粒体肌病/线粒体脑肌病的97例患者,提取其肌肉和/(或)白细胞mtDNA,用Southern杂交检测mtDNA的大片段缺失、以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测常见类型的点突变(包括A3243G、A8344G、T8993G、　T8993C、T3271C突变)、并对部分患者进行mtDNA伞长测序寻找有无其他的突变位点.结果 97例患者中有81例患者存在mtDNA突变,突变类型包括单一的大片段缺失21例,多发的大片段缺失4例,A3243G突变43例,A8344G突变6例,T8993G、T8993C、T3271C突变各1例.KSS/CPEO与单发的mtDNA大片段缺失相关、MELAS与A3243G点突变、MERRF与A8344G点突变、母系遗传的Leigh　病与8993位点的突变相关.另外在4例线粒体肌病患者中发现细胞色素b编码基因A15316G　(T194A)、G15221A(D159N),ATPase6编码基因G9196A(D224N)和16SrRNA C2835T突变各1例.结论 国人不同类型线粒体肭肌病的mtDNA突变类型与国外外的报道道基本一致.虽然线粒体脑肌病的临床表刑和基因型之间有一定的相关件,但不同的基因型和临床表型之间也存在一定的交叉,反映了线粒体病的异质性特点.     

线粒体DNA突变与乳腺癌关系的研究进展

线粒体是动物细胞核外唯一有遗传物质的细胞器,通过电子传递链的氧化磷酸化为机体提供90%的ATP能源.它有多种非常重要的功能,其中包括调控细胞的凋亡、基因表达、调节细胞氧化还原电势、调节信号传导、产生活性氧自由基,以及在机体生长发育、代谢、疾病、死亡以及生物进化等方面都有重要意义.     

基因芯片筛查糖尿病线粒体基因突变

目的建立一种快速、准确的高通量检测线粒体DNA突变的基因芯片技术,并探讨这些突变与糖尿病的关系。方法以尼龙膜为介质,通过紫外交联固定28个待测突变位点的野生型和突变型探针,并采用该基因芯片对200例2型糖尿病患者和210名健康对照的线粒体tRNA leu（UUR）基因及ND1基因进行筛查,DNA测序进一步确证突变位点,Mfold和Antheprot软件预测变异型基因及蛋白质二级结构。结果成功研制可检测28个突变位点的线粒体DNA芯片,在糖尿病组检出tRNA leu（UUR）基因13290C突变2例（1．0％）,ND1基因突变23例：G3316A突变6例（3．0％）、13394C突变5例（2．5％）、A4164G突变8例（4．0％）,T4216C突变2例（1．0％）,T3593C（0．5％）和A3606G突变各1例（0．5％）;对照组检出G3316A突变1例（0．5％）、A4164G突变5例（2．4％）。这些突变位点的测序结果与基因芯片检测结果一致。两组间仅13394C突变率差异有统计学意义（P=0．027）。G3316A突变导致丙氨酸→苏氨酸,13394C突变导致酪氨酸→组氨酸,13593C突变导致缬氨酸→丙氨酸,T4216C突变导致酪氨酸→组氨酸,A3606G和A4164G突变分别为亮氨酸和蛋氨酸的无意义突变,前4种突变型的ND1蛋白二级结构不同于野生型。结论线粒体DNA芯片是一种快速可靠的高通量基因突变检测方法,ND1基因13394C突变可能参与了线粒体基因缺陷型糖尿病的发病。     

Relationship between mutations of mitochondrial DNA ND1 gene and type 2 diabetes

Background Recent studies have indicated that many mutations in mitochondrial (mt)DNA NDI gene region are related to diabetes mellitus. In this study we explored the relationship between various mtDNA ND1 gene mutations and type 2 diabetes mellitus (DM) among Chinese. Methods Using PCR restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis and gene sequencing, 4 spots of mtDNA (nt3243, nt3316, nt3394, nt3426) were screened in 478 diabetics and 430 non-diabetic subjects.Results In diabetic group, there were 13 carriers (2.72%)of 3316 G→A mutation,12 (2.51%) of 3394 T→C mutation and 2 (0.42%) of 3426A→G mutation. In controls, only 3394 T→C mutation was observed in 2 subjects (0.47%). There was significant difference in the frequency of 3316 and 3394 mutation between two groups (P&lt;0.05, respectively). More subjects with mitochondrial DNA ND1 gene mutations had DM family history and greater tendency of maternal inheritance when compared to those patients without mutation in diabetic group（P&lt;0.01）. A 3426 mutation diabetic pedigree was studied, and we found 12 maternal members in the family had the same mutation. Conclusion mtDNA ND1 gene mutations at nt3316 (G→A), nt3394 (T→C) and 3426 (A→G) might contribute to the pathogenesis of DM with other genetic factors and environment factors.     

A型性格与非胰岛素依赖型糖尿病关系的病例对照研究

目的 探讨A型性格与非胰岛素依赖型（II型）糖尿病的关系。方法 采用频数匹配病例对照研究设计，随机选择徐州市II型糖尿病新发病例185例，医院对照201例和人群对照197例，使用“A型性格问卷”和统一的调查表开展现场调查，并对结果进行单因素和多因素非条件Logistic回归分析。结果病例组行为特征计分TH，CH及TH＋CH计分与对照组相比，差异有非常显著意义（P＜0．01），与B型性格相比，A型性格者患II型糖尿病的OR值为2．59（95％CI为1．62－4．13），结论 A型性格可能是II型糖尿病独立的危险因素。     

磺脲类药物受体基因多态性和2型糖尿病相关性研究

目的 :调查糖尿病 (DM)患者磺脲类药物受体基因 16外显子 - 3T→C多态性与 2型DM相关性。　方法 :应用限制性内切酶片段长度多态性技术 ,对相互间无一级亲属关系的 15 5例 2型DM患者及 132名正常人中磺脲类药物受体基因第 16外显子 3T→C多态性进行遗传学相关性研究。　结果 :2型DM患者 16外显子 3T→C为“C”的等位基因及“CC”纯合子基因型频率比正常人显著增高 (P <0 .0 1)。　结论 :等位基因“C”所代表的单倍体在2型DM发病中遗传易感性上起重要作用。     

葡萄糖转运蛋白4基因与2型糖尿病相关性研究

目的 探讨中国汉族人群中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)基因val383Ile突变与2型糖尿病的相关性。方法 采用聚合酶链反应—寡核苷酸连接测定方法对北京地区204例患者—配偶进行GLUTT4基因Val383Ile多态性基因型检测。结果 病例组中发现2例为GLUT4基因val383Ile突变的杂合携带者，对照组中末发现GLUT4基因Val383Ile突变。结论GLUT4基因val383Ile突变在北京地区汉族人群中不常见，可能为2型糖尿病某种亚型的致病因素。     

关于血浆内脏脂肪素与2型糖尿病肾病的探讨

目的探讨血浆内脏脂肪素(visfatin)水平与2型糖尿病(T2DM)肾病患者的关系。方法采用酶联免疫吸附实验测定T2DM肾病、单纯T2DM患者和正常健康受试者(control)空腹血浆visfatin水平,并分析其与血压、体重指数、腰围、空腹血糖、糖化血红蛋白、血脂、尿白蛋白排泄率(UAER)等的关系。结果T2DM肾病和单纯T2DM组的空腹血浆visfatin水平显著高于健康正常对照组(P均<0.05);T2DM肾病组空腹血浆visfatin水平明显高于单纯T2DM组(P<0.05)。多元线性回归分析表明:血浆visfatin水平升高主要受血脂、尿白蛋白排泄率的影响。而尿白蛋白排泄率又主要受血浆visfatin水平的影响。结论血浆visfatin水平可能与糖尿病肾病的发生和发展有关。     

金属硫蛋白基因多态性与2型糖尿病的关系

目的 :探讨金属硫蛋白 (metallothionein,MT)基因多态性与中国汉族人群中 2型糖尿病 (T2 DM)发病之间的关系。方法 :采用 PCR技术和限制性片段长度多态性 (RFL P)的方法检测 4 1名糖尿病患者和 5 3名正常对照者的金属硫蛋白基因家族中的 MT4基因 (rs6 6 6 6 36 ) 2 0 1 G→ A突变 ,统计各组对象的突变频率。结果 :MT4基因 (rs6 6 6 6 36 ) 2 0 1 G→ A突变型等位基因 (A)频率在糖尿病组和正常对照组中差异有显著性(P<0 .0 5 ,OR=2 .335 ) ;AA,GA和 GG三种基因型频率分布差异也有显著性 (P<0 .0 5 ) ;不同基因型的相对风险分析 ,GA基因型携带者患 2型糖尿病的风险是 GG基因型的 3.4 6 2倍 (OR=3.1 6 2 ,95 % OR CI=1 .389～8.6 2 9)。结论 :MT4突变型等位基因与 2型糖尿病的发生有显著的关联性 ,基因突变使 2型糖尿病的发病风险增加     

胰岛素抵抗与2型糖尿病体位性低血压的关系

目的：探讨2型糖尿病（DM）及糖尿病合并高血压（DMH）患者发生体位性低血压（PH）,及其与糖尿病神经病变、高胰岛素血症和胰岛素抵抗（IR）的关系。方法：DM及DMH患者各30例。检测立卧位血压、自主及外周神经功能及血清胰岛素和血糖浓度,并计算胰岛素敏感指数。结果：单纯DM患才40%发生PH,而DMH患者发生PH者达67%,两者之间差异非常显著（P＜0.01)。DM合并PH和DMH合并PH患者的立卧位收缩压和舒张压变化幅值明显高于单纯DM患者（P＜0.01),如DM同时合并高血压和PH者其腓总神经和腓浅神经等的传导速度明显低于单纯DM（P＜0.05),但体位性心率变化的差值、体重指数（BMI）及空腹和餐后2h血糖浓度在3组中差别无显著性。DMH和PH者的血胰岛素浓度呈显著正相关（r=0.689,P＜0.01)。结论：DMH更易发生PH,并加重外周神经的损害。DM患者伴PH存在明显的胰岛素抵抗（IR）和高胰岛素血症,如同时合并高血压,上述代谢紊乱更明显。     

2型糖尿病患者血清瘦素水平与胰岛素抵抗的关系

目的:探讨血清瘦素水平与2型糖尿病胰岛素抵抗(IR)之间的关系。方法:应用放射免疫分析法测定120例2型糖尿病患者、82例正常对照组的空腹血清瘦素、胰岛素(FINS)水平,并计算胰岛素敏感指数(IAI)。结果:2型糖尿病患者瘦素水平较正常对照组明显升高,IAI较正常对照组明显降低。相关及回归分析表明:糖尿病组瘦素与IAI呈负相关,与体重指数(BMI)、FINS、甘油三酯、胆固醇呈正相关,瘦素在逐步回归分析中最后进入方程。结论:2型糖尿病患者血清瘦素水平与IR、脂代谢之间有密切的关系。     

线粒体DNA3160-3755区域基因突变与2型糖尿病的关系

目的研究线粒体DNA3160-3755区域基因在延边地区2型糖尿病（T2DM）患者中的突变情况,探讨该区域线粒体基因突变与2型糖尿病的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymorphismchainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR-RFLP）技术和直接测序法对延边地区人群108例正常健康体检者、328例T2DM患者（其中2例合并耳聋）,进行线粒体DNA3160-3755区域基因突变筛查。结果线粒体DNA3316G-A在糖尿病组和正常对照组中的突变率分别为3．7％和3．8％。两组间差异无统计学意义（P〉0．05）;3394T→C在糖尿病组和正常对照组中的突变率分别为7．3％和1．9％,两组间差异有统计学意义（P〈0．05）;在糖尿病组及正常对照组中均未检测到线粒体DNA3243A→G、3593T→C和3714A→G突变。结论线粒体DNA3316G→A突变与延边地区T2DM的发生无关;线粒体DNA3,394T→C突变与延边地区T2DM的发生有关;线粒体DNA3423A→G,3593T→C,3714A→G突变在延边地区T2DM中的发生率为0,提示上述位点基因突变率极低。