单纯疱疹病毒性脑炎诊断与治疗观察

目的：探讨小儿单纯疱疹病毒性脑炎（HSE）的临床特点、诊断方法及治疗效果。方法：应用聚合酶链反应（PCR）技术和酶联免疫吸附测定（EUSA）方法，对27例病毒性脑炎患儿的脑脊液进行HSV—DNA和特异性IgM抗体检测。结果：脑脊液检查HSV—DNA阳性或HSV—IgM阳性者诊断为单纯疱疹病毒脑炎12例，占44％。对单纯疱疹病毒性脑炎患儿予以静脉滴注阿昔洛韦，连续用药1周，结果治愈7例，好转3例，自动出院及死亡各1例。结论：PCR技术与特异性IgM抗体检测两种方法相结合有助于提供单纯疱疹病毒性脑炎早期诊断的实验室依据，而阿昔洛韦的使用是改善预后的关键。     

分子生物学技术检测儿童病毒性脑炎病原体的研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测儿童病毒性脑炎脑脊液（CSF）中的病原体的价值。方法应用定性聚合酶链反应（PCR）作筛选，检测最常见的引起病毒性脑炎的6种病毒，对单纯疱疹病毒（HSV），柯萨奇病毒（CV），埃可病毒（EV）阳性者作荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测，其中单纯疱疹病毒脑炎（HSVE）分别在3个时点（治疗前、治疗中、出院时）检测DNA拷贝数。结果定性聚合酶链反应阳性标本FQ-PC检测100％阳性，HSV—DNA量在3时点有差异，病毒核酸拷贝数与临床表现一致。结论FQ—PCR可作为儿童病毒性脑炎早期诊断的有效方法之一，动态观察HSV—DNA含量有助于指导治疗，估计疾病的发展和预后     

病毒性脑炎、脑膜炎多病原早期诊断的研究

目的：明确病毒性脑炎、脑膜炎病原，评价其早期诊断方法。方法：采用微量细胞培养法，PCR法、ELISA间接法对86例脑炎、脑膜炎的患儿进行病原学检测。结果：（1）86例患儿中36例用微量细胞培养法分离到了病毒，阳性率41．86％，其中肠道病毒18例、腺病毒8例、呼吸道合胞病毒7例，阳性率分别为29．30％、9．30％、8．14％：（2）86例患儿脑脊液中检出特异性HSV1 DNA23例，Adv-DNA15例，CVB－DNV32例，阳性率分别为26．74％、17．14％和37．21％；（3）用ELISA间接法测定了病人血清及脑脊液中特异性单纯疱疹病毒1（HSV1）－IgM、腺病毒（Adv)-IgM、柯萨奇病毒（CVB）－IgM。血清中阳性数HSV11，Adv10例，CBV25例，阳性率分别为12．79％，11．63％。29．06％。脑脊液中HSV1 8例，Adv9例，CVB15例（其中CVB2 8例，CVB3 10例），阳性率分别为9．30％，10．47％、17．44％。结论：（1）PCR技术阳性率高于传统病毒分离培养法；（2）血清及脑脊液中特异性抗体水平检测可用于早期诊断，（3）本地区病毒性脑炎，脑膜炎的病原以肠道病毒为首位，腺病毒次之，单纯疱疹病毒居第三位。     

无环鸟苷对脑脊液单纯疱疹病毒DNA影响初探(附8例报告)

目的：探讨无环鸟苷对脑脊液（CSF）中单纯疱疹病毒（HSV－1）DNA的影响。方法：应用定量聚合酶链反应（PCR）技术检测了8例单纯疱疹病毒性脑炎（HSE）患者系列CSF中HSV－1，并将我环鸟苷治疗前后的HSV－1DNA量作比较分析。结果：无环鸟苷治疗后的CSF中，HSV－1DNA量较治疗前减低，结论：无环鸟苷可使CSF中HSV－1DNA量减低，CSF中HSV－1DNA定量检测可作为判断无环鸟苷疗效及给药与否的依据之一。     

应用荧光定量PCR法快速诊断柯萨奇病毒性脑炎

目的：采用逆转录PCR结合荧光探针对体外RNA扩增和检测技术即荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法测定脑脊液中柯萨奇病毒（CBV）的数量，诊断柯萨奇病毒性脑炎。方法：采用CBV FQ-PCR诊断试剂盒，以一种完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量PCR法，检测了113例临床诊断为病毒性脑炎患儿的脑脊液标本。结果：46例脑脊液FQ-PCR CBV阳性患者中，CBV拷贝数与临床病情轻重呈正相关，在病程早期CBV阳性率较高。结论：FQ-PCR法可用于柯萨奇病毒性脑炎的早期诊断，对指导治疗和疗效观察有一定的临床意义。     

单纯疱疹脑炎的病原学诊断及临床分析

目的：探讨病原学诊断在单纯疱疹脑炎早期的诊断及临床意义。方法：经酶联免疫吸附试验（ELISA）检测29例病毒性脑炎患儿血清和脑脊液（CSF）中的单纯疱疹病毒HSV—Ⅰ和HSV-Ⅱ型IgM、IgG抗体;用聚合酶链反应（PCR）检测CSF中HSV—DNA。结果：有14例确诊为单纯疱疹脑炎（HSE）,15例为非单纯疱疹脑炎（NHSSE）。在HSE的临床表现中,意识障碍发生率显著高于NHSSE;实验室脑脊液常规检测,HSE多见红细胞、脑电图及CT检查,额与颞部位有特征性改变。结论：HSF的病原学诊断对于早期诊断及指导临床治疗具有重要意义。     

结缔组织病患儿B19病毒感染的意义

目的：研究我国小儿常见结缔组织病患B19病毒感染的状况及其临床意义。方法：用巢式PCR法对95例小儿常见结缔组织病患进行B19－DNA检测，对其中50例患同时进行B19主要衣壳蛋白抗IgM(B19-VP2-IgM）检测。结果：病例组95例，B19－DNA阳性34例（36％），健康对照组50例，B19－DNA阳性2例（4％）；病例组B19－DNA阳性率与对照组相比有显差异（P＜0．01）。病例组B19－VP2－IgM检测50例，阳性11例（22％），健康对照组B19－VP2－IgM均为阴性；B19－VP2－IgM阳性率与对照组相比有显差异（P＜0．01）。5种疾病间B19－DNA及B19－VP2－IgM阳性率无显差异（P＞0．05）。50例患B19－DNA，B19－VP2－IgM同时检测结果：10例B19－DNA，B19－VP2－IgM均阳性，1例仅B19－VP2－IgM阳性，7例仅B19－DNA阳性。病例组B19阳性率为37％（35／95）。结论：我国结缔组织疾病患儿有较高的B19感染率。B19与小儿结缔组织病密切相关，可能是导致这些疾病的主要病原体之一。     

肠道病毒脑炎的季节分布及临床特点

目的探讨肠道病毒所致病毒性脑炎（肠道病毒脑炎）在各个季节的分布及I}缶床特点。方法全部病毒性脑炎患者在疾病的急性期留取脑脊液,按比例在每季节各随机抽取15例、42例、14例和9例患儿,以PCR法检测肠道病毒,观察肠道病毒脑炎的流行病学特点及临床特征。结果①80例患儿中肠道病毒PCR阳性22例（27．5％）,其中春季13．3％（2／15）,夏季35．7％（15／42）,秋季26．7％（4／14）,冬季11．1％（1／9）。②肠道病毒感染者和非肠道病毒感染者脑脊液、头颅CT与脑电图的异常情况差异无统计学意义（P〉0．05）。③临床情况：两组发热、惊厥和意识方面比较,差异无统计学意义（P〉O．05）;皮肤肌肉刺痛、口角或咽峡疱疹、扁桃体灰白小点及心肌损害方面,两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;肝功能损害方面,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论①肠道病毒脑炎和非肠道病毒所致病毒性脑炎在季节分布、脑脊液常规、脑脊液生化、头颅CT、脑电图及发热、惊厥、意识改变等方面无显著差异;②肠道病毒脑炎较易出现肌肉刺痛、咽峡黏膜疱疹及心、肝功能损害,患儿扁桃体上可见灰白斑点。     

HPV、HSV2感染及C—cerbB—2表达与宫颈癌关系

目的：探讨汕头地区宫颈癌的发生与HPV，HSV2感染以及C-cerbB-2表达的相关性。方法：采用PCR技术检测宫颈癌（84例）组织与正常宫颈（13例）组织的HPV－DNA，HSV2－DNA，并用免疫组化SP法检测同一宫颈癌组织标本与正常宫颈组织标本的C-cerbB-2表达情况。结果：（1）宫颈癌组织HPV－DNA，HSV2－DNA阳性率为47．6％，46．4％，正常宫颈组织则为7．7％，15．4％，宫颈癌组织的HPV，HSV2感染率均显著高于正常宫颈组织（P＜0．01，P＜0．05）。（2）宫颈癌组织中，HPV，HSV2双阳性24例，经统计学处理，HPV和HSV2间的感染有显著相关性（P＜0．05）。（3）宫颈癌组织的C-cerbB-2表达率为34．5％，显著高于正常宫颈组织（0／13，P＜0．05）。（4）75．9％的C-cerbB-2阳性患者（22／29）与HPV与HPV和（或HSV2）同时呈现阳性。结论：汕头地区宫颈癌的发生与较高的HPV，HSV2感染率和C-cerbB-2表达率密切相关，三者的共同作用可能是宫颈癌发生发展的重要因素。     

孕妇血清中单纯疱疹病毒的检测

应用免疫组学检测方法及聚合酶链式反应（PCR）方法检测正常孕妇血清中单纯疱疹病毒（HSV）抗体及DNA表达,正常孕妇血清中HSV－IgG,HSV-IgM及HSV－DNA的阳性表达率分别为93．7％（291／301）,12．9％（40／310）和20％（62／310）。结果表明检测孕妇血清中HSV的现症感染水平具有重要意义。     

巢式聚合酶链反应检测脑脊液中单纯疱疹病毒的DNA

应用巢式（ｎｅｓｔｅｄ）聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测患者脑脊液中单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）ＤＮＡ，２５份经鞘内ＩｇＧ抗体确诊的“单纯疱疹病毒性脑炎（ＨＳＥ）”患者的ＣＳＦ标本中２３份ＰＣＲ阳性；１０５份ＩｇＧ阴性的“散发性脑炎”患者ＣＳＦ中１５份ＰＣＲ阳性，其中７份阳性标本为发病１周内所取，２份取于发病当日。提示ＰＣＲ更适于ＨＳＥ的早期诊断。     

小儿病毒性脑炎的脑电图分析

目的:评价脑电图在小儿病毒性脑炎中的诊断价值,比较脑电图较其他方法对诊断小儿急性病毒性脑炎早期的优越性。方法:采用seiiate Harmonie 44数字化脑电图仪对62例病毒性脑炎患儿进行EEG检查,并且和其脑脊液、CT等的检查结果进行对比。结果:本组62例脑炎患儿,EEG轻度异常26例,中度异常22例,重度异常9例,正常者5例,阳性率91.9%,以发病后4~7天阳性率最高;CT结果异常14例,正常者48例,阳性率22.6%;脑脊液检查异常36例,正常者26例,阳性率58.1%。结论:在临床上有病毒感染史、EEG结果异常时,结合临床症状、体征,应考虑病脑的诊断。尽管脑电图的异常并非是病脑的特异性诊断指标,但其变化早于脑脊液及头颅CT,故对病脑的临床早期诊断有可靠的价值。     

应用PCR,病毒分离及核酸杂交技术诊断疱疹病毒性脑炎的研究

应用聚合酶链反应，核酸分子杂交和病毒分离技术检测了７例临床诊断为病毒性脑炎患者及１０例其他神经疾病对照组患者的脑脊液中单纯疱疹病毒ＤＮＡ。结果ＰＣＲ检出５例脑炎患者ＣＳＦ中ＨＳＶＤＮＡ阳性，其中ＨＳＶ１型２例，ＨＳＶ２型３例，而核酸杂交方法仅检出２例，其中ＨＳＶ－１和ＨＳＶ－２各１例，与病毒分离结果一致。     

PCR检测生殖器疱疹患者HSV-2

目的：用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍ ｅｒａｓｅｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ, Ｐ Ｃ Ｒ）检测生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒（ｈｅｒｐｅｓｓｉｍ ｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ ２, Ｈ Ｓ Ｖ２）。方法：对１０１ 例生殖器疱疹和糜烂患者及２０ 例对照组用 Ｐ Ｃ Ｒ法检测 Ｈ Ｓ Ｖ１、 Ｈ Ｓ Ｖ２。结果： Ｈ Ｓ Ｖ２ 检出阳性率占 ６０４％ （６１／１０１）, Ｈ Ｓ Ｖ２ 和 Ｈ Ｓ Ｖ１ 双重感染占４％ （４／１０１）。对照组均为阴性,并且年龄轻者感染阳性率高于年龄长者。结论： Ｐ Ｃ Ｒ 具有操作较易、快速、敏感的特点,为临床对生殖疱疹的诊断和鉴别诊断提供了理想的新方法。     

单纯疱疹病毒感染诊断方法及标本选择的探讨

目的目的探讨单纯疱疹病毒（HSV）感染诊断方法及标本的选择对诊断结果的意义。方法选择117例疑似HSV感染的皮肤科门诊患者或神经内科脑炎脑膜炎患者血清，其中53例有明显疱疹症状者同时取疱液标本，78例脑炎脑膜炎患者同时采集脑脊液标本。应用ELISA法、免疫印迹法检测血清、脑脊液中HSV—IgM抗体，应用间接免疫荧光法（IIF）检测脑脊液、疱疹液HSV抗原。结果血清、脑脊液标本ELISA法和免疫印迹法检测HSV—IgM抗体阳性率分别为70．94％、6．41％和59．83％、3．85％。脑脊液、疱疹液TIF法检测HSV抗原阳性率分别是15．38％、67．93％。结论ELISA法与免疫印迹法检测HSV—IgM抗体阳性率无显著性差异（γ=0．017，P〉0．5）；脑脊液标本供检测HSV抗原与HSVIgM抗体的阳性率差异显著（γ=13．224，P〈0．05．）；对复发感染患者采用疱疹液抗原检测相对于采用血清检测抗体对诊断HSV感染更具有临床意义。在临床上，对不同病症病程的HSV感染，选择相应适宜的诊断方法及标本种类可取得更准确的检测结果。     

反转录病毒介导基因转移治疗脑肿瘤的安全性研究Ⅱ.HSV—tk/ACV系统的安全性研究

采用细胞接种、X－gal染色、TK基因的PCR和病理切片观察，分别将PA317／BAG．PA317／TK产病毒细胞注射到动物体内，结果产病毒细胞在动物体内存活期均不超过1个月；产病毒细胞在体内没有形成肿瘤，也没有发现严重的炎症反应；HSV－tk／ACV系统用于动物基因治疗，ACV及其代谢产物没有发现明显的毒副作用和病理改变。说明反转录病毒介导的HSV－tk／ACV系统在动物体内取得了安全的结果。     

Polymerase chain reaction for the rapid diagnosis of tuberculous meningitis

Polymerase chain reaction (PCR) based on the amplification of a 169 bp DNA fragment specific for the Mycobacterium tuberculosis complex was evaluated for the rapid diagnosis of tuberculous meningitis (TBM). A total of 105 CSF specimens from clinically suspected cases of TBM were studied. Clinical details of the cases and cytochemical parameters of the CSF specimens were recorded. For PCR 10 CSF specimens from cases other than TBM, 4 non-mycobacterial culture isolates (one strain of E coli, one strain of proteus species and 2 strains of salmonella species) and one sample of sterile distilled water were processed as negative controls. For positive control standard culture of Mycobacterium tuberculosis H37Rv was processed with every batch of specimens. Besides PCR, smear for AFB by the Ziehl-Neelsen (ZN) and the fluorochrome method and culture on Lowenstein-Jensen medium was also carried out. By PCR, 31.42% specimens were found positive, whereas by conventional culture on Lowenstein-Jensen medium only 3.8% specimens were positive.     

212例性传播疾病的病原学检测结果分析

目的：了解大理地区引起性传播疾病（STD）的病原微生物种类。方法;采集212例患泌尿生殖道分泌物,应用培养法,免疫标记法和PCR技术等进行病原微生物检测。结果：淋球菌,解脲脲原体,沙眼衣原体,人乳头瘤病毒,单纯疱疹病毒和白色念珠菌的检出率分别是55．2％,21．7％,13．2％,4．7％和0．9％和4．2％。重叠感染率为15．1％。结论：男女患均以淋球菌感染为主,其次为解脲脲原体和沙眼衣原体感染,但病毒性感染易形成潜伏状态,应引起临床医生高度重视。