透明晶状体和老年性白内障晶状体上皮细胞水通道蛋白1的表达

目的　探讨透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞水通道蛋白 1(aquaporin 1,AQP1)的表达水平。方法　收集 5例透明晶状体和 4 0例老年性白内障患者的前囊膜。应用免疫组织化学方法和计算机图像分析技术对前囊膜下晶状体上皮细胞AQP1进行检测。结果　AQP1阳性表达在透明晶状体和老年性白内障患者前囊膜下晶状体上皮细胞的细胞膜。图像分析透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值低于透明晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值。结论　透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞的细胞膜表达AQP1,AQP1可能在老年性白内障发生发展中起一定作用。     

Bax凋亡蛋白在硅油眼并发白内障晶状体上皮细胞中的表达

目的　观察Bax蛋白在硅油眼并发白内障晶状体上皮细胞中的表达,分析凋亡蛋白与硅油眼并发白内障的关系。方法　收集2009年6月至2010年9月在大连医科大学附属第二医院眼科行白内障手术治疗患者的晶状体前囊膜共45例45眼,其中包括老年性白内障20例20眼,硅油眼并发白内障18例18眼,透明晶状体脱位7例7眼,通过HE染色及免疫组化的方法观察Bax蛋白在老年性白内障、硅油眼并发白内障及晶状体脱位患者的晶状体上皮细胞中的表达情况。结果　硅油眼并发白内障前囊膜下细胞基质中可见硅油小滴。Bax蛋白在白内障晶状体上皮细胞有表达,在透明晶状体上皮细胞无表达,三组之间Bax蛋白表达有显著性差异（P<0.05）,且三组中两两之间亦存在统计学差异（P<0.05）。Bax蛋白在硅油眼并发白内障晶状体上皮细胞的表达强于老年性白内障晶状体上皮细胞上的表达,二者之间存在统计学差异（P<0.05）。结论　Bax凋亡蛋白与硅油眼并发白内障的发生、发展有关,老年性白内障和硅油眼并发白内障的发病机制可能存在差异。     

基质金属蛋白酶-2,9及其抑制因子-1,2在老年性白内障晶状体上皮细胞的表达

目的　研究基质金属蛋白酶- 2, 9 (MMP -2、MMP- 9) 及其抑制因子- 1, 2 (TIMP 1、TIMP- 2) 在老年性白内障晶状体上皮细胞的表达, 探讨其在老年性白内障发病中的作用。方法　对40 例老年性白内障患者(排除代谢性和继发性白内障) 和8例晶状体脱位(晶状体透明) 患者晶状体前囊膜, 用免疫组化方法(SP法) 和免疫荧光技术检测MMP- 2、MMP- 9、TIMP- 1、TIMP -2的表达。结果　MMP- 2、MMP- 9、TIMP- 1、TIMP- 2在老年性白内障晶状体上皮细胞表达均为阳性, 而在透明晶状体上皮细胞仅1例表达阳性, 其余为阴性。MMP- 2在老年性白内障组和透明晶状体组平均吸光度(A值) 分别为(0 .447 9±0 .093 7)、(0 .145 8±0. 053 6); TIMP -2 为(0. 573 4±0. 109 4)、(0 .135 7±0. 023 1); MMP -9为(0 .177 9±0 065 5)、(0. 039 2±0 .009 3); TIMP -1为(0 .279 0±0. 062 6)、(0 .092 2±0. 028 2)。结论　基质金属蛋白酶及其抑制因子在老年性白内障发病机制中可能发挥重要作用。     

老年性白内障晶状体上皮细胞的形态学变化

目的 观察老年性白内障晶状体上皮细胞的形态学改变，探讨其与白内障形成的关系。方法 采集老年性白内障晶状体囊外除术中取出的前囊膜，采用铺片及ＨＥ染色、平板包埋及制备超薄切片等技术，分别在光镜和电镜下观察晶状体上皮细胞的密度、细胞形态和超微结构变化。结果 白内障 晶状体上皮细胞密度较正常晶状体明显减小（Ｐ〈０．０１），６０岁以上组细胞低于６０岁以下组（Ｐ〈０．０１）。光镜下，形态异常的细胞散在分布，     

年龄相关性白内障晶状体囊膜中P33ING1的表达

目的:探讨年龄相关性白内障的发生与晶状体前囊膜中P33ING1表达之间的相关性.方法:收集30例年龄相关性白内障及10例透明晶状体前囊膜,采用免疫组织化学法,分别观察透明晶体组和白内障组晶状体上皮细胞中P33ING1阳性表达水平.结果:白内障患者晶状体囊膜中P33ING1含量较正常人明显增高.结论:P33ING1在年龄相关性白内障的形成过程中起重要作用.     

年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中hTERT的活性表达

目的：探讨hTERT在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LEC）中的活性表达及在白内障形成中的作用。方法：对40例年龄相关性白内障患者和10例正常LEC中的hTERT进行原位杂交技术检测,并进行比较。结果：年龄相关性白内障LEC中hTERT的阳性表达率明显增高,与正常晶状体组相比,有显著性差异（P〈0.01）。结论：LEC中hTERT活性的变化与年龄相关性白内障的形成密切相关,随着年龄的增长,hTERT的表达活性升高,使LEC发生衰老,从而形成白内障。     

CLC-3和AQP-1在大鼠半乳糖性白内障晶状体中表达水平的变化

目的:通过研究大鼠半乳糖性白内障晶状体中氯通道蛋白-3(chloridechannelprotein-3,CLC-3)和水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)表达水平的变化,探讨CLC-3和AQP-1与白内障发病的关系。方法:将半乳糖注射Wistar大鼠单侧眼球后,裂隙灯下观察晶状体混浊情况,分别在造模后不同时间点摘取模型组和对照组大鼠的眼球,取出晶状体,运用实时荧光定量PCR方法检测各组晶状体中CLC-3mRNA和AQP-1mR-NA含量的变化。结果:透明晶状体和半乳糖性白内障晶状体中均有CLC-3mRNA和AQP-1mRNA的表达;生理盐水对照组各时间点CLC-3mRNA和AQP-1mRNA表达无统计学差异;模型组于3、7、14d时CLC-3mRNA表达逐渐增高,均高于同期对照组(P<0.01),到14d时约达正常水平7倍,21、30d时又有所下降,均低于同期对照组(P<0.01);各时间点晶状体CLC-3mRNA含量两两比较,差异均有极显著意义(P<0.01);模型组于3d时AQP-1mRNA表达已下降,与同期对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),且随着白内障进一步发展,AQP-1mRNA含量逐渐降低,均低于同期对照组(P<0.01);各时间点晶状体AQP-1mRNA含量两两比较,差异均有极显著意义(P<0.01)。结论:晶状体中CLC-3和AQP-1表达的变化可能与白内障的发生发展有着密切的联系。     

晶状体上皮细胞(LECs)凋亡及凋亡相关基因caspase-3表达与老年性白内障

目的 探讨晶状体上皮细胞(LECs)凋亡及凋亡相关基因caspase-3表达与老年性白内障发生的关系.方法 选择32例老年性白内障患者晶状体前囊膜标本(白内障组),同时收集高度近视患者晶状体前囊膜标本28例(高度近视组).采用免疫组化法检测两组的晶状体前囊膜组织中凋亡相关基因caspase-3的表达,并应用TUNEL法检测两组LECs的凋亡情况.结果 白内障组LECs中凋亡细胞百分率(30.4±3.7)％,明显高于高度近视组LECs中凋亡细胞百分率[(0.27±0.12)％],差异有统计学意义(P＜0.05).白内障组LECs中caspase-3蛋白的阳性表达率为84.38％,明显高于高度近视组LECs中caspase-3蛋白的阳性表达率(10.71％),差异有统计学意义(P＜0.05).等级Logistic回归分析显示:老年性白内障患者的LECs中caspase-3蛋白的表达明显高于高度近视组(P＜0.01).结论 LECs的凋亡及caspase-3的表达在老年性白内障的发生发展过程中起重要作用.     

糖尿病性白内障晶状体上皮细胞水通道蛋白-1表达变化

目的研究大鼠糖尿病性白内障（diabetic cataract，DC）晶状体上皮细胞（lens epithelial cells，LECs）水通道蛋白-1（aquaporin-1，AQP1）表达水平的变化。方法链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）60mg／kg体重一次性尾静脉注射制作大鼠糖尿病模型，分别在造模后不同时间点摘取模型组及对照组大鼠的眼球，制作石蜡切片，应用免疫组织化学方法和计算机图像分析技术对晶状体囊膜下上皮细胞AQP1进行检测。结果透明晶状体和DC各期晶状体囊膜下上皮细胞膜均有AQP1阳性表达。图像分析显示：在造模2周糖尿病大鼠晶状体尚透明，LECs的AQP1平均吸光度（A）值即下降，与对照组比较差异有显著性意义（P〈0.05）；DC各期LECs的AQP1表达均显著低于对照组（均P〈0.01），随着白内障的发展，A值逐渐下降。除DCⅡ期与Ⅲ期之间A值差异无显著性意义外，其余DC各期之间差异均有极显著性意义（均P〈0.01）。结论LECs胞膜AQP1表达量减少先于DC的发生，DC早期AQP1的表达量显著下降，AQP1表达改变可能在DC发生发展中起一定作用。     

老年性白内障晶状体上皮细胞超微结构的研究

目的观察老年性白内障晶状体上皮细胞超微结构的改变，探讨细胞凋亡在老年性白内障形成中的作用。方法老年性白内障患者24例，行囊外或超声乳化联合后房型人工晶状体植入术，术中取中央部晶状体前囊膜，分别行光镜、扫描电镜、透射电镜观察。结果老年性白内障晶状体上皮细胞的超微结构改变有细胞形态大小不一，扁平细胞多无正常细胞结构，低柱状及柱状细胞结构大体正常，但细胞间隙增大，胞浆内可见空泡变性，部分细胞溶解坏死或发生皱缩，未见凋亡细胞。结论老年性白内障的发生与晶状体上皮细胞变形坏死密切相关，与晶状体上皮细胞凋亡无关。     

Caspase-3及Bax在人晶状体上皮细胞中的表达

目的 :观察Caspase 3及Bax在人晶状体上皮细胞中的表达 .方法 :收集 30只白内障晶状体前囊膜以及胚胎晶状体 (6只 )和成人透明晶状体 (4只 )的前囊膜 ,采用免疫组织化学的方法观察Caspase 3及Bax的表达情况及染色强度 .结果 :Caspase 3及Bax在各型白内障中均有很好的表达 ,在年龄相关性白内障中Caspase 3及Bax的表达为 11/ 12 ,10 / 12 ,在高度近视性白内障中Caspase 3及Bax的表达为 7/ 8,6 / 8,在外伤性白内障中Caspase 3及Bax的表达为 5 / 6 ,5 / 6 ,在并发性白内障中Caspase 3及Bax的表达为 3/ 4 ,4 / 4 ;在各型白内障中Caspase 3及Bax的表达没有显著性差异 (P >0 .0 5 ) .结论 :在白内障的发生中存在晶体上皮细胞的凋亡     

体外培养人眼晶状体上皮细胞整合素α5的表达

目的　探讨体外培养的人眼晶状体上皮细胞整合素α5的表达。方法　采用免疫荧光细胞计数检测法 ,对 2 0例先天性白内障患者术中的环形撕裂前囊膜进行原代培养并传代 ,取 2～ 3代细胞进行检测整合素α5的表达。结果　体外培养人眼晶状体上皮细胞整合素α5的表达阳性率平均为 93 .3 0 % ,阴性率为 6.70 %。结论　体外培养人眼晶状体上皮细胞高表达整合素α5 ,其可能在后发性白内障的发生和发展过程中发挥作用。     

老年核性与皮质性白内障晶体上皮细胞密度及增殖细胞核抗原表达

目的 :检测老年核性白内障和皮质性白内障晶体上皮细胞密度和增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnucle arantigen ,PCNA)表达 ,了解这两种白内障晶体上皮细胞增殖状态。方法 :用SP免疫组化染色方法染色两组病例中央区晶体上皮铺片。用计算机图像分析系统计算上皮铺片的细胞密度。结果 :核性白内障晶体上皮细胞密度为(5 0 38± 2 6 2 .0 3)个 /mm2 ,30张铺片中PCNA阳性 2 5张。皮质性白内障晶体上皮细胞密度为 (4 2 5 0 .6 3± 2 75 .0 5 )个 /mm2 。PCNA阳性 4例。结论 :老年核性白内障晶体上皮细胞密度高于皮质性白内障。PCNA阳性率高。提示老年核性白内障晶体上皮细胞增殖状态较为活跃 ,而皮质性白内障晶体上皮细胞退行性改变明显。     

硫酸锌对过氧化氢诱导鼠晶状体上皮细胞HSP27表达的影响

目的:探讨硫酸锌(ZnSO4)在H2O2诱导的大鼠晶状体上皮细胞热休克蛋白27(HSP27)表达中的作用。方法:离体培养大鼠晶状体,阴性对照组培养液中不加H2O2;阳性对照组加H2O2;实验组同时加入H2O2和Zn-SO4。光学显微镜下观察3组晶状体混浊程度的改变。用免疫组织化学方法检测表达情况,统计比较各组差异。结果:实验组晶状体的混浊程度较阳性对照组轻。H2O2刺激后晶状体上皮细胞中HSP27表达显著增加。随作用时间的延长阳性对照组HSP27阳性细胞数较同时段实验组明显减少。结论:ZnSO4能促进鼠的晶状体上皮细胞中HSP27表达,从而可能对晶状体的保护起重要作用。     

高功率微波对兔眼晶状体辐射损伤的研究

目的探讨高功率微波(HPM)辐射对兔眼晶状体的损伤作用.方法800 mW/cm2功率密度的HPM辐射青紫蓝兔20min,于照后不同时间应用裂隙灯、光镜、激光扫描共聚焦显微镜和图像分析技术对兔眼晶状体辐射损伤进行检测.结果HPM照射后30d晶状体改变以变性为主,上皮细胞AgNOR和DNA含量明显下降.照射后90d晶状体囊膜增厚,上皮细胞增生,AgNOR和DNA含量反跳性明显升高,晶状体后皮质混浊,白内障发生,随着时间的推移,病变持续性加重.结论HPM可导致晶状体损伤及白内障发生,辐射引起上皮细胞增殖异常是白内障发生的重要原因.     

硫氧还蛋白-2 在氧化损伤的人晶状体上皮细胞中的表达及其意义

目的：探讨硫氧还蛋白-2(thioredoin-2,Trx-2)是否参与白内障的发病过程及其对过氧化氢(H2O2)诱导的 人晶状体上皮细胞氧化损伤的影响。方法：选取志愿者(因外伤行透明晶状体取出术患者)10例和行超声乳化白内 障手术患者(年龄大于60岁)30例的晶状体前囊膜,采用链霉素亲生物素蛋白-过氧化物酶标免疫组织化学法检测志 愿者和白内障患者晶状体上皮细胞中Trx-2蛋白的表达情况。体外培养SRA01/04细胞,根据不同处理分为空白对照 组、20 μmol/L H2O2组、50 μmol/L H2O2组、100 μmol/L H2O2组、阴性对照组(转染对照空pCMV6质粒并用100 μmol/L H2O2处理)和过表达Trx-2组(转染pCMV6-Trx-2过表达质粒并用100 μmol/L H2O2处理)。采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2- thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法检测各组细胞活力;采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡;采用 化学比色法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,谷胱甘肽 (glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用Western印迹检测各组细胞中Trx-2以及B细胞淋巴瘤/白 血病-2蛋白(B-cell lymphoma 2 protein,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸 蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,caspase-3)的表达。结果：与志愿者相比,白内障患者晶状体上皮 细胞中Trx-2蛋白表达明显减少(P<0.05)。与空白对照组比较,20, 50,100 μmol/L H2O2组Trx-2蛋白表达量均明显降低 (均P<0.05)。与空白对照组相比,100 μmol/L H2O2组和阴性对照组细胞存活率降低、凋亡率增加,细胞内SOD和CAT 活性降低、GSH含量减少、MDA含量增加,Trx-2和Bcl-2蛋白表达降低,Bax和caspase-3蛋白表达增加(均P<0.05)。与 阴性对照组比较,过表达Trx-2组细胞存活率增加、凋亡率降低,SOD和CAT活性增加、GSH含量升高、MDA含量降 低,Trx-2和Bcl-2蛋白表达增加,Bax和caspase-3蛋白表达减少(均P<0.05)。结论：Trx-2参与白内障发病中上皮细胞的凋 亡,过表达Trx-2能够减少H2O2诱导的细胞凋亡,这可能与拮抗H2O2诱导的氧化损伤有关。