缬草醛对肠易激综合征模型大鼠结肠CRF,TPH1 mRNA及5-HT表达的影响

该研究旨在通过探讨蜘蛛香环烯醚萜类成分缬草醛对肠易激综合征(IBS)大鼠结肠中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、色氨酸羟化酶1(TPH1)mRNA表达及5-羟色胺(5-HT)含量的影响,阐释缬草醛通过5-HT通路治疗IBS的作用机制。将54只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、缬草醛高、中、低剂量组、匹维溴铵组,每组9只。采用孤养结合慢-急性不可预见性应激法建立IBS大鼠模型,免疫组化法测定大鼠结肠CRF表达,RT-PCR法测定结肠中TPH1 mRNA表达,高效液相色谱法测定大鼠结肠中5-HT含量。实验结果显示,孤养结合慢-急性不可预见性应激可造成大鼠结肠中CRF,TPH1 mRNA表达以及5-HT含量升高(P0.05),缬草醛各剂量组中CRF,TPH1 mRNA及5-HT含量较模型组明显下降(P0.05)。实验结果表明,肠易激综合征能够导致结肠中CRF,TPH1 mRNA的表达以及5-HT的含量升高,而缬草醛通过降低结肠中CRF,TPH1 mRNA的表达以及5-HT的含量,而改善胃肠道的相关症状。     

眼针对肠易激综合征模型大鼠结肠组织和血清5-HT、5-HIAA的影响

目的观察肠易激综合征（Irritable bowel syndrome,IBS）模型大鼠远端结肠组织5-羟色胺（5-hydroxytryp-tamine,5-HT）和5-羟吲哚乙酸（5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA）的表达以及眼针干预的影响。方法实验动物分成正常组、模型组、眼针组,采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建立IBS动物模型并进行眼针干预。各组采用ELISA法检测血清和远端结肠组织中5-HT和5-HIAA水平。结果与正常组比较,模型组5-HT和5-HIAA水平均显著升高,5-HT转化率也显著升高,但5-HT的增加量明显高于5-HIAA的增加量,提示5-HT降解与合成分泌的不相匹配可能是模型组大鼠5-HT水平升高的重要原因;而与模型组比较,眼针组5-HT和5-HIAA水平明显下降,眼针组5-HT转化率显著降低。结论 5-HT降解与合成分泌的不相匹配可能是模型组大鼠5-HT水平升高的重要原因,眼针干预可有效改善IBS大鼠5-HT代谢,使5-HT恢复至正常水平。     

眼针对IBS模型大鼠结肠组织5-HT含量及转化率的影响

目的:研究肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)模型大鼠结肠组织5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)含量、5-HT转化率以及眼针治疗的影响。方法:实验动物分成对照组、IBS模型组、眼针组,采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建立IBS动物模型并进行眼针治疗。各组采用ELISA法检测结肠组织5-HT和5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)的表达,采用RT-PCR法检测结肠组织5-HT重摄取转运体(serotonin reuptaketransporter,SERT)、色氨酸羟化酶1(Tryptophan hydroxylase1,TPH1)的mRNA表达。结果:与对照组比较,IBS模型组5-HT、5-HIAA水平显著升高,5-HT转化率也显著升高,SERT mRNA表达下调而TPH1mRNA表达上调;与IBS模型组比较,眼针组5-HT和5-HIAA水平明显下降,5-HT转化率显著降低,SERT mRNA表达上调而TPH1mRNA表达下调。结论:5-HT降解与合成分泌的不相匹配可能是IBS模型大鼠5-HT水平升高的重要原因,眼针治疗可有效改善IBS大鼠5-HT代谢,使5-HT恢复至正常水平。     

蜘蛛香总环烯醚萜中chlorovaltrate和蜘蛛香素B的测定

目的:运用高效液相色谱法测定蜘蛛香总环烯醚萜中chlorovaltrate和蜘蛛香素B的含量。方法:采用高效液相色谱法,waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);chlorovaltrate和蜘蛛香素B的流动相分别为乙腈-水(60∶40),(50∶50);检测波长分别为254,203 nm;流速均为1.0 mL·min-1;柱温均为30℃。结果:蜘蛛香总环烯醚萜中chlorovaltrate和蜘蛛香素B进样量分别在15.5~155,20~200 pg与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r分别为0.998 6,0.998 7);测得chlorovaltrate和蜘蛛香素B含量分别为8.91,7.00 mg·g-1。结论:确定了蜘蛛香总环烯醚萜中chlorovaltrate和蜘蛛香素B的含量,为蜘蛛香总环烯醚萜的质量控制提供了一定依据。     

逍遥散对肠易激综合征大鼠5-羟色胺及5-羟色胺转运体作用研究

目的:观察逍遥散对肠易激综合征模型大鼠结肠黏膜5-羟色胺(5-HT)、5-HT转运体(SERT)的调节作用,研究其作用机制.方法:48只大鼠随机分为正常组、模型组、逍遥散低、中、高剂量组和阳性对照组,以心理应激联合免疫诱导致敏法建立肠易激综合征(IBS)模型,评估球囊结直肠扩张引起腹部收缩反射(AWR)的最小容量阈值,以反映内脏敏感性;采用酶联免疫法测定结肠黏膜5-HT、SERT水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠引起AWR的最小容量阈值、结肠黏膜SERT水平明显降低,结肠黏膜5-HT水平明显升高(P＜0.01),而逍遥散能降低结肠黏膜5-HT水平,升高结肠黏膜SERT水平(P＜0.05或P＜0.01).结论:逍遥散的作用机制可能是通过调节IBS大鼠5-HT信号系统,减弱神经元兴奋性,从而提高内脏痛阈,消除肠道过敏.     

回药阿夫忒蒙丸对失眠大鼠下丘脑5-HT和5-HIAA含量的影响

目的:观察"阿夫忒蒙丸"对失眠大鼠下丘脑5-HT和5-HIAA含量的影响。方法:将72只SD大鼠随机分为4组,治疗组36只(其中阿夫忒蒙丸高、中、低剂量组各12只)、甜梦胶囊对照组12只,模型组12只,空白组12只,治疗组和对照组均采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)造模,空白组采用腹腔注射同体积的生理盐水,造模成功后开始灌胃治疗,连续治疗14d,于末次灌胃治疗50分钟后对大鼠进行脱颈椎处死、取脑,分离下丘脑,检测5-HT和5-HIAA水平。结果:1.腹腔注射PCPA可使正常大鼠的睡眠一觉醒周期消失,是复制失眠大鼠模型的比较稳定的方法;2.阿夫忒蒙丸可升高失眠大鼠下丘脑5-HT、5-HIAA水平,与对照组比较有显著性差异。结论:阿夫忒蒙丸治疗失眠可能与其升高下丘脑5-HT、5-HIAA水平有关。     

柴术宁肠方对肠易激综合征模型大鼠5-羟色胺信号系统的影响

目的:探讨柴术宁肠方对肠易激综合征(IBS)模型大鼠5-羟色胺(5-HT)信号系统的影响。方法:60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、匹维溴铵组(15 mg·kg-1)、柴术宁肠方低、中、高剂量组(2.5,5,10 g·kg-1)。采用复合应激法建立肠易激综合征(IBS)大鼠模型,造模成功后连续灌胃给药1周,每日1次,正常组及模型组给予等体积生理盐水,考察一般状态半定量积分、腹部撤回反射(AWR)评分及最小容量阈值;用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠血清5-HT水平,结肠色胺酸羟化酶1(TPH1),5-羟色胺转运体(SERT),5-羟色胺3受体(5-HT3R),5-羟色胺4受体(5-HT4R)水平;RT-PCR法检测结肠TPH1,SERT,5-HT3R,5-HT4R mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组一般状态半定量积分、腹部撤回反射评分及最小容量阈值均有显著性差异(P0.01);模型组血清5-HT和结肠的TPH1,5-HT3R水平及基因表达明显增高和上调(P0.01,P0.05);结肠SERT,5-HT4R水平及基因表达显著降低和下调(P0.05)。与模型组比较,柴术宁肠方血清5-HT和结肠TPH1水平明显下调(P0.05,P0.01);结肠5-HT3R水平及基因表达显著下调(P0.05);结肠SERT,5-HT4R水平及基因表达显著上调(P0.05)。结论:柴术宁肠方可能通过对IBS模型大鼠5-HT信号通路的多靶点调节,降低IBS大鼠内脏敏感性,缓解IBS症状。     

针药并用对抑郁症睡眠障碍大鼠下丘脑、杏仁核、中缝背核5-HT与5-HIAA含量及其比值的影响

目的观察针药并用对抑郁症睡眠障碍大鼠下丘脑、杏仁核、中缝背核5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量及其比值的影响。方法将40只SD大鼠随机分为正常组8只和造模组32只。正常组大鼠采用常规合笼饲养,不接受任何刺激与处置。造模组大鼠进行为期21 d的孤养+CUMS法+REM睡眠剥夺法造模,其中28只顺利完成造模,随机分为模型组、针刺组、药物组和针药组,每组7只。模型组仅造模不干预;针刺组取印堂、神庭配太冲进行针刺干预;药物组采用盐酸舍曲林片和阿普唑仑片的水溶液灌胃干预;针药组采用针刺配合水溶液灌胃干预。针刺组、药物组和针药组均每日治疗1次,连续干预7 d。比较各组大鼠下丘脑、杏仁核、中缝背核5-HT与5-HIAA含量及其比值。结果模型组造模后下丘脑、杏仁核和中缝背核的5-HT、5-HIAA含量较正常组出现明显下降(P0.05)。针刺组、药物组和针药组治疗后下丘脑、杏仁核和中缝背核的5-HT、5-HIAA含量均较模型组出现了明显上调(P0.05)。模型组下丘脑、中缝背核5-HIAA/5-HT比值与正常组比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。针刺组杏仁核及针药组下丘脑5-HIAA/5-HT比值与模型组比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论针药并用能对抑郁症睡眠障碍大鼠5-HT能神经系统的活跃程度起到一定的改善作用,能增加睡眠时间,提高睡眠质量。针药结合的疗效可能以针刺为主。     

连翘对化疗性异食癖大鼠血清和脑组织5-HT及5-HIAA含量的影响

目的:初步探索连翘防治化疗性恶心呕吐的作用机制。方法:用顺铂建立大鼠异食癖模型,造模后72 h,采用HPLC-荧光检测法分别测定大鼠血清及脑组织中5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量。结果:与模型组比较,连翘提取物小、中、大剂量均有降低大鼠血清及脑组织5-HT、5-HIAA含量的趋势,但无统计学差异。结论:连翘防治顺铂所致恶心呕吐的止呕机制可能与5-HT、5-HIAA有关,仍需要进一步实验研究。     

桂枝汤对体温双向调节作用机理探讨——对下丘脑5-羟色胺的影响

脑室注射5-HT，一小时内能诱致大鼠发热。测定发热大鼠和体温低下大鼠下丘脑组织的5-HT及其代谢产物5-羟吲噪蜡酸(5-HIAA)的含量，发现在发热动物中5-HT含量升高．5-HIAA含量下降；在低体温大鼠．5-HT和5-HIAA含量均较正常降低。桂枝汤口饲给药，既能抑制5-HT脑室注射引起的发热反应；在解热扣提高低体温动物肛温的同时．能使发热大鼠下丘脑中5-HT含量显著降低，5-HIAA含量升高；使低体温大鼠下丘脑的5-NT含量上升、5-HIAA含量下降。实验结果提示．桂枝汤对体温的双向调节，部分通过影响体温中枢神经递质5-HT实现的．     

独活寄生汤对佐剂性关节炎大鼠的抗炎镇痛作用及血清中5-HTP，5-HIAA的影响

目的:观察独活寄生汤对佐剂性关节炎模型大鼠免疫器官脏器系数和血清中5-羟色氨酸(5-HTP)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响。方法:实验设对照组、模型组、阿司匹林组(0.20 g·kg-1)、独活寄生汤低、中、高剂量组(0.85,1.7,3.4 g·kg-1);除对照组外,其余各组左后肢踝关节腔注射完全弗氏佐剂(FCA)制作佐剂性关节炎模型。ig给药14 d,对照组及模型组灌服羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。ELISA法测定血清中5-HTP和5-HIAA的含量。结果:独活寄生汤能显著增加大鼠胸腺质量,明显降低佐剂性关节炎大鼠血清中5-HTP和5-HIAA的含量,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:独活寄生汤对大鼠起到抗炎镇痛的作用,其作用机制可能与降低大鼠血清5-HTP和5-HIAA有关。     

疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠 结肠黏膜5-HT,CGRP表达的影响

目的:研究疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠血及结肠黏膜中5-羟色胺(5-HT)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响,探讨其疗效机制。方法:60只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,疏肝健脾方高、中、低剂量组和匹维溴胺组;用寒冷-束缚刺激法复制D-IBS大鼠模型;采用紫外分光光度法测各组大鼠血清5-HT含量,放免法检测血浆CGRP水平,免疫组织化学SABC法检测结肠黏膜组织5-HT,CGRP的表达情况。结果:模型组大鼠血中5-HT含量及结肠黏膜中5-HT阳性纤维的平均吸光度(A)升高,CGRP降低,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05);各用药组血中5-HT及其在肠黏膜的表达降低,CGRP升高,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且以疏肝健脾高、中剂量组差异明显(P<0.01)。结论:疏肝健脾方通过调节D-IBS大鼠5-HT,CGRP的变化,是其发挥疗效的作用机制之一。     

越鞠丸提取物YJ-XCC1Z3抗抑郁作用研究

目的：观察越鞠丸提取物YJ-XCC1Z3用于抑郁症的实验治疗效果。方法：YJ-XCC1Z3分高、低剂量405,135 mg·kg^-1分别给予小鼠灌胃。采用自主活动测定仪,观测YJ-XCC1Z3对小鼠自主活动的影响；采用2种行为绝望模型小鼠悬尾试验和小鼠强迫游泳试验,观察YJ-XCC1Z3对小鼠不动时间的影响；采用利血平拮抗实验,观测YJ-XCC1Z3对小鼠体温及脑内单胺类神经递质代谢的作用；采用5-羟色胺酸(5-HTP)诱导小鼠甩头增强试验,观测YJ-XCC1Z3对小鼠甩头次数的影响。结果：YJ-XCC1Z3组小鼠的自主活动与对照组比较没有显著差异；YJ-XCC1Z3 405 mg·kg^-1能明显缩短小鼠强迫游泳不动时间与小鼠悬尾不动时间；YJ-XCC1Z3 405,135 mg·kg^-1均可显著拮抗利血平所致的小鼠体温下降；YJ-XCC1Z3 405 mg·kg^-1组可明显增加5-HTP诱导小鼠甩头总次数；YJ-XCC1Z3 405 ,135 mg·kg^-1均使5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)的含量增加,YJ-XCC1Z3 405 mg·kg^-1组可使多巴胺含量减少；YJ-XCC1Z3 135 mg·kg^-1使5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)含量增加,对高香草酸(HVA)和3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)的含量无影响；YJ-XCC1Z3 405, 135 mg·kg^-1均使5-HIAA／5-HT比值减少。结论：YJ-XCC1Z3可以改善小鼠抑郁状态的行为,具有一定的抗抑郁作用,并无精神运动兴奋作用。YJ-XCC1Z3可通过增加脑内5-HT, NE的含量而发挥抗抑郁作用,其中对5-HT的影响与YJ-XCC1Z3降低脑内5-HT的代谢有关。     

芎芷石膏汤对硝酸甘油致偏头痛大鼠血浆NO, NOS, CGRP及脑中5-HT, 5-HIAA含量的影响

目的:研究芎芷石膏汤的镇痛作用及对硝酸甘油致偏头痛大鼠血浆一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)和降钙素基因相关肽(CGRP)及脑组织中5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响。方法:将小鼠和大鼠分为空白、模型、实验药物3个剂量和阳性对照组(阿司匹林0.2 g·kg-1),以芎芷石膏汤低、中、高剂量(小鼠:6,12,24 g·kg-1·d-1;大鼠:3,6,12 g·kg-1·d-1)灌胃给药干预7 d。福尔马林实验末次给药后30 min后小鼠右后足跖皮下注射浓度为2.5%的福尔马林20μL(正常对照组除外)记录小鼠给福尔马林后第Ⅰ时相(0~5 min)和第Ⅱ时相(10~60 min)内小鼠舔右后足的累计时间。热板法于末次给药后15,30,60,90,120 min,在热盘痛觉测试仪(55±0.5)℃上记录每只小鼠首次舔后足或跳跃时间(s)。硝酸甘油所致大鼠偏头痛实验,末次给药后30 min,除空白对照组大鼠以相应剂量95%乙醇sc外,其余各受试组均sc硝酸甘油注射剂10 mg·kg-1,复制偏头痛模型。分光光度法和放免法测大鼠血浆NO,NOS和CGRP含量,高效液相-电化学法测脑组织中5-HT,5-HIAA含量。结果:与正常组比较,福尔马林实验模型组小鼠右后足跖皮下注射福尔马林后,第Ⅰ时相舔足时间,第Ⅱ时相舔足时间均明显增多。在注射硝酸甘油造模后,与空白对照组相比,模型组30 min内大鼠前肢挠头次数较空白对照组均明显增加(P<0.01),大鼠血浆中的NO,NOS,CGRP明显升高(P<0.01),5-HT明显下降(P<0.05)。芎芷石膏汤能有效抑制福尔马林致小鼠疼痛反应,明显减少小鼠I时相舔足时间和Ⅱ时相舔足时间,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),并对热板致痛小鼠的物理疼痛镇痛效果明显,能显著提高小鼠的痛阈值,与空白对照组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。硝酸甘油致偏头痛模型组大鼠血浆NO,NOS,CGRP与空白对照组相比均明显增高(P<0.05),而脑中5-HT,5-HIAA含量与空白对照组相比明显下降(P<0.05)。与模型组相比,经不同剂量芎芷石膏汤灌胃后大鼠血浆NO,NOS,CGRP增加受到抑制,同时脑中5-HT向5-HIAA的代谢减少,5-HT的量增加,尤以中、高剂量组明显(P<0.05,P<0.01)。结论:芎芷石膏汤具有明显镇痛作用,可能通过降低血浆中NO,NOS,CGRP含量和升高脑中5-HT含量,发挥对偏头痛的治疗作用。     

舒郁胶囊对原代大鼠海马神经元5-HT3A/3B受体表达的影响

目的:观察抑郁情绪模型组和模型治疗组大鼠血清对原代培养的大鼠海马神经元5 - HT3 A/3B受体(5-HT3A/3BR)蛋白水平表达的影响,探索复方舒郁胶囊治疗抑郁情绪的微观作用机制.方法:大鼠随机分为5组:正常组、模型组、舒郁胶囊治疗组(0.51g·kg-1)、柴胡治疗组(0.4 g·kg-1)和氟西汀治疗组(0.002 g·kg-1),采用孤养结合28 d慢性温和刺激(CMS)制备抑郁情绪大鼠模型,治疗组造模的同时灌胃给药,收集各组大鼠血清灭活除菌,干预神经元24 h后利用蛋白印迹技术( Western blot)和细胞免疫荧光技术(immunofluorescence,IF)分别测定神经元胞内5-HT3A/3BR蛋白表达.结果:与正常血清组相比,模型组血清海马神经元5-HT3A/3BR表达水平均显著升高(P ＜0.01,P＜0.05);与模型组比较,治疗组均显著下调5-HT3AR的异常升高状态(P＜0.01),但对5-HT3BR表达无明显改变.结论:大鼠海马神经元内5-HT3R表达与抑郁情绪关系密切,5-HT3A/3BR的表达变化可能是导致抑郁情绪的重要病因之一.舒郁胶囊及其君药柴胡含药血清对以上2种蛋白表达的调节趋势与氟西汀一致,对该病症的疗效显著,作用机制可能是调节海马神经元内5-HT3AR的异常表达.     

青藤碱对SSNI模型大鼠镇痛效应和纹状体细胞外液单胺类递质的影响

目的:观察青藤碱对部分坐骨神经损伤(SSNI)诱导的神经病理性疼痛大鼠模型镇痛效应,并探讨其对纹状体细胞外液中单胺类神经递质及其代谢产物的影响.方法:雄性SD大鼠,随机分为假手术组、SSNI模型组、加巴喷丁组(100mg·kg-1)、青藤碱高、低剂量组(40,20mg·kg-1),采用Von Frey hairs和Cold Spray法评价机械痛敏和冷痛敏的程度.纹状体微透析采样,高效液相色谱-电化学法检测细胞外液中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)等神经递质及其代谢产物二羟苯乙酸(DOPAC)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量.结果:SSNI模型大鼠的机械痛阈、冷痛敏显著改变,脑内NE显著降低,DA,5-HT及其代谢产物明显升高.与模型组相比,青藤碱高剂量组在腹腔给药30～120min时机械痛阈显著提高(P＜0.01),在30～240min冷痛敏分值明显降低(P＜0.05);在45～135 min内明显上调纹状体细胞外液NE含量(P＜0.05),45,75,135 min明显降低DA的含量(P＜0.05),45～135 min显著减少5-HT的含量(P＜0.01),并在45～135m in显著降低DOPAC(P＜0.01),45～75 min明显降低5-HIAA的含量(P＜0.05).结论:青藤碱对SSNI模型大鼠神经源性疼痛有干预作用,其机制可能与调节纹状体细胞外液单胺类神经递质紊乱相关.     

眼针对肠易激综合征患者血清5-羟色胺水平的影响

目的观察眼针对肠易激综合征患者血清中5-HT含量的影响,探究眼针治疗肠易激综合征机理。方法选取2008年1月至2010年12月符合并接受眼针治疗肠易激综合征研究的60例患者,分别于治疗前和治疗后空腹抽取静脉血8mL离心并冷藏,于疗程前后分别做一次免疫学指标定量检测。结果眼针治疗后5-HT含量[（267．28±105．74）mol／L]明显低于治疗前[（313．07±110．63）mol／L],治疗前后比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论眼针通过对5-HT含量的降低对腹泻型肠易激综合征起到治疗作用,揭示了其治疗肠易激综合征的部分生物学机制。