介绍一种特异性测定脱羧凝血酶原的快速简便法

作者介绍了一种用锯鳞蝰(一种小毒蛇)毒液(Echis Carinatus Venom Ecv)和凝血酶特异性产生底物(Chromozym TH)来测定脱羧凝血酶原(descarboxyprothrombin PIVKAII)的方法。该法具有快速、敏感、特异性高,且价廉、简便,尤其适合于临床常规应用,可作为诊断维生素 K 缺乏时有价     

第48讲抗磷脂综合征

凝血过程中有三种反应,磷脂起重要作用即:①组织因子(TF)-活化因子VII,激活因子IX和因子X;②活化因子IX与因子VIII,激活因子X;③活化因子X与因子V激活凝血酶原.所谓抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody,aPL),可抑制磷脂与因子X、凝血酶原结合,干扰凝血活酶形成,致凝血障碍,使磷脂依赖性凝血试验如凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(aPTT)及蝰蛇毒凝血时间(RVVT)延长.     

凝血酶原复合物的制备及其临床应用进展

凝血酶原复合物(prothrombin complex concentrates,PCC)是由从健康人混合血浆中分离制备的1种能促进血液凝固的静脉注射血浆蛋白制剂.PCC主要含有依赖于维生素K的凝血酶原(FⅡ)、凝血酶原转化因子(FⅦ)、抗血友病乙型因子(FⅨ)和自身凝血酶原(FⅩ),由于这些因子都属糖蛋白,都在肝脏合成,并由维生素K介导,其理化性质(如分子量、等电点等)极为相似,故在规模化生产中用一般的理化方法很难将其分开.商品PCC几乎都含有上述4种因子,因而在临床上,除了用于治疗乙型血友病外,PCC更多的是用于治疗因维生素K缺乏或患肝病而引起的出血性症状.随着PCC分离技术的发展和制品安全性的提高,以及临床医生越来越认同,PCC的使用量正在逐年增加.将就PCC的制备及其临床应用等方面的研究进展,综述如下.     

应用新合成的试剂作基质测定人血浆凝血酶、凝血酶原和抗凝血酶Ⅱ的一种敏感的比色法

测定血浆凝血酶原、凝血酶及抗凝血酶Ⅲ的方法(如免疫法和血凝固试验等)已有不少报导。最近报导用三肽作底物测定血浆凝血酶及抗凝血酶Ⅲ。所用三肽是H-D苯丙氨酰-L-哌可酰-L-精氨酸或Boc-L-缬氨酰-L-脯氨酰-L-精氨酸的衍生物对硝酰替苯胺(P-nitroanilide)或氨甲基香豆素酰胺(Aminomethylcoumarinamide)。作者曾报导,L-脯氨酰-L-苯丙氨酰-L-精氨酸-α-萘酯对激肽释放酶是一种高灵敏度的基质,并用对甲苯磺酰-赖氨酸萘酯(Tos-Lys-NE)作基质制备了血纤维蛋白溶酶原的酶谱。本文介绍了用苯甲酰-L-亮氨酰-L-丙氨酰-L-精氨酸-α-萘酯(Bz-Leu-Ala-Arg-NE)作基质测定血浆凝血酶原和抗凝血酶Ⅲ,并且制备了血浆凝血酶原和凝血酶的酶谱。     

老年人凝血指标的检测

目的对健康老年人的凝血系统各项指标进行检测 ,并对其异常改变进行分析。方法采用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)测定凝血酶原片段 1 2 (F1 2 )、纤维蛋白肽 A(FPA)、可溶性纤维蛋白单体复合物 (SFMC) ;采用 CA- 5 30血液凝固仪测定凝血酶原时间 (PT)、活化部分凝血活酶时间 (APTT)、凝血酶时间 (TT)、纤维蛋白原(Fbg)。结果与青年对照组比较 ,老年组 PT INR、APTT、TT水平均无显著性改变 (P>0 .0 5 ) ,老年组 Fbg、F1 2、FPA、SFMC水平均显著增高 (P<0 .0 1)。结论采用 F1 2、FPA、SFMC、Fbg等指标观察老年人的高凝状态和血栓形成倾向 ,具有一定实用价值     

脱-γ-羧基(异常)凝血酶原可作为原发性肝细胞癌的一个血清标志

凝血酶原是一种维生素K依赖性凝血蛋白,在肝内合成。其氨基末端区有γ—羧基谷氨酸残基,具有凝血酶原的机能所必需的结合钙的特性。特异性氨基末端谷氨酸残基羧化形成γ—羧基谷氨酸,是正常肝细胞粗面内质网的一种后转化过程。缺少维生素K或摄入维生素K拮抗剂(华法令钠),可抑制肝的维生素K依赖性羧化酶的活性,脱—γ—羧基凝血酶原(异常凝血酶原)被释入血中。在正常人血中不能检出异常凝血酶原。本文报告了对一组原发性肝细胞癌(HCC)患者进行凝血酶原生物合成研究的结果。     

遗传性凝血酶原缺陷症的基因缺陷

遗传性凝血酶原缺陷症是由凝血酶原基因缺陷引起的常染色体隐性遗传性疾病。其基因缺陷导致凝血酶原蛋白分子的空间结构发生改变,影响了凝血酶原的合成、分泌和活性,造成其活性和(或)抗原含量不同程度的降低。本文就凝血酶原的基因缺陷进行综述。     

用比色法测定血清总补体活性

作者详细介绍了一种用比色法测定血清总补体活性的方法。此法具有结果准确、重复性好、简便,快速等优点。试验原理内含硷性磷酸酶(ALP)的脂质体,其膜上载有抗原二硝基苯酚(DNP)。介质中含有ALP 的底物P-硝基苯磷酸脂。脂质体膜将酶与底物隔开。当抗DNP 抗血清和含有活性补体的标本加到这种脂质体溶液中时,脂质体表面就形成免疫复合物,从而诱导一系列的补体反应其完整的脂质体膜受损,导致其内含酶与介质中的底物相互作用。ALB 作用于无色底物的产物P-硝基苯酚(有色)于410nm 测其吸光度(A)。A 值与脂质体损     

老年人凝血指标的检测

目的对健康老年人的凝血系统各项指标进行检测,并对其异常改变进行分析.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定凝血酶原片段1+2(F1+2)、纤维蛋白肽A(FPA)、可溶性纤维蛋白单体复合物(SFMC);采用CA-530血液凝固仪测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fbg).结果与青年对照组比较,老年组PT INR、APTT、TT水平均无显著性改变(P＞0.05),老年组Fbg、F1+2、FPA、SFMC水平均显著增高(P＜0.01).结论采用F1+2、FPA、SFMC、Fbg等指标观察老年人的高凝状态和血栓形成倾向,具有一定实用价值.     

遗传性凝血酶原缺陷症的基因缺陷

遗传性凝血酶原缺陷症是由凝血酶原基因缺陷引起的常染色体隐性遗传性疾病。其基因缺陷导致凝血酶原蛋白分子的空间结构发生改变，影响了凝血酶原的合成、分泌和活性，造成其活性和(或)抗原含量不同程度的降低。本文就凝血酶原的基因缺陷进行综述。     

一个纯合突变Tyr510Asp导致的遗传性凝血酶原缺陷症家系表型与基因分析

凝血酶原(凝血因子Ⅱ,FⅡ)是肝脏合成的维生素K依赖性丝氨酸蛋白酶,在凝血过程的第二阶段转变为凝血酶.遗传性凝血酶原缺陷症是由位于人类染色体11p11-q12的FⅡ基因突变引起的一种罕见常染色体隐性遗传性疾病,发病率约为1/200万,临床表现为程度不同的出血症状,其出血倾向的严重性与血浆FⅡ活性(FⅡ∶C)水平相关[1-2].研究表明该病是由于FⅡ基因中单核苷酸的插入、替代或缺失,导致FⅡ蛋白中氨基酸序列改变或产生终止密码子使翻译过程提前终止所致[3].我们对1个遗传性凝血酶原缺陷症家系成员进行表型检测及基因分析,报告如下.     

泛素结合结构域与泛素化信号的识别

泛素化(Ubiquitylation,UB)是目前最为复杂最为多元的翻译后修饰,几乎参与胞内所有的生物学过程。其通过改变底物的分子景观(landscape)、三维结构、位置、活性、影响底物蛋白与其他蛋白的相互作用等方法,从时间和空间上调节底物所参与的生物学过程。而泛素化底物功能的发挥依赖于特异性的泛素结合结构域(Ubiquitin binding domains,UBDs)。UBDs的表面功能基团特异性识别具有不同修饰类型的泛素化底物,并决定其功能的特异性。已知的20多种UBDs超家族对泛素化信号网络的有序调节是人们开启泛素化网络的一把钥匙,同时了解UBD-ubiquitin的特异性识别是认识泛素化蛋白质组学“ubiquitome”的基础。     

血浆蛋白制品的临床应用(续四)

<正> 6 凝血酶原复合物(Prothrombin Complex)6.1 概况 凝血酶原复合物是一种供静脉输注、促进血液凝固的止血制剂,其浓缩制剂(Prothrombin Com-plex Concentrate,PCC),含维生素K依赖性凝血因子Ⅱ(凝血酶原)、因子Ⅶ(前转变素,稳定因子)、因子Ⅸ(血浆凝血活酶成分)和因子Ⅹ(Stuart-Prower因子),这些因子都是糖蛋白,由肝脏合成,有相似的理化性     

用国产发色底物测定血浆凝血因子X活性的初步探讨

本文用国产发色底物131150测定了40例正常人和90例肝病患者的凝血因子X活性(FX:CA),同时测定血浆凝血酶原时间(PT)和蝰蛇毒磷脂时间(RVVCT)。结果表明,CPS法测定FX:CA与血浆凝固法的结果基本一致。肝病时FX:CA明显降低,并与病情严重性相关。故本试验可作为诊断肝病出血和判断预后的辅助指标之一。     

1,6-二磷酸果糖与清开灵注射液存在配伍禁忌

1,6-二磷酸果糖(FDP)为高渗液,主要成分为果糖.其具有调节糖代谢中若干酶活性的功能,为恢复和改善细胞代谢的调节剂和高能底物.FDP作为一种产生高能的底物而应用于临床,包括治疗急性心肌梗死、心肌缺血、心源性休克、外周血管疾病及心力衰竭,也用于缺血性脑损伤、脑卒中、脑梗死及脑水肿、肺源性心脏病与支气管哮喘等疾病的治疗,且药物不良反应发生率低,应用前景广阔.     

足月妊娠妇女凝血功能的分析

目的　了解足月妊娠妇女凝血功能多项指标的临床意义。方法　采用美国产贝克曼全自动血凝仪 (ACL -90 0 0型 )检测 1 50例足月妊娠妇女与 1 0 0例健康非孕妇女凝血酶原时间 (PT) ,部分凝血酶原时间 (APTT) ,凝血酶时间(TT) ,纤维蛋白原 (FIB)。结果　足月妊娠妇女PT、APTT、TT均较对照组明显缩短 (P<0 .0 5或P<0 .0 1 ) ,FIB极其明显增多 (P <0 .0 1 )。结论　足月妊娠妇女血液凝血程度明显高于非孕对照组 ,处于高凝状态。     

厄贝沙坦和咪达普利对早期雄性自发性高血压大鼠凝血和纤溶系统的影响

背景 目前对于高血压凝血和纤溶系统的改变存在着争议 , 而凝血和纤溶系统在高血压血栓栓塞性和 /或出血性并发症的进程中具有关键性作用,因此,检测高血压患者的凝血和纤溶状态 ,并以此为依据合理选用能改善其凝血和纤溶状态的抗高血压药以及据此提出合理的康复介入方案,具有不容忽视的临床价值. 设计 随机对照的实验研究. 目的 探讨厄贝沙坦和咪达普利在降压的同时 , 对早期雄性自发性高血压大鼠( spontaneously hypertensive rats, SHR)血浆凝血酶原时间、纤维蛋白原含量、组织型纤溶酶原激活物活性( tissue-type plasminogen activator activity, t-PAA)、纤溶酶原激活物抑制剂活性( plasminogen activator inhibitor activity, PAIA)和α 2 纤溶酶抑制物活性(α 2 plasmin inhibitor activity,α 2-PIA)的影响. 地点、材料和干预本实验在武汉大学医院检验中心进行. 15周龄雄性 SHR 30只按随机数字表法分为 3组,咪达普利组给予含咪达普利的水 3 mg/( kg· d);厄贝沙坦组给含厄贝沙坦的水 50 mg/( kg· d); SHR对照组和同龄雄性 Wistar Kyoto( WKY)大鼠 (正常血压对照组 )10只以等量蒸馏水代替;采用一期法检测血浆凝血酶原时间,采用凝血酶法检测血浆纤维蛋白原含量,采用发色底物法检测血浆 t-PAA, PAIA和α 2-PIA. 主要观察指标厄贝沙坦和咪达普利对 SHR凝血、纤溶系统的作用结果并与正常血压对照组( WKY大鼠)进行比较. 结果 与 WKY组比较 SHR对照组血浆纤维蛋白原含量显著增高( P< 0.01), t-PAA显著增高( P< 0.05) ,α 2-PIA显著降低( P< 0.01) , 而凝血酶原时间和 PAIA无明显变化.与 SHR对照组比较咪达普利组和厄贝沙坦组经过 3个月治疗血压明显降低( P< 0.01),纤维蛋白原含量显著降低( P< 0.01),α 2-PIA显著增高( P< 0.01). 结论早期雄性 SHR血管内凝血与纤溶并存,厄贝沙坦和咪达普利对早期雄性 SHR的干预能逆转 SHR慢性隐性 DIC所致的血栓前状态和动脉粥样硬化,改善其已受损的凝血和纤溶系统,从而降低出血性和 /或血栓栓塞性并发症的危险性.     

凝血酶原基因G20210A与血栓性疾病的关系

1996年,Poort SR等[1]对有静脉血栓形成家族史的患者,将凝血酶原(FⅡ)基因作为候选基因尝试寻找与静脉血栓形成相关的新的遗传危险因素,发现在凝血酶原基因3′端非编码区的第20210位核苷酸G→A的改变与血浆凝血酶原水平增高有关,可增加静脉血栓栓死的患病风险.1997年Rosendaal FR[2]首次报道了凝血酶原基因G20210A(FⅡ G20210A)突变可增加心肌梗死(MI)的发病机会.据此凝血酶原基因G20210A的变异与血栓形成的联系引起了研究者的极大兴趣,并且成为血栓形成领域新的研究热点.作者就凝血酶原基因G20210A变异与血栓形成的研究动态作一综述.     

先天性心脏病患儿体外循环围术期凝血指标检测的临床意义

目的研究先天性心脏病患儿体外循环(CPB)围术期凝血功能的变化。方法取患儿围术期4个时段的标本,分别以凝固法、发色底物法等检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、抗凝血酶(AT)活性等凝血及抗凝功能指标。结果以上指标的检测可判断患儿血液肝素化后凝血功能的变化。结论各凝血指标特别是AT活性可作为CPB围术期抗凝效果的监测和早期弥漫性血管内凝血(D IC)的诊断。     

妊娠妇女凝血状态的探讨

凝血检验是为临床诊治有关疾病提供重要依据的实验.部分凝血活酶时间(APTT)、凝血时间(CT)可以检测内源性凝血系统的凝血功能.凝血酶原时间(PT)是外源性凝血系统的过筛试验.医学界一直认为妊娠期孕妇处于高凝状态,APTT与PT应轻度缩短.为了避免分娩时大出血,产科围产期检查中,CT是必测项目.多年来各临床实验室以玻片法测CT作为内源性凝血系统的过筛试验,由于其准确性差,受外来影响大,使实验结果与临床存在很大差异.