DNA修复基因O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在人群肺癌发生中的作用

目的：探讨DNA修复基因O^6－甲基鸟嘌呤－DNA甲基转移酶（O^6-methylguanine-DNA methyltransferase,hMGMT)在人群肺癌发生中的作用。方法：用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测150例肺癌组织、40例正常肺组织、50例对肺癌例和对照外周血单个核细胞中hMGMT基因mRNA的表达；用免疫组化检测p53、C－MYC、K－RAS基因表达，并分析有关暴露因素对修复基因hMGMT表达的影响，以及hMGMT基因与p53、C－MYC、K－RAS等癌变相关基因的关系。结果：32．7％（49／150）的肺癌组织和5．0％（2／40）的正常肺组织存在hMGMT基因表达低下，hMGMT基因表达低下与肺癌发生的危险度OR值为9．22（2．05－57．65），20．0％（10／50）的肺癌病人外周血和4％（2／50）的正常人外周单个核细胞细胞也可检出hMGMT基因表达低下，探讨影响hMGMT基因表达的各种暴露因素，发现吸烟可抑制hMGMT基因表达，另外发现，K－RAS癌基因的过度表达与hMGMT表达低下有关（P＜0．05）；而p53、C－MYC基因的表达与hMGMT无关。结论：DNA修复hMGMT在肺癌发生中起着重要的作用，其表达低下是人群发生肺癌的危险因素之一，该基因的低表达可作为有价值的肺癌易感性标志。     

卵巢癌组织中MGMT表达意义

目的探讨6-氧-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）在卵巢癌中的表达及临床意义.方法应用免疫组化（SP）法对60例卵巢癌及癌旁正常组织中MGMT的表达进行检测.结果60例卵巢癌组织中MGMT的表达率为46.7%,癌旁正常组织MGMT的表达率为100%（P＜0.05）.MGMT的表达与卵巢癌的组织学类型和临床分期无关（P＞0.05）,但与卵巢癌的病理分级有关（P＜0.05）.结论卵巢癌组织中存在MGMT的表达缺失,MGMT的功能失活可能是卵巢癌发生的重要机制之一.     

燃煤污染型砷中毒患者MGMT基因启动区甲基化及MGMT mRNA的表达

[目的]了解燃煤污染型砷中毒患者血中O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因（MGMT基因）启动区甲基化及患者皮肤组织中MGMT mRNA转录表达的情况，探讨两者间关系及其在砷中毒发生发展乃至癌变中的作用。[方法]采用甲基化特异性PCR法（MSP）检测99例砷中毒患者和103例正常对照MGMT基因启动区甲基化情况；同时采用原位杂交技术检测其中61例砷中毒患者皮肤组织中MGMT mRNA的表达情况。[结果]①砷中毒组MGMT基因启动区甲基化阳性率为40．4％，对照组为2．91％；随病情加重砷中毒患者甲基化阳性率逐渐升高，轻、中、重度砷中毒组甲基化阳性率分别为22．73％、39．02％和52．78％，非癌变组与癌变组甲基化阳性率分别为27．78％和65．00％，均显著高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）。②随着砷中毒患者皮肤病变的加重，MGMT mRNA阳性表达率逐渐降低，其表达率在非癌变组与癌变组分别为71．05％和30．43％，两组间差异有统计学意义（P〈0．01）。③MGMT基因启动区甲基化阳性率升高与该基因mRNA表达降低有关联（r=0．456，P=0．01）。[结论]MGMT基因启动区高甲基化是砷中毒发生发展乃至癌变发生的早期事件；MGMT基因启动区高甲基化可导致MGMT mRNA转录水平下降并可能是进一步导致蛋白活性降低的重要原因之一。     

尿中马尿酸、甲基马尿酸的高效液相色谱测定法

目的建立高效液相色谱法测定尿中马尿酸和甲基马尿酸（2、3、4-甲基马尿酸）。方法选择甲醇＋0．4％醋酸水溶液为流动相，检测波长为254nm，流速0．7ml／min；样品处理后经高效液相反相分离，采用色谱保留时间定性，峰面积定量。结果在选定的色谱条件下，标准曲线的线性关系良好，其相关系数大于0．999；精密度试验，相对标准偏差为0．25％-2．36％（n=6）；样品加标回收率为93．37％-100．6％；方法最低检测浓度马尿酸为0．038mg／L，2-甲基马尿酸为0．12mg／L，3．甲基马尿酸为0．011mg／L，4．甲基马尿酸为0．026mg／L。结论该方法操作简单、方法精密度、准确度均能满足实验要求，结果可靠。     

某铀矿工人痰细胞中p16和MGMT基因的甲基化状态

目的检测某铀矿氡职业暴露人群痰细胞中6-氧-甲基嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）基因和p16基因的甲基化状态，为寻找氡致肺癌高危人群的分子标记物提供试验依据。方法91名氡职业暴露工人按氡子体累积暴露剂培工作水平月（WLM）分为高（〉120WLM）、中（60～120WIN）、低（30～60WLM）和较低（2～30WLM）4个剂量组，用聚合酶链反应-甲基化特异性（MSP）检测4组人群痰细胞中的p16和MGMT基因的异常甲基化状态。结果随着氡子体累积暴露剂量的增加，p16基因甲基化率（0．00％，20．00％）、MGMT基因甲基化率（0．00％～28．00％）、总甲基化率（0．00％～40．00％）均呈明昆上升趋势，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论p16和MGMT基因甲基化与氡子体累积暴露剂量有关。     

高脂饮食对1,2-二甲基肼诱导大鼠肠道肿瘤的影响

目的用1,2-二甲基肼诱导大鼠肠道肿瘤,同时观察高脂对1,2-二甲基肼诱导大肠肿瘤的影响。方法Westar大鼠50只,鼠龄7周,根据不同饮食及是否腹腔注射二甲基肼将大鼠分为4组：标准饮食对照组（n=10）、标准饮食±二甲肼诱导成瘤（SDT,n=15）组、高脂饮食对照组（n=10）、高脂饮食±二甲肼诱导成瘤（HFDT,n=15）组。实验18周后处死大鼠,酶联免疫吸附法检测大鼠血清甘油三酯（TG）、肿瘤坏死因子（TNF）-α及结肠TNF-α、白介素-6（IL-6）水平;取出肠道,观察肿瘤部位、数量、大小等,制作病理切片,观察组织学改变,免疫组织化学法检测TNF-α、Ki-67在正常组织、肿瘤中的分布。结果实验结束时SDT组大鼠死亡率20．00％、成瘤率75．00％、荷瘤率117％,HFDT组大鼠死亡率26．67％、成瘤率81．82％、荷瘤率191％,SDT组和HFDT组死亡率、成瘤率（P=0．545）及荷瘤率（χ^2=1．343,P=0．247）差异均无统计学意义。SDT组中肿瘤平均体积〉0．05cm^3个数占28．57％,HFDT组中肿瘤平均体积〉0．05cm^2个数占66．67％,两组肿瘤平均体积差异具有统计学意义（P=0．030）。高脂饮食大鼠血清TG[（1．39±0．31）mmol／L]、TNF-α[（124．80±21．69）ng／L]较标准饮食大鼠血清TG[（0．46±0．20）mmol／L]、TNF-α[（85．83±17．45）ng／L]显著升高（P值均=0．000）。高脂饮食大鼠结肠黏膜TNF-α[（6．22±0．63）ng／g]、IL-6[（13．50±0．67）ng／g]较标准饮食大鼠结肠黏膜TNF-α[（2．33±0．44）ng／g]、IL-6[（7．31±0．41）ng／g]显著升高（P=0．020,P=0．000）;高脂饮食对照组Ki-67阳性表达率40％,较标准饮食对照组10％显著升高（P=0．028）;HFDT组Ki-67阳性表达率90．48％较SDT组50％显著升高（P=0．015）。结论高脂饮食可能通过导致大鼠血清TG、TNF-α上升,上调结肠黏膜炎症因子TNF-α、IL-6及增殖细胞核抗原Ki-67的表达,从而介导炎症进展及细胞增殖,最终影响肿瘤形成及进展,有关高脂对1,2-二甲基肼诱导肠道肿瘤的作用仍需更深入的研究。     

DNA损伤修复基因MGMT在肿瘤发生与预后中的作用

通过对DNA损伤修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）基因的遗传多态性、高甲基化及蛋白表达与肿瘤发生和预后关系的探讨,反映MGMT基因在肿瘤遗传学研究中的重要性。     

基质金属蛋白酶-9和唾液酸化Lewis X在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和唾液酸化Lewisx（sLeX）抗原在乳腺癌组织中表达状况及其与肿瘤转移及预后的关系。方法应用免疫组织化学MW-LSAB法检测120例乳腺癌、71例转移淋巴结和30例远离癌组织的正常乳腺组织上皮细胞MMP-9和sLeX表达状况。结果MMP-9和sLeX在正常乳腺上皮细胞中阳性率分别为33．3％（10／30）和20．0％（6／30），在乳腺癌组织中阳性率分别为75．8％（91／120）和86．7％（104／120），差异有统计学意义（P〈0．05）。在有淋巴结转移的乳腺癌组织中，sLeX阳性率高于无淋巴结转移的乳腺癌组织（P〈0．05），而MMP-9阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MMP-9高表达有利于肿瘤浸润，sLeX高表达有利于肿瘤转移。联合检测MMP-9和sLeX，对预测乳腺癌侵袭、转移及评估患者预后具有重要实用价值。     

居室空气中主要挥发性化学物对小鼠脏器O6-DNA甲基转移酶表达的影响

目的探讨居室空气中主要挥发性化学物对小鼠肺、肝、肾、睾丸组织O6-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)表达的影响。方法根据20户新装修居室空气中甲醛、苯、甲苯、二甲苯和氨的平均质量百分构成比采用化学纯品配制混合染毒液(0.9124g/ml)。将昆明种小鼠随机分为4组,低剂量组(7.5mg/m)3、中剂量组(15mg/m3)、高剂量组(30mg/m3),每组10只。在静式染毒柜中每天染毒1次,每次4h,共染毒9周。对照组不加混合物,在染毒柜中放置时间与染毒组相同。应用链霉亲和素生物-过氧化物酶(SABC)免疫组化法对小鼠肺、肝、睾丸、肾组织中MGMT进行检测。结果高、中、低剂量染毒组小鼠肝、肺、睾丸组织中MGMT表达降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。肾组织中MGMT表达各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论居室空气中主要挥发性化学物对小鼠肝、肺、睾丸组织MGMT表达可能具有抑制作用。     

CK19、Galectin-3及AAT在甲状腺乳头状病变的表达及其意义

目的 探讨CK19、Galectin-3、AAT在甲状腺乳头状病变中的表达及其意义。方法采用CK19、Galectin-3、AAT作为免疫标记,SP法标记甲状腺乳头状病变组织。结果CK19、Galectin-3、AAT在30例甲状腺乳头状癌中的表达率为93．3％（28／30）、93．3％（28／30）、83．3％（25／30）,且表达均为中度强阳性。在甲状腺乳头状增生中表达率仅为6．7％（2／30）、6．7％（2／30）、10％（3／30）。结论CK19、Galectin-3、AAT对良、恶性的甲状腺乳头状病变具有鉴别作用。