单侧磨牙缺失对老年学习记忆减退大鼠基底前脑胆碱能系统的影响

目的:探讨单侧缺牙对不同学习记忆能力老年大鼠基底前脑胆碱能系统的影响。方法:用Morris水迷宫筛选出老年记忆减退鼠和老年记忆正常鼠,拔除单侧磨牙后2个月,用免疫组化和组织化学染色观察对其斜角带核垂直支胆碱能神经元和海马CA1区、前额皮质胆碱能纤维密度的影响。结果:斜角带核垂直支ChAT阳性细胞数和海马CA1区、前额皮质AChE阳性纤维密度在老年记忆减退鼠中,拔牙组较对照组(未拔牙)明显下降;海马CA1区AChE阳性纤维密度在老年记忆正常鼠中,拔牙组较对照组明显下降。结论:单侧磨牙缺失可加速老年学习记忆减退鼠基底前脑胆碱能系统的损害。     

糖皮质激素对糖尿病大鼠学习记忆及Bax表达的影响

目的探讨糖皮质激素对糖尿病大鼠学习记忆及Bax表达的影响。方法 SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,将实验分为3组:正常对照组,糖尿病组,RU486组(糖皮质激素受体阻断剂)即给予RU486的糖尿病大鼠。3个月后水迷宫检测大鼠学习记忆能力,TUNEL染色检测脑海马区神经元凋亡,免疫组化及Western检测脑海马区Bax蛋白表达。结果水迷宫检测显示,与对照组相比糖尿病大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少(均<0.01),出现了学习记忆能力减退的表现,RU486组较对照组无明显变化(>0.05)。与对照组相比,糖尿病组脑海马区凋亡神经元数目增多,Bax表达增加(<0.01),RU486组较对照组无明显变化(>0.05)。结论糖皮质激素能促进糖尿病大鼠脑海马区凋亡相关基因Bax表达,诱导神经元凋亡,损害学习记忆能力。     

三七三醇皂苷对糖尿病大鼠学习记忆功能的改善作用

目的探讨三七三醇皂苷(panax notoginseng,PTS)对糖尿病大鼠学习记忆的改善作用及可能机制。方法链脲佐菌素诱导SD大鼠糖尿病模型,将大鼠分为对照组、糖尿病组及PTS组,3个月后水迷宫实验检测大鼠学习记忆,Nissl染色观察脑海马区神经元形态,TUNEL染色观察海马区神经元凋亡,免疫组化染色和Western blot检测凋亡相关基因Bax在海马区的表达情况。结果与对照组相比,糖尿病组大鼠学习记忆能力减退,表现为逃避潜伏期长以及穿经水迷宫平台次数减少,而且脑海马区神经元形态不规则,排列紊乱,结构不清晰,凋亡神经元及Bax表达均明显增加。PTS组与对照组无明显差别。结论PTS改善糖尿病大鼠学习记忆能力可能与下调糖尿病脑海马区神经元Bax的表达,抑制神经元凋亡相关。     

慢性酒精中毒大鼠学习记忆及Meynert基底核胆碱能神经元的变化

目的研究酒精致大鼠学习记忆障碍与Meynert基底核(NBM)胆碱能神经元变化的关系。方法将24只雄性Wister大鼠随机均分成对照组和酒精中毒组,酒精中毒组大鼠隔日胃内注入含酒精(2.5 g/kg)的蒸馏水2 ml共90d,对照组则注入不含酒精的蒸馏水2 ml。然后采用Morris水迷宫和免疫组织化学技术,分析大鼠Meynert基底核胆碱能神经元、额叶皮层星形胶质细胞数的变化和学习记忆能力的关系。结果酒精中毒组大鼠Morris水迷宫潜伏期明显延长,Meynert基底核胆碱能神经元数目明显减少,额叶皮层星形胶质细胞数目反应性增生。结论酒精致大鼠学习记忆能力障碍与Meynert基底核胆碱能神经元减少有关。     

异丙酚预处理对拟阿尔茨海默病模型大鼠神经行为学和神经原纤维缠结及胶质纤维酸性蛋白的影响

目的:观察异丙酚预处理对拟阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的神经行为学及海马损伤神经原纤维缠结(NFT)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,分析异丙酚的脑保护作用。方法:大鼠海马CA1区微量注射冈田酸(OA),建立拟AD大鼠模型。异丙酚预处理组大鼠于拟AD模型制作前30min,腹腔注射异丙酚100mg/kg。并以Morris水迷宫实验观察大鼠行为学变化,Bielschowsky染色观察NFT及免疫组织化学方法观察GFAP表达的变化。结果:与对照组大鼠相比,模型组大鼠学习记忆能力显著降低;Bielschowsky染色观察海马CA1区域出现大量NFT的特征性病理变化,GFAP免疫组织化学阳性细胞明显增多。与模型组大鼠相比,异丙酚预处理组大鼠学习记忆能力明显提高;海马CA1区NFT明显减少或消失,GFAP免疫组织化学阳性细胞明显减少。结论:拟AD模型建立前30min异丙酚预处理能改善拟AD模型大鼠学习记忆能力,降低NFT和GFAP的表达,有明显的脑保护作用。     

戊四氮诱导癫痫大鼠空间学习记忆受损及海马突触后致密物95表达减少

目的探讨戊四氮诱导癫痫对大鼠空间学习记忆功能的影响及海马突触后致密物95(PSD-95)的表达变化。方法戊四氮(PTZ)腹腔注射诱导慢性癫痫(CEP)模型,采用Morris水迷宫对两组大鼠进行行为学检测,运用免疫组织化学方法观察海马CA1、CA3区PSD-95的表达,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠海马PSD-95mRNA的表达。结果癫痫组大鼠空间学习记忆能力受损;其海马CA1、CA3区PSD-95免疫阳性产物较对照组明显减少(P<0.05),同时伴有海马PSD-95mRNA表达下降(P<0.01)。结论戊四氮诱导癫痫大鼠空间学习记忆受损可能与海马神经元PSD-95的表达减少有关。     

NGF过表达对大鼠脑缺血再灌注损伤模型认知功能的影响

目的探究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)过表达对大鼠脑缺血再灌注损伤模型认知功能的影响。方法将SD大鼠分成空白对照组、模型组和NGF转染组。水迷宫实验检测各组大鼠学习能力,荧光定量PCR,Western blot和免疫组织化学染色检测NGF和Caspase-3的相对表达水平,免疫荧光染色定位NGF蛋白的表达,尼氏染色和透射电镜观察神经元细胞的数量以及血脑屏障的完整性。结果 NGF转染组逃避潜伏期时间要明显短于模型组,而穿越平台次数明显多于模型组。NGF转染组NGF蛋白和mRNA相对表达量明显高于模型组,Caspase-3蛋白和mRNA相对表达量明显低于模型组。NGF蛋白与神经元细胞标记蛋白NSE可共染,而与神经胶质细胞标志物GFAP不可共染。NGF转染组细胞数明显多于模型组细胞数。模型组细胞轮廓模糊,血脑屏障破坏,而NGF转染组细胞轮廓存在,血脑屏障破坏较小。结论 NGF的过表达促进神经元细胞的存活,对大鼠脑缺血再灌注损伤模型的认知功能有保护作用。     

神经干细胞移植对192-IgG-saporin老年性痴呆模型鼠的学习记忆及海马胆碱能纤维的影响

目的探讨神经干细胞(NSCs)移植对192-IgG-saporin致老年性痴呆模型鼠学习记忆和海马胆碱能纤维再生的影响。方法采用192-IgG-saporin(2.5μg/5μL)侧脑室注射SD大鼠建立痴呆模型后,行基底前脑神经干细胞移植,4周后行Y迷宫检测,并观察大鼠海马胆碱能纤维数的变化。结果Y迷宫检测显示大鼠的学习、记忆能力,模型组(107.38±9.34、3.75±0.71)与正常组比较明显下降(P<0.01),而移植组(75.26±5.33、5.45±0.51)有所改善(P<0.05);免疫组化显示模型组大鼠海马CA1区辐射层和齿状回分子层胆碱能阳性纤维,模型组与正常组比较,CA1辐射层和齿状回分子层纤维密度分别减少到11.07%和12.96%(P<0.01),与正常组比较均而干细胞移植组则分别恢复到正常组的81.39%和75.30%(P>0.05)。结论神经干细胞能促进192-IgG-saporinAD动物模型鼠学习记忆能力的恢复及海马胆碱能纤维的再生。     

神经调节素1β对慢性氧乐果中毒大鼠学习记忆障碍的治疗作用

目的观察神经调节素1β(NRG1β)对慢性氧乐果中毒大鼠细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2磷酸化(p-ERK1/2)水平的影响,探索其改善慢性氧乐果中毒认知障碍的作用机制。方法应用Y型电迷宫筛选出有学习记忆能力的大鼠,给予氧乐果5mg/(kg·d)皮下注射4周建立慢性氧乐果中毒认知障碍模型,模型制作成功后治疗组大鼠经侧脑室注射给予NRG1β干预治疗。Y型电迷宫检测大鼠的学习、记忆能力;HE染色观察海马组织的形态学变化;透射电子显微镜观察海马组织超微结构;免疫组织化学和免疫蛋白印迹法检测p-ERK1/2在海马组织内的分布和表达水平。结果 Y型电迷宫结果显示,染毒大鼠学习记忆能力较对照组明显降低,经NRG1β干预治疗后较模型组明显提高;模型组大鼠海马组织损伤明显,ERK1/2磷酸化水平明显下降;NRG1β治疗后海马组织损伤较模型组轻微,ERK1/2磷酸化水平升高。结论 NRG1β可以上调慢性氧乐果中毒大鼠海马组织内ERK1/2的磷酸化(p-ERK1/2)水平,对慢性氧乐果中毒认知障碍有一定的改善作用。     

单侧磨牙缺失对老年记忆减退大鼠海马结构的影响

为了探讨单侧缺牙对不同学习记忆能力老年大鼠海马结构的影响 ,本研究用 Morris水迷宫筛选出老年记忆减退鼠和老年记忆正常鼠 ,拔除单侧磨牙后 2个月 ,观察其海马结构神经元和胆碱能纤维密度的影响变化。结果显示 :(1)海马 CA1 区锥体细胞密度 :老年记忆减退鼠拔牙组较对照组 (未拔牙 )明显下降 (P<0 .0 1) ;(2 )海马 CA1 区 ACh E阳性纤维密度 :老年记忆减退鼠拔牙组和老年记忆正常鼠拔牙组均较对照组 (未拔牙 )明显下降 (P<0 .0 1)。结果提示 :单侧磨牙缺失可加速老年性学习记忆减退鼠海马结构的损害。     

BDNF improves the effects of neural stem cells on the rat model of Alzheimer's disease with unilateral lesion of fimbria-fornix

In this study, neural stem cells (NSCs) were obtained from the hippocampus using the serum-free culturing. NSCs labeled with 5'-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) were transplanted into transected rat basal forebrain followed by the injection of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) into the lateral ventricle. Nestin staining and double-labeling immunohistochemistry were used to detect cell survival and neuronal differentiation of the BrdU labeled cells in the basal forebrain and it was observed that labeled NSCs differentiated into neurons and astrocytes in the basal forebrain. Immunohistochemical detection of p75(NGFR) indicated that the number of cholinergic neurons of the combination groups treated by NSCs, BDNF, and NSCs groups had more significant improvement than that of the injured groups in medial septum (MS) and vertical diagonal branch (VDB). Learning and memory abilities were also measured by Y-maze test and the results support that BDNF can enhance the treatment effects of NSCs transplanted into brain lesion model.     

噪声对大鼠学习记忆中海马区NOS阳性神经元表达的影响

目的：拟在白噪声下观察对大鼠学习记忆的影响及海马区NOS的变化，探讨噪声所致大鼠学习记忆下降的机制。方法：44只SD大鼠，其中20只随机分两组，分别在持续80dB(A)白噪声和无噪声的环境下，在Y—迷宫中进行空间辨别学习记忆训练，了解噪声对大鼠学习记忆的影响，另24只大鼠随机分三组：噪声训练组、正常训练组和噪声观察组，以同样的方法训练，用免疫组化的方法观察持续噪声对海马区NOS阳性神经元表达变化。结果：噪声能降低大鼠学习记忆能力，而且海马区NOS阳性神经元较正常对照组的数量及染色强度显著降低。结论：噪声降低海马区神经元活性，NOS的合成减少，抑制海马习得性长时程突触增强，影响记忆的获得与保持，延迟短时记亿向长时记忆的转化。     

BDNF和神经干细胞联用对老年痴呆鼠基底前脑 胆碱能神经元和学习记忆能力的影响

探讨脑源性神经营养因子(BDNF)和神经干细胞(NSCs)联合应用对老年痴呆大鼠基底前脑胆碱能神经元及大鼠学习记忆能力的影响。利用无血清培养技术获得新生SD鼠的海马NSCs,行BrdU标记。切断SD大鼠左侧穹隆海马伞,基底前脑注射NSCs,同时侧脑室注射BDNF,2周后行nestin和BrdU/NF、BrdU/GFAP免疫荧光双标染色,4周后行Y迷宫测试,免疫组化结合图像分析技术观察各组大鼠基底前脑神经营养因子受体(NGFR)阳性神经元数目变化。结果发现,移植后NSCs能够在宿主体内存活且分化成神经元和胶质细胞;免疫组化结果显示损伤组大鼠胆碱能神经元数在内侧隔阂(MS)和斜角带(VDB)分别减少64.3%和49.3%,较正常组明显下降(P<0.01);移植组神经元数下降34.1%和27.6%较损伤组有改善(P<0.05),但与正常组比较有显著性差异(P<0.05);联合组神经元数减少15.1%和18.6%,与正常组无显著性差异(P>0.05)。Y迷宫测试结果显示,大鼠的学习记忆能力与基底前脑NGFR阳性细胞数呈正相关。提示,BDNF和NSCs移植的联用较单独使用NSCs或BDNF更好地改善老年痴呆大鼠的学习记忆能力。     

大鼠主动逃避学习后pElk-1在脑内表达分布的时程变化

为探讨大鼠主动逃避学习后转录因子pElk1在脑内表达分布的时程变化,将55只成年SpragueDawley大鼠,分为正常对照组、Y迷宫训练组和假训练组,其中训练组与假训练组再各分为训练后0、1、3、6、24h组,每组动物各5只。训练组动物接受Y迷宫光-电结合训练,假训练组动物接受光电不结合假训练。应用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑内各区pElk1分布及表达的变化。结果发现:pElk1免疫阳性神经元在全脑内分布广泛,在纹状体边缘区皮层大部、下丘脑、杏仁核、海马、尾壳核、边缘区、小脑均有较强表达;Y迷宫训练后0、1、3、6h,在海马、皮层大部、杏仁核、下丘脑、纹状体尾壳核及边缘区、小脑均有pElk1免疫阳性神经元表达的持续增强,训练后24hpElk1免疫阳性反应回归到正常组水平;假训练组在假训练后各时间点也有皮层大部、杏仁核等部位的表达增强,但在海马、尾壳核、纹状体边缘区等部位表达增强不明显,与训练组表达强度相比,差异有显著性。以上结果表明:pElk1在全脑分布广泛,Y迷宫学习增强海马、尾壳核、纹状体边缘区等区域的pElk1的表达,提示pElk1可能参与了Y迷宫相关的各脑区的学习记忆活动。     

神经干细胞和脑源性神经营养因子联用对痴呆模型鼠基底前脑p75表达及其学习记忆能力的影响

目的:研究神经干细胞(NSC)和脑源性神经营养因子(BDNF)联合治疗对痴呆模型鼠基底前脑p75表达量的影响及其与学习记忆的关系。方法:模拟阿尔茨海默病(AD)大鼠模型,基底前脑注射NSC,侧脑室注射BDNF;Y迷宫测试,免疫组化结合图像分析观察基底前脑p75蛋白表达,半定量RT-PCR法分析基底前脑p75 mRNA表达水平。结果:p75蛋白和p75 mRNA在内侧隔核和斜角带的表达损伤组大鼠较正常组明显下降;移植组较损伤组有明显改善;联合组与正常组无显著性差异。大鼠的学习记忆能力与基底前脑p75 mRNA表达量呈正相关。结论:NSC和BDNF联用较单独使用其一更好地提高p75mRNA表达量和改善痴呆鼠的学习记忆能力。     

The contribution of low affinity NGF receptor (p75NGFR) to delayed neuronal death after ischemia in the gerbil hippocampus

The implication of low affinity nerve growth factor receptor (p75NGFR), which is believed to play a pro-apoptotic role, in delayed neuronal death (DND) after ischemia in the gerbil hippocampus was investigated. Immunohistochemistry and Western blot analysis revealed that the presence of p75 NGFR immunoreactivity (IR) was negligible in the hippocampus of the sham control gerbil but appeared clearly in CA1 neurons 3 and 4 days after 5-min transient ischemia. Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated UTP nick end labeling (TUNEL) positive nuclei appeared when the level of p75NGFR IR increased. Furthermore, almost all TUNEL-positive CA1 neurons also costained for p75NGFR. These results suggest that p75NGFR contributes to DND after ischemia by an apoptotic mechanism.     

免疫毒素192-IgG-saporin侧脑室注射建立阿尔茨海默病动物模型的实验研究

目的建立大鼠阿尔茨海默病(Alzheimer′sdisease,AD)动物模型,并观察其学习记忆能力及基底前脑胆碱能神经元改变。方法采用SD大鼠侧脑室注射192-IgG-saporin(2.5μg/5μl),21d后行Y迷宫检测,28d后处死大鼠,免疫组化观察基底前脑神经生长因子受体(NGFR)阳性神经元细胞数的变化。结果Y迷宫检测显示模型组大鼠的学习次数、记忆能力(107.38±9.34、3.75±0.71)较正常组明显下降(P<0.01)。免疫组化显示模型组损伤侧在内侧隔核(MS)和斜角带垂直支(VDB)的NGFR阳性神经元细胞数(7.50±1.77、15.00±2.27)与正常组对应侧比较分别减少81.96%和84.23%(P<0.01),MS和VDB的NGFR阳性神经元面积和周长降低(P<0.05),灰度值升高(P<0.05)。结论免疫毒素192-IgG-saporin侧脑室注射可以模拟AD行为学改变和部分病理学特征。     

基底前脑神经元移植到海马后ChAT、NGFR和NOS的表达变化

为了比较基底前脑神经元移植至海马后胆碱乙酰转移酶、神经生长因子受体和一氧化氮合酶神经元的变化规律。选用雄性 SD大鼠 35只 ,在单侧穹隆海马伞损伤后一周 ,将胚胎基底前脑神经元植入损伤侧海马。在移植术后存活 5 d,7d,14 d,30d,6 0 d,90 d,和 180 d共分为 7个时间组灌注取材 ,进行 Ch AT和 NGFR的免疫组织化学反应及 NOS反应 ,观察其神经元的变化。结果证明 ,Ch AT神经元在移植后 30 d方出现阳性反应 ;NGFR神经元在移植后 7d可见淡染的胞体 ,随后逐渐增强 ;NOS神经元在移植后 7d时呈明显的阳性反应 ,而且数量多。三种神经元直到 180 d时均尚呈阳性反应。提示移植物内 NOS神经元出现早且数量多 ,NGFR神经元出现的也较早 ,Ch AT神经元出现最晚。这三种物质在细胞内出现的时间和数量差异与它们在细胞内发挥的功能有关     

空间辨别性学习记忆活动与大鼠海马结构基质细胞衍生因子 1表达的关系

目的 探讨大鼠空间辨别性学习记忆活动与趋化因子基质细胞衍生因子.1(SDF-1)的关系. 方法用免疫组织化学方法、免疫印迹法和RT-PCR方法对获得空间辨别性学习记忆大鼠海马结构内SDF-1表达进行研究,并与游水组和对照组比较.结果 1.免疫组织化学方法显示,对照组大鼠海马结构内趋化因子SDF-1阳性细胞分布在海马结构各亚区和各层.阳性细胞的形态以圆形为主,少见锥体形和梭形.阳性产物主要分布在细胞膜上;游水组大鼠海马结构内SDF-1阳性细胞的形态和分布与对照组相比未见组间差异;训练组大鼠海马结构内SDF-1免疫阳性细胞的数量比对照组增多(P<0.01).阳性细胞的形态以锥体形和三角形居多,在分布上有向齿状回聚集的趋势.2.免疫印迹方法检测训练组大鼠海马结构内SDF-1蛋白质的表达明显高于对照组(P<0.01).而且在训练组内则随着训练时间的延长表达量随之增加.3.RT-PCR方法检测训练组大鼠海马结构内SDF-1mRNA的量明显高于对照组(P<0.01),且随着训练时间的延长表达增加.在水盆中漫游的游水组大鼠,不论是免疫组织化学方法,还是免疫印迹法以及RT-PCR方法获得的结果与对照组相比均未见组间差异. 结论 经水迷宫训练使大鼠获得空间辨别性学习记忆功能,致使海马结构内细胞导向因子SDF-1表达上调,上调的SDF-1蛋白质可能与所获功能需要的形态基础.神经微环路的形成有关.