人工肽(NANP)_(40)ELISA法检测恶性疟原虫子孢子抗体

自然感染或实验室感染恶性疟原虫子孢子后均可产生保护性免疫。由自然感染而产生的抗子孢子抗体可识别位于子孢子表面的环子孢子(CS)蛋白。CS蛋白分子含有4～12个氨基酸组成的片段。这些氨基酸是连续重复10～37次。此重复片段可能是抗体识别的靶位点,并已可能通过基因工程或人工合成等方法加以制备。采用世界卫生组织免疫研究和培训中心Giudice G Del博士惠赠的人工合成恶性疟原虫CS蛋白重复序列肽链(天冬酰胺-丙氨酸-天冬酰胺-脯氨酸)_(40),即(NANP)_(40)作抗原,以酶联免疫吸附试验(ELISA)法对55份恶性疟患者血样进行抗CS蛋白抗体的检测。现将结果简述如下。 试验基本按Giudice(1987)方法。(NANP)_(40)     

环子孢子抗体试验作为血清流行病学工具检测无免疫力旅游者恶性疟原虫感染的评价

环子孢子(CS)抗体是宿主对疟原虫子孢子主要表面抗原的应答,过去对CS抗体应答观察都是在疟疾高发区人群中进行的,本文观察了无免疫力旅游者的情况。 三组血清标本采自五年来的门诊病人:第一组为98例恶性疟患者的156份标本;第二组为62例间日疟患者的76份标本;第三组为32例对照,均未去过疟区。所有疟疾患者标本都是首次去疫区后采集的,皆为德国     

在巴布亚新几内亚在对恶性疟原虫环子孢子蛋白的应答中独特的CD4~+T细胞亚群的有限激活

一般认为CD4~+和CD8~8T淋巴细胞以及抗体在子孢子免疫应答中起重要作用。动物试验发现,细胞因子特别是γ-IFN和IL-6参与免疫应答。但这些因子的相互作用及其疫苗发展的重要性仍不了解。为了阐明疟原虫子孢子免疫调节机制,本文分析了疟疾高发区自然感染疟原虫人群抗恶性疟原虫环子孢子(CS)蛋白的CD4~+T细胞免疫和体液免疫应答。     

泰国不同地区分离的恶性疟原虫环子孢子蛋白存在共同抗原决定簇

本实验采用单克隆抗体(MAB)和抗疟原虫环子孢子(CS)蛋白特异的人血清抗体,以西部印渍法研究泰国不同疟区的恶性疟原虫环子孢子蛋白特异抗原决定簇。抗恶性疟子孢子的特异抗体血清(间接荧光抗体IgG滴度为1:1024)取自泰国东部     

一种克服子孢子疫苗缺点的设想

以环子孢子(CS)蛋白表位为基础的子孢子疫苗的临床试验结果不佳,疟疾流行区人群只产生弱的抗子孢子免疫力,其中能对整个CS蛋白序列400个残基中一种多肽产     

居住疟区的儿童环子孢子抗体与恶性疟发病的关系

已证明疟区人群自然感染疟疾后可诱发产生抗子孢子(环子孢子蛋白)抗体。为了解此类抗体在抵抗疟疾感染方面的保护作用,对疟区人群抗子孢子抗体水平与发生恶性疟感染间的关系进行了研究。     

恶性疟原虫自然感染者对候选疟原虫子孢子疫苗(R32_(tet82) )的淋巴细胞反应性

R32_(tet82) 抗原是一种基因工程疟疾候选疫苗抗原,为 E.coli 生产的恶性疟原虫环子孢子表面蛋白质类的多肽。本文着重研究恶性疟自然感染者对 R32_(tet82) 抗原体外诱导 T细胞介导的免疫应答能力。     

疟原虫环子孢子蛋白参与子孢子对蚊唾液腺的入侵

蚊唾液腺是疟原虫子孢子从卵囊释放后的靶器官。子孢子从卵囊中逸出时表面覆盖着高浓度的环子孢子 (CS)蛋白 ,而所有种属疟原虫的CS蛋白其结构都是相似的。该蛋白中部具有种属特异性重复区 ;两端为高度保守的氨基酸伸展区 ,分别为 :N 端重复序列 (Ⅰ区 )和C 端细胞黏附序列。有资料显示 :CS蛋白能结合到蚊的唾液腺 ,但不能结合到其他开口于循环血淋巴的器官 ,如蚊胃、卵巢和马氏管等。为了检测CS蛋白与唾液腺的结合是否与子孢子入侵唾液腺有关 ,进行了本项实验。以CS蛋白 (恶性疟原虫CS序列的重组蛋白 )和抑制性N 端肽段 (为恶性疟原…     

疟疾子孢子疫苗伍用Detox佐剂时的安全性、免疫原性和效果

抗疟原虫环子孢子(CS)蛋白重复区的多克隆和单克隆抗体被动转移给小鼠和猴,能抵抗子孢子诱导的疟疾。以伯氏疟原虫蛋白重复区为主要结构的合成肽和重组蛋白疫苗在实验动物亦显示诱导产生保护性免疫。为此,作者设计了恶性疟原虫的CS蛋白疫苗:含有B细胞表位的CS蛋白重复区(R32)T辅助细胞表位的流感病毒A非结     

自然感染诱发的抗恶性疟环子孢子蛋白的抗体

应用间接荧光抗体试验(IFA)和环子孢子沉淀试验(CSP)曾证明疟区人群和疟疾病人血清中含有抗恶性疟和间日疟子孢子的特异性抗体。鉴于对引起此项免疫反应应答的抗原尚不了解,本文对与疟区人群和疟疾病人血清发生反应的恶性疟子孢子抗原成份进行了研究。     

识别疟原虫环子孢子蛋白的T细胞克隆及其保护效应

已有的研究表明,小鼠经照射灭活的疟原虫子孢子或子孢子表面抗原免疫后获得的抗子孢子感染的抵抗力,主要依赖于能识别环子孢子蛋白(CS)和子孢子表面抗原(SSP_2)的CD8~+T细胞。环子孢子蛋白的T     

卵形疟原虫卵囊中环子孢子蛋白的定位

众所周知,疟原虫环子孢子(CS)蛋白不仅是免疫应答的靶子,亦是抗疟原虫疫苗发展的首选目标。但对这些蛋白卵囊中的分布了解甚少。本文作者应用抗卵形疟原虫CS 蛋白的单克隆抗体(MAb 110-54. 3) ,结     

用无细胞蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白的研究

目的探索无细胞麦芽体外蛋白合成系统重组表达恶性疟原虫蛋白可行性,并检测用重组蛋白制备的免疫血清对原虫蛋白的特异性反应。方法将目的蛋白PfRON2的部分片断克隆连接到重组表达载体后,用无细胞麦芽体外蛋白合成系统进行重组表达并纯化,用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备免疫血清,并用免疫斑点实验(Western blot)和免疫荧光抗体实验(IFA)检测该血清对恶性疟蛋白的特异性反应。结果成功克隆的重组质粒能在无细胞麦芽体外蛋白合成系统中生成大小相符的GST融合蛋白,并能较好地纯化。免疫斑点实验中,用该重组蛋白制备的免疫血清能检测到重组蛋白和恶性疟目标蛋白,免疫荧光抗体实验显示该免疫血清能成功地标记恶性疟目标蛋白所在部位。结论无细胞麦芽体外蛋白合成系统可应用于恶性疟原虫蛋白的重组表达,获得的免疫血清能特异性识别疟原虫蛋白。     

恶性疟原虫CSP基因重组蛋白及DNA免疫诱导小鼠体液免疫应答比较

本文利用恶性疟原虫FCC1/HN株环子孢子蛋白 (PfCSP)基因DNA质粒通过不同途径、不同剂量免疫小鼠 ,观察其产生的体液免疫应答反应 ,并将其与相应的重组表达蛋白疫苗进行比较。结果显示 :DNA免疫刺激机体产生抗体反应强度的免疫途径依次为肌肉、静脉和皮下 ;宿主对DNA免疫存在一定的剂量依赖性 ;ELISA和Dot -ELISA检测免疫后 4周和 7周 ,DNA质粒组刺激机体产生抗体的滴度均显著低于相应的重组蛋白组。表明PfCSPDNA疫苗与重组表达蛋白疫苗均可刺激小鼠产生特异性体液免疫应答 ,但前者诱导高滴度的抗体反应需要更长的时间     

重组多肽酶联免疫吸附法检测抗Scl-70抗体的初步应用

目的制备人Scl-70抗原207～765位氨基酸片段融合蛋白作为自身抗原,探讨ELISA检测抗Scl-70抗体的敏感性和特异性。方法构建编码Scl-70抗原第207至第765位氨基酸片段的重组体,在宿主菌E.coliBL21（DE3）中表达融合蛋白,经Ni^2＋-NTA亲和层析纯化后,免疫印迹法鉴定抗原性,ELISA检测北京协和医院免疫科血清库中系统性硬化（SSc）及部分其他结缔组织病患者血清抗Scl-70抗体。结果重组融合蛋白在宿主菌中获得可溶性表达,免疫印迹法鉴定表明其能与标准抗Scl-70抗体阳性血清反应,而与正常血清、其他抗血清无反应。在36份SSc患者血清中,天然抗原免疫双扩散（DID）法共检出的6份阳性血清用重组多肽ELISA检测有5份呈阳性,30份经天然抗原DID法检测为阴性的血清用重组多肽ELISA检测有3份呈阳性;20份其他结缔组织病患者血清用重组多肽ELISA检测均为阴性。结论重组的207—765位氨基酸片段是Scl-70抗原的主要抗原表位区域,以重组多肽为基质ELISA检测抗Scl-70抗体的敏感性较高,为进一步研究抗体水平与临床病情变化的相关性奠定了基础。     

来自不同种疟原虫子孢子保护抗原之间的类似结构

子孢子外周(CS)蛋白是一些疟原虫种的保护性抗原。抗CS蛋白的单克隆抗体能与另外二条细胞内多肽(IS_1和IS_2)发生免疫活性沉淀,这二条多肽得自[~(35)S]甲硫氨酸代谢标记的原虫抽提液中。本文作者通过双相电泳和反相高压液相层析,比较了来自伯氏疟原虫,诺氏猴疟原虫,食蟹猴疟原虫和人恶性疟原虫的CS和IS。在还原和非还原的情况下,这些疟原虫种的CS,IS_1和IS_2的分子量在42,000～67,000之间。它们的等电点值范围为4.7到6.0。由每一种疟原虫所分离出来的CS和IS蛋白能与各自的单克隆抗体反应,产生非常类似的肽段图谱。这些结果证明IS是CS的细胞内前体,而且因CS     

人环子孢子抗体对感染疟原虫按蚊的影响

蚊媒吸血时获得的人体环子孢子(CS)抗体能否影响子孢子的感染性目前尚有争议。作者对西肯尼亚恶性疟高发地区的媒介——冈比亚按蚊(An.gambiae)和催命按蚊(An.funestus)作了调查,包括野栖按蚊     

在冈比亚婴儿中检出先天传递的抗疟原虫子孢子抗体

鉴于非洲婴儿在初生的几个月内对疟疾有抵抗力,作者等在西非的一个恶性疟高度流行区,研究了抗子孢子抗体是否能从有自然免疫的母亲被动地传给她们的子女。研究的对象为20名母亲及其新生儿。全部婴儿用血涂片法在3个月内均未检出疟原虫。恶性疟原虫子孢子是用冈比亚按蚊离体吸含配子体血感染后,饲养在实验室,然后解剖唾腺所得。疟原虫子孢子期的特异抗体是用环子孢子沉淀反应(CSP)和间接荧光抗体试验(IFA)检出的。在孵育后的未经稀释的血浆标本中,若有10%以上活的子孢子形成末端沉淀,即为环子孢子沉淀反应阳性。荧光抗体反应是用成二醛固定的恶性疟子孢子孵育血浆稀释液,然后用FITG结合的抗人IgG染色。     

国人扩张型心肌病患者血清中抗心肌线粒体肽类抗体的研究

应用免疫转印技术,研究扩张型心肌病患者的抗心肌抗体,发现患者血清中存在抗心肌线粒体30kD多肽抗体,阳性率为52.38％;而对照组中的冠心病患者和正常人均为阴性。提示ADP/ATP载体可能是扩张型心肌病自身免疫应答的靶抗原分子。     

人疟原虫的子孢子与红内期虫体间具有免疫交叉反应的证据

疟原虫在哺乳类宿主体内的发育是复杂的,不少研究认为子孢子表面与红内期原虫间无共同抗原。但本文证明,人恶性疟原虫子孢子表面与红内期原虫具有共同抗原,此抗原并能刺激人体发生强免疫应答。作者以间接免疫荧光法,用抗人工培养的恶性疟原虫泰国株(Kl)的单克隆抗体,测试恶性疟原虫子孢子,在22个单克隆抗体中,有一个(McAb5.1)与子孢子呈强阳性反应,其稀释滴度高达1:10~6;而且,其对子孢