THE INHIBITIVE EFFECTS OF 1,8-DIHYDROXY-3-ACETYL-6-METHYL-9,10 ANTHRACENONE ON INVASIVE AND METASTASIS OF OVARIAN CARCINOMA SKOV3 CELLS

目的:研究化合物1,8-二羟基-3-乙酰基-6-甲基-9,10蒽醌抑制卵巢癌细胞SKOV3侵润转移作用.方法:利用细胞划痕实验、MTT法、明胶酶谱实验等方法,研究1,8-二羟基-3-乙酰基-6-甲基-9,10蒽醌对SKOV3细胞侵润、黏附和迁移能力的影响.结果:1,8-二羟基-3-乙酰基-6-甲基-9,10蒽醌具有抑制SKOV3细胞运动迁移能力和抑制SKOV3细胞的黏附能力;无细胞毒作用浓度的1,8-二羟基-3-乙酰基-6-甲基-9,10蒽醌处理SKOV3细胞后,基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的活性均有一定程度的降低.结论:1,8-二羟基-3-乙酰基-6-甲基-9,10蒽醌具有抑制SKOV3细胞侵润、黏附和迁移能力.     

不对称1,8-二羟基-9,10-蒽醌化合物的单甲基化反应

本文以硫酸二甲酯、重氮甲烷和碘甲烷-氧化银为甲基化试剂,对芦荟大黄素、大黄酸甲酯和1,8-二羟基-3-乙酸甲酯-9,10-蒽醌三个结构不对称化合物的C_1和C_8羟基进行单甲基化反应。研究了这些异构体的分离方法,并应用核磁共振NOE效应确定了甲氧基在蒽醌母核上的位置。     

2-羟基-3-甲基蒽醌诱导结肠癌细胞凋亡机制的研究

目的 探讨2-羟基-3-甲基蒽醌(HMA)对结肠癌HCT116和HT-29细胞生长的抑制的影响及其可能的机制。方法 通过TCMSP数据库检索分析HMA的作用靶点。体外培养结肠癌细胞HCT116和HT-29,并给予不同浓度的HMA干预,通过CCK-8、台盼蓝计数、集落形成和Annexin V/PI双染法检测HMA对结肠癌细胞活力、生长、存活能力及凋亡的影响,Western blot法检测HMA对潜在靶点及凋亡调节蛋白表达的影响。结果 TCMSP检索分析得到HMA存在于白花蛇舌草、半枝莲和巴戟天中药,含有32个潜在靶点,其中包含凋亡相关基因Caspase-3。不同浓度的HMA干预结肠癌细胞可抑制细胞活力、细胞生长、集落形成数量,同时诱导细胞凋亡。Western blot结果显示,HMA可下调抗凋亡基因Bcl-2,上调促凋亡基因Bax,促进凋亡相关蛋白cleaved Caspase-9和cleaved Caspase-3蛋白的活化、剪切,从而促进细胞凋亡。结论 HMA对大肠癌细胞有抑制生长和诱导凋亡的作用,可能是通过调控Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-9和cleaved ...     

槲皮素抑制卵巢癌细胞株SKOV3生长的作用研究

目的:观察槲皮素对卵巢癌细胞株生长的影响,为寻找新的卵巢癌细胞的治疗药物提供实验依据.方法:运用细胞培养、光镜观察及MTT法测定细胞活性等方法,对比卵巢癌细胞株SKOV3在加入不同浓度槲皮素作用不同时间后的生长情况和细胞活性,探讨槲皮素对卵巢癌细胞株SKOV3生长的作用.结果:加入不同浓度的槲皮素后,卵巢癌细胞株SKOV3在形态学和细胞活性方面均发生改变,表现为细胞坏死、细胞生长抑制率增加,且作用浓度为50μmol/L的最为显著.结论:实验证明槲皮素有抑制卵巢癌细胞株SKOV3生长的作用,具有时间依赖性,其最佳作用浓度为50μmol/L.     

2-甲基-3-羟基蒽醌诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制

为探讨2-甲基-3-羟基蒽醌抗肿瘤作用及其机制,本研究采用锥虫蓝法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞周期变化、细胞凋亡率、线粒体膜电位及细胞内游离钙的变化,Western blot方法检测凋亡相关蛋白caspase-4、caspase-7、caspase-9、Bcl-2、Bax、JNK、细胞色素C的表达。结果发现：2-甲基-3-羟基蒽醌时间依赖性地抑制乳腺癌细胞的生长,升高细胞内游离钙含量,降低线粒体膜电位并诱导其凋亡;药物上调Bax并下调Bcl-2蛋白的表达;诱导caspase-4、caspase-7、caspase-9、calpain的活化及细胞色素C的释放。结果提示2-甲基-3-羟基蒽醌可能通过Ca²⁺/calpain/caspase-4途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡。     

醋酸镁比色法测定首乌丸中1,8-二羟基蒽醌的含量

[目的]运用醋酸镁比色法测定首乌丸中有效成分1，8-二羟基蒽醌母环的含量，从而为控制该制剂的生产工艺及质量提供可靠方法。[方法]以首乌丸中有效成分1，8-二羟基蒽醌为考察指标，用醋酸镁甲醇显色。[结果]1，8-二羟基蒽醌在24．70μg～197．60μg范围内有良好的线性关系，平均加样回收率为99．38％，RSD为2．50％。[结论]方法简便、可靠，可用于首乌丸的质量控制。     

3-乙酰基-5-羟甲基-7-羟基香豆素治疗病毒性肝炎高胆红素血症37例

病毒性肝炎合并重度黄疸在临床上较常见,也是临床医务人员亟待解决的难题之一,黄疸的消退,直接影响患者的预后.我院于2004年在常规治疗基础上,采用3-乙酰基-5-羟甲基-7-羟基香豆素注射液(云南大理药业有限公司生产)治疗病毒性肝炎,伴有高胆红素血症37例,效果显著,现作报道.     

油酸在小鼠体内代谢生成9,10-二羟基硬脂酸的实验观察

目的探索油酸（OA）在小鼠体内能否代谢生成9,10-二羟基硬脂酸（DHSA）。方法将4周龄雄性昆明小鼠30只适应饲养1周后按体质量随机分为3组,分别以普通饲料、含13%橄榄油饲料和含13%大豆油饲料喂养,10周后空腹12h取血测定血清、红细胞膜中的油酸和DHSA含量。结果橄榄油组血清、红细胞膜中油酸和DHSA含量显著增加,高于大豆油组和普通饲料组（P〈0.05）,但大豆油组和普通饲料组油酸和DHSA含量相近。结论油酸可在小鼠体内转化生成DHSA。     

4-羟基-3-(3′、5′-二甲基哌啶甲基)-联苯对体外培养心肌细胞作用的研究

4-羟基-3-(3′、5′-二甲基哌啶甲基)-联苯(N_(14))是无致溃疡性的新型非甾体抗炎药,具有阻断体内致炎活性物质前列腺素及白三烯和羟基脂肪酸等功能.本文用N_(14)对Wistar 新生大鼠体外培养心肌细胞作用的研究表明:N_(14)对体外培养心肌细胞有明显的负性频率作用,且对自发性或由乌豆碱诱发的速发型心律失常有明显的对抗作用.     

大蒜提取物二烯丙基化三硫对人膀胱癌T24细胞侵袭转移的影响

目的:研究大蒜提取物二烯丙基化三硫(dially trisulfide,DATS)于体外对T24细胞侵袭转移能力的影响及其可能机制。方法:应用MTT法检测DATS对T24细胞黏附纤连蛋白能力的影响,应用Transwell小室进行人工重组基膜侵袭实验检测DATS对T24细胞侵袭能力的影响,并应用划痕愈合试验检测DATS对T24细胞迁移能力的影响。采用蛋白质印迹方法检测DATS作用后T24细胞中MMP-9蛋白的表达。结果:黏附试验表明DATS作用24h后,能有效抑制T24细胞与细胞外基质的黏附,呈剂量依赖性。划痕试验显示DATS作用不同时间对T24细胞迁移力的影响呈剂量和时间依赖性。侵袭试验表明DATS作用于T24细胞24h后,随着药物浓度的升高,T24细胞的侵袭力逐渐降低。DATS可减少T24细胞中MMP-9蛋白的表达。结论:DATS能显著抑制T24细胞的黏附、迁移和侵袭能力。DATS的侵袭转移抑制能力可能与降低MMP-9的表达有关。     

免疫脂质体对卵巢癌细胞生长抑制试验的研究

以卵巢上皮癌单克隆抗体与包载阿霉素和顺铂的脂质体结合，制备出单抗脂质体阿霉素的交联物ＭＬＡ和单抗脂质体顺铂的交联物ＭＬＰ。并用其对卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ，进行生长抑制实验。结果表明，ＭＬＡ在较高浓度时与ＡＤＭ有同样强的杀伤细胞能力，当浓度减低时，则ＭＬＡ明显强于阿霉素（ＡＤＭ）。而ｓＫＯＶ３对ＭＬＰ及顺铂（ＰＤＤ）均不敏感。     

铁蛋白对卵巢癌细胞生长和细胞周期动力学的影响

检测Ｈ铁蛋白及Ｌ铁蛋白对人上皮性卵巢癌细胞株ＡＯ及３ＡＯ的生长情况及细胞周期分布的影响。采用３Ｈ标记胸腺嘧啶校苷摄入细胞ＤＮＡ的放射测定法及流式细胞仪进行测定。结果：Ｈ及Ｌ铁蛋白均能抑制 ＡＯ及 ３ＡＯ细胞的生长，此作用在加入铁蛋白后的 ７２ ｈ较 ３６ ｈ显著，且随铁蛋白浓度的增加而增强０．０１＜Ｐ＜０．０５）。在７２时Ｈ铁蛋白的抑制作用较强，有显著差异（Ｐ＜０．０１）。同时发现，加入铁蛋白可使Ｇ１期细胞百分比增加，而Ｓ期细胞明显减少，也有显著差异（Ｐ＜０．０５）。结论：初步认为铁蛋白，特别是Ｈ铁蛋白可抑制卵巢癌细胞生长，并阻止其从 Ｇ０／ Ｇ１；期进入 Ｓ期。     

乳腺浸润性小叶癌超声特征与腋窝淋巴结转移的相关性研究

[目的]本研究旨在探讨乳腺浸润性小叶癌(Invasive lobular carcinoma,ILC)患者腋窝淋巴结转移(axillary lymph node metastasis, ALNM)的超声特征及其他参数影响因素。[方法]收集病理已证实为ILC且术前行超声检查的病例91例,根据有无腋窝淋巴结转移分为ALNM组和无ALNM组,采用回顾性研究,收集患者的超声图像特征、术前CA153以及免疫指标等。[结果] 91例ILC患者中,45例发生ALNM,46例未发生ALNM。单因素x_²分析显示,病灶>23.5mm、纵横比≧1、周边高回声晕等超声特征,以及术前CA153>6.5U/ml与ALNM有关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,周边高回声晕和术前CA153>6.5U/ml是影响ILC患者ALNM的独立危险因素(P<0.05)。[结论]周边高回声晕和术前CA153>6.5U/ml是影响ILC患者发生ALNM的独立危险因素,可作为临床实践参考指标。     

小干扰RNA沉默EGFR基因对卵巢癌细胞侵袭力的影响

目的 通过小干扰RNA(siRNA)沉默表皮生长因子受体(EGFR)基因的表达,旨在探讨其对卵巢癌SKOV3细胞体外侵袭力影响.方法 体外构建靶向EGFR基因siRNA质粒和阴性对照质粒, Lipofectamin 2000介导转染到SKOV3细胞中.实验分空白对照组、非特异性转染组、特异性转染组.采用RT-PCR和免疫细胞化学法检测EGFR基因mRNA和蛋白表达水平;采用平板克隆形成法检测细胞生长增殖能力;采用Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭力.结果 特异性转染组细胞EGFR mRNA 的表达与其他两组相比明显减弱(F=50.45,q=12.87、11.72,P<0.01),EGFR 蛋白表达明显下调(F=61.54,q=14.58、11.46,P<0.01);细胞生长增殖能力减弱(F=130.12,q=21.12、18.15,P<0.01);体外侵袭力明显降低(F=34.09,q=11.26、8.34,P<0.01).结论 siRNA可以有效抑制SKOV3细胞EGFR基因的表达,从而抑制SKOV3细胞增殖和侵袭能力.     

鼻咽癌细胞的糖皮质激素受体含量及受新酮醛的影响

以~H-地塞米松(~3H-dexamethasone,~3H-Dex)为放射配基,测定鼻咽癌细胞糖皮质激素受体(GCR)含量,结果当用地塞米松(Dex)非标记配基作竞争性试验时,GCR水平较高,而且低分化鼻咽癌上皮细胞(CNE-Ⅱ)GCR含量明显高于高分化细胞(CNE-I)(P<0.05);用新酮醛、新鱼腥草素或多糖替换Dex作竞争物时,CNE-Ⅰ细胞由于受新酮醛作用影响,GCR含量明显高于Dex作用时的含量(P<0.05);CNE-Ⅱ细胞GCR含量提示新酮醛、新鱼腥草素、Dex三者的作用大致相同(P>0.05)。此外,以CNE-Ⅰ和CNE-Ⅱ作竞争物时均测不到GCR含量,且为负值。     

尼美舒利对人胃癌原位移植模型作用的研究

目的研究尼美舒利(环氧化酶2抑制剂)对人胃癌组织原位移植非肥胖性糖尿病(non-obesitydiabetes,NOD)重度联合免疫缺陷(severe combined immune deficiency,SCID)小鼠模型的肿瘤转移抑制、血管生成和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法建立人胃癌细胞原位移植NOD SCID小鼠胃癌模型,40只小鼠均分成2组。移植后1周,分别静脉注射0.9%氯化钠溶液(0.9%氯化钠溶液组)和50 mg/kg.d-1尼美舒利(尼美舒利组),每周2次,共2周。第5周处死动物,观察肿瘤转移情况,免疫组织化学法检测肿瘤组织微血管密度及VEGF表达。结果0.9%氯化钠溶液组20只小鼠中肿瘤转移18只,尼美舒利组20只小鼠中转移5只,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。0.9%氯化钠溶液组平均微血管密度为(9.5±2.9),尼美舒利组为(3.9±2.1),两组间差异有统计学意义(P<0.05)。0.9%氯化钠溶液组18只小鼠VEGF阳性表达,明显高于尼美舒利组的5只,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论尼美舒利通过抑制肿瘤组织VEGF表达和血管生成,抑制肿瘤转移。尼美舒利无明显出血等不良反应。     

EFFECTS OF RETINOIC ACID ON PROLIFERATION AND DIFFERENTIATION OF A HUMAN OVARIAN CARCINOMA CELL LINE： 3AO

Objective To observe the effects ofretinoic acid (RA) on the proliferation and differentiation of a human ovarian carcinoma cell line: 3AO cells. Methods 3AO cell proliferation was evaluated by viable cell count, percentage of cells in each cycle phase were analyzed by flow cytometric analysis, alkaline phosphatase (AKP) activity was determined as described, and CA125 expression was measured by ELISA. Results RA could inhibit the proliferation of 3AO cells accompanied with morphological changes in a dose-dependent manner. Cell cycle analysis indicated that RA inhibition of 3AO cells growth occurred through induction of G1 arrest with a concomitant reduction in the proportion of cells in S phase, AKP activity increased significantly after treatment with RA(0.1 μmol/L) for 1-5 days. Dose-response studies revealed that the AKP activity increased to a different extent as a function of RA concentrations. Furthermore, RA could suppress the expression of CA125 tumor marker in 3AO cells. Conclusion RA could markedly inhibit the proliferation and induce the differentiation of 3AO cells.     

卵巢恶性肿瘤组织中uPA及其PAI-1表达的临床意义

目的：探讨卵巢恶性肿瘤组织中尿型纤溶酶原激活因子（uPA）及其1型抑制因子（PAI-1）表达的临床意义。方法：采用免疫组化SABC法检测uPA、PAI-1在40例卵巢恶性肿瘤、20例卵巢良性肿瘤及20例正常卵巢组织中的表达情况并分析其与临床病理因素及预后的相关性。结果：①uPA、PAI-1在卵巢恶性肿瘤组织中的阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤组织和正常组织（P〈0.05）。②在临床分期Ⅲ～Ⅳ期者其卵巢恶性肿瘤组织中uPA、PAI-1阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期（P〈0.05）。③uPA、PAI-1表达阳性者,平均生存时间分别均为29.32、31.78个月,明显低于uPA、PAI-1表达阴性者的49.0、52.23个月（P〈0.05）。Cox模型分析显示PAI-1表达为影响卵巢癌预后的独立因子。结论：uPA、PAI-1表达与卵巢恶性肿瘤的发生及侵袭、转移相关,并与卵巢恶性肿瘤的不良预后关系密切。