沉默Yes相关蛋白1对人非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 研究Yes相关蛋白1(YAP1)在非小细胞肺癌细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭中的作用.方法 通过慢病毒介导的小干扰RNA靶向抑制人非小细胞肺癌细胞株A549中YAP1基因的表达,采用CCK-8法、流式细胞术分别检测沉默YAP1对A549细胞增殖及凋亡周期的影响,Transwell实验观察沉默YAP1对A549细胞迁移、侵袭能力的影响.结果 沉默YAP1后,A549细胞YAP1 mRNA和蛋白表达均下调(P＜0.01),CCK-8实验结果显示沉默YAP1抑制A549的增殖、增加G0/G期的细胞比例(P＜0.01),Transwell实验结果示沉默YAP1抑制A549细胞的迁移、侵袭(P＜0.01).结论 沉默YAP1基因对非小细胞肺癌细胞的恶性生物学特征具有抑制作用,YAP1可能成为肺癌治疗的潜在靶标.     

rL-IL29对肺腺癌A549细胞生物学特性的影响及相关机制

目的: 探讨表达IL-29的重组新城疫病毒LoSota株（recombinant Newcastle disease virus LoSota line expressing IL 29,rL IL29）对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制。方法: 体外培养肺腺癌A549细胞,以rL-IL29感染的A549细胞为rL-IL29组,LoSota株新城疫病毒（NDVL）感染的A549细胞为NDVL组及PBS处理的A549细胞为对照组。蛋白质印迹法检测各组A549细胞中NDV HN、IL-29蛋白的表达;CCK8法、划痕试验及Transwell侵袭实验检测rL IL29对肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;蛋白质印迹法检测细胞E-钙黏蛋白、MMP2、波形蛋白及AKT/NF κB通路相关蛋白的表达水平。结果： A549细胞感染rL-IL29后,NDV HN及IL-29蛋白均稳定表达,且明显高于NDVL组及对照组;rL-IL29及NDVL感染A549细胞后能够抑制细胞的增殖、迁移及侵袭,且rL-IL29作用更强;与对照组及NDVL组比较,rL-IL29感染后A549细胞中E-钙黏蛋白表达量明显增加,波形蛋白、MMP2（66 kDa/72 kDa）、p AKT及P65蛋白表达明显减弱（均P＜0.05）。 结论： rL-IL29可能通过阻碍AKT/NF-κB信号通路上调E-钙黏蛋白表达和下调波形蛋白、MMP2蛋白表达,从而抑制肺腺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移。     

大黄酸对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其机制

目的：探讨大黄酸对非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并阐明其机制。方法：将NSCLC A549细胞分为对照组和低、中及高剂量大黄酸组,采用不含大黄酸的培养基和含有质量浓度为5、10和20 μmol·L^-1大黄酸的培养基分别培养细胞24、48和72 h。采用MTT法检测各组A549细胞增殖率,流式细胞术检测A549细胞凋亡率以及不同细胞周期A549细胞百分比,Western blotting法检测各组A549细胞中半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）、半胱氨酸蛋白酶9（Caspase-9）、细胞色素C（Cyt-C）和凋亡诱导因子（AIF）蛋白表达水平,划痕实验和Transwell实验检测各组A549细胞迁移和侵袭能力。结果：大黄酸处理24h后,与对照组比较,低、中和高剂量大黄酸组A549细胞增殖率明显降低（P<0.05）,细胞迁移距离明显减少,侵袭细胞数量明显减少;中和高剂量大黄酸组A549细胞凋亡率明显升高（P<0.05）;高剂量大黄酸组G₁期细胞百分比明显降低（P<0.05）。大黄酸处理48 h后,与对照组比较,中和高剂量大黄酸组A549细胞中Caspase-3、Caspase-9、Cyt-C和AIF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：大黄酸可抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能与上调Caspase-3、Caspase-9、Cyt-C和AIF蛋白表达有关。     

miR-217靶向E2F3抑制非小细胞肺癌细胞增殖并诱导凋亡

目的：研究miR-217对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法：RT-qPCR检测非小细胞肺癌组织和细胞中miR-217与E2F3 mRNA的表达,利用Lipofectamine 2000将miR-NC、miR-217 mimic、miR-217 inhibitor、pc-NC、pc-E2F3质粒分别或联合转染进入非小细胞肺癌SK-MES-1或A549细胞,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,双荧光素酶报告检测靶向关系,Western blot检测E2F3蛋白相对表达水平。结果：miR-217在非小细胞肺癌组织和细胞中均明显下调（P<0.01）。与Control组相比,miR-217 mimic组非小细胞肺癌SK-MES-1或A549细胞克隆数目明显减少,细胞凋亡率升高（P<0.01）,miR-217 inhibitor组非小细胞肺癌SK-MES-1或A549细胞克隆数目明显增加,细胞凋亡率降低（P<0.01）。miR-217靶向下调E2F3。共转染pc-E2F3后逆转miR-217对非小细胞肺癌SK-MES-1或A549细胞增殖和凋亡的作用。结...     

真核基因组编码大量长链非编码RNA癌易感性候选基因15在肺癌细胞中表达上调且通过miR-153-3p激活Wnt/β-catenin 通路调控A549细胞增殖、侵袭及化疗敏感性实验研究

目的:探讨真核基因组编码大量长链非编码RNA癌易感性候选基因15(lncRNA CASC15)调控肺癌A549细胞增殖、侵袭和化疗敏感性的作用机制。方法:实时荧光定量PCR实验分析lncRNA CASC15、miR-153-3p在65例肺癌组织、50例癌旁组织、肺癌A549细胞和正常肺上皮BEAS-2B细胞中的差异表达。选取A549细胞进行培养,并将siRNA CASC15转染A549细胞,分析下调CASC15对A549细胞增殖和侵袭的影响,用不同浓度顺铂(0、2、4、8、16μg/ml)处理A549细胞后,检测细胞活力和凋亡率。miRcode预测lncRNA CASC15的潜在结合靶点,双荧光素酶报告基因实验进一步分析与miR-153-3p之间的相关性。下调miR-153-3p或同时上调lncRNA CASC15和miR-153-3p表达,分析A549细胞增殖、侵袭和化疗敏感性情况。过表达或下调miR-153-3p,检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达。XAV939作用细胞后进一步检测miR-153-3p对A549细胞的增殖、侵袭和化疗敏感性的影响。结果:与癌旁正常组织或B...     

TBX3在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响

 目的 检测TBX3在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达,观察下调TBX3对肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法 采用免疫组化方法检测93例NSCLC组织中TBX3蛋白的表达情况。应用siRNA干扰肺癌细胞系A549和H157内TBX3基因的表达,观察其对细胞增殖和侵袭能力的影响。 结果 在93例NSCLC中,71例存在TBX3蛋白过表达（76.34%）,其阳性表达与肿瘤的p-TNM分期和淋巴结转移相关。转染TBX3特异性干扰RNA后,肺癌细胞的增殖与侵袭能力均受到显著抑制。 结论 TBX3在NSCLC中呈过表达,并与肺癌分期和转移显著相关,干扰TBX3表达可明显抑制肺癌细胞的增殖与侵袭能力。     

甘草查尔酮B对人非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨甘草查尔酮B(LCB)对于人非小细胞肺癌A549细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法：采用CCK-8法和平板克隆形成法检测LCB对A549细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞技术检测对细胞周期、凋亡的影响;采用Western blotting法检测线粒体凋亡蛋白表达。结果：LCB可显著抑制A549细胞的增殖。LCB经处理后将A549细胞阻滞在G0/G1期（P<0.05）,同时细胞凋亡率也明显增加（P<0.05）。Bax/Bcl-2比值及Caspase-3蛋白表达明显上升（P<0.05）。结论：LCB可通过阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,从而抑制非小细胞肺癌A549的增殖。     

miR-155-5p mimic靶向HIF-1α对非小细胞肺癌A549细胞生长和运动能力的调节作用和机制

【摘要】 目的 探讨miR-155-5p mimic靶向缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）对非小细胞肺癌A549细胞生长和运动能力的调节作用和机制。 方法 取对数期生长的A549细胞,将未经转染的细胞设为Control组,miR-155 mimic及HIF-1α分别转染至A549细胞,设为miR 155 mimic组和HIF-1α组;再将两者共同转染于A549细胞,设为mimic+HIF-1α组。采用荧光素酶报告基因检测miR 375与SLC7A11的靶向关系,利用RT PCR检测各组细胞miR 155-5p及HIF-1α mRNA表达水平,Edu染色检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室实验检测细胞侵袭,Western blot检测细胞中各蛋白表达。结果 HIF-1α是miR 155-5p-mimic的靶向基因。与Control组相比,miR-155-mimic组HIF-1α-mRNA水平、HIF-1α和Ki67蛋白表达量及增殖细胞数、侵袭细胞数及划痕愈合率均降低（P＜0.05）,HIF-1α组HIF-1α mRNA水平、HIF-1α和Ki67蛋白表达量及增殖细胞数、侵袭细胞数及划痕愈合率均升高（P＜0.05）。与HIF-1α组相比,mimic+HIF-1α组HIF-1α mRNA水平、HIF-1α和Ki67蛋白表达量及增殖细胞数、侵袭细胞数及划痕愈合率均降低（P＜0.05）。与Control组相比,miR-155-mimic组N cadherin、VEGF、VEGFR2、P38蛋白表达量降低,E cadherin蛋白表达量升高（P＜0.05）,HIF-1α组N cadherin、VEGF、VEGFR2、P38蛋白表达量升高,E cadherin蛋白表达量降低（P＜0.05）。与HIF-1α组相比,mimic+HIF-1α组N cadherin、VEGF、VEGFR2、P38蛋白表达量降低,E cadherin蛋白表达量升高（P＜0.05）。结论 miR-155-5p可通过靶向抑制HIF-1α表达抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移,其作用机制可能与抑制上皮间质转化及VEGF/P38通路相关。     

miR-363通过靶向HMGA2调控非小细胞肺癌的细胞生长与侵袭

【摘要】 目的 探讨miR 363通过靶向高迁移率蛋白A2(High mobility protein A1,HMGA2)调控非小细胞肺癌的细胞生长与侵袭行为及其作用机制。方法 qPCR检测非小细胞肺癌和癌旁正常组织、不同细胞株中miR 363的表达;分析miR 363的表达与非小细胞肺癌临床病理学参数之间的关系; CCK 8细胞增殖实验检测miR 363对非小细胞肺癌细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测miR 363对非小细胞肺癌细胞周期的影响;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测抑制miR 363后非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭能力的变化;双荧光素酶报告基因检测miR 363与HMGA2的相互作用。结果 与癌旁正常组织比较,非小细胞肺癌组织中miR 363表达明显增高;非小细胞肺癌细胞A549中miR 363的表达水平最高;抑制miR 363的表达后非小细胞肺癌细胞增殖能力减弱,促进其凋亡行为;抑制miR 363的表达后,A549细胞的迁移和侵袭能力受到相应的抑制;miR 363能与HMGA2的3’ UTR特异性结合,调控HMGA2的表达活性。结论 miR 363在非小细胞肺癌的发生发展过程中起着重要作用,可通过靶向调节HMGA2的表达影响非小细胞肺癌细胞的生长和侵袭。     

牛磺酸对人肺癌细胞株A549细胞凋亡的影响

探讨牛磺酸（Tau）对人肺癌细胞株A549细胞凋亡的作用及其初步机制。方法 将A549细胞分为6组:Control组（正常对照组,未给予任何药物处理）和Tau 1组(给予Tau 10 mmol·L-1)、Tau 2组(给予Tau20mmol·L-1)、Tau 3组(给予Tau 40 mmol·L-1)、Tau 4组(给予Tau 80 mmol·L-1)、Tau 5组(给予Tau160mmol·L-1);阳性对照组DDP 4mg·L-1,作用时间分别为24、48、72h。应用MTT比色法检测人肺癌细胞株A549的细胞增殖,流式细胞术检测人肺癌细胞株A549的细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-9、Caspase-3的活性,免疫印迹法检测p53正向细胞凋亡调控因子（PUMA）的水平及Bax蛋白、Bcl-2蛋白的表达水平。结果Tau能够以时间剂量依赖方式来抑制A549细胞增殖,并显著增加A549细胞凋亡率。Tau可以明显增加A549细胞内Caspase-9、Caspase-3的活性,以及诱导A549细胞内PUMA、Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调。Tau对人胚肾细胞293T的细胞活性无明显影响。结论 Tau对人肺癌细胞株A549有增殖抑制和凋亡诱导的作用,其机制可能是Tau通过上调PUMA、Bax表达及下调Bcl-2表达,进而增加Caspase-9、Caspase-3的活性来诱导A549细胞发生凋亡。     

miRNA-155表达对人肺癌细胞A549增殖的影响

【目的】探讨miRNA-155在正常肺组织和非小细胞肺癌组织中的表达及miRNA-155对人肺癌细胞A549增殖的影响。【方法】采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）技术检测15例非小细胞肺癌组织及其癌旁组织中miRNA-155的表达;A549细胞分别转染miR-NC和miRNA-155 mimic ,采用Real-time PCR技术检测转染后A549细胞中的miRNA-155表达水平,同时采用MTT 技术和流式细胞技术检测转染后A549细胞增殖情况,Western印迹法检测转染后A549细胞中Akt、p-Akt（Ser473）、p27、bcl-2、bax的表达。【结果】miRNA-155在非小细胞肺癌组织中的表达情况明显高于癌旁组织（ P ＜0．05）;与转染 miR-NC 组相比, A549细胞转染miRNA-155 mimic后miRNA-155表达水平明显增高（ P ＜0．001）,MTT实验和流式细胞技术显示miRNA-155促进A549细胞的增殖;Western印迹法结果显示：转染miRNA-155的A549细胞p-Akt （Ser473）,bcl-2的表达水平增高,p27、bax的表达水平降低。【结论】miRNA-155可能通过促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,上调p-Akt（Ser473）、bcl-2表达,同时抑制p27、bax的表达来促进非小细胞肺癌的发生发展。     

MicroRNA-204 在非小细胞肺癌患者组织中的表达及对癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察microRNA-204（miR-204）在非小细胞肺癌（NSCLC）患者体内的表达水平及对癌细胞增殖的影响,探讨miR-204 在非小细胞肺癌中的临床意义及可能分子机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-204 在肺癌及癌旁组织中的表达情况;用化学合成的miR-204 模拟物和抑制物转染人非小细胞肺癌A-549 肺癌细胞,CCK-8 法检测细胞增殖的情况,流式检测细胞凋亡情况,qRT-PCR、Western blot 法分别检测Bcl-2 的mRNA 和蛋白表达。结果 miR-204 在肺癌组织中表达水平与对应癌旁组织比较,差异有统计学意义（P <0.05）,肺癌组织低于癌旁组织;肺癌组织中miR-204 低表达与分期、肿瘤大小、肿瘤淋巴结转移相关（P <0.05）;miR-204 可抑制A-549 细胞的增殖,促进细胞凋亡,并下调Bcl-2 的mRNA 与蛋白表达水平。结论 miR-204 在非小细胞肺癌组织中表达下调并与肺癌恶性临床病理特征有关,miR-204 可能通过调节Bcl-2 的表达从而影响非小细胞肺癌细胞的增殖及凋亡。     

碱制法炮制可显著增强斑蝥的抗肿瘤作用

目的 研究碱制法炮制前后斑蝥对人肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。方法 提取生品斑蝥中的斑蝥素和碱制斑蝥中的斑蝥酸钠。以人非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,生斑蝥与碱制斑蝥处理细胞后,采用CCK-8法检测药物对细胞增殖活性的影响,划痕实验观察细胞迁移作用,Transwell实验观察细胞侵袭作用,WB观察药物对A549细胞MMP1、MMP2蛋白表达的影响,ELISA法检测细胞炎症因子IFN-γ、IL-1β和TNF-α水平,AnnexinV/PI染色观察细胞凋亡情况。结果 生斑蝥与碱制斑蝥均可使A549细胞活力明显降低;生斑蝥与碱制斑蝥均能抑制A549细胞迁移,且生斑蝥高浓度组划痕愈合程度最低,与生斑蝥高浓度组相比,差异具有显著性（P<0.01）;碱制斑蝥较生斑蝥抑制A549细胞侵袭作用更明显,差异具有显著性（P<0.01）;且生斑蝥与碱制斑蝥均可抑制 MMP1和MMP2蛋白的表达,显著上调炎症因子IFN-γ水平,但对IL-1β、TNF-α含量则没 有显著影响,Annexin V/PI双染荧光拍照发现生斑蝥组与碱制斑蝥组红绿荧光强度均增加,且碱制斑蝥组荧光增加更明显。结论 碱制法炮制后斑蝥的抗癌作用显著提高,具有抑制A549细胞增殖,侵袭和迁移的作用,其机制可能与下调MMP1和MMP2的表达,促进凋亡及上调炎症因子IFN-γ水平有关。     

沉默MACC1基因表达对耐药性非小细胞肺癌A549细胞增殖及侵袭的影响

目的探讨siRNA沉默结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达对耐药性非小细胞肺癌细胞株A549增殖及侵袭的影响。方法培养非耐药性和耐药性非小细胞肺癌A549细胞,应用RT-PCR技术检测MACC1 mRNA的表达水平;通过化学合成特异性siRNA,与阳离子脂质体Lipofectamine 2000形成复合体,转染耐药性A549细胞,RT-PCR检测转染效果;继续顺铂药物处理耐药性A549细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst33258染色法观察siMACC1后耐药性A549细胞的凋亡形态;Transwell法检测siMACC1后耐药性A549细胞迁移能力;Western blot法检测siMACC1后耐药性A549细胞周期蛋白E-cadherin和N-cadherin的表达水平。结果与耐药性A549细胞组比较,非耐药性A549细胞组中MACC1 mRNA表达量显著下降(P0.05)。与siRNA NC耐药性A549细胞组比较,siRNA MACC1耐药性A549细胞组中MACC1 mRNA表达量显著降低(P0.05),细胞增殖抑制率上升(P0.05);Hoechst 33258细胞染色结果表明siRNA MACC1耐药性A549细胞组发生细胞皱缩,细胞核聚集,细胞形态学呈现细胞凋亡改变;Transwell实验表明MACC1基因沉默后,细胞迁移能力变弱;Western blot结果表明MACC1基因沉默后,与siRNA NC耐药性A549细胞组比较,siRNA MACC1耐药性A549细胞组中E-cadherin蛋白表达显著增加(P0.05),N-cadherin蛋白表达显著减少(P0.05),细胞的侵袭转移能力显著减弱。结论 MACC1在耐药性A549细胞中的异常升高,可能是肺癌肿瘤细胞耐药性产生的分子机制之一。siRNA MACCl能够有效转染耐药性A549细胞,能显著地抑制耐药性A549细胞增殖与侵袭。     

沉默CDH1基因促进非小细胞肺癌A549细胞系转移侵袭的机制

目的探究小干扰RNA(siRNA)沉默非小细胞肺癌A549细胞系E-钙黏蛋白(E-cadherin)基因(CDH1)后对于A549细胞转移和侵袭的促进作用。方法采用siRNA技术沉默A549细胞中的CDH1基因,采用RT-QPCR和Western blot法检测沉默后的基因表达与蛋白表达。将细胞分为对照组(Control)、siRNA阴性组(siRNA-NC)和siRNA基因沉默组(siRNA-CDH1),CCK-8检测基因沉默后12、24、48、72 h细胞活力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化,Transwell小室检测细胞侵袭能力的变化,Western blot法检测细胞转移侵袭关键因子波形蛋白(vimentin),基质金属蛋白MMP-2和MMP-9,以及N-cadherin的表达水平。RT-QPCR检测vimentin、MMP-2、MMP-9以及Slug、Snail的mRNA表达水平。结果 CDH1沉默后,A549细胞活力显著增高,且呈时间依赖性,相比Control组和siRNA-NC组差异有统计学意义(P0.05)。细胞划痕实验和Transwell小室实验结果显示,CDH1沉默后细胞迁移和侵袭能力显著增强,相比Control组和siRNA-NC组差异有统计学意义(P0.05)。siRNA-CDH1组中vimentin、MMP-9、MMP-2以及N-cadherin的表达显著上调,vimentin、MMP-9、MMP-2以及Slug、Snail的mRNA表达水平也上调,相比Control组和siRNA-NC组差异有统计学意义(P0.05)。结论 CDH1缺失可以增加A549细胞的增殖能力以及侵袭能力。     

臭椿酮对非小细胞肺癌H460的作用和机制研究

目的 探究臭椿酮（ailanthone）抗非小细胞肺癌的作用及分子机制。 方法 CCK8检测ailanthone对H460非小细胞肺癌增殖的影响;Cultrex细胞迁移和侵袭法检测ailanthone对细胞迁移和侵袭的作用;细胞免疫荧光检测ailanthone对cyclin d1表达的影响;WB检测ailanthone对细胞蛋白激酶B（Akt）、蛋白酪氨酸激酶Src磷酸化和细胞周期蛋白D1（cyclin d1）蛋白表达的影响。结果 CCK8结果表明,于对照组相比,不同浓度（0.2、0.4、0.6、0.8和1.0μM）的ailanthone处理下H460细胞的增殖能力明显受抑制（P<0.05或P<0.001）;Cultrex 96孔细胞迁移法检测结果显示,于对照组（1.00±0.07）相比,ailanthone组（0.35±0.03,P＜0.01）明显抑制细胞迁移;Cultrex BME细胞侵袭法表明,ailanthone组（0.27 ± 0.04,P＜0.001）与对照组（1.00 ± 0.07）比明显抑制细胞侵袭;细胞免疫荧光实验显示,ailanthone处理细胞（14.67 ±1.20,P＜0.001）与对照组（50.00 ±1.73）比,明显抑制了Cyclin d1阳性细胞数;WB结果显示,H460细胞在ailanthone处理后Akt和Src的磷酸化明显降低,同时cyclin d1的表达明显下降。结论 ailanthone抑制非小细胞肺癌H460的增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能是抑制Akt的磷酸化抑制细胞的迁移和侵袭,同时抑制Src的磷酸化抑制细胞周期相关蛋白cyclin d1的表达。     

ALKBH5通过抑制上皮-间质转化降低人滋养细胞的迁移和侵袭能力

目的 探讨去甲基酶ALKBH5对滋养细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭功能及对上皮-间质转化（EMT）过程的影响。方法 将ALKBH5高表达、抑制及其阴性对照NC质粒转染人滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）及Westen boltting（WB）实验检测各组细胞中ALKBH5 mRNA及ALKBH5蛋白的表达水平。并通过Transwell实验检测转染后滋养细胞迁移、侵袭功能变化,同时通过 WB 实验检测各组细胞中上皮-间质转化（EMT）相关蛋白：Vimentin、Fibronectin、E-cadherin、N-cadherin、MMP9及MMP2的表达水平。结果 ALKBH5组与未转染组（Control）和无意义序列组（NC）相比,ALKBH5 mRNA及蛋白高表达效果显著（P<0.05）;shALKBH5组与未转染组（Control）和无意义序列组（NC）相比,ALKBH5 mRNA及蛋白抑制效果显著（P<0.05）。ALKBH5高表达后HTR-8/Svneo细胞迁移、侵袭功能降低（P<0.05）,EMT相关蛋白中上皮标记物E-cadherin蛋白表达上调,间质标记物Fibronectin、N-cadherin、MMP2蛋白表达下调,差异有统计学意义（P<0.05）。ALKBH5表达抑制后HTR-8/Svneo细胞迁移、侵袭功能增强（P<0.05）,EMT相关蛋白中上皮标记物E-cadherin蛋白表达下调,间质标记物Fibronectin、N-cadherin、MMP2蛋白表达上调,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 ALKBH5通过抑制EMT过程降低滋养细胞迁移、侵袭能力,从而参与子痫前期的发病机制。     

EIF4G1对非小细胞肺癌细胞凋亡的抑制作用

目的 研究真核翻译起始因子4γ1(eukaryotic translation initiation factor 4γ1,EIF4G1)对非小细胞肺癌细胞株A549细胞凋亡的抑制作用。方法 使用RNAi技术下调A549细胞内EIF4G1的表达后,通过MTS法检测细胞生长增殖,采用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,采用蛋白质印记(Western blot)技术检测下调EIF4G1后对A549细胞中与细胞凋亡相关的蛋白表达影响。 结果 下调A549细胞内EIF4G1的表达后,细胞生长受到明显抑制,细胞凋亡率也明显增加(P＜0.05),且凋亡相关蛋白和对照组相比,FAS,P21和TRAF2的表达量明显增高(P＜0.05)。 结论 EIF4G1在A549细胞中表达降低后,凋亡相关蛋白FAS,P21和TRAF2的表达量升高,促进A549细胞凋亡。