脑泰方对缺血再灌注沙鼠脑组织谷氨酸及其转运体功能的影响

目的：探讨脑泰方对脑缺血再灌注沙姒脑组织谷氨酸及其转运体功能的影响。方法：采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断模型。利用脑组织突触膜颗粒对^3H-L谷氨酸摄入量及高效液相色谱仪观察脑泰方对脑组织谷氨酸含量的影响。结果：模型组脑组织谷氨酸含量明显高于假手术组（P＜0．01），而其转运体功能则明显低于假手术组（P＜0．01）；脑泰方治疗组明显降低脑组织谷氨酸含量（P＜0．01）及显著升高大脑皮层、海巴、纹状体谷氨酸转运体功能（P＜0．01）。结论：脑泰方对缺血脑组织的保护作用是通过提高谷氨酸转运体功能以降低神经元突触中过多堆积的谷氨酸，从而减轻其兴奋性毒性。     

脑泰方对沙鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的药效学研究

目的 :探讨脑泰方对沙鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断模型。利用放免法测定脑组织TXB2 、6 -Keto -PG1a及其血清TNF-2 的含量。结果 :模型组脑组织TXB2 、及其血清TNF a的含量明显高于假手术组 (P <0 .0 1) ,而 6 -Keto -PG1a含量则明显高于假手术组 (P <0 .0 1) ;脑泰方治疗组能明显降低脑组织TXB2 及其血清TNF-a的含量 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,并能显著升高脑组织 6 -Keto -PG1a含量 (P <0 .0 5 ) ,且疗效优于尼莫地平组 (P <0 .0 5 )。结论 :脑泰方保护缺血脑组织的作用机理可能与其调节TXA2 与PGI2 的相对平衡以增加脑血流量和减少TNF -α的生成 ,减轻TNF -α激活的炎性介质的致炎作用 ,促进神经功能恢复有关。脑泰方对缺血脑组织的保护作用可能是与其调节TXA2 与PGI2 的相对平衡和抑制TNF-a的分泌有关。     

脑泰方对脑出血急性期大鼠脑铁代谢的干预作用及神经保护机制

目的:研究脑泰方对脑出血急性期大鼠脑组织铁代谢的调节作用,从铁死亡角度探究其神经保护机制。方法:采用自体血注射法构建SD大鼠脑出血模型,分为假手术组、模型组、去铁胺组、脑泰方常规剂量组、脑泰方高剂量组,各组于造模并给药7 d后取材;采用HE染色观察脑组织病理形态改变,采用Zea Longa 5级评分法进行大鼠神经功能缺失评分,采用普鲁士蓝染色观察并检测病灶脑组织铁沉积量,采用免疫组化和Western Blotting技术检测转铁蛋白受体(TfR)、铁调节蛋白-2(IRP-2)、膜铁转运蛋白-1(Fpn-1)的表达,采用生物试剂盒检测病灶脑组织脂质活性氧(lipid-ROS)含量,采用Western Blotting技术检测铁死亡标志物环氧合酶-2(COX-2)的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑组织病理损伤明显加重,神经功能缺失评分明显升高,TfR、IRP-2表达均明显升高,Fpn-1表达明显降低,病灶脑组织铁沉积量、lipid-ROS含量及COX-2表达均明显升高,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。与模型组比较,去铁胺组及脑泰方各剂量组病理损伤明显减轻,神经功能缺失评分明显降低,TfR、IRP-2表达均明显降低,Fpn-1表达明显升高,脑组织铁沉积量、lipid-ROS含量及COX-2表达均明显降低(P0.05或P0.01);脑泰方高剂量组铁沉积量高于去铁胺组,而其Lipid-ROS含量及COX-2表达均明显低于去铁胺组与脑泰方常规剂量组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:脑泰方可通过调节脑出血急性期大鼠神经细胞铁代谢蛋白的表达,减少脑组织铁沉积,从而抑制神经细胞铁死亡而发挥脑保护作用;铁超载并非神经细胞铁死亡的唯一因素,高剂量的脑泰方还可能通过其他途径抑制神经细胞铁死亡而发挥脑保护作用。     

电针对老年性痴呆大鼠脑兴奋性氨基酸含量的影响

目的 :观察电针对老年性痴呆大鼠脑内谷氨酸 (Glu)、天门冬氨酸 (Asp)含量的影响 ,探讨电针治疗老年性痴呆的作用机制。方法 :采用高效液相色谱和紫外分光光度计比色法检测。结果 :模型组大鼠脑组织内Glu、Asp含量明显低于假手术组 (P <0 0 1) ;针刺及喜得镇组Glu、Asp含量明显高于模型组 (P <0 0 5 ) ,但与假手术组比较无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,且针刺组与喜得镇组比较亦无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :升高老年性痴呆大鼠脑内兴奋性氨基酸水平可能是电针治疗老年性痴呆的作用机制之一。     

脑泰方对脑出血大鼠脑组织铁沉积致神经细胞过氧化损伤的影响

目的观察脑泰方对大鼠脑出血后脑组织铁沉积致神经细胞过氧化损伤的影响,探讨其作用机制。方法采用自体血注射法构建SD大鼠脑出血模型,随机分为模型组、脑泰方组、阳性对照组、假手术组,各组均于给药7、14、28 d取材;HE染色观察脑组织病理变化,采用Zea Longa 5级评分法进行神经功能缺失评分,免疫组化检测病灶脑组织铁沉积量、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量,免疫荧光技术检测转铁蛋白(Tf)、转铁蛋白受体(TfR)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX-4)的表达。结果与假手术组同一时点比较,模型组大鼠脑组织TfR和Tf表达上调,GPX-4表达下调,GSH含量下降,铁沉积量和MDA含量升高,神经功能缺失评分升高,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);MDA含量与铁含量呈正相关,GSH含量及GPX-4水平与铁含量呈负相关,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,脑泰方组和阳性对照组大鼠脑组织TfR、Tf表达下调,GPX-4表达上调,GSH含量升高,铁沉积量、MDA含量降低,神经功能缺失评分降低,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与阳性对照组比较,脑泰方组对大鼠脑组织MDA、GSH含量调节作用更强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑泰方可抑制模型大鼠脑组织铁输入蛋白的表达,减轻神经细胞铁超载,增强细胞抗氧化能力而发挥神经保护作用。     

针刺对缺血脑组织谷氨酸含量及其代谢型受体5mRNA表达水平影响的实验研究

目的:观察针刺对局灶性脑缺血模型大鼠缺血脑组织谷氨酸含量及其代谢型受体5(metabotropic glutamate receptor5,mGluR5)mRNA表达水平的影响。方法:采用线栓法复制大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、曲池组、内关组及地机组,并设置假手术组、空白组,每组6只。针刺14d后,脑组织取材,利用酶化学法检测缺血脑组织中谷氨酸的含量,利用RT-PCR检测mGluR5 mRNA的表达水平。结果:与假手术组及空白组相比,内关组、曲池组及模型组大鼠脑组织谷氨酸含量明显升高;与模型组、地机组相比,内关组、曲池组大鼠脑组织内谷氨酸含量明显下降。与假手术组及空白组相比,地机组及模型组大鼠脑组织mGluR5 mRNA表达明显升高;与模型组及地机组大鼠相比,内关组与曲池组大鼠脑组织mGluR5 mRNA表达明显升高。结论:针刺可降低缺血性脑组织谷氨酸含量,上调mGluR5 mRNA的表达水平,从而达到保护缺血性脑组织的作用。     

益气活血中药脑泰方对脑缺血后海马CA2区铁跨膜转运蛋白表达的调节作用

目的:研究脑缺血后铁跨膜转运蛋白:转铁蛋白受体(Transferrin Receptor,TFR)、膜铁转运蛋白(Ferroportin,Fpn)、二价金属离子转运体(Divalent Metal Ion Transporter 1,DMT1)、人类猫白血病C亚类病毒受体(Feline Leukemia Virus Subgroup C Receptor,FLVCR)、胸腺癌抵抗蛋白(Breast Cancer Resistance Protein,BCRP)在益气活血法脑泰方(黄芪、川芎、地龙、僵蚕)干预后的表达变化。方法:随机将SD大鼠分为假手术组、模型组、脑泰方低、中、高剂量组(3、9、27 g/kg)。各组大鼠预处理灌胃给药连续3 d,大脑中动脉栓塞法(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)模型制备术后连续灌胃给药3d,1次/d。术后3 d取材,免疫组织化学及Western-blot检测TFR、Fpn、DMT1、FLVCR、BCRP的表达。结果:脑泰方高剂量组缺血海马CA2区TFR表达明显降低(P0.05),DMT1量的表达减少(P0.05),Fpn表达明显增高(P0.05)。脑泰方各剂量组FLVCR表达明显增高(P0.05),各脑泰方治疗组BCRP表达与模型组无差异。结论:脑泰方通过减少TFR、DMT1的表达,抑制铁的细胞内转运,增加Fpn、FLVCR的表达,促进胞内铁的外排,调节铁代谢,起到神经元的保护作用。     

脑泰方提取物对局灶性脑缺血大鼠CD34表达的影响

目的探讨脑泰方提取物对缺血脑组织CD34表达的影响。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、脑复康组、脑泰方低、中、高剂量组。通过月桂酸钠损伤血管内皮细胞来复制局灶性脑缺血模型,采用免疫组化方法检测各组大鼠缺血脑组织CD34的表达。结果脑缺血后,CD34微血管呈阳性表达,脑泰方提取物中、高剂量组表达高于模型组(P<0.05)。结论脑泰方提取物能够增强缺血脑组织CD34的表达,促进局部血管新生和微血管的建立。     

脑泰方提取物对局灶性脑缺血大鼠血浆TXB_2及6-Keto-PGF_（1α）含量的影响

目的探讨大鼠局灶性脑缺血后脑泰方对其血浆血栓素B2（TXB2）及6-酮-前列腺素F1α（6-Keto-PGF1α）含量的影响。方法线栓大鼠左侧大脑中动脉制作大鼠局灶性脑缺血模型,65只健康SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组和脑泰方组。动态观察脑泰方治疗后1d、3d、5d和7d血浆TXB2和6-Keto-PGF1α含量的变化。结果模型组术后1d、5d、7d血浆TXB2含量和TXB2/6-Keto-PGF1α比值明显高于假手术组（P〈0.01）,与模型组同时点比较,脑泰方组血浆TXB2含量和TXB2/6-Keto-PGF1α明显降低。结论脑泰方能通过降低血浆TXB2及TXB2/6-Keto-PGF1α,达到对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用。     

脑泰方提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马神经干细胞增殖及Notch1蛋白表达的影响

目的:研究脑泰方提取物(NTFE)对大鼠脑缺血再灌注后内源性神经干细胞增值及Notch1蛋白表达的影响。方法:随机将SD大鼠分为假手术组、模型组及给药组(脑泰方组),以大脑中动脉闭塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,在手术处理后不同时间点给予NTFE药物治疗,利用免疫组织化学方法观察NTFE对脑缺血再灌注后大鼠内源性神经干细胞(NSCs)增殖的影响及Notch1蛋白表达的动态变化。结果:与假手术组比较,模型组Nestin阳性细胞数均增高(P0.05);各给药组在不同时间点Nestin、Notch1的表达均明显高于同时间点模型组(P0.05)。结论:NTFE能够促进MCAO模型大鼠缺血再灌注后神经细胞再生,其作用机制可能与Notch信号通路有关。     

电针对局灶性脑缺血组织谷氨酸乳酸丙酮酸含量的影响

目的:观察连续电针内关穴、曲池穴治疗7天,对局灶性脑缺血大鼠脑组织中谷氨酸、乳酸、丙酮酸含量的影响,探讨针刺治疗脑缺血的作用机制。方法:采用线栓法建立中动脉栓塞(MCAO)大鼠模型,按照神经功能评分随机配伍分为模型组、内关组、曲池组、地机组,另设立假手术组及正常组,利用韩式疼痛治疗仪电针相应穴位,7天后处死,取缺血侧脑组织行石蜡切片,HE染色观察其海马及皮质的形态学变化;酶化学法检测其谷氨酸、乳酸、丙酮酸含量。结果:电针内关穴能够显著降低MCAO大鼠缺血侧脑组织中堆积的谷氨酸(P<0.05)。电针内关穴、曲池穴能够显著降低MCAO大鼠缺血脑组织中的乳酸含量(P<0.05),同时提高其丙酮酸含量(P<0.05)。结论:电针内关穴、曲池穴能够降低脑缺血兴奋性氨基酸毒性作用,同时提高无氧酵解产物乳酸的利用率,为神经元提供能量支持。     

脂肝泰胶囊对高脂血症性脂肪肝大鼠胰高血糖素及胰岛素含量的影响

目的 :探讨脂肝泰胶囊治疗高脂血症性脂肪肝的作用机制。方法 :采用高脂饮食喂饲大鼠复制脂肪肝模型 ,实验分组为模型组、脂肝泰高剂量组、脂肝泰低剂量组、东宝肝泰对照组和正常对照组。以高、低剂量脂肝泰和东宝肝泰进行干预 ,然后测定各组大鼠血浆胰高血糖素和血清胰岛素、游离脂肪酸及肝组织中游离脂肪酸的含量。结果 :模型组大鼠血浆胰高血糖素、血清和肝组织中游离脂肪酸的含量均较正常组明显升高 (P <0 .0 5或 P <0 .0 1) ;血清胰岛素的含量较正常组明显降低 (P <0 .0 1)。与模型组比较 ,各治疗组大鼠血浆胰高血糖素、血清和肝组织中游离脂肪酸的含量均明显降低 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,脂低组各项指标的含量均低于对照组 (P<0 .0 5 ) ;各治疗组大鼠血清胰岛素的含量均明显升高 (P <0 .0 1) ,高、低剂量组的含量高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;结论 :脂肝泰胶囊可通过降低胰高血糖素、升高胰岛素的含量发挥抗脂肪肝作用     

七十味珍珠丸对局灶性脑缺血大鼠脑组织中SOD、CAT、MDA的影响

目的:观察七十味珍珠丸对永久性大脑中动脉阻塞(Permanent Middle Cerebral Artery Occlusion,PMCAO)大鼠脑组织中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)及丙二醛(Maleic dialdehyde,MDA)含量的影响,初步探讨其脑保护作用机制。方法:取SD大鼠用线栓法制备PMCAO模型。观察七十味珍珠丸对大鼠脑梗死体积、脑组织中超SOD、CAT及MDA含量的影响。结果:与PMCAO模型组比较,七十味珍珠丸高、低剂量组大鼠脑梗死体积都有不同程度的减小(P0.01或P0.05),脑组织中SOD、CAT含量都有所升高,MDA含量有不同程度下降(P0.01)。结论:七十味珍珠丸可能通过有效地增强内源性抗氧化酶清除自由基的能力、减轻脑组织脂质过氧化损伤来实现脑保护作用的。     

电针对局灶性脑缺血大鼠兴奋性氨基酸含量的影响

采用凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血模型,研究脑缺血区脑组织Ｇｌｕ、Ａｓｐ的含量。结果显示,缺血６０ｍｉｎ后,脑组织Ｇｌｕ、Ａｓｐ升高均有非常显著性意义（Ｐ＜０．０１）。提示ＥＡＡ（Ｇｌｕ、Ａｓｐ）参与缺血区神经元的损害。电针督脉经“百会”、“大椎”２穴１０ｍｉｎ后,可有效地降低脑组织中Ｇｌｕ、Ａｓｐ的含量,阻止神经元继发性坏死,将为临床针灸治疗缺血性中风提供理论依据。     

参龙健脑胶囊对脑缺血大鼠脑组织谷氨酸及N-甲基-D-天冬氨酸受体表达的影响

目的观察参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠脑组织谷氨酸（Glu）、N-甲基D-天冬氨酸受体（NMDAR）表达的影响,探讨其神经保护机制。方法结扎双侧颈总动脉制备缺血性脑损伤大鼠模型,模型成功后随机分为假手术组、模型组、脑复康组及参龙健脑胶囊低、高剂量组,参龙健脑胶囊低、高剂量组和脑复康组分别按照0.40、1.20、0.45 g/kg剂量给药,每日灌胃1次,连续28 d。采用比色法观察Glu在大鼠脑组织中的含量,免疫组化方法观察NMDAR亚单位NR1在海马区的表达。结果与模型组大鼠比较,参龙健脑胶囊组大鼠脑组织中Glu含量明显降低（P〈0.01,P〈0.05）,海马区NR1表达减少（P〈0.01）。结论参龙健脑胶囊对缺血性脑损伤的保护作用可能与其抑制脑缺血后脑组织中Glu的释放、减少NR1的表达密切相关。     

加味止嗽散不同部位群对过敏性哮喘豚鼠平喘作用的比较

目的:观察加味止嗽散(MZ)、MZ脂溶性部位群(MZC)和水溶性部位群(MZS)对过敏性哮喘豚鼠血液和支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸粒细胞(EOS)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)含量及对肺组织结构的影响。方法:采用Wright染色法计血液和BALF中的EOS。采用放射免疫法和硝酸还原酶法分别测定哮喘豚鼠血清和BALF中ET-1、NO的含量。光镜和电镜下观察豚鼠肺组织的结构变化。结果:哮喘模型组豚鼠体内的EOS、ET-1、NO的量明显高于正常对照组(P<0．01),肺组织病理学和超微结构发生明显改变。与哮喘模型组比较,MZ和MZC治疗组能降低豚鼠血液和BALF中EOS、ET-1、NO的含量(P<0．01或P<0．01)和减轻肺组织病理改变,MZS组则未见有明显的作用。结论:MZ中具有平喘作用的物质大多数集中在MZC中,其平喘作用机制可能与其能减少哮喘豚鼠体内EOS数量、恢复ET-1、NO平衡和减轻肺组织结构损伤有关。     

针刺对缺血性脑血管病模型大鼠脑组织代谢型谷氨酸受体的影响

目的：观察针刺对缺血性脑血管病模型大鼠脑组织代谢型谷氨酸受体的影响。方法：将大鼠分为对照组（Ⅰ组）,模型组（Ⅱ组）,模型＋针刺组（Ⅲ组）,每组30只。采用颈内动脉插入线栓法建立大脑中动脉栓塞（MCAO）模型,处死前30min行针刺干预,观察脑组织代谢型谷氨酸受体的变化。结果：模型组出现受体表达水平增加,随着时间的增加,表达水平呈上升水平,差异具有统计学意义（P〈0.05）。模型＋针刺组同样出现表达水平的增加,24h时mGluR1、mGluR3、mGluR8的表达水平较模型组同时段降低,差异具有统计学意义,提示经针刺干预后mGluR1、mGluR3、mGluR8的表达受到抑制。结论：针刺可抑制缺血性脑血管病模型大鼠脑组织代谢型谷氨酸受体的表达,从而减轻脑组织的进一步损伤。     

益肾通络中药复方对IR大鼠神经功能缺损及脑神经细胞凋亡的影响

目的：探讨益肾通络中药复方对脑缺血再灌注（ischemiare-perfusion,IR）模型大鼠神经功能缺损与脑神经细胞凋亡的影响。方法：成年雄性Wistar大鼠30只随机分为假手术组、治疗组、对照组3组,用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）脑缺血再灌注（IR）模型,参照Zea-Longa法进行神经病学评分、Swanson法测定脑梗死灶体积、TuNEL法检测凋亡细胞,观察益肾通络中药复方对脑缺血再灌注模型大鼠神经功能缺损与脑神经细胞凋亡的影响。结果：益肾通络中药复方治疗组的神经病学评分、脑梗死灶体积与凋亡细胞数均明显低于生理盐水对照组（P〈0．05或P〈0．01）。结论：益肾通络中药复方能明显减轻脑缺血再灌注动物的神经功能缺损与脑神经细胞凋亡。