胰腺癌组织中BRAF基因和KRAS基因突变分析

目的探讨人胰腺癌组织中BRAF和KRAS基因突变情况及两者的关系。方法对36例胰腺癌组织及癌旁胰腺组织中BRAF基因15号外显子及KRAS基因12号密码子进行测序。结果 36例胰腺癌组织中,25例出现KRAS基因12号密码子突变(69.4%,25/36),3例出现BRAF基因V600E突变(8.3%,3/36),且均同时存在KRAS突变;11例KRAS野生型胰腺癌组织中未发现BRAF突变;癌旁胰腺组织中均未检出突变。结论胰腺癌组织中BRAF基因突变可能并非主要突变,且常与KRAS基因突变同时存在。     

胰腺癌患者外周血与肿瘤组织中KRAS基因突变的研究

目的检测胰腺癌患者外周血与肿瘤组织KRAS基因突变率及两者的一致性,探讨外周血KRAS基因突变的临床应用价值。方法收集2011年7月至2012年11月北京军区总医院、北京恒兴医院30例住院胰腺癌患者外周血标本,同时在北京军区总医院、北京恒兴医院、空军总医院、解放军309医院收集胰腺癌石蜡标本25例,胰腺癌新鲜组织5例。利用高分辨率熔解曲线(HRM)法分别检测30例胰腺癌患者外周血和30例肿瘤组织中的KRAS基因突变情况,分析其中13例外周血与肿瘤组织配对标本基因突变的一致性。结果胰腺癌患者外周血中KRAS基因突变率为50%,肿瘤组织为70%,配对标本中突变一致性为62.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胰腺癌患者外周血与肿瘤组织KRAS基因突变一致性较高,在无法获得组织学标本时可以用高敏感性HRM法检测外周血KRAS基因状态,为胰腺癌的临床诊疗提供帮助。     

sARMS-PCR 检测非小细胞肺癌肿瘤组织中KRAS、BRAF 基因突变研究

目的：针对非小细胞肺癌（NSCLC）患者组织标本鼠类肉瘤病毒癌基因同源基因（KRAS）和鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体 B1（BRAF）驱动基因突变使用特异引物双扩增实时蝎形探针扩增阻滞突变系统（sARMS-PCR）检测的可行性;了解 KRAS 和 BRAF 基因突变患者临床病理特征,为NSCLC 患者个体化治疗提供理论依据。方法收集89例NSCLC 患者肿瘤组织甲醛固定石蜡包埋标本（FFPE）,采用FFPE 样品 DNA 分离试剂盒（离心柱型）提取 DNA,使用sARMS-PCR 同时进行 KRAS 及 BRAF 基因突变检测。结果① KRAS 基因突变21例（21／89）;其中KRAS 基因7种热点突变中,检出6种热点突变,均位于第12、13位密码子,1例同时检出存在G12D 及G12V 位点突变,1例同时检出存在G12C 及G12V 位点突变;未发现G12S 突变型;② BRAF 基因突变1例（1／89）,突变位点为V600E,为女性,黏液腺癌;③未见KRAS 和BRAF 基因同时突变现象。结论临床使用sARMS-PCR 技术检测NSCLC 患者KRAS 和BRAF 基因突变有较强敏感性,且石蜡组织标本取材方便,可以作为两种基因的临床检测方法;KRAS 和BRAF 基因突变与年龄、吸烟史、病理分型等均无明显相关性,KRAS 基因突变与性别相关,男性高于女性;KRAS 与BRAF 基因是独立存在的。     

结直肠癌组织和静脉血中KRAS基因突变分析及临床意义

目的：研究结直肠癌组织与静脉血中KRAS基因突变情况,探讨其对临床治疗及预后的意义。方法整群收集2013年1月-2014年12月经病理科诊断手术的129例原发结直肠癌组织标本和肘静脉血5 mL及60例癌旁正常组织对照。用PCR-DNA直接测序法检测KRAS突变情况。结果①癌组织KRAS突变率为39.53%(51/129),静脉血KRAS突变率为32.56%(42/129﹚。静脉血KRAS基因突变率比癌组织的低6.97%,差异有统计学意义(P<0.05)。癌旁正常组织无基因突变。②KRAS基因有7种突变类型,12密码子为主要突变占78.43%(40/51)。③癌组织与静脉血野生型与突变型整体的一致率为89.92%(116/129),一致性较高(K=0.783)。结论结直肠癌组织KRAS基因突变与静脉血高度一致,在肿瘤组织无法获取的情况下能代替其作为检测靶点。     

结直肠癌组织中错配修复蛋白基因表达与临床病理及KRAS BRAF基因突变的相关性分析

目的 分析结直肠癌肿瘤组织中错配修复蛋白（MMR）表达与临床病理因素及KRAS、BRAF基因突变的相关性。方法 采用免疫组织化学法和扩增阻滞突变系统对212例结直肠癌根治标本石蜡组织的MMR蛋白表达及KRAS、BRAF基因突变状态进行回顾性分析。结果 212例结直肠癌肿瘤组织中错配修复蛋白表达缺失率为11.3%(24/212)。212例结直肠癌组织中KRAS、BRAF基因的突变率分别为40.6%(86/212)、3.3%(7/212)。结论 错配修复蛋白联合KRAS、BRAF突变检测可为结直肠癌患者预后评估及个体化治疗提供依据。     

结肠癌组织和转移灶中KRAS基因突变的临床意义

目的 研究晚期结肠癌组织与转移灶中KRAS基因突变对临床治疗和用药的意义.方法 整群收集该院2014年1-12月手术的68例原发晚期结肠癌组织和转移灶.用直接测序法检测KRAS基因突变情况.结果 ①癌组织中KRAS基因突变率60.29%(41/68),转移灶为55.88%(38/68),癌组织的突变率高,二者差异无统计学意义(P>0.05).②肝转移KRAS基因突变率58.62%(34/58)较肺转移26.67%(4/15)患者高,差异有统计学意义(P<0.05);③癌组织与转移灶的KRAS基因突变同时存在的有36例,一致率为89.71%(61/68),一致性较高(Kappa=0.89).结论 结直肠癌患者中,癌组织KRAS基因突变率高于转移灶,一致率为89.71%.KRAS基因突变提示侵袭转移风险高,易耐药复发预后不良.建议原发灶和转移灶同时检测.     

结直肠癌KRAS、BRAF及PIK3CA基因突变状态分析

目的检测结直肠癌组织KRAS、BRAF及PIK3CA基因突变状态,分析突变与临床特征的关系。方法收集结直肠癌手术切除或穿刺活检标本177例,提取DNA经探针扩增阻滞突变系统聚合酶链反应扩增后,检测KRAS、BRAF及PIK3CA基因的突变状态,分析结直肠癌组织中3个基因间突变的内在关系,并分析KRAS突变与临床特征的关系。结果 KRAS基因突变率为37.9%,以Gly12Val突变最多,占总突变率的32.8%;BRAF基因突变率为4.0%;PIK3CA突变率为14.1%,以E542K突变最多,占总突变率的36.0%。BRAF基因突变者共7例,全部为KRAS和PIK3CA野生型的患者;PIK3CA基因突变者共25例,其中19例(76.0%)与KRAS存在共同突变。结论结直肠癌患者KRAS基因突变率较高,KRAS基因突变与淋巴结转移和肿瘤进展相关。联合检测KRAS、BRAF及PIK3CA基因对指导临床制定个体化治疗有重要意义。     

胰腺癌组织中BRAF表达的初步研究

目的:了解BRAF基因在正常胰腺和胰腺癌组织中的表达水平。方法:6例胰腺癌标本取自胰腺癌手术患者,3例正常胰腺组织取自外伤性胰腺损伤需切除部分胰腺者。用Trizol法抽提每份组织的总RNA,分别进行紫外分光光度计测定、琼脂糖凝胶电泳及Lab on ch ip检测,对总RNA进行质控;应用实时定量PCR技术检测正常胰腺和胰腺癌组织BRAF的mRNA水平;应用W estern b lot检测BRAF的蛋白表达水平。结果:BRAF mRNA水平在正常胰腺组织中为0.001 016 7±0.000 25,胰腺癌组织中为0.002 606 2±0.001 09,上调2.56倍;W estern b lot显示,正常胰腺组织BRAF蛋白表达为6.70±2.50,胰腺癌组织为21.23±5.60,上调3.17倍。结论:胰腺癌组织中BRAF mRNA和蛋白表达水平均明显上调,其可能的调控机制及生物学效应还有待进一步研究。     

结直肠癌组织中KRAS、NRAS及BRAF基因突变状态与临床病理特征的关系

目的:探讨结直肠癌组织中KRAS、NRAS及BRAF基因突变状态与临床病理特征的关系.方法:选取接受根治手术治疗的1205例结直肠癌患者的肿瘤组织标本,采用突变扩增阻滞系统检测KRAS、NRAS、BRAF基因的突变状态.1205例患者中,<40岁88例,40～岁663例,≥60岁454例;男722例,女483例;原发于...     

KRAS、NRAS及BRAF基因突变与结直肠癌肝转移的关系

目的 探讨KRAS、NRAS和BRAF基因突变与结直肠癌肝转移的关系。方法 收集川北医学院附属医院2019年1月至2021年10月结直肠癌组织标本246例,基于ARMS法和荧光PCR技术进行KRAS、NRAS和BRAF基因突变检测,收集患者临床资料并分析KRAS、NRAS和BRAF基因突变与肝转移的关系。结果 在246例结直肠癌患者中,KRAS、NRAS和BRAF突变率分别为45.93%(113/246)、6.10%(15/246)和4.87%(12/246)。NRAS基因突变与同时性结直肠癌肝转移相关,在NRAS突变组结直肠癌确诊时出现肝转移的频率较高（P=0.005）,但随着病程时间延长,1 a内发生肝转移的频率在NRAS突变组和野生组无统计学意义（P=0.155）,多因素Logistic回归分析显示NRAS突变是同时性结直肠癌肝转移的独立危险因素（OR=9.974,P=0.008）。KRAS和BRAF突变与肝转移无明显相关性（P> 0.05）。结论 NRAS基因突变的结直肠癌患者早期较易出现肝转移,对其进行检测不仅在靶向治疗中具有重要的指导作用,在早期肝转移评估中也具有重要...     

利用基因芯片技术检测BRAF基因在胰腺癌组织中的表达

目的：研究BRAF基因在正常胰腺与胰腺癌组织中表达的情况。方法：收集正常胰腺组织3例以及胰腺癌手术切除标本6例。后者均经病理学检查证实;用TRizol法对组织进行总RNA抽提,采用无RNA酶的DNA酶I等方法进行纯化;通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳以及Lab-on—chip对总RNA进行质控;利用寡核苷酸芯片技术检测正常胰腺和胰腺癌组织中BRAF基因的表达,并且应用逆转录聚合酶链反应（RT‘PCR）技术加以验证。结果：总RNA的OD260nm／OD280nm之值在1．8～2．0之间;琼脂糖凝胶电泳18s和28s电泳条带清晰,且28s和18s亮度之比≥2;Lab—on—chip检测显示18s和28s双峰比例及位置均正常。无降解杂峰出现。芯片杂交扫描图像信号清晰,具有较低的整体背景和较高的信噪比;Ratio分析表明,BRAF基因在胰腺癌组织中表达上调（Cy3／Cy5〉2．0）。RT—PCR验证了胰腺癌组织中BRAF mRNA表达上调。结论：BRAF基因在胰腺癌组织中表达上调,其在胰腺癌发生发展过程中的作用机制还有待于进一步探讨。     

阑尾黏液性肿瘤中KRAS基因突变分析

目的 探讨阑尾黏液性肿瘤(appendiceal mucinous neoplasms, AMNs)中KRAS基因突变情况,并分析其与临床病理特征的关系。方法 收集62例AMNs的手术切除标本进行回顾性研究,其中低级别阑尾黏液性肿瘤36例,阑尾黏液腺癌26例。62例患者中男性22例,女性40例,患者年龄29～79岁,中位年龄59岁。采用实时荧光定量PCR法检测KRAS基因突变情况,分析KRAS基因突变与临床病理特征之间的相关性。结果 62例AMNs中KRAS基因突变率为83.9%(52/62),其中低级别阑尾黏液性肿瘤为88.9%(32/36),黏液腺癌为76.9%(20/26)。KRAS基因突变均为第2号外显子突变,其中12号密码子G12D及G12V突变最为常见,分别占44.2%(23/52)及36.5%(19/52)。KRAS基因突变与性别、年龄、AMNs类型、继发性腹膜假黏液瘤级别、AJCC肿瘤分级与分期、有无淋巴结转移、有无脉管侵犯、有无神经侵犯均无明显相关性。结论 AMNs中存在KRAS基因的高频突变,可作为潜在的靶点用于临床治疗的探索。     

KRAS基因在胰腺癌发生发展中的作用

胰腺癌是危害人类健康的恶性肿瘤之一。KRAS基因作为胰腺癌中常见的基因改变类型,其与胰腺癌间的关系一直是国内外学者研究的重要方向。近年来研究发现,KRAS不仅在胰腺癌的发生中发挥着重要作用,在胰腺癌的进展中也同样必不可少。KRAS将可能成为将来治疗胰腺癌的一个重要靶点。作者对KRAS基因在胰腺癌发生发展中的作用作一综述。     

KRAS、PIK3 CA和BRAF基因突变与结直肠癌治疗效果不理想的预后相关

KRAS、PIK3 CA和BRAF基因突变对结直肠癌预后预测研究的结果发表在今年8月的英国肿瘤学杂志上.作者认为,肿瘤特异性的基因突变决定了肿瘤的生物学行为和其对特殊治疗的反应,因此肿瘤基因突变的信息能够指引治疗策略的选择.     

结直肠癌KRAS、BRAF及PIK3 CA基因突变的检测及内在关系

目的：检测结直肠癌组织KRAS、BRAF及PIK3CA基因突变情况,并分析其内在关系。方法：收集内蒙古巴彦淖尔市医院普外一科2011年3月至2011年8月结直肠癌手术切除标本41例,提取DNA经PCR扩增后,检测KRAS、BRAF和PIK3CA基因的突变情况,分析结直肠癌组织KRAS、BRAF及PIK3CA基因突变间的内在关系。结果：（1）15例患者的KRAS基因发生突变,突变率36．6％,5例患者的BRAF基因发生突变,突变率12．2％,7例患者的PIK3CA基因发生突变,突变率17．1％。（2）BRAF基因突变者共5例,全部为KRAS野生型的患者;PIK3CA基因突变者共7例,其中3例（42．9％）为KRAS野生型的患者,4例（57．1％）为KRAS突变型的患者;BRAF与PIK3CA基因不存在共突变。结论：（1）结直肠癌患者KRAS基因突变率较高,有必要进行常规检测。（2）KRAS野生型患者中部分患者的BRAF基因突变可能是促进结直肠癌发生发展的原因之一。 PIK3CA与KRAS基因的共突变可能促进了结直肠癌发生发展。     

KRAS、PIK3 CA和BRAF基因突变与结直肠癌治疗效果不理想的预后相关

局部进展的Ⅲ期病变约占非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer，NSCLC）的25％～30％，包含了异质性广泛的组合，是治疗模式最具有挑战性的一个亚群．对于ⅢA期N2NSCLC接受诱导化放疗（41Gy）后无进展的患者，到底应该选择手术还是完成全量放疗？内科医生、放疗科医生和外科医生一直争论不休。     

BRAF基因突变与消化道肿瘤

近年来,BRAF基因在肿瘤中的作用越来越受到重视.BRAF基因编码一种丝/苏氨酸特异性激酶（a serine/theronine-specific kinases）,是RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK通路（MEK：mitogen/extracellular signalregulated kinase;ERK：extracellular signal-regulated kinase;MAPK：mitogen-activated protein kinase）重要的转导因子,参与调控细胞内多种生物学事件,如细胞生长、分化和凋亡等.     

新疆维吾尔族、汉族结直肠癌患者中KRAS及BRAF基因突变差异及其与预后的关系研究

目的探讨新疆维吾尔族(维族)、汉族结直肠癌伴肝转移患者中KRAS基因及BRAF基因突变差异及其与临床病理特征和预后的关系。方法选择新疆医科大学第一附属医院2005年1月-2010年12月收治的100例新疆维、汉族结直肠癌伴肝转移患者,应用PCR及Pyrosequencing测序法检测分析KRAS基因及BRAF基因突变情况,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果维、汉族结直肠癌伴肝转移患者的KRAS与BRAF基因突变率分别为28%(28/100)与5%(5/100)。50例汉族患者中KRAS基因突变18例,BRAF基因突变2例;50例维吾尔族患者中KRAS基因突变10例,BRAF基因突变3例。原发肿瘤组织学分级、区域淋巴结转移、脉管瘤栓、肝外侵犯或转移、KRAS和BRAF为结直肠癌的预后影响因素(P<0.05);多因素分析显示,脉管瘤栓(P=0.035)、KRAS基因(P=0.001)为结直肠癌的独立的预后因素。结论在新疆维、汉族结直肠癌伴肝转移患者中,脉管瘤栓及KRAS基因具有主要的预后价值。积极检测KRAS基因,可望延长患者生存期。     

胰腺癌组织中bax基因和蛋白的过度表达

目的分析人胰腺癌组织中bax基因的mRNA转录和蛋白表达,探讨其在胰腺癌发生发展中的作用.方法应用原位杂交和免疫组织化学法检测40例胰腺癌和14例慢性胰腺炎组织的bax表达.结果胰腺癌组织中bax基因的mRNA水平及蛋白水平的表达分别为65%(26/40)、72.50%(29/40),明显高于慢性胰腺炎组织.该基因的表达与患者的年龄、性别、TNM分期及组织分化程度无关.结论在胰腺癌组织中bax基因mRNA转录和蛋白表达结果具有显著一致性,该基因在胰腺癌发生发展中起重要作用.