具有抗疱疹病毒作用及抗真菌作用的药物现状与进展

1具有抗疱疹病毒作用的药物现状与进展人类疱疹病毒(HerpesVirus)分为8型,其中单纯疱疹病毒1型(HerpesSimplexVirus-1,HSV-1)、单纯疱疹病毒2型(HerpesSimplexVirus-2,HSV-2)、水痘-带状疱疹病毒(Varicella-ZosterVirus,VZV)、巨细胞病毒(CytomegaloVirus,CMV)、Epstein-Barr病     

2010年美国疾病控制中心生殖器疱疹治疗指南

生殖器疱疹(GH)是由单纯疱疹病毒(HSV)感染引起的慢性终身性病毒感染性疾病.单纯疱疹病毒2型(HSV-2)主要引起生殖器疱疹,少数情况下HSV-1引起生殖器疱疹.几乎所有的HSV-2为性接触感染,见于肛周和生殖器官感染,HSV-1可见于肛周、生殖器官和口唇感染.     

单纯疱疹病毒2型糖蛋白G的基因扩增、克隆及其B细胞抗原表位分析

目的:克隆单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白G-2(gG-2)全长基因并对糖蛋白G-2进行B细胞抗原表位预测. 方法:用PCR法扩增HSV-2的gG-2基因,连接到pGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α株后测序. 利用Lasergene,Clustal X等软件,进行B细胞抗原表位预测. 结果:完成单纯疱疹病毒2型(HSV-2)gG-2全长基因克隆. 通过B细胞抗原表位分析,发现HSV-1的gG-1和HSV-2的gG-2氨基端的同源性很低. gG-2蛋白在"独特区"存在抗原指数非常强的抗原表位. 结论:成功构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)gG-2全长基因克隆,为单纯疱疹病毒感染的诊断试剂的研发及抗单纯疱疹病毒疫苗研究寻找更好的靶位点提供研究材料和参考.     

中药抗病毒1号、2号胶囊对单纯疱疹病毒-2感染骨髓间充质干细胞Toll样受体9和干扰素表达的影响

[目的]观察中药抗病毒1号、2号胶囊对单纯疱疹病毒(HSV)-2感染骨髓间充质干细胞(BMSCs)Toll样受体9(TLR9)和干扰素(IFN)表达的影响.[方法]培养BMSCs进行HSV-2病毒接种,分别设立抗病毒1号、2号胶囊组,阿昔洛韦组,病毒组与空白对照组,采用Real-Time RT-PCR方法检测TLR9 ...     

shRNA表达载体对HSV-2 ICP4基因的干扰效应

目的构建针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2) ICP4基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探究该载体表达的shRNA对HSV-2的抑制作用。方法重组表达载体通过脂质体转染法转染HEK293细胞,并接种HSV-2,48h后,实时荧光定量RT-PCR检测mRNA转录情况,Western blot检测ICP4蛋白的表达情况,终点滴定法测定病毒的滴度。结果与对照组相比,干扰组对mRNA抑制率为71%,使蛋白表达减少71.81%,并且病毒滴度也明显降低(P<0.05)。结论构建的pGPU6/Neo-shRNA ICP4重组质粒表达载体能在体外细胞水平上干扰HSV-2 ICP4的基因表达,抑制HSV-2在细胞中复制。     

传统草药与无环鸟苷联合应用对HSV-1感染的体内外作用

大量文献报道,联合用药能增强无环鸟苷(ACV)抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)的作用效果,尤其对 ACV 耐药株的 HSV-1感染。作者选择10种临床上常见的传统草药水提液与 ACV 联合用药,进行抗 HSV-1感染的体内外实验研究。体外实验利用细胞培养技术,将 HSV-1(感染滴度100PFU/0.2ml)接种于 Vero 单层细胞上,在含有不同药物的细胞维持液中培养2天。结果发现,10种     

用ELISA法和固相酶标玻片法测定宫颈癌患者和正常健康对照者对单纯疱疹病毒抗体水平的比较研究

<正> 根据生物学及免疫学特性,单纯疱疹病毒可分为两个型,即 HSV-1和 HSV-2。近十年来,不少报导认为 HSV-2的生殖器感染和宫颈癌有关。但日本学者高桥报告,在日本和亚洲宫颈癌的发生可能和 HSV-1有关。我们从宫颈癌患者脱落细胞标本中分离到的单纯疱疹病毒 CC_(21)株,经鉴定为 HSV-1(生物学指标属 HSV-2,但中和试验指标属     

盐酸万乃洛韦缓释胶囊的动物药代动力学及相对生物利用度研究

盐酸万乃洛韦(valaciclovir hydrochloride)是阿昔洛韦的前体药,即阿昔洛韦的L-缬氨酸酯盐酸盐.其对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和2型(HSV-2)的抑制作用强,对水痘疱疹病毒、EB病毒以及巨细胞病毒的抑制作用弱.     

聚合酶链反应检测宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒感染

目的 :探讨宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒 (HSV)感染情况。方法 :用聚合酶链反应检测宫颈糜烂患者和正常对照组单纯疱疹病毒感染情况。结果 :10 2例宫颈糜烂患者中 ,HSV- 1和 HSV- 2阳性率分别是 4 .9%和 30 .4 % ,正常对照组中 ,HSV- 1和 HSV- 2阳性率分别为 2 .7%和 12 .0 %。结论 :HSV感染与宫颈糜烂关系密切 ,且以 HSV- 2感染为主。     

聚合酶链反应检测宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒感染

目的：探讨宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒(HSV)感染情况。方法：用聚合酶链反应检测宫颈糜烂患者和正常对照组单纯疱疹病毒感染情况。结果：102例宫颈糜烂患者中,HSV-1和HSV-2阳性率分别是4．9％和30．4％,正常对照组中,HSV-1和HSV-2阳性率分别为2．7％和12.0％。结论：HSV感染与宫颈糜烂关系密切,且以HSV-2感染为主。     

人参皂苷Rg3对HSE模型鼠的治疗作用及免疫调节效应

目的：研究人参皂苷Rg3对单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)模型鼠的治疗作用及其免疫调节效应。方法：腹腔注射单纯疱疹病毒1(HSV-1)病毒悬液,用PBS做六个稀释度10倍递次稀释,分别为10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5和10^-6,制备小鼠HSE模型。硝酸还原酶法检测小鼠脑组织NO含量。腹腔注射人参皂苷Rg3,剂量分别为0.3、1.0和3.0 mg•kg^-1,观察Rg3对HSE模型鼠存活时间的影响和脑组织病理形态的改变。MTT法检测Rg3对小鼠淋巴细胞转化功能和NK细胞毒活性的影响,鼠脾T淋巴母细胞增殖分析法测定上清中IL-2活性,细胞病变抑制法测定IFN-γ活性。结果：成功建立HSE小鼠模型。HSE模型鼠脑组织中NO含量高于对照组(P<0.05)。0.3 mg•kg^-1Rg3组和疱疹性脑炎小鼠的存活时间延长,脑组织病理改变减轻。0.4 mg•kg^-1Rg3组SI、IL-2和IFN-γ高于对照组(P<0.05),NK细胞毒活性高于对照,但差异无显著性(P<0.05)。结论：Rg3对HSE小鼠具有保护作用,具有免疫调节效应,是一种具有潜在开发前景的抗HSV-1药物。     

Characteristics of Atmospheric Fine Particulate Matter(PM_(2.5)) Induced Differentially Expressed Proteins Determined by Proteomics and Bioinformatics Analyses

Objective To screen the differentially expressed proteins(DEPs) in human bronchial epithelial cells(HBE) treated with atmospheric fine particulate matter(PM_(2.5)).Methods HBE cells were treated with PM_(2.5) samples from Shenzhen and Taiyuan for 24 h. To detect overall protein expression, the Q Exactive mass spectrometer was used. Gene ontology(GO), Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG), and Perseus software were used to screen DEPs.Results Overall, 67 DEPs were screened in the Shenzhen sample-treated group, of which 46 were upregulated and 21 were downregulated. In total, 252 DEPs were screened in the Taiyuan sampletreated group, of which 134 were upregulated and 118 were downregulated. KEGG analysis demonstrated that DEPs were mainly enriched in ubiquitin-mediated proteolysis and HIF-1 signal pathways in Shenzhen PM_(2.5) samples-treated group. The GO analysis demonstrated that Shenzhen sample-induced DEPs were mainly involved in the biological process for absorption of various metal ions and cell components. The Taiyuan PM_(2.5)-induced DEPs were mainly involved in biological processes of protein aggregation regulation and molecular function of oxidase activity. Additionally, three important DEPs, including ANXA2, DIABLO, and AIMP1, were screened.Conclusion Our findings provide a valuable basis for further evaluation of PM_(2.5)-associated carcinogenesis.     

S100BmRNA在单纯疱疹病毒性脑炎小鼠脑组织中的表达

目的检测单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)小鼠脑组织中S100BmRNA的含量,初步探讨S100BmRNA对HSE小鼠脑损害的评估价值。方法使用已制造成功的HSE小鼠模型48只,分为HSE组、正常组、假手术组,分别提取小鼠脑组织总RNA,反转录为cDNA,采用RT-qPCR检测S100BmRNA含量,并对S100BmRNA进行测序。结果 HSE组S100B含量显著高于假手术及正常组(P<0.01);S100B基因测序结果在BLAST中进行比对,显示同源性100%证实合成S100B基因片段的正确。结论 S100B在HSE、正常、假手术组均有表达,但其表达的程度并不一致,提示S100B可能为HSE小鼠脑损害的标志物,其含量的高低与损害程度有关。     

甘草甜素对HSV-1抑制作用的实验研究

目的:观察甘草甜素对单纯疱疹病毒Ⅰ型的抑制作用,为临床更为有效的治疗单纯疱疹病毒性脑炎探索新的药物.方法:体外培养Vero细胞,分成甘草甜素在病毒吸附vero细胞后加入病毒、吸附前甘草甜素预处理细胞以及吸附前甘草甜素预处理病毒,通过观察空斑形成单位来评价甘草甜素对单纯疱疹病毒Ⅰ型的抑制作用,以及作用发生于病毒感染的哪个阶段.结果:病毒吸附vero细胞后加入甘草甜素能明显抑制病毒所致的空斑形成,IC50为0.56mmol/L.吸附前甘草甜素预处理细胞以及吸附前甘草甜素预处理病毒,对病毒所致的空斑形成无明显影响.结论:甘草甜素能明显地抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型的复制,它的作用是发生在病毒穿入细胞后的阶段,不能阻止病毒对细胞的吸附,也不能直接灭活病毒.     

Alport综合征iPSCs差异性表达新小核糖核苷酸的分析

目的 构建Alport综合征(AS)与正常对照者(NC)诱导多能干细胞(iPSCs)新核糖核苷酸(novel microRNA)差异性表达谱,分析其靶基因功能。方法 采用前期工作成功从尿肾状杆细胞诱导成的iPSCs,运用高通量测序平台获得AS与NC的差异性表达谱,使用靶基因预测软件TargetScan进行靶基因预测,靶基因与参考基因比较后,在候选靶基因找到显著富集的GO条目及KEGG通路。结果 在AS与NC中发现49个有意义的差异性表达novel microRNAs,其中33个表达上调,16个表达下调。在GO靶基因富集分析中,靶基因主要富集于生物调节、生物新陈代谢、细胞组成、细胞信号传导、酶催化反应、分子转运等过程。在KEGG通路分析中,靶基因主要参与代谢通路、嘌呤代谢、癌症转录调节等过程。结论 来源于AS与NC的iPSCs存在较大的差异性表达novel microRNA,其靶基因在分子功能、细胞组成、生物过程起着重要作用。这些差异性表达的novel mciroRNAs与靶基因可能是AS发病机制的潜在位点。     

人参皂苷Rg3体外抗HSV-1活性与免疫调节效应

目的：研究人参皂苷Rg3体外对单纯疱疹病毒1型 (HSV-1)的抑制作用与免疫调节效应。方法：采用结晶紫染色法观察Rg3对HSV-1致细胞病变效应的抑制作用。用MTT比色法检测Rg3对Vero细胞和小鼠脾细胞增殖的影响。以Rg3诱导小鼠脾细胞,用鼠脾T淋巴母细胞增殖分析法测定上清中IL-2活性,细胞病变抑制法测定IFN-γ活性。结果：浓度在1.56～25 m g•L^-1的Rg3对HSV-1致细胞病变效应抑制作用显著高于病毒对照组 (P<0.05);浓度小于25 mg•L^-1的Rg3对传代Vero细胞及小鼠脾细胞的增殖作用与细胞对照组比较差异无显著性 (P>0.05); 3.13~6.25 mg•L^-1的Rg3体外诱生IL-2和IFN-γ分泌水平显著高于对照组( P<0.05)。结论：一定浓度的Rg3具有体外抗HSV-1活性,对传代Vero细胞及小鼠脾细胞无毒性,可显著促进IL-2和IFN-γ分泌,参与免疫调节效应。     

Preliminary study on Herpes simplex virus type 1 infection of human oral epithelial cell in vitro

Objective： To explore the functions and mechanisms of herpes simplex virus type I（HSV-1） while infecting human oral epithelial cells in vitro（being similar to the infection in vivo）. Methods：An abundance of HSV-1 strains amplified in Vero cells were used to infect human oral epithelial cells. The culture supernatant was collected to infect Vero cells again. Morphology of HSV-1 was identified by inverted microscope and transmission electron microscope. Nucleic acid of the virus was detected by PCR. Results：The infected human oral epithelial cells didn＇ t display an obvious cytopathic effect（CPE） under inverted microscope（while Vero cells which were infected by the culture supernatant showed typical（CPE）. The virus particles were not observed in the cytoplasm nor in nucleus of human oral epithelial cells, however under transmission electron microscope in the cytoplasm of Vero cells, the nucleic acid of HSV-1 could be detected in infected human oral epithelial cells, by PCR. Conclusion-HSV-1 can successfully infect human oral epithelial cells. This model may provide a useful approach for studying the pathogenesis of herpes virus-associated periodontal disease.     

小鼠卡英酸颞叶癫痫慢性发作期的磷酸化蛋白组学研究

目的: 探究小鼠颞叶癫痫慢性发作期蛋白质功能和信号通路的改变。方法: (1)制备小鼠卡英酸颞叶癫痫模型,行为学达到Racine分级4分判定为造模成功。28 d后,取对照组和实验组小鼠海马组织进行磷酸化蛋白组学实验;(2) 选取检出密度大于10 ⁶的数据进行统计分析;(3)利用GO(Gene Ontology)数据库、KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)数据库和STRING数据库对磷酸化蛋白组学数据进行统计分析;(4)结合文献对组学结果进行分析。 结果: (1)质谱共检测出12 697个蛋白质磷酸化位点,其中159个位点变化差异具有统计学意义(P<0.05);(2)在蛋白质功能层面,磷酸化水平显著性变化的蛋白质的分子功能主要是结合(39.5%)和催化活性(35.7%), 这些蛋白质参与细胞交流(20.8%)、初级代谢和含磷酸盐化合物代谢等生化过程;(3)在信号通路层面,这些蛋白质参与10条信号转导通路,包括谷氨酸能突触信号通路、Ras信号通路、长时程增强信号通路等;(4)在蛋白质相互作用层面,这些蛋白质形成以Grin1和Dlg3为核心,以Arhgef 2、Arhgap33和Tiam1为核心与以Spnb1/3/4、Add3和Ank2为核心的蛋白质相互作用网;(5)磷酸化蛋白组学数据显示,Grin1、Arhgef2、Arhgap33、Tiam1、Sptbn1/2/4和Ank2等磷酸化水平在癫痫慢性发作期显著升高。结论: 磷酸化蛋白组学的结果从蛋白质功能、信号通路和蛋白质相互作用3个层面阐明了小鼠颞叶癫痫慢性发作期海马体蛋白质的变化,验证了磷酸化蛋白组学研究的可靠性,并提示多巴胺功能和Kir3.1钾通道功能可能与癫痫发生相关。     

多种受体酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼减轻流行性乙型脑炎病毒感染的研究

目的 评价多种受体酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼（sunitinib）在体内和体外治疗流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）感染的效果。方法 4周龄BALB/c小鼠腹腔注射JEV。感染小鼠以两种给药策略进行治疗,分别为连续5 d和连续10 d给与舒尼替尼治疗,后观测其体重变化和生存率;通过qRT-PCR技术检测小鼠脑内病毒RNA载量的变化;利用免疫组织化学染色技术检测小鼠脑内CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的数量及分布;利用免疫荧光染色技术观察药物治疗前后小鼠脑内JEV病毒E蛋白的表达。此外,通过JEV体外感染Vero细胞并给与一定浓度舒尼替尼进行干预,观察细胞存活状态;采用间接免疫荧光染色观察治疗前后细胞内JEV病毒E蛋白的表达。结果 小鼠感染JEV后连续给与舒尼替尼可显著提高其生存率,并且连续给药5 d的生存率和体重变化结果优于连续给药10 d。舒尼替尼治疗后减少了脑内CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞浸润,小鼠脑内血管套袖样改变减轻;但治疗前后小鼠脑内的JEV病毒载量和脑内E蛋白的表达变化不太明显;感染JEV的Vero细胞在给与...