HPLC法分析川芎-香附配伍前后指标成分的变化

目的：研究药对川芎-香附配伍对单味药材中指标成分的影响。方法：以川芎嗪、阿魏酸、藁本内酯和α-香附酮为指标成分,采用HPLC法分析川芎、香附及川芎-香附配伍前后变化。色谱条件：色谱柱为Inertsil ODS-3（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为：甲醇-0.05%磷酸水溶液（梯度洗脱,0～20 min：45%～48%甲醇;20～25 min：48%～70%甲醇;25～50 min：70%～75%甲醇;50～55 min：75%～100%甲醇;55～60 min：100%～45%甲醇）,检测波长为270 nm。结果：药对中指标成分川芎嗪、阿魏酸、藁本内酯含量与单味药材相比均有所增大。结论：川芎-香附配伍前后特征峰面积均发生明显变化。     

苏木对羟基红花黄色素A在寒凝血瘀大鼠体内药代动力学的影响

目的建立寒凝血瘀大鼠体内羟基红花黄色素A(HSYA)的反相高效液相色谱分析方法,研究苏木对HSYA在寒凝血瘀模型大鼠体内药代动力学(药动学)的影响。方法寒凝血瘀模型大鼠12只,随机分为2组,分别灌服红花单煎液和红花-苏木合煎液,于给药后5、10、20、30、45、60、90、120、150、210、270min眼底静脉丛取血,20%三氯乙酸水溶液沉淀蛋白,采用RP-HPLC法检测给药不同时间后大鼠血浆中HSYA的浓度,DAS 2.0药动学软件计算药动学参数。结果与红花单用组相比,红花与苏木配伍后,大鼠血浆中HSYA的药时曲线下面积AUC(0-t)和峰浓度Cmax及分布半衰期t1/2α增大(P<0.01),表观分布容积V1/F和清除率CL/F减小(P<0.01)。结论苏木可促进寒凝血瘀模型大鼠对红花中HSYA的吸收,降低HSYA在体内的分布,从而发挥增效作用。     

川芎嗪和参麦针剂对老龄大鼠脑缺血再灌注

目的：从ＡＴＰ酶活性变化和自由基损伤方面研究川药嗪和科注射液及其配伍而成的川芎参麦注射液对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤防护作用的机制,为防治脑梗塞提供依据。方法：老龄（２０月龄以上）大鼠分为正常对照、模型组、尼莫通组、川芎嗪组、参麦组、川在麦组（川芎参麦注射液）,观察大鼠全脑缺血３０分钟再灌注６０分钟后脑组织中ＡＴＰ酶和ＳＯＤ活性及ＭＤＡ、Ｃａ＾２＋、Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋含量。结果：Ｃａ＾２＋离子水平和Ｃ     

方剂配伍的临床药动学研究Ⅰ:川芎与川芎芍药汤的比较

目的：为进一步验证“复方效应成分动力学”假说提供临 床药物动力学(PK)研究依据。方法：用已建立的方法［１］，研究健康自 愿者一次口服川芎汤(1 g/kg)、川芎芍药(1∶1)汤(2 g/kg)后血清中阿魏酸(FA)的药动学。 结果：两组的血药时曲线均表现为双峰现象，属开放性一室模型。川芎汤和川芎芍药汤组 FA的主要药动学参数分别如下：Ka(L/min)=0.281 6±0.132 7 和0.120 6±0.062 1；Cmax(ng/mL)=100.084 4± 34.695 5和47.567 6±28.235 8;AUC(ng/min·mL)=15 734.88±7 063.77和5 717.92±5 590.99;Cl/F(s)(L/min)=0..002 8±0.001 4 和0.041 6±0.025 4;V/F(c)(ng/mL)=0.610 8±0.280 0和2.04 1 5±1.106 3。结论：川芎配伍芍药明显影响川芎在血清中FA的吸收、分布和排泄 等。     

中药复方及单味五指毛桃根中补骨脂素大鼠体内药动学研究

目的：建立反相高效液相色谱法,分别比较中药复方与单味五指毛桃根提取物中补骨脂素大鼠体内的药动学差别,探讨中药复方对药效成分体内过程的影响。方法：实验大鼠分别灌胃中药复方、五指毛桃根提取物后,测定不同时间点大鼠血浆中补骨脂素浓度,采用药动学程序3P97对数据进行统计学处理,进行药动学模型拟合并计算相关药代动力学参数。结果：复方及五指毛桃根中补骨脂素在大鼠体内均呈一室模型,复方中补骨脂素的吸收滞后时间（Lag time）长于单味药材,其吸收速率常数（Ka）小,吸收半衰期t1/2（ka）长,吸收速度较慢,使得复方两次达峰时间较晚;两者消除速率常数（Ke）、消除半衰期t1/2（ke）比较表明复方排泄较慢,在体内的作用时间稍长;曲线下面积复方大于五指毛桃根,吸收多于后者,生物利用度相对高,两者在Lag time、Tmax（1）及Tmax（2）上存在显著性差异。结论：中药复方与单味药材体内药动学之间存在差异,其产生的原因可能与复方间的相互配伍,复方成型工艺或其中添加辅料有关。     

川芎-香附不同配比提取物中主要成分含量变化研究

目的比较川芎-香附不同配比提取产物藁本内酯、阿魏酸和α-香附酮含量变化,为药对的药效学和药物代谢动力学研究提供依据。方法分别测定川芎、香附药材及1∶2、1∶1、2∶1比例的川芎-香附药对提取液中指标成分的含量,确定不同比例川芎-香附药对提取液中有效成分与其药对比例变化的相关性。结果川芎-香附药对比例为1∶1时,香附中α-香附酮的溶出度明显增大;川芎-香附药对比例为2∶1时,川芎中藁本内酯溶出度显著增加。结论不同配比的川芎-香附药对在提取过程中有效成分溶出度不同。     

葛根及川芎合用对缺血再灌注大鼠保护作用的研究

目的研究葛根及川芎合用对缺血再灌注大鼠的保护作用,为临床提供数据参考。方法选取120只SD大鼠分为正常对照组,假手术组,模型组,葛根联合川芎高、中、低剂量组,葛根组,川芎组。正常对照组、假手术组、模型组均给予等体积生理盐水灌胃;葛根联合川芎高、中、低剂量组分别给予8、4、2g/kg葛根及川芎灌胃;葛根组给予4g/kg葛根灌胃;川芎组给予4g/kg川芎灌胃。灌胃时间为再灌注0、6h时。测定脑组织含水量,神经功能缺损评分及脑组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量。结果模型组与正常对照组比较大鼠脑组织含水量、神经功能缺损评分及TNF-α、IL-6的含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。葛根联合川芎高、中剂量组及葛根组、川芎组与模型组比较大鼠脑含水量及TNF-α、IL-6的含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论葛根及川芎合用对缺血再灌注大鼠可起到保护作用,其机制可能与降低脑组织含水量、改善神经功能以及降低脑炎症因子含量有关。     

党参、蒲公英、川芎及其配伍对大鼠血浆中PGI＿2、TXA＿2含量的影响

本文观察了健脾、清热、活血的代表中药党参、蒲公英、川芎及共配伍对大鼠血浆中ＰＧＩ＿２和ＴＸＡ＿２含量的影响。结果提示，三药配伍复方和党参加川芎配伍可提高大鼠血浆中ＰＧＩ＿２的代谢产物ＰＧＦ＿（１０）的含量，从而提示是其抗溃疡作用机制之一，但对ＴＸＡ＿２的代谢产物ＴＸＢ＿２含量无影响：单用党参或川芎对二者均无影响。     

丹红注射液在正常和寒凝血瘀大鼠中的药代动力学

目的 建立同时测定血浆中丹参素（DSS）、原儿茶酸（PA）及羟基红花黄色素A（HSYA）的HPLC分析方法,研究丹红注射液主要酚酸类成分DSS、PA以及HSYA在正常和寒凝血瘀大鼠中药代动力学行为。方法 连续冰水刺激20天制作寒凝血瘀模型,给正常及模型大鼠尾静脉注射丹红注射液,采用HPLC法检测给药后2、5、10、15、20、25、30、40、50、60、90min血浆中DSS、PA以及HSYA的浓度,流动相为0.2 %甲酸水（A）-甲醇（B）,梯度洗脱,梯度波长检测：280nm（0~40min）,402nm（40~60min）,DAS3.0软件计算药代动力学参数。结果 DSS和PA呈现二室开放模型,HSYA呈现三室模型,与正常组相比,模型大鼠体内,DSS、PA和HSYA的达峰浓度Cmax、DSS的分布半衰期t1/2α、PA和HSYA的消除半衰期t1/2α(t1/2r) 和药时曲线下面积AUC以及总表观分布容积V均显著增大;PA和HSYA的分布半衰期t1/2α和DSS药时曲线下面积AUC均显著降低。结论 在寒凝血瘀病理模型下,DSS在体内分布减慢,生物利用度降低;PA和HSYA的分布加快,消除减慢,表观分布容积增大,生物利用度增加,更能发挥好疗效。     

川芎与川芎芍药汤的比较

为给复方药效成分动力学假说提供实验依据 ,证明方剂的配伍可明显影响彼此在体内化学成分的动力学参数 ,以川芎单煎汤和川芎芍药汤为工具进行了临床药物动力学研究。方法 :采用文献方法 ,测定健康自愿者 1次口服川芎汤(1g/ kg)、川芎芍药 (1∶ 1)汤 (2 g/ kg)后血清中阿魏酸 (FA)的药动学。结果 :2组的血药一时曲线均表现为双峰现象 ,属开放性一室模型。川芎汤和川芎芍药汤组 FA的主要药动学参数分别为 :Ka(L/ m in) =0 .2 816± 0 .132 7和 0 .12 0 6±0 .0 6 2 1;Cmax(ng/ m L) =10 0 .0 844± 34.6 95 5和 47.5 6 76± 2 8.2 35 8;AU…     

裸项栉鰕虎鱼感染创伤弧菌初报

目的 分离及鉴定感染实验用鰕虎鱼的病原菌。方法 将病料分离培养,纯化培养后,用16s rRNA及生理生化方法鉴定病原菌。结果 分离到了革兰阴性弧菌,命名为：GDLAMI-1210株,显微镜下观察为逗点样形态,电镜下可看到菌的一端钝圆,一端长杆弯曲的鞭毛,生理生化鉴定结果与弧菌一致,16s rRNA测序结果与创伤弧菌标准菌株（ATCC27562T）等聚为一类菌,回归实验证实该菌对裸项栉鰕虎鱼有一定的致病性。结论 裸项栉鰕虎鱼感染创伤弧菌初报。     

鼠三毛滴虫新疆灰仓鼠分离株形态学观察及其16S rRNA基因分析

目的 对从新疆实验动物研究中心饲养的封闭群灰仓鼠体内分离到的1株鞭毛虫进行形态学鉴定及基因鉴定。方法 取灰仓鼠回盲部内容物进行直接涂片和常规姬姆萨染色后镜检观察,提取虫体总DNA,PCR扩增该鞭毛虫的16S rRNA基因,测序后与国外已报道的鞭毛虫进行核酸同源性分析,并应用MEGA5.22软件绘制系统发育进化树。结果 形态学观察表明分离到的鞭毛虫为鼠三毛滴虫。测序后核酸同源性分析表明鼠三毛滴虫新疆灰仓鼠分离株16S rRNA序列与国外已报道的三毛滴虫高度同源。系统发育进化树表明鼠三毛滴虫新疆灰仓鼠分离株序列与已报道的鼠三毛滴虫16S rRNA（序列号AY886846.1） 位于同一进化分支,与其他相关三毛滴虫亲缘关系较远。结论 形态学鉴定和16 S rRNA基因分析表明,此次从新疆实验动物研究中心饲养的封闭群灰仓鼠体内分离到的鞭毛虫为鼠三毛滴虫。     

白芷、川芎药对配伍挥发油成分的GC-MS分析

目的 研究白芷、川芎单味药及其药对的挥发油成分,并考察白芷、川芎药对配伍对挥发油成分的影响。方法 采用水蒸气蒸馏法提取白芷、川芎单味药及其药对的挥发油,运用气相色谱-质谱联用技术,结合计算机检索,并与文献资料比对,进行化学成分的分离和鉴定。色谱条件：TR5-MS毛细管色谱柱（30 m× 0.25 mm,0.25 μm）;载气为高纯氦气;进样口温度250℃;进样量1 μL,分流比50：1;恒流模式,载气流速1.00 mL/min;程序升温：起始温度50℃,保持1 min,以5℃/min 的速率升至240℃,保持1 min,然后以5℃/min 升至280℃,并保持1 min。质谱条件：电子轰击（EI）离子源,电子能量70 eV,离子源温度220℃,传输线温度280℃,质量范围（m/z）：50～650 amu,数据采集扫描模式为全扫描,溶剂延迟5 min。结果 在白芷、川芎、药对（1：1）、药对（4：1）的挥发油及白芷、川芎等浓度挥发油混合物（药对等浓度挥发油）中分别鉴定出69、59 、59、60、78 种化合物,其中共有成分19种。结论 从挥发油的组分及含量来看,不同配伍比例药对挥发油的成分有很大的不同,单味药挥发油组分的含量在药对中都发生了变化。     

Serological evidence of chronic Chlamydia pneumoniae infection in coronary artery disease

Background : Recent studies have suggested that Chlamydia pneumoniae infection could be involved in atherosclerosis and related clinical manifestations such as coronary artery disease, carotid artery stenosis and myocardial infarction.     

Prevalence of Helicobacter pylori, cytomegalovirus,and Chlamydia pneumoniae immunoglobulin seropositivity in coronary artery disease patients and normal individuals in North Indian population

Background

In present day atherosclerosis is perceived as a chronic inflammatory vascular condition and infectious diseases are believed to contribute to its pathophysiology. In this context, the microorganisms which are believed to play a role in the pathophysiology include Chlamydia pneumoniae, cytomegalovirus (CMV), and Helicobacter pylori.

Method

A case control study (retrospective) was conducted over a two-year period. The study population was divided into two groups with 200 individuals in each group. The first group comprised cases of coronary artery disease (CAD) and the second comprised healthy controls selected from the general population after matching for age and sex. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was done for immunoglobulin (IgG) antibodies to H. pylori, C. pneumonia, and CMV. They were also evaluated for conventional risk factors including hypertension, diabetes, obesity, and dyslipidaemia. Epi Info™ version 6 six software was used for analysis of data. Odds ratio, χ² for trend and multiple logistic regression analysis were used to find out statistically significant results.

Results

Seropositivity for H. pylori was present in 119 patients of CAD (59.5%) but it was present in only 76 controls (38%) (P = 0.001). There was a statistically significant association between seropositivity for H. pylori and CAD. There was no statistically significant association between C. pneumoniae and CMV seropositivity with CAD. Multiple logistic regression analysis was done with CAD as the outcome (dependent variable). The predictor covariates (independent) variables were seropositivity to H. pylori, C. pneumoniae, and CMV, hypertension, obesity, diabetes, and dyslipidaemia. It was found that seropositivity to H. pylori, hypertension, obesity, and dyslipidaemia were significant risk factors for CAD.

Conclusion

Our study shows an association between IgG antibody response to H. pylori and CAD. Multiple logistic regression analysis showed that this association was retained even on comparison with the other risk factors.     

LC-MS/MS测定白及止血海绵中白及葡甘聚糖的含量

目的 建立LC-MS/MS方法测定白及止血海绵中白及葡甘聚糖含量。方法 采用Waters X BridgeTM Amide(2.1mm×100mm,3.5μm);流动相为乙腈∶5mmol/L醋酸铵(内含0.1%甲酸水溶液)=60∶40;流速为0.3mL/min;柱温35℃;进样量10μL。结果 D-甘露糖线性范围为50.0~5 000.0ng/mL(r=0.999 5),方法学考察表明日内和日间精密度、最低检测限和定量限均符合相关标准,加样回收率为98.4%(n=5),RSD=1.03%。结论 本法操作简单,选择性好,灵敏度高,适用于白及止血海绵中的白及葡甘聚糖的定量分析。     

精子特异性Sleeping Beauty转座酶转基因小鼠模型的建立

目的建立精子特异性表达Sleeping Beauty(SB)转座酶转基因小鼠模型,为研究SB转座子在小鼠中的应用提供工具。方法克隆精子特异性启动子用以驱动SB转座酶基因的表达,建立精子特异性表达SB转座酶的载体,利用显微注射方法建立以C57BL/6J为背景的精子特异性表达SB转座酶的转基因小鼠。PCR鉴定首建鼠的基因型,western blot(WB)和免疫组织化学(IHC)检测SB转座酶基因在小鼠生殖腺睾丸中的表达情况,筛选睾丸中高表达SB转座酶的转基因小鼠。结果显微注射方式获得了5只首建小鼠,其中3只能稳定传代,利用WB和IHC成功的筛选出一株在精子中高表达SB转座酶的转基因小鼠。结论成功建立了精子特异性高表达SB转座酶转基因小鼠模型,为将SB转座子作为一种基因工程工具应用于小鼠基因修饰模型的建立提供非常重要的工具资源。