乌贼墨对小鼠造血干细胞、粒-单系祖细胞及外周白细胞的影响

目的探讨乌贼墨对小鼠造血干细胞、粒-单系祖细胞及外周血WBC的影响。方法用不同剂量的乌贼墨灌胃正常小鼠、环磷酰胺(Cy)和辐射骨髓损伤模型小鼠,采用造血祖细胞体外培养方法和实验血液学技术,检测小鼠骨髓造血干细胞生成数(CFU-S)、粒-单系祖细胞集落生成数(CFU-GM)和外周血WBC数量。结果乌贼墨能够显著提高正常小鼠CFU-S,CFU-GM和外周血WBC数量,有效拮抗模型小鼠体内CFU-S,CFU-GM及外周WBC的降低,并显著促进模型小鼠上述各指标的恢复。结论乌贼墨具有显著的促进小鼠骨髓粒系造血作用。其作用机制可能通过调节机体的免疫机能,诱导机体产生粒/单核细胞集落刺激因子和多种细胞因子,促进造血细胞的增殖,并诱导造血细胞向粒单系细胞分化。     

抗衰片对电离辐射损伤后小鼠骨髓造血作用的影响

摘要： 目的 探讨抗衰片对电离辐射损伤后小鼠造血重建的调控影响。方法 9~10 周龄雄性 C57BL/6 小鼠随机分为照射对照组、 低剂量组、 中剂量组和高剂量组, 每组 10 只。后 3 个剂量组分别按 0.75、 1.5、 3.0 g/kg 体质量灌服抗衰片水溶液, 照射对照组给予同体积生理盐水, 1 次/d, 连续给药 11 d。第 4 天对 4 组小鼠进行 6.0 Gy 137 Cs-γ射线单次全身照射。照射后第 8 天, 观察小鼠内源性脾结节 （即脾集落形成单位, CFU-S）、 小鼠骨髓粒-巨噬细胞集落形成单位 （CFU-GM） 和骨髓成纤维细胞集落形成单位 （CFU-F） 的生成情况。同时, 体外扩增的骨髓间充质干细胞（MSC） 与正常供体小鼠的造血干细胞 （HSC） 进行二维共培养 （2D CFU-GM）, 通过 2D CFU-GM 检测辐射损伤后药物作用的 MSC 促进 HSC 的增殖能力。结果 与照射对照组相比, 3 个剂量组的 CFU-GM 数目显著增多, 中剂量组及高剂量组 CFU-S、 CFU-F、 2D CFU-GM 增殖能力显著提高 （均 P＜0.05）。结论 抗衰片可以促进电离辐射损伤后小鼠造血系统重建。     

两种rhG-CSF制剂用于自体外周造血干细胞移植的效果比较

目的探讨两种重组人粒细胞集落刺激因子吉赛欣(国产rhG-CSF)和惠尔血(进口rhG-CSF)在外周造血干细胞(PBSC)动员及移植后造血恢复中的效能差异。方法选择2000-01～2003-05在本院进行自体外周造血干细胞动员的47例血液肿瘤患者,随机分为两组,在化疗后白细胞降至最低点时分别接受国产rhG-CSF和进口rhG-CSF进行干细胞动员,比较rhG-CSF使用时间及采集所得CD34+细胞数量,其中接受干细胞回输的41例再随机分组,在预处理和干细胞回输后,外周WBC达到0×109/L时分别接受两种rhG-CSF促进造血恢复,比较外周血中性粒细胞绝对计数(ANC)恢复至≥1.5×109/L的天数及rhG-CSF使用时间。结果47例进行干细胞动员的患者中,24例应用进口rhG-CSF,23例应用国产rhG-CS,使用时间分别为6.17±2.64d和5.78±1.83d,所得采集物CD34+细胞总数分别为(5.90±5.06)×106/kg体重和(5.13±6.07)×106/kg体重,两者比较无显著性差异。41例接受自体干细胞回输的患者,22例应用进口rhG-CSF,19例应用国产rhG-CSF,使用时间分别为10.86±2.41d和10.83±4.75d,ANC恢复至≥1.5×109/L的时间分别为9.07±1.50d和10.00±4.20d,两者比较亦无显著性差异。结论两种rhG-CSF制剂在PBSC动员、PBSC回输后造血恢复等方面无明显差异,均可供临床上选择使用。     

粒细胞集落刺激因子对健康供者的影响

目的探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对正常供者的影响。方法2003年1月至2008年12月,在我院接受rhG-CSF动员剂进行的外周血造血干细胞捐赠者16例,给予rhG-CSF5～10μg/(kg·d),共5d。观察动员及采集过程的不良反应,检测动员前后血常规,观察CD3+、CD19+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+细胞比值在动员前后变化,并随访所有供者。结果10例供者在rhG-CSF动员过程中无严重不适,有3例出现低热、头痛、肌肉及骨骼疼痛、腰痛等,3例供者出现发热,其严重程度均在I级,但无需终止动员。WBC经rhG-CSF动员后,数量较动员前升高,停止动员后3d,全部供者的WBC恢复至动员前水平。Hb、PLT、CD3+、CD19+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+细胞比值在动员前、动员后72h及96h无明显变化,差异无统计学意义。结论健康供者可耐受C-CSF5～10μg/(kg·d)的动员和采集过程,且对T细胞亚群无影响。     

骨髓造血干细胞分离 保存的研究

目的探讨骨髓造血干细胞分离及保存的方法。方法应用羟乙基淀粉(HES)或percoll液分离骨髓造血干细胞;联合应用二甲基亚砜(DMSO)和HES对造血干细胞进行液氮保存。应用血细胞计数法、锥虫蓝拒染实验、粒-巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)的体外培养等方法对造血干细胞冷冻前后的有核细胞(NC)数、存活率、体外分化能力进行检测;应用流式分析法计数CD34+细胞数。结果利用HES沉降法分离的单个核细胞数、CD34+细胞数、CFU-GM集落数均比percoll液离心法明显增多;骨髓造血干细胞冷冻保存1年后的有核细胞数、CD34+细胞数、锥虫蓝活率、CFU-GM集落计数与保存前差异无统计学意义。结论HES法分离骨髓造血干细胞方法安全、有效;通过程序降温,联合使用DMSO及HES的低温冻存方法对骨髓造血干细胞的长期保存是适合的。     

MOED化疗联合G—CSF动员外周血造血干细胞的临床研究

自体外周血造血干细胞移植（APBSCT）中,联合化疗加G—CSF动员外周血造血干细胞为最常用的动员方法。自2007年5月以来我科采用MOED（米托蒽醌＋长春新碱＋依托泊苷＋地塞米松）化疗联合重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）动员外周血干细胞,具有动员效率高、干细胞采集数量充足、预处理后造血重建快及经济实惠的优点。现报道如下。     

阿胶有效组分对辐射损伤小鼠造血系统的保护作用研究

目的：研究阿胶有效组分A、B对放射损伤小鼠造血系统的保护作用机制。方法：小鼠3.5Gy ^137Se全身辐射造模,每日给药A（1.0g/kg和2.0g/kg）和B（0.8g/kg和1.6g/kg）,d25处死动物。检测小鼠骨髓和脾造血干/祖细胞集落红系暴增式集落形成单位（BFU-E）、红系集落形成单位（CFU-E）、粒细胞巨噬细胞集落生成单位（CFU-GM）、脾表面结节数量,荧光酶标仪检测骨髓细胞活性氧（ROS）含量,Elisa测定小鼠外周血粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、IL-6、红细胞生成素（EPO）、IFN-γ、β型转化生长因子（TGF-β）和血清及肝组织匀浆内超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧物酶（GSH-Px）含量。结果：A、B组分能促进射线损伤小鼠外周血白细胞和红细胞的升高,保护骨髓和脾造血干/祖细胞集落BFU-E、CFU-E、CFU-GM,增加脾表面集落形成单位（CFU-S）数量和血清中GM-CSF、IL-6含量,降低骨髓细胞内ROS含量,提高血清内SOD、GSH-Px和肝脏内SOD含量。结论：从体外模拟人胃、肠的消化系统能够分离阿胶有效补血活性成分,这种成分保护辐射损伤小鼠造血系统的机制可能与保护贫血小鼠造血微环境、刺激机体表达相关造血细胞因子和增强机体抗自由基能力有关。     

rhG-CSF对小鼠化疗后外周血白细胞减少的治疗作用

目的研究小鼠PC方案化疗后不同时机运用重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）对外周血白细胞减少的治疗作用。方法将小鼠随机分为早期治疗（A）、晚期治疗（B）、预防用药（C）、阴性对照（D）四组,然后按PC方案给予小鼠腹腔注射。继以在外周血中白细胞（WBC）低于正常低值（A组）、外周血WBC降至正常低值一半（B组）及化疗后48h外周血WBC仍在正常范围时（C组）分别连续给予皮下注射rhG-CSF,对照组（D组）给予生理盐水皮下注射代替。观察各组外周血白细胞计数变化。结果①化疗后预防组外周血白细胞值未降至正常范围以下,A组较B组低于正常值的持续时间短、rhG-CSF连续用药后至正常水平恢复时间快。②与治疗组相比,预防用药组化疗后外周血WBC下降的最低值和用rhG-CSF后上升的最高值均高于治疗组,A组又较B组疗效好。③rhG-CSF用药前后相应时间点预防组的WBC值高于治疗组,其中A组高于B组。结论化疗后应用rhG-CSF可有效升高小鼠外周血白细胞数,预防用药较治疗用药、早期用药较晚期用药更能够恢复小鼠化疗后造血功能。     

大剂量重组人粒细胞集落刺激因子对8.0Gy ^60Co γ射线照射小鼠长期存活率及远后效应的影响

目的探索重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）对8.0Gy60Coγ射线照射小鼠长期存活率及远后效应的影响。方法 70只雄性C57BL/6小鼠,随机分为正常对照、照射对照及rhG-CSF大、中、小剂量治疗共5组,除正常对照组外,其他4组均接受8.0Gy60Coγ射线照射。治疗组小鼠于照射后0.5和24h两次分别皮下注射rhG-CSF1000、500和250μg/kg,随时记录各组动物存活率,照射后70、160和300d进行外周血细胞计数分析,300d时检测各组存活小鼠造血和免疫相关指标。结果照射对照组动物照后19d内全部死亡,平均存活时间（12.1±3.0）d;rhG-CSF1000μg/kg治疗组照射后30、100和300d存活率分别为86.7%、86.7%和80.0%,死亡小鼠平均存活时间较照射对照组明显延长（P〈0.01）。照后300d时,rhG-CSF1000μg/kg治疗组的外周血红细胞和血小板计数均与正常对照组没有统计学差异,骨髓混合细胞集落形成单位数量显著低于正常对照组（P〈0.01）;rhG-CSF治疗组的CD4＋/CD8＋比值倒置且250μg/kg剂量组明显低于正常对照组（P〈0.05）;rhG-CSF治疗组造血和免疫器官的组织病理切片结果显示仍然存在不同程度的病变。结论 rhG-CSF1000μg/kg治疗可以显著提高8.0Gy60Coγ射线照射小鼠存活率,但照射后300d造血和免疫系统相关指标尚未完全恢复正常。     

枸杞多糖对小鼠骨髓造血干细胞、粒单系祖细胞增殖分化的影响

枸杞多糖(LBP)10mg·kg~(-1)·d~(-1)ip,连续3d,可促进正常小鼠骨髓造血干细胞(CFU-S)增殖,明显增加骨髓粒单系祖细胞(CFU-GM)数量,促进CFU-GM向粒系分化。     

重组人粒细胞集落刺激因子注射液动员外周血干细胞10例

目的 :探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG CSF)注射液动员外周血造血干细胞 (PBSC)的效果。方法 :对 6例恶性血液病病人 ,1d内静脉注射长春新碱 1～ 2mg·m- 2 及环磷酰胺 4～ 7g·m- 2 (分 4次 ,间隔 4h) ,外周血白细胞降至 1×10 9·L- 1以下时 ,加rhG CSF 6～ 8μg·kg- 1,皮下注射 ,qd× 5～ 7d ;对 4例健康供者在采集PBSC前 5d予rhG CSF 6～ 8μg·kg- 1,皮下注射 ,qd× 5d。白细胞升至 10× 10 9·L- 1以上时采集PSBC ,并进行CD+ 34 及粒 巨噬细胞集落形成单位 (CFU GM )检测。结果 :一次收集单个核细胞计数 (3.9±s 1.7)×10 8·kg- 1;CD+ 34 (4 .8± 2 .3)× 10 8·kg- 1;粒 巨噬细胞集落形成单位 (5± 3)× 10 4 ·kg- 1。未出现严重不良反应。结论 :rhG CSF无论对病人自体还是对健康供者均能安全、高效地动员PBSC ,满足移植所需要。     

多发性骨髓瘤患者外周血造血干细胞动员的临床分析

目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)患者使用化疗联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)进行外周血造血干细胞动员的效果及影响因素.方法:将20例MM患者检测采集物中有核细胞数及CD34+细胞数量进行回顾性分析.结果:20例患者共经过44例次单采,自化疗结束至采集日平均时间为10.55(8～14)天.获得有核细胞均数为6.01×108/kg(1.67～14.7×108/kg),CD34+细胞12.49×106/kg(1.9～38×106/kg).仅有2例患者采集物CD34+细胞＜2.5×106/kg.对比两组的临床特征,发现CD34+细胞产率与病程,动员前化疗次数,外周血白细胞恢复时间相关,而与年龄、性别、疾病状态等因素无明显相关性.结论:化疗联合G-CSF方案应用于MM患者中,绝大多数能获得足够的干细胞,对于病程长,化疗次数多动员后血象恢复时间长的患者效果不佳.     

百里醌对辐射暴露小鼠造血系统的保护作用

目的　探讨百里醌对小鼠造血系统辐射损伤的影响。方法　ICR小鼠,按平均体质量一致原则分为对照组、照射组和百里醌组,每组5只。其中,对照组小鼠不接受照射,其他2组小鼠接受2.0 Gy照射。照射前1 d,对百里醌组小鼠予以灌胃百里醌（10 mg/kg）, 照射后持续3 d,其余2组小鼠灌胃生理盐水。照射7 d后处死小鼠,取外周血和单侧股骨骨髓细胞进行计数,检测骨髓细胞克隆形成能力与活性氧水平。结果　与对照组相比,照射组小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、血细胞比容（HCT）、血小板（PLT）、单侧股骨骨髓细胞数（BMMNC）、骨髓细胞集落形成数量均显著下降,骨髓细胞活性氧水平显著升高（P＜0.05）,百里醌组外周血WBC、RBC、HGB、HCT和PLT计数也出现显著下降（P＜0.05）。与照射组相比,百里醌组小鼠外周血WBC、BMMNC及骨髓细胞集落形成数量显著提高（P＜0.05）,骨髓细胞活性氧水平降低（P＜0.05）。结论　百里醌对造血系统辐射损伤具有保护作用,可通过抑制活性氧提高骨髓细胞增殖功能。     

石花多糖对辐射损伤小鼠防护作用的研究

目的研究地衣类石花多糖对辐射损伤小鼠造血功能及DNA损伤的防护作用。方法用内源性脾结节形成(CFU-S),骨髓有核细胞计数(BMNC),脾脏指数观察石花多糖50,80 mg/kg腹腔注射对137Csγ射线照射小鼠造血功能的影响;单细胞凝胶电泳(SCGE)技术检测小鼠淋巴细胞照射后的DNA双链断裂,观察给药后小鼠DNA损伤修复情况。结果照射前连续给药3 d,照后第7天受照小鼠的BMNC、CFU-S和脾指数与对照组相比有明显的增高;SCGE中各项指标显示,给药组的DNA损伤的修复明显增加,呈明显的量-效关系。结论石花多糖对辐射损伤小鼠具有良好的辐射防护作用。     

OGP_(10～14)及其衍生物改善化疗后小鼠造血功能的研究

目的观察人工合成的成骨生长肽羧基端片段(OGP(10～14))及其衍生物G38I、G38K对环磷酰胺化疗后骨髓抑制小鼠外周血象和骨髓造血功能的影响。方法 40只BALB/C小鼠随机分为5组,均给予环磷酰胺(CTX)腹腔注射诱导骨髓抑制。分别给予OGP(10～14)、G38I、G38K或粒细胞集落刺激因子(G-CSF)治疗,未给予治疗的CTX组为阴性对照。实验中多次采集小鼠外周血测定外周血象并于注射CTX后第7天处死。观察骨髓有核细胞数的变化。结果 CTX组小鼠注射CTX后外周血白细胞和血小板下降,出现骨髓造血抑制。注射CTX前OGP(10～14)及其衍生物对小鼠外周血象无明显影响。注射CTX后OGP(10～14)组和G38I组外周血白细胞较CTX组显著升高,疗效与G-CSF接近,G38I组和G38K组血小板升高。OGP(10～14)及其衍生物G38I、G38K和G-CSF处理使小鼠骨髓有核细胞数增多,OGP(10～14)和G38I疗效更优于G38K。结论 OGP(10～14)及其衍生物G38I、G38K促进骨髓抑制小鼠外周血白细胞和血小板升高,刺激骨髓造血干细胞活性,加速骨髓造血功能的恢复。     

T2毒素对小鼠外周血象和骨髓造血干、祖细胞的作用

T2毒素2.3 mg/kg(相当LD_(30))单次ip后测定小鼠外周血象,BMNC及骨髓CFUs、CFU—GM、CFU—E和BFU—E的改变以了解T2毒素血液毒理的特征.外周血中WBC总数明显减少,RBC和pt无变化.T2毒素虽不影响CFUs的数量,但对CFU—GM、CFU—E和BFU—E均有杀伤作用,中毒后2 h三种细胞存活率达最低值分别为正常的27％、48％和57％,恢复速度甚快,5 d内全部正常.三种细胞的T2毒素剂量活存曲线均为指数坪型.分析了各类造血干细胞对T2毒素敏感性不同的原因可能与各种细胞固有特性和细胞增殖状态有关。     

新瑞白和惠尔血对儿童造血干细胞移植后造血功能恢复的比较研究

目的:比较新瑞白和惠尔血应用于造血干细胞移植后,患儿造血功能的恢复情况。方法:选取2015年12月至2017年6月在我院行自体或异基因造血干细胞移植的患儿47例,根据术后用药方案分为新瑞白组22 例和惠尔血组25 例。新瑞白组单次注射聚乙二醇化重组人粒细胞刺激因子注射液100 µg/kg;惠尔血组给予重组人粒细胞刺激因子注射液5 µg/ (kg·d),直至中性粒细胞计数(ANC)>1.0×10^9/L,比较两组患儿的造血干细胞植入时间和白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)的恢复情况及不良反应、并发症的发生情况。结果:新瑞白组和惠尔血组的造血干细胞植入时间分别为(13.23±1.34)d 和(15.12± 6.00)d,差异无统计学意义(P>0.05);植入时,两组患儿WBC、Hb和PLT水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05);两组患儿不良反应(发热)发生率及发热持续时间比较差异均无统计学意义(P 均>0.05)。但新瑞白组患儿WBC恢复时的单核细胞比例(17.32%±8.22%)高于惠尔血组(9.84%±7.13%,P<0.05)。结论:新瑞白和惠尔血在造血干细胞移植后促进造血功能恢复方面无明显差别,但新瑞白能够促进更多的单核细胞产生,同时可以避免多次注射带来的痛苦,还能够节省费用。