转移相关基因CD44V9在乳腺癌中的表达及其临床意义

为探讨CD44V9在乳腺癌组织中的表达及其临床意义，笔者应用SABC免疫组化法检测62例乳腺癌、20例乳腺良性肿瘤及15例正常乳腺组织中CD44V9的表达水平。结果示乳腺癌组CD44V9阳性表达率和高表达率分别为64.5%，48.4%，明显高于良性肿瘤组（20.0%，5.0%）和正常乳腺组（6.7%，0%）(均P<0.05);良性肿瘤组高于正常组，但差异无显著性（P>0.05）。伴有淋巴结转移的乳腺癌中CD44V9表达率为79.1%，明显高于无淋巴结转移者的表达率（31.6%）（P<0.05）;浸润性癌中CD44V9表达率为70.4%，明显高于早期浸润性癌的表达率（25.0%）(P<0.05)。CD44V9表达与肿瘤大小、PTNM分期无关（P>0.05），但随PTNM分期的增高，CD44V9表达水平呈上升趋势。提示CD44V9在乳腺癌的发生发展、侵袭转移中可能起重要作用。CD44V9基因表达水平有望作为判断乳腺癌转移倾向的参考指标。     

外周血中hMAM表达与乳腺癌微转移关系的研究

目的 研究乳腺癌患者外周血中人乳珠蛋白(hMAM-mRNA)的表达与乳腺癌微转移的关系.方法 以MCF-7乳腺癌细胞为阳性对照,利用Nested-RT-PCR技术检测92例乳腺癌术后患者、20例乳腺良性肿瘤患者、10例其他系统恶性肿瘤患者、10例正常人群外周血hMAM-mRNA表达情况.结果 hMAM-mRNA仅在乳腺癌患者外周血中表达.92例乳腺癌患者外周血中hMAM-mRNA表达率为43.5%(40/92),hMAM-mRNA在外周血中的表达与ER、PR状态,患者月经状况,肿瘤大小无关.与HER-2、CEA、CA15-3在外周血中是否阳性表达及患者年龄相关.与腋窝淋巴结转移状况密切相关.结论 外周血中hMAM-mRNA检测是乳腺癌血微转移可供参考的临床指标.     

外周血中hMAM表达与乳腺癌微转移关系的研究

目的 研究乳腺癌患者外周血中人乳珠蛋白(hMAM-mRNA)的表达与乳腺癌微转移的关系.方法 以MCF-7乳腺癌细胞为阳性对照,利用Nested-RT-PCR技术检测92例乳腺癌术后患者、20例乳腺良性肿瘤患者、10例其他系统恶性肿瘤患者、10例正常人群外周血hMAM-mRNA表达情况.结果 hMAM-mRNA仅在乳腺癌患者外周血中表达.92例乳腺癌患者外周血中hMAM-mRNA表达率为43.5%(40/92),hMAM-mRNA在外周血中的表达与ER、PR状态,患者月经状况,肿瘤大小无关.与HER-2、CEA、CA15-3在外周血中是否阳性表达及患者年龄相关.与腋窝淋巴结转移状况密切相关.结论 外周血中hMAM-mRNA检测是乳腺癌血微转移可供参考的临床指标.     

外周血中hMAM表达与乳腺癌微转移关系的研究

目的 研究乳腺癌患者外周血中人乳珠蛋白(hMAM-mRNA)的表达与乳腺癌微转移的关系.方法 以MCF-7乳腺癌细胞为阳性对照,利用Nested-RT-PCR技术检测92例乳腺癌术后患者、20例乳腺良性肿瘤患者、10例其他系统恶性肿瘤患者、10例正常人群外周血hMAM-mRNA表达情况.结果 hMAM-mRNA仅在乳腺癌患者外周血中表达.92例乳腺癌患者外周血中hMAM-mRNA表达率为43.5%(40/92),hMAM-mRNA在外周血中的表达与ER、PR状态,患者月经状况,肿瘤大小无关.与HER-2、CEA、CA15-3在外周血中是否阳性表达及患者年龄相关.与腋窝淋巴结转移状况密切相关.结论 外周血中hMAM-mRNA检测是乳腺癌血微转移可供参考的临床指标.     

乳腺癌患者外周血CK5/6/18阳性细胞的检测及其临床意义

目的：探讨乳腺癌患者外周血细胞角蛋白5／6／18（cytokeratin5／6／18，CK5／6／18）阳性细胞表达水平及其临床意义。方法：采用流式细胞术检测56例乳腺癌患者外周血CK5／6／18阳性细胞的表达情况。结果：56例乳腺癌患者中有26例外周血CK5／6／18细胞表达阳性，阳性率为46．4％，与健康对照人群和乳腺良性疾病患者比较，P〈0.05；Ⅲ、IV期乳腺癌患者外周血中CK5／6／18阳性细胞的表达高于I、II期乳腺癌患者，P〈0.05；ER、PR阳性的患者与阴性患者表达无显著意义（P〉0.05）。结论：乳腺癌患者外周血中CK5／6／18阳性细胞的表达与乳腺癌的分期有关，可作为临床监测和判断预后的参考指标。     

细胞黏附分子在骨肉瘤中的表达及其临床意义

[目的]检测CD44V6、β-catenin在骨肉瘤组织中的表达，分析其表达与人骨肉瘤细胞浸润及转移能力的相关性。[方法]应用免疫组织化学方法检测35例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、15例正常骨组织中CD44V6、β-catenin的表达。[结果]骨肉瘤组织中CD44V6、β-catenin的阳性表达显著高于骨软骨瘤及正常骨组织（P〈0．01）；两者的表达分别与骨肉瘤临床分期、肿瘤转移及2年内死亡有关（P〈0．05），而与患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分型、术前化疗无关（P〉0．05）；两者的阳性表达呈正相关（P〈0．01）。[结论]CD44V6、β-catenin在骨肉瘤的阳性表达与骨肉瘤的发生、发展和转移密切相关，可能在骨肉瘤细胞侵袭、转移的过程中起协同作用；联合检测CD44V6、β-catenin可以作为骨肉瘤的诊断和预测转移的指标。     

P-选择素、CD44v6及nm23-H1蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:P -选择素、CD44v6和nm23-H1蛋白表达在乳腺浸润性导管癌(IDC)转移扩散中的作用及相互关系.方法:应用SP法检测93例IDC、25例乳腺导管内癌(DCIS)和17例正常乳腺组织中p-选择素、CD44v6及nm23-H1蛋白表达情况.结果:IDC中,P-选择素、CD44V6和nm23-H1阳性表达率分别为88.17％、82.79％、79.56％,P-选择素、CD44V6在IDC的阳性表达率高于DCIS和正常乳腺组织(P＜0.05),nm23-H1在IDC的阳性表达率低于DCIS和正常乳腺组织(P＜0.05).p-选择素、CD44V6和nm23-H1均与患者年龄、肿瘤大小无关(P＞0.05),P-选择素和CD44V6高表达、nm23-H1低表达与淋巴结转移有关(P＜0.05).P-选择素和CD44V6与IDC组织学分级有关(P＜0.05).P-选择素和CD44v6的表达两者呈正相关关系(r=0.414,P＜0.05).结论:P-选择素、CD44v6与nm23-H1蛋白可能共同参与了乳腺癌的恶性转化及转移扩散过程.P-选择素与CD44v6两基因可能通过相互作用参与了乳腺癌的恶性转化及转移扩散过程.     

细胞间黏附分子1和CD44V6及E钙黏蛋白在人胃癌组织中的表达及意义

目的探讨细胞间黏附分子1（ICAM-1）、CD44V6和E钙黏蛋白在胃癌中的表达及其意义。方法检测ICAM-1、CD44V6和E钙黏蛋白在78例胃癌、30例胃良性病变和30例正常胃组织的表达，分析其之间的相关性及与临床病理特征的关系。结果ICAM-1、CD44V6蛋白表达阳性率：胃癌组织显著高于胃良性病变及正常胃组织（P〈0.01），有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组（P〈0.05），T3、T4组明显高于T1、T2组，Ⅲ、Ⅳ期组明显高于Ⅰ、Ⅱ期组（P〈0．05）。E钙黏蛋白表达阳性率：胃癌组织显著低于胃良性病变及正常胃组织（P〈0．01）；无淋巴结转移组明显高于有淋巴结转移组（P〈0．01），T1、T2组明显高于T3、T4组，Ⅰ、Ⅱ期组明显高于Ⅲ、Ⅳ期组（P〈0．05）。胃癌组织中ICAM-1蛋白表达水平与CD44V6、E钙黏蛋白表达水平之间无相关性（P〉0．05）。联合检测胃癌组织中CD44V6、E钙黏蛋白和ICAM-1的表达，对胃癌转移的敏感度为97．78％，明显高于单项测定指标。结论黏附分子ICAM-1、CD44V6、E钙黏蛋白的阳性表达预示胃癌具有较强的侵袭转移能力，联合检验这3种指标能更准确地判断胃癌的转移情况。     

基质细胞衍化因子-1在乳腺肿瘤患者血浆中的表达及其临床意义

目的探讨乳腺肿瘤患者血浆中基质细胞衍化因子-1（SDF-1）的表达及其临床意义。方法使用ELISA法对26例乳腺良性肿瘤患者和52例乳腺癌患者血浆中的SDF-1蛋白水平进行检测。结果乳腺肿瘤患者的血浆中均可以检测到SDF-1蛋白的存在，乳腺癌患者血浆中的SDF-1蛋白表达水平明显高于乳腺良性肿瘤患者（P=0．000）；而在乳腺癌患者中，已有腋窝淋巴结转移者的SDF-1蛋白表达水平又高于无腋窝淋巴结转移者（P=0．036）。结论外周血中SDF-1的表达可能作为一种特异性的恶性肿瘤标志，而且其高表达水平可能与乳腺癌的淋巴结转移状态有关。     

bag-1，bcl-2基因表达与乳腺癌的发生及预后

目的探讨抗凋亡基因bag-1和bcl-2在乳腺癌组织中的表达及意义，了解肿瘤细胞凋亡的特点。方法采用免疫组化SABC法观察了100例乳腺癌与10例乳腺良性肿瘤及10例正常乳腺组织的石蜡标本切片中bag-1和bcl-2的表达，并进行统计研究。结果Bag-1在乳腺癌组织、乳腺良性肿瘤中，正常乳腺组织中阳性表达率分别为85．0％、10．0％、10．0％，差异有显著性（P〈0．05），其表达与不同病理类型及临床分期无关（P〉0．05）。bcl-2在乳腺癌组织、乳腺良性肿瘤、正常乳腺组织中阳性表达率分别为46．0％、80．0％、90．0％，差异有显著性（P〈0．05）。其表达与不同病理类型及临床分期亦无关（P〉0．05）。对100例乳腺癌进行随访，bag-1阳性表达者5年生存率为78．7％，bag-1阴性表达者5年生存率为8．5％，两者差异有显著性（P〈0．05）。bcl-2阳性表达者5年生存率为43．6％，bag-1阴性表达者5年生存率为46．8％，两者差异无显著性（P〉0．05）。结论bag-1在乳腺癌组织中高表达，bcl-2在乳腺癌组织中低表达，bag-1、bcl-2在乳腺癌组织中的表达与肿瘤的临床分期、病理分型等无关。bag-1阳性表达者预后好，而bcl-2的表达与预后无关。     

胰腺癌中VEGF mRNA，bFGF mRNA和PDGF mRNA及相应受体的表达与意义

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）mRNA,碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)mRNA和血小板衍生生长因子（PDGF）mRNA及相应受体（flt-1,bFGFR1,PDGFR)与肿瘤微血管（microressel,MV)生成在胰腺癌生成、侵袭、转移中的作用及它们的相互关系。方法 应用原位分子杂交技术检测51例胰腺癌及32例急、慢性胰腺炎病人病变组织中VEGF mRNA,bFGF mRNA,PDGF mRNA的表达,应用免疫组化方法检测相应病例中flt-1,bFGFR,PDGFR的表达和肿瘤微血管计数（MVC）。分析其表达与胰腺癌病理参数及预后的关系。结果 胰腺癌中3种血管生长因子mRNA及受体阳性率明显高于包慢性胰腺炎（P＜0．05或P＜0．01）,它们的高表达与胰腺癌的分化程度呈负相关（P＜0．05）;与肿瘤的浸润、淋巴及血道转移（肿瘤的进展阶段）呈正相关（P＜0．05或P＜0．01）,而与肿瘤大小无关;癌组织中MVC明显高于急慢性胰腺炎（P＜0．01）;3种血管因子及受体与胰腺癌MVC呈正相关（P＜0．05或P＜0．01）;癌组织中3种血管因子mRNA及bFGFR与术后生存率呈显著负相关（P＜0．01）。结论 VEGF mRNA,bFGF mRNA,PDGF mRNA及受体的表达及MVC的测定可作为判定胰腺癌生长、转移及预后的重要指标,阻断3种生长因子及受体有助于胰腺癌的治疗。     

hTERT mRNA和MDR mRNA在人肝癌中的表达及其意义

目的　探讨hTRTmRNA及MDRmRNA在人肝细胞肝癌 (HCC )组织中的表达及其意义。方法　检测 5 8例HCC患者癌组织及癌旁组织中hTERTmRNA和MDRmRNA的表达情况。结果　在 5 8例肝癌患者癌组织及其癌旁组织中 ,hTERTmRNA阳性率分别为 44 .83 % ( 2 6/5 8)和 5 .17% ( 3 /5 8) ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;MDRmRNA阳性率分别为 60 .3 4% ( 3 5 /5 8)和 3 2 .76% ( 19/5 8) ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。hTRTmRNA ,MDRmRNA在人肝癌组织中的检出率与临床分期、肝外转移、术后复发、肿瘤大小等明显相关 (均P <0 .0 5 ) ,而与肿瘤数目、血清AFP水平等无明显相关 (P >0 .0 5 )。MDRmRNA检出率与术前化疗明显相关 (P <0 .0 1) ,但与门静脉癌栓无关 (P >0 .0 5 ) ;而hTERTmRNA与术前化疗无相关 (P >0 .0 5 ) ,但与门静脉癌栓有关 (P <0 .0 5 )。结论　hTERTmRNA和MDRmRNA可能与肝细胞的恶性转化及术后复发有关 ,故可望作为预测肝癌复发、转移的参考指标和肝癌治疗的靶基因     

FHITmRNA和WWOXmRNA在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的观察乳腺癌组织中FHIT mRNA和WWOX mRNA表达情况，并探讨其与临床病理学指标的关系。方法以逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测51例乳腺癌及癌旁组织标本中染色体脆性位点抑癌基因FHIT mRNA和WWOX mRNA表达，半定量分析电泳结果。以免疫组化法检测乳腺癌石蜡标本中的雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和HER-2基因状态。结果51例配对标本中，WWOX mRNA表达在乳腺癌组织及癌旁非癌乳腺组织中差异有显著性（P〈0．01）；FHIT基因的mRNA表达在乳腺癌组织及癌旁非癌乳腺组织中差异有显著性（P〈0．01）。FHIT mRNA和WWOX mRNA在乳腺癌组织中的低表达呈正相关（rs=0．354，P〈0．05）。FHIT mRNA和WWOX mRNA的表达与临床病理分期有关（P〈0．05），WWOX mRNA的表达与腋淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论FHIT和WWOX基因系重要的候选抑瘤基因，与其他预后指标的联合检测可望对患者的治疗预后作出更准确的预测。     

CD24mRNA和PDGF-D mRNA在结直肠癌组织中的表达及意义

目的检测CD24mRNA和PDGF-D mRNA在结直肠癌组织及切缘正常组织的表达情况,探讨两者与结直肠癌发生发展的关系。方法收集54例结直肠癌组织及其相应的切缘正常组织,用RT-PCR方法分别检测两种组织中CD24mR-NA和PDGF-D mRNA的表达水平,应用SPSS17.0统计学软件分析它们与临床病理之间的关系。结果 CD24mRNA和PDGF-D mRNA在结直肠癌组织中的表达水平高于切缘正常组织(0.8322±0.0856:0.2065±0.0871,0.8482±0.0692:0.2533±0.0716)。CD24mRNA的表达与结直肠癌的浸润程度有关(P0.05),与年龄、肿瘤的分化程度、Duke's分期、肿瘤大小等因素无关(P0.05)。PDGF-D mRNA的表达与年龄、肿瘤的分化程度、Dukes分期有关(P0.05),与结直肠癌的浸润程度、肿瘤大小因素无关(P0.05)。相关分析表明CD24mRNA和PDGF-D mRNA在结直肠癌组织中表达呈正相关(rs=0.383,P=0.004)。结论 CD24和PDGF-D在结直肠癌组织中均呈高表达,且与结直肠癌的发生发展密切相关,提示两者可能成为结直肠癌早期诊断和评价预后的新指标,并为结直肠癌的靶向治疗提供新思路。     

钠碘转运体和甲状腺过氧化物酶mRNA在甲状腺病变中的表达及意义

目的 探讨甲状腺滤泡源性肿瘤及病变中钠碘转运体（NIS）和甲状腺过氧化物酶（TPO）mRNA的表达及意义。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术，对55例甲状腺肿块的NIS mRNA和TPO mRNA丰度进行了检查。结果NIS mRNA在5种不同病理类型以及4种不同状态间的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。而TPO mRNA的比较，差异均有统计学意义（P〈0．05），良性病变组TPO mRNA表达率明显高于恶性病变组而接近于正常对照组。表达TPO mRNA病例的半定量观察结果，良、恶性病变组间TPO mRNA的光密度积分值（mRNA丰度）差异具有统计学意义（P〈0．01），良性病变组明显高于恶性病变组。结论良恶性甲状腺滤泡源性肿瘤及病变中均存在着NIS的缺陷；TPO作为甲状腺良性肿瘤和病变的标志物有一定的应用价值；临床甲状腺结节性病变如同位素扫描为冷结节，细针穿刺活检（FNAB）检查TPO阴性者应视为手术适应证。     

Survivin mRNA和VEGF mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨Survivin mRNA和VEGF mRNA在膀胱癌不同病理分级、临床分期、初发和复发的膀胱移行细胞癌组织中的表达和临床意义.方法 采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量逆转录聚合酶链反应试验方法检测51例膀胱癌组织及12例膀胱正常组织中Survivin mRNA和VEGF mRNA的表达,将所得数据进行统计学分析.结果 Survivin mRNA和VEGF mRNA在正常膀胱组织、低级别、表浅型和初发膀胱癌组织中的表达明显低于其分别在膀胱癌组织、高级别、浸润型和复发中的表达,两两比较差异有统计学意义(P＜0.05);Survivin mRNA和VEGFmRNA两者之间呈正相关(r=0.889,P＜0.05).结论 Survivin mRNA和VEGF mRNA的高表达可能在膀胱癌的发生发展中起重要作用,两者可作为判断膀胱癌生物学行为的重要指标,联合检测Survivin mRNA和VEGF mRNA的表达水平有助于膀胱癌患者病情判断和预后评估.     

NORE1B、RASSF1A mRNA在肝细胞癌中的表达及其相关性

目的 探讨肝细胞癌(HCC)组织中NORE1B、RASSF1A的转录表达及其临床意义.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析41例HCC及对应癌旁组织中NORE1B、RASSF1AmRNA的表达情况,以及与临床病理特征的关系,并探讨两者表达的相关性.结果 NORE1B mR-NA在HCC中的缺失率为63.4%,癌旁组织中为34.1%(P<0.01).RASSF1A mRNA在HCC中的缺失率为75.6%,癌旁组织中为39.0%(P<0.05).两者的差异表达与乙肝、肝硬化以及Edmondson分级均存在相关性(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小、术前肝功能Child-Push分级和血清AFP检测值均无显著相关.NORE1B与RASSF1A mRNA在HCC中的表达呈正相关性(P<0.05).结论 NOBE1B与RASSF1A在HCC的发生发展中可能存在协同作用.     

Probe-independent and direct quantification of insulin mRNA and growth hormone mRNA in enriched cell preparations

Task division in multicellular organisms ensures that differentiated cell types produce cell-specific proteins that fulfill tasks for the whole organism. In some cases, the encoded mRNA species is so abundant that it represents a sizeable fraction of total mRNA in the cell. In this study, we have used a probe- and primer-free technique to quantify such abundant mRNA species in order to assess regulatory effects of in vitro and in vivo conditions. As a first example, we were able to quantify the regulation of proinsulin mRNA abundance in beta-cells by food intake or by the glucose concentration in tissue culture. The second example of application of this technique is the effect of corticosteroids on growth hormone mRNA in enriched somatrotrophs. It is anticipated that other examples exist in which measurement of very abundant mRNAs in dedicated cells will help to understand biological processes, monitor disease states, or assist biotechnological manufacturing procedures.     

miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的研究miR-196b和HoxB8在结直肠癌组织中的表达及与其临床病理特征的关系,并探讨在结直肠癌组织中miR-196b与靶基因HoxB8表达的关系。方法用实时荧光定量PCR技术检测30例结直肠癌组织及对应的正常黏膜组织中miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA的表达量,用Western blot法检测HoxB8蛋白的表达。结果 miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中的表达量均高于其在对应的正常黏膜组织中的表达量（P〈0.05）。miR-196b mRNA的表达与结直肠癌的淋巴结转移、肿瘤分期（Ⅰ＋Ⅱ与Ⅲ＋Ⅳ）及远处转移均有关（P〈0.05）,而与肿瘤部位、大小、大体类型、浸润深度、组织分化程度、患者的年龄及性别均无关（P〉0.05）;HoxB8mRNA的表达与结直肠癌的上述临床病理特征均无关（P〉0.05）。miR-196b mRNA与HoxB8 mRNA的表达存在负相关（r=-0.458,P〈0.05）,而与HoxB8蛋白的表达无明显相关性（r=-0.236,P〉0.05）。结论 miR-196bmRNA及HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中均呈高表达,miR-196b mRNA的高表达与结直肠癌的发生、发展及预后有关。miR-196b可能通过与靶基因HoxB8 mRNA的3′非编码区结合抑制HoxB8 mRNA的表达。     

瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad3、7mRNA表达的调控机制

目的研究转化生长因子-β1影响瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)Smad3、7mRNA表达的调控机制。方法用放线菌酮(CHX)和放线菌素D预处理KFB,以分别阻断KFB内源性蛋白质的合成及mRNA合成。采用逆转录PCR法检测瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad3、7mRNA表达水平。结果经CHX预处理后,KFB的Smad3mRNA表达轻度上调,并完全抑制了TGF-β1对KFBSmad3mRNA的下调作用(P<0.01);而CHX预处理对KFB的Smad7mRNA表达及TGF-β1上调Smad7mRNA的作用并无明显影响。经放线菌素D预处理后,随TGF-β1作用时间延长,KFB的Smad3mRNA表达水平无明显下降。结论TGF-β1对KFBSmad3mRNA表达的调控过程可能还需要细胞合成其他蛋白的参与;但对Smad7mRNA表达的调控则不需要细胞合成其他蛋白参与,KFB细胞中的Smad7可能也是活化的SMADs的直接靶基因。