L－脯氨酸产生菌的选育

以嗜乙酰乙酸棒杆菌ＡＴＣＣｌ３８７０为出发菌株，经硫酸二乙酯（ＤＥＳ）和亚硝基胍（ＮＴＧ）逐级诱变处理，结构类似物定向选育，获得一株Ｌ－脯氨酸高产菌ＺＱ－３（ＳＧｒ、Ｓｕｃｇ、ＤＨＰｒ）。在含１６％葡萄糖的培养基中，摇瓶发酵７２ｈ，产酸率为５．３％～５．５％。     

L-异亮氨酸高产菌育种机理的初步研究

研究了黄色短杆菌生物合成Ｌ－异亮氨酸代谢控制途径，结果表明，选育Ｌ－异亮氨酸高产菌必须首先活化磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（ＰＣ）、天冬氨酸激酶（ＡＫ）、高丝氨酸脱氢酶（ＨＤ）、苏氨酸脱氢酶（ＴＤ）和乙酰羟基酸合成酶（ＡＳ）这五个关键酶，并减弱由丙酮酸激酶（ＰＫ）、柠檬酸合成酶（ＣＳ）、天冬氨酸β－脱羧酶（ＡＤ）、二羟吡啶二羟酸合成酶（ＰＳ）和高丝氨酸－Ｏ－转乙酰酶（ＨＴ）引起的五条分支代谢强度，从而强化生物合成Ｌ－异亮氨酸的主代谢流。根据这一育种思想，以黄色短杆菌（ＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍＡＴＣＣ１４０６７）为出发菌株，采用相关的氨基酸结构类似物进行定向育种，有目的地活化ＰＣ、ＡＫ、ＨＤ、ＴＤ和ＡＳ等酶，筛选获得的Ｌ－异亮氨酸高产菌ＺＱ－４，产酸达２８～３０ｇ／Ｌ．     

L-异亮氨酸菌种选育及发酵条件优化

以栖糖蜜棒杆菌（Corynedacterium melassecola）ATCC17965为出发菌株。根据代谢控制发酵原理。经硫酸二乙酯和60^Co诱变处理。定向选育出一株L-异亮氨酸产生菌131-5（SG^r＋LeuME^r＋Leu＋AHV^r＋Suc^g＋Eth^r）。在培养基未经优化的情况下产L-异亮氨酸14-15g／L．同时，考察了培养基及发酵每件对茼株产酸的影响，在优化的培养基和发酵条件下积累L-异亮氨酸19．2g／L．最高时可迭21．3g／L．     

利用神经网络对L-缬氨酸发酵建模

根据L-缬氨酸发酵过程的实验数据,利用BP神经网络进行训练,建立实验模型,实时获取生化变量的预测值并进行验证.结果表明,运用BP神经网络对L-缬氨酸发酵过程进行模拟,所建立的模型能比较精确地模拟菌体生长、底物消耗及发酵产酸过程的变化,可以为L-缬氨酸发酵生产过程提供动态模拟,具有重要的实用价值.     

赖氨酸摇瓶发酵条件的优化

针对赖氨酸发酵的工业化要求,以黄色短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍ）ＷＳＨＬ１为产生菌进行了摇瓶条件下的赖氨酸发酵条件研究．通过正交实验得到了较佳氮源配比;经在发酵过程中添加几种氮源的试验,发现发酵中后期添加适量有机氮源有利于发酵;考察不同初始硫酸铵和葡萄糖浓度对发酵的影响,确定了适合工业生产的浓度范围;采用分批补料培养方式,最终赖氨酸盐酸盐质量浓度为８５．５ｇ／Ｌ     

生物素和VB1在谷氨酸棒杆菌过量合成缬氨酸中的作用

通过对谷氨酸棒杆菌突变株AATV341进行生物素和VB1添加量的实验，探讨了生物素和VB1添加量对该菌株菌体质量及缬氨酸产量的影响；同时根据对AATV341进行的胞内外某些特定氨基酸和有机酸检测，研究了这两种维生素对碳架代谢流的分布，尤其是对丙酮酸节点处的代谢流量分布的影响。结果表明，生物素添加量在40μg／L时，菌体质量和缬氨酸在胞外的累积明显提高，谷氨酸在胞外累积降低；VB1的适量添加，可提高缬氨酸在胞外的累积，降低发酵液中乙酸和草酰乙酸的含量。     

短杆菌异淀粉酶产生菌选育及酶作用性质研究

研究和讨论了一株短杆菌异淀粉酶的筛选,诱变,产酶条件及部分酶学特性。结果是摇瓶发酵液中酶活单位最高可达520u/ml.酶作用最适pH可低至5.0,最适温度可高至55℃。该酶对多种不同的含α-1,6-葡萄糖苷键的底物皆具有良好的水解作用。水解产物的分子量分布情况类似于假单胞菌异淀粉酶。     

L-异亮氨酸的发酵条件

从黄色短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍ）ＡＴＣＣ１４０６７出发，选育获得一株Ｌ－异亮氨酸高产菌ＺＱ－４．试验结果证明，生物素是ＺＱ－４菌株唯一必需生长因子，生物素或玉米浆用量分别为５０μｇ／Ｌ和２０ｍＬ／Ｌ时可得到较高的产酸率。为了获得较高的Ｌ－异亮氨酸积累量，培养基中葡萄糖质量浓度为１４０ｇ／Ｌ，硫酸铵用量为４０ｇ／Ｌ时较为适宜；以适当的摇瓶装液量改善通风状况可明显提高产酸率。在适宜的发酵条件下，ＺＱ－４经摇瓶发酵培养３ｄ，Ｌ－异亮氨酸积累量可达２８～３０ｇ／Ｌ．     

原生质体紫外诱变选育鸟苷高产菌株

以一株鸟苷产生菌Bacillus subtilis JSIM-G518为出发菌株,采用原生质体紫外诱变的方法,选育具有核苷水解酶缺失,磺胺胍,德夸菌素、狭霉素C等抗性的突变株,摇瓶的鸟苷产量达到24.0 g/L,比出发菌株提高了30%.该突变株遗传性状稳定,连续传代10次,仍维持较高的鸟苷产量.     

L-组氨酸产生菌的选育

以谷氨酸棒杆菌 (Corynebacterium glutamicum )ATCC 1376 1为出发菌株 ,经硫酸二乙酯(DES)和亚硝基胍 (NTG)诱变处理 ,D 组氨酸 (D His)、6 氮鸟嘧啶 (6 AU)等结构类似物平板和以L 组氨酸 (L His)为惟一氮源平板定向筛选 ,获得一株L 组氨酸产生菌H 2 4 (D Hisr 6 AUrHisase- ) .在加有 15 0 g/L葡萄糖、35g/L硫酸铵以及 10mL/L玉米浆的发酵培养基中发酵 72h ,产L 组氨酸 1.6 g/L.     

供氧对L-异亮氨酸分批发酵的影响

对黄色短杆菌L-异亮氨酸高产菌XQ-4(AHVrAECrSucgSGrEthrα-ABrIleHxr)分批发酵供氧需求进行了研究.在2L台式发酵罐中进行分批发酵,当体积传氧系数(Kla)为385h-1左右时,供氧比较适宜,在138g/L的葡萄糖溶液中可产生23.5g/LL-异亮氨酸.     

腐乳生产菌种的选育

从毛霉ＭｕｃｏｒＺ３ｌ８出发，选育出Ｍ．Ｚ３２８变异株。研究了Ｍ．Ｚ３２８变异株的前酵条件：Ｔ＝３０±１℃，相对湿度９５％．采用新工艺进行生产实验，前酵时间仅需２２ｈ．首次发现毛霉菌丝能渗透到豆腐坯的最深层。用正交试验确定后酵条件。优化结果表明，采用低盐控温后酵新工艺，能将后酵时间缩短到１０～１２ｄ，即可生产出氨基酸态氮高达１．７５ｇ／１００ｇ干腐乳以上的白腐乳。其质构、颜色等均能达到质量要求。研究了腐乳发酵过程的流变特性，微细结构及ＤＳＣ．图谱的变化情况。     

霉菌酸性蛋白酶高产突变菌株9169的选育

对一株宇佐美曲霉进行紫外光、微波和60Co的逐级诱变育种,使酸性蛋白酶产量从2800U/mL提高到7200U/mL.突变株传代多次,产酶性能保持稳定;对突变株与出发株的发酵过程进行了比较研究,发现突变株最大产酶时间提前10h以上,而培养基pH值对产酶有一定影响.     

高产、大分子透明质酸突变菌株NUF-036的选育

对兽疫链球菌NUF-035进行紫外诱变,得到突变菌株NUF-036,使透明质酸的产量从1.8 g/L提高到3.0 g/L,相对分子质量从2.1×10~6提高到3.2×10~6,突变株经多次传代,透明质酸产量及相对分子质量保持稳定.     

用筛选抗性突变株法选育碱性脂肪酶的高产菌

以圆弧青霉白色变株ＰＢ２２７ 为出发株⒙通过多次诱变⒙筛选抗真菌抗生素的抗性株和抗底物、底物结构类似物或分解产物的抗性株⒙获得一株己酸抗性突变株ＰＧ３７⒙其产酶水平比出发株ＰＢ２２７ 菌株提高了１．５ 倍⒙达到５５７ μｍ ｏｌ／⒉ｍ ｉｎ·ｍ Ｌ⒕．ＰＧ３７ 所产脂肪酶的最适作用ｐＨ 为１０．０⒙最适作用温度为２５ ℃⒙在ｐＨ ７．０～１０．５ 范围内稳定．