木犀草素对小鼠急性心肌梗死后心肌细胞缺血损伤的保护作用

目的探讨木犀草素对小鼠急性心肌梗死后心肌细胞缺血损伤的保护作用。方法选择C57BL/6J成年雄性小鼠54只,随机分为假手术组(6只)、模型组(16只)、联合低剂量组(木犀草素5mg/kg,16只)、联合高剂量组(木犀草素20mg/kg,16只)。RT-PCR检测心肌细胞TNF-α、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)mRNA表达,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡,免疫印迹检测信号通路c-Jun氨基末端激酶(JNK)。结果与假手术组比较,模型组生存率明显降低(P0.05)。与模型组比较,联合高剂量组生存率明显升高(P0.05)。与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA和磷酸化P65蛋白相对表达明显降低(P0.05)。与联合低剂量组比较,联合高剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA和磷酸化P65蛋白相对表达明显降低(P0.05)。与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组细胞凋亡明显下调(19.17±3.06、14.67±2.34 vs 23.33±4.80,P0.05)。与联合低剂量组比较,联合高剂量组细胞凋亡明显下调(P0.05)。与模型组比较,联合低剂量组和联合高剂量组磷酸化P38和磷酸化JNK明显降低(P0.05)。与联合低剂量组比较,联合高剂量组磷酸化P38和磷酸化JNK明显降低(P0.05)。结论木犀草素通过丝裂原活化蛋白激酶/NF-κB通路保护心肌细胞缺血损伤。     

木犀草素对吲哚美辛所致大鼠胃溃疡的防护作用

背景 长期服用非甾体抗炎药可导致胃溃疡.但目前常用的胃溃疡的治疗剂存在诸多副作用.目的 探讨木犀草素(luteolin,Lut)对吲哚美辛(indomethacin,IND)所致大鼠胃溃疡的防护作用及其相关机制.方法 40只雄性Wistar大鼠按照随机数字法分为对照组、模型组、低、中和高剂量Lut组,每组纳入8只大鼠....     

木犀草素减轻糖尿病小鼠心肌损伤及其机制

目的 探讨木犀草素（Luteolin,LTL）对糖尿病小鼠心肌损伤影响及其可能调控机制。方法 腹腔注射链脲霉素制备1型糖尿病小鼠模型,将雄性C57/BL6J小鼠分为3组（每组16只）:对照组,糖尿病组,糖尿病+木犀草素组。糖尿病+木犀草素组给予LTL 50 mg/（kg·d）灌胃,对照组和糖尿病组给予50 g/L的羧甲基纤维素钠灌胃。药物治疗3月后,小鼠心脏超声检测心功能;Masson评估胶原容积分数（collagen volume fraction,CVF);Tunel法检测心肌细胞凋亡;Western blot检测Rho和ROCK2的表达。结果 与对照组相比,糖尿病组各项心功能指标显著降低（P<0.05）,CVF显著增高（P<0.05）,小鼠心肌细胞凋亡显著增高（P<0.05）,Rho和ROCK2的表达显著增加（P<0.05）;与糖尿病组相比,糖尿病+木犀草素组各项心功能指标明显改善（P<0.05）,CVF显著降低（P<0.05）,小鼠心肌细胞凋亡显著降低（P<0.05）,Rho和ROCK2的表达降低（P<0.05）。结论 LTL可能通过抑制RhoA/ROCK2信号通路减少糖尿病小鼠心肌细胞凋亡,从而减轻糖尿病心肌损伤。     

木犀草素对脑胶质瘤大鼠生长及血管生成及血管NF-κB表达水平的影响

目的 初步探析木犀草素联合替莫唑胺对脑胶质瘤大鼠生长、血管生成及血管NF-κB表达水平的影响,为胶质瘤的防治提供新思路。方法 以120只雌性Wistar大鼠进行实验,30只做体外实验确定最佳处理条件。另外90只分为3组并进行造模,分别用木犀草素、替莫唑胺、木犀草素联合替莫唑胺进行处理,比较各组细胞周期(G₂/M所占比例)、血管内皮生长因子(VEGF)表达及血管NF-κB表达。结果 联合处理组的G₂/M所占比例、VEGF、NF-κB分别为(3.6±1.6)%、(16.2±2.5)%、(347.7±70.2)mm₂,分别低于木犀草素处理组与替莫唑胺处理组,差异有统计学意义(P＜0.05)。同时木犀草素处理组的G₂/M所占比例、VEGF、NF-κB也低于替莫唑胺处理组,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 木樨草素可多靶点、多环节、多途径抑制肿瘤,且可透过血脑屏障,对细胞周期、VEGF与NF-κB表达均有明显抑制作用,与替莫唑胺联合应用治疗脑胶质瘤可取得较佳效果,值得进一步展开深入研究。     

木犀草素对人胃癌HGC-27细胞迁移的影响及机制

目的 观察木犀草素对人胃癌细胞系HGC-27细胞迁移能力的影响,并探讨其作用机制.方法 用10、20、40 μmol/L木犀草素培养HGC -27细胞.用划痕实验、Transwell实验观察不同浓度木犀草素对同样条件培养下胃癌HGC-27细胞迁移能力的影响,并采用Westem blot方法检测金属基质蛋白酶-7(MMP-7)mRNA.结果 划痕实验中培养24h后,未经木犀草素处理的HGC-27细胞运动迁移基本完全覆盖了划痕区域,而经10、20、40 μmol/L 木犀草素处理的HGC-27细胞仅覆盖了96.2％、72.3％、55.6％的划痕区域.Transwell实验中经10、20、40 μmol/L木犀草素处理的HGC细胞穿膜数量占对照组细胞穿膜数量的百分比分别为97.6％、59.5％、20.0％.经10、20、40μmol/L木犀草素处理的HGC-27细胞内MMP-7蛋白的表达水平明显降低,并与木犀草素的浓度呈负相关.结论 木犀草素抑制了胃癌HGC-27细胞的迁移能力,其作用与抑制HGC-27细胞内的MMP-7蛋白表达水平有关.     

木犀草素调控OPG对牙周炎大鼠干预效果及作用机制

目的 分析木犀草素调控骨保护素(OPG)对牙周炎大鼠干预效果及作用机制。方法 选取60只SPF级8～10周龄雄性SD大鼠,15只作为对照组,其余45只建立牙周炎模型,之后将45只大鼠随机分为模型组、木犀草素低剂量组、木犀草素高剂量组。建模成功后开始灌胃,模型组给予10 ml/kg生理盐水进行灌胃,木犀草素低剂量组给予50 mg/kg木犀草素进行灌胃,木犀草素高剂量组给予100 mg/kg木犀草素进行灌胃。观察每组OPG表达量、牙槽骨吸收情况、破骨细胞数及核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3/白细胞介素(IL)-1β通路蛋白表达量。结果 与对照组相比,模型组、木犀草素低剂量组、木犀草素高剂量组OPG、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)表达量明显降低,骨小梁分离度(Tb.Sp)、CEJ-ABC、破骨细胞数、RANKL表达量、NLRP3、IL-1β表达量显著升高(P<0.05);与模型组相比,木犀草素低剂量组、木犀草素高剂量组OPG、Tb.N、Tb.Th表达量明显升高,Tb.Sp、CEJ-ABC、破骨细胞数、RANK...     

木犀草素抑制肝星状细胞增殖及其胶原合成

目的 研究木犀草素对体外培养的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)增殖及其胶原表达、合成的影响。方法 从Wistar大鼠肝脏分离培养HSC,并用~3H-TdR和~3H-pro同位素掺入实验,基因探针原位杂交等技术研究了木犀草素对HSC增殖、胶原基因表达合成的影响。结果 当木犀草素的浓度分别达到10 μmol/L和20 μmol/L 时抑制HSC增殖(t=2.542,P＜0.05)和胶原合成(t=3.650,P＜0.01),其作用具有剂量依赖关系;25 μmol/L木犀草素使Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达降低,其中Ⅰ型前胶原基因表达降低具有统计学差异(x~2=6.850,P＜0.01)。结论 木犀草素在体外抑制HSC增殖和胶原表达合成,在体内可能会具有预防或冶疗肝纤维化的作用。     

RNA干扰靶向XIAP对人脑胶质瘤细胞U251的生物学行为影响

目的 采用RNA干扰技术(RNAi)抑制X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP),观察抑制前后人脑胶质瘤细胞U251的生物学行为.方法 DNA重组技术合成针对人脑胶质瘤U251细胞XIAP基因三条siRNA(siRNA1,siRNA2,siRNA3),以脂质体2000作为载体进行转染,RT-PCR法检测XIAP的mRNA表达,选择特异性较高的siRNA,以此 siRNA为标准建立20 nmol/L、30 nmol/L、50 nmol/L3个浓度梯度,转染细胞,Western blot 检测XIAP基因的蛋白表达,选出最低有效浓度;流式细胞仪检测抑制前后细胞周期和凋亡率.结果 siRNA成功转染了人脑胶质瘤细胞U251,转染率达到80%以上;RT-PCR检测siRNA2特异性较高;Western-blot检测终浓度为30 nmol/L的siRNA抑制效率较高;流式细胞仪检测停滞在G0/G1期的细胞增多,在S期的细胞减少,并且细胞的凋亡率增加.结论 通过RNA干扰可以抑制人脑胶质瘤U251细胞XIAP的表达,促进人脑胶质瘤细胞凋亡,从而抑制细胞的生长.     

荭草苷和木犀草素对人红细胞自然老化的保护作用

目的探讨荭草苷和木犀草素对人红细胞自然老化的保护作用及构效关系。方法采用健康成年人去白细胞抗凝血制成红细胞悬浮液,建立自然老化模型。测定红细胞溶血度,抗氧化酶系及腺苷三磷酸酶(ATPase)活性,丙二醛(MDA)浓度。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDSPAGE)电泳分析损伤红细胞膜蛋白变化,采用扫描电镜和透射电镜观察红细胞形态及红细胞膜骨架超微结构。结果荭草苷、木犀草素均能较显著抑制红细胞溶血,保护抗氧化酶活性及ATPase活性,同时荭草苷、木犀草素还能显著降低MDA含量(P<0.05,P<0.01),对红细胞膜蛋白具有保护作用,明显改善红细胞形态及超微结构。结论荭草苷和木犀草素对人红细胞自然老化的保护作用是通过直接对抗氧自由基损伤和保护抗氧化酶系活性及红细胞结构功能的完整性而实现的。     

低剂量辐射对荷人胶质瘤(U251)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因蛋白Bcl-2表达的影响

目的研究低剂量辐射对荷人胶质瘤（U251）裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因蛋白Bcl-2表达的影响。方法对荷人胶质瘤裸小鼠进行全身深部X射线照射，采用免疫组化技术检测荷人胶质瘤裸小鼠移植瘤组织的Bcl-2蛋白表达水平。结果D1（75mGy）照射后，胶质瘤细胞的Bcl-2蛋白表达呈下降趋势，与假照组（0mGy）比，无显著差异（P〉0．05）；D2（4Gy）组、D1＋D2组的Bcl-2蛋白表达明显减少，与假照组（0mGy）比有统计学差异（P〈0．05）；而D1＋D2组与D2组比较，有统计学差异（P〈0．05），以D1＋D2组Bcl-2蛋白的表达减少更为显著。结论低剂量辐射在一定程度上可能下调了胶质瘤细胞的Bcl-2蛋白的表达，同时对其后的大剂量辐射有协同作用。     

格尔德霉素体外抑制人肝癌细胞株HepG2增殖并促进凋亡

目的研究格尔德霉素对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响。方法不同浓度格尔德霉素与人肝癌HepG2细胞共培养,采用MTT法检测增殖抑制率;采用流式细胞术Annexin V法检测细胞凋亡率。结果在0.2、0.4和0.8μmol/L浓度下,格尔德霉素均显著抑制HepG2细胞的增殖,在干预细胞48h后,其抑制率分别为20.36%、29.45%和42.52%,抑制率随药物浓度增加而升高;同时,细胞凋亡率分别为4.82%、24.47%和53.64%,也呈剂量依赖性,与相应对照组比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论格尔德霉素可抑制肝癌HepG2细胞增殖并诱导其调亡。     

Protective effects of luteolin against oxidative stress and mitochondrial dysfunction in endothelial cells

Background and aimsLuteolin is a common flavonoid that is abundantly present in various edible plants, it is known to exhibit beneficial effects on cardiovascular system. However, the mechanisms which underlie the protective effects of luteolin on endothelial cell damage caused by oxidative stress remains unclear. The purpose of this study is to test the hypothesis which states that luteolin protects against H₂O₂-induced oxidative stress via modulating ROS-mediated P38 MAPK/NF-κB and calcium-evoked mitochondrial apoptotic signalling pathways.Methods and resultsHuman umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were pretreated with luteolin prior to being stimulated by 600 μM H₂O₂ for another 24 h. The expression of native and phosphorylated-P38, IκB, NF-κB, native eNOS, phosphorylated-eNOS, iNOS and several apoptosis-related proteins were analyzed by Western blot. In addition, intracellular calcium was determined by fura-2 AM and mitochondrial membrane potential was examined by using JC1. Using the data gathered, we found indications that H₂O₂ induced P38 MAPK/NF-κB activation. H₂O₂ downregulated the expression of eNOS and upregulated iNOS, which in turn contribute to an elevated NO generation and protein nitrosylation. However, pretreatment with luteolin markedly reversed all of these alterations dose-dependently. Additionally, an intracellular calcium rise and subsequent mitochondrial membrane potential collapse, P53 phosphorylation, reduced BcL-2/Bax ratio in the mitochondrial membrane, release cytochrome c from mitochondria, leading to the subsequent activation of caspase 3 activation by H₂O₂ were all markedly suppressed in the presence of luteolin.ConclusionResults from this study may provide the possible molecular mechanisms underlying cardiovascular protective effects of luteolin.     

声动力化学疗法对大鼠脑胶质瘤凋亡及相关基因表达的影响

目的 以大鼠颅内C6胶质瘤为实验模型,观察SDT组、单纯照射组、血卟啉单甲醚(HMME)组、对照组脑胶质瘤组织学变化、原位凋亡检测、Cyt-C和Caspase-3蛋白表达水平.结果 SDT组随着时间的延长,肿瘤组织坏死逐渐增加,24 h达到高峰;单纯照射组可见肿瘤组织坏死较SDT组明显少;对照组及HMME组标本各时间段胶质瘤细胞均未见坏死组织.原位凋亡检查见HMME组和对照组凋亡细胞极少,各时间点凋亡率无明显差别.处理后24 h,单纯照射组凋亡率明显高于HMME组和对照组(P＜0.01);处理后3、7 d,凋亡率与HMME组和对照组无明显差别.SDT组处理后24 h,凋亡率明显高于其他3组(P＜0.01).处理后3、7 d,凋亡率与其他3组无明显差别.HMME组和对照组各时间点Cyt-C和Caspase-3蛋白表达率无明显差别.单纯照射组Cyt-C和Caspase-3蛋白表达率高于HMME组和对照组(P＜0.01);处理3、7 d后Cyt-C和Caspase-3蛋白表达率与HMME组和对照组无明显差别.SDT组处理后24 h,Cyt-C和Caspase-3蛋白表达率明显高于其他3组(P＜0.01).处理后3、7 d,Cyt-C和Caspase-3蛋白表达表达率与其他3组无明显差别.结论 SDT对大鼠脑胶质瘤有明显的抑制效应,早期可能通过损伤线粒体后,释放Cyto-C,激活Caspase-3而直接启动胶质瘤细胞本身凋亡程序.     

人参皂甙Rh2对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的影响及机制探讨

目的观察人参皂甙Rh2（GS-Rh2）对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的影响,并探讨其机制。方法人脑胶质瘤细胞株U251经GS-Rh2处理后,采用MTT法测算细胞抑制率,用流式细胞术测算细胞凋亡率,用RT-PCR检测U251中Bcl-2、Caspase-3 mRNA,用Western blot法检测U251中Bcl-2、Caspase-3蛋白。结果 GS-Rh2对U251具有抑制作用,并呈剂量依赖性;根据细胞增殖抑制曲线计算出GS-Rh2作用于细胞的抑制浓度（IC）,求得IC30、IC50、IC70值分别为10.6、22.3、70.2μg/ml;GS-Rh2可诱导U251凋亡,并呈剂量依赖性。在GS-Rh2作用下,U251中Bcl-2 mRNA、蛋白呈明显低表达,随着GS-Rh2作用时间延长,Caspase-3 mRNA、蛋白表达逐渐增高。结论 GS-Rh2可明显抑制U251增殖,诱导其凋亡,其机制与GS-Rh2下调U251中Bcl-2 mRNA及蛋白表达、上调Caspase-3 mRNA及蛋白表达有关。     

重组腺病毒AdCat对血管平滑肌细胞

目的探讨腺病毒载体介导的过氧化氢酶基因转染对体外培养的人血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响.方法用含过氧化氢酶基因的重组腺病毒(AdCat)转染人血管平滑肌细胞,采用Western blot 方法检测血管平滑肌细胞过氧化氢酶的表达,应用细胞计数方法观察血管平滑肌细胞的增殖活性,应用流式细胞术和Hoechst 33258 染色等方法对血管平滑肌细胞的凋亡进行研究.结果Western blot显示AdCat转染后血管平滑肌细胞过氧化氢酶表达明显增多;细胞计数显示AdCat组明显抑制细胞增殖,与阴性对照组、空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术显示AdCat组与阴性对照组、空白对照组比较凋亡率明显增加(P<0.01).经Hoechst 33258染色后,AdCat组凋亡细胞明显多于空白对照组.结论重组腺病毒AdCat转染导致血管平滑肌细胞过氧化氢酶过度表达,抑制血管平滑肌细胞的增殖,促进血管平滑肌细胞的凋亡.     

STIL在神经胶质瘤中表达及对增殖能力的影响

目的 探讨STIL在神经胶质瘤中表达及生物学意义.方法 公用数据库TCGA在线分析STIL在神经胶质瘤中表达水平,并检测了20例神经胶质瘤临床标本中STIL表达量,利用siRNA干扰技术瞬时敲低胶质瘤细胞系中STIL的表达水平,并利用定量聚合酶链反应(qPCR)及Western印迹检测敲低效率,免疫组织化学染色(SP)...     

Effect of ERBB2 expression on invasiveness of glioma TJ905 cells

ObjectiveTo investigate the influence and possible mechanism of ERBB2 expression on the invasiveness of glioma cells.MethodsGlioma TJ905 cells were separated and cultured. ERBB2 shRNA and overexpressing vectors were constructed, which were then transfected. The ERBB2 expression was up-regulated or down-regulated. Changes of invasiveness of TJ905 cells were detected by Transwell assay, and the expressions of matrix metalloprotease (MMP)-2 and MMP-9 were measured by Western blot.ResultsERBB2 shRNA transfection vector could effectively inhibit expression of ERBB2; while ERBB2 overexpressing vector transfection could significantly improve the expression of ERBB2 in TJ905 cells. Transwell assay showed that when ERBB2 expression was down-regulated, the invasiveness of TJ905 cells was notably decreased; when ERBB2 expression was up-regulated, the invasiveness of TJ905 cells was markedly increased. Meanwhile, Western blot indicated that down-regulating ERBB2 inhibited the expression of MMP-2 and MMP-9, while up-regulating ERBB2 enhanced their expressions.ConclusionsERBB2 expression is closely related to the invasiveness of glioma TJ905 cells.     

人参皂甙单体Rh2对人脑胶质瘤细胞U251增殖和凋亡的影响及其机制探讨

目的观察人参皂甙单体Rh2（GS-Rh2）对人脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法用GS-Rh2处理人脑胶质瘤U251细胞,采用MTT法检测U251细胞增殖抑制率,流式细胞仪和Annexin V-FITC/PI双染法观察U251细胞凋亡情况,TRAP-ELISA法检测U251细胞端粒酶活性,RT-PCR法检测U251细胞人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA的表达。结果 5、10、20、40、80μg/ml GS-Rh2组U251细胞增殖抑制率分别为20.42%、32.19%、45.09%、57.37%、73.82%。根据细胞增殖抑制曲线计算出IC30、IC50、IC70值分别为9.7、25.2、68.4μg/ml。FITC和PI荧光双参数点图显示实验组细胞分布区域与对照组相比出现明显改变,随着药物浓度的增加,早期凋亡、晚期凋亡或坏死的区域细胞数量逐渐增多。9.7、25.2、68.4μg/ml GS-Rh2处理12、24、48、72 h后U251细胞端粒酶活性随GS-Rh2浓度增加和作用时间的延长而降低。浓度为25.2μg/ml GS-Rh2作用24、48、72 h的U251细胞hTERTmRNA与β-actin灰度值比为0.964 9±0.004 2、0.401 8±0.001 4、0.297 8±0.001 8,对照组为0.976 4±0.005 1。作用48、72 h U251细胞hTERT mRNA与β-actin灰度值比与对照组相比P均〈0.05;作用48、72 h者相比P〈0.05。结论 GS-Rh2能够诱导人脑胶质瘤U25l细胞凋亡,抑制U25l细胞增殖。其机制与其抑制hTERT基因表达,降低端粒酶活性有关。