Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制由IL-23诱导PBMC IFN-γ的产生

目的：探讨重组人白介素23（IL-23）诱导正常人PBMC IFN-γ的产生，细胞亚群和调节因素。方法：正常人PBMC在不同条件下与IL-23进行培养，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养液中IFN-γ的水平。同时采用流式细胞仪，分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的细胞亚群。结果：IL-23呈剂量依赖性诱导PBMC IFN-γ产生，并可与IL-2协同诱导IFN-γ的产生。细胞亚群分析的结果表明，IL-23诱导高表达CD56^＊NK细胞产生IFN-γ，对CD4^＊和CD8^＊T细胞无明显作用。Th2细胞因子和抗IL-12受体β1 mAb（IL-12Rβ1）抑制IL-23诱导IFN-γ产生。结论：IL-23可直接作用于CD3^＊CD56^＊NK细胞，诱导产生IFN-γ。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1 mAb抑制IL-23诱导IFN-γ产生，提示可以用于由IL-23引起自身免疫病的治疗。     

IL-4、IL-10和抗IL-12受体β1 mAb抑制IL-23诱导正常人记忆T细胞 IFN-γ产生

目的 探讨重组人白介素23（IL-23）是否能够诱导正常人T细胞IFN-γ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法 正常人PBMC在抗CD3（anti-CD3）单克隆抗体或anti-CD3和抗CD28（anti-CD28）单克隆抗体刺激的条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养液中IFN-γ的水平;同时采用流式细胞仪,在单个细胞水平上分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的T细胞亚群。结果 在未经任何刺激的情况下,PBMC产生很低或不产生IFN-γ。IL-23呈剂量依赖方式促进由anti-CD3活化的PBMC IFN-γ产生。细胞亚群分析的结果表明,IL-23诱导记忆CD4^＋和CD8^＋T细胞表达IFN-γ,对活化的CD4^＋T细胞作用较为明显。Th2细胞因子（IL-4、IL-10）和抗IL-12受体β1 mAb（IL-12Rβ1）抑制IL-23诱导T细胞IFN-γ产生。结论 IL-23促进活化的记忆CD4^＋和CD8^＋T细胞IFN-γ的产生。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1 mAb抑制由IL-23诱导IFN-γ产生,提示这些细胞因子和抗体对IL-23引起的自身免疫病具有拮抗作用。     

人外周血卡介苗(BCG)特异性中央型和效应型记忆CD4+T细胞的特征

目的：探讨正常人外周血BCG特异性记忆T细胞的特征。方法：分离PPD^-和PPD^＋正常人PBMCs，与BCG进行培养，采用ELISA法检测细胞培养上清液中IFN-γ的水平，ELISPOT法检测分泌IFN-γ的细胞数，利用流式细胞仪在单个细胞水平上检测细胞表面分子及细胞内因子IFN-γ和IL-2的表达及其关系。结果：当BCG刺激后，PPD^＋正常人PBMCs不产生或只产生少量的IFN-γ，而PPD^＋者IFN-γ产生的量和细胞数均明显增加（P〈0．05）。流式细胞检测分析的结果表明，当BCG刺激后，主要是CD4^-而非CD8^＋T细胞表达IFN-γ和IL-2，两者相比具有显著差异。在CD4^＋T细胞中单独产生IFN-γ的细胞占大多数，其次为IFN-γ和IL-2双阳性细胞，只产生IL-2的细胞占少数。此外，85％～95％以上的CD4^＋IFN-γ^＋T细胞为CD45RO^＋，其中60％以上的细胞为CCR7^＋，其余的为CCR7^-。同样地，80％～95％左右的细胞为CD62L。。结论：BCG可以诱导抗原特异性记忆CD4^＋T细胞的产生，其中大多数为中央型记忆CD4^＋T细胞，少数为效应记忆CD4^＋T细胞，提示其在预防和控制结核分枝杆菌感染中发挥重要作用。     

CD226在NK细胞亚群上表达规律与功能关系的研究

目的：观察CD226分子在NK细胞亚群上的分布和其他NK细胞活化性受体和抑制性受体的共存规律，及与NK细胞功能的关系。方法：分别以IL-2或IL-15刺激PBMC和MLC细胞为模型，采用双重免疫荧光染色和流式细胞术分析，观察CD226分子在CD56^bright和CD56^dim NK细胞亚群上的表达，及与NK细胞活化性受体CD16和抑制性受体NKG2A的共存关系，同时用ELISA方法检测培养上清中IFN-γ的水平。用4小时^51Cr释放试实验检测NK细胞杀伤水平。结果：在PBMC中，CD226主要分布于CD56^dim亚群，在IL-2作用下，CD226主要分布于CD56^bright,亚群，而在IL-15作用下，NKG2A^ CD226^ 双阳性细胞明显增加。在MLC活化的NK细胞中，CD226主要分布于CD56^dim亚群，在IL-15作用下，CD226主要分布于CD56^bright亚群，IL-2和IL-15都能促进CD16^ CD226^ 和NKG2A^ CD226^ 双阳性细胞的增殖。IL-2和IL-15能明显提高PBMC培养上清中IFN-γ的水平，并能促进PBMC和MLC中NK细胞的杀伤活性。结论：CD226主要分布于活化NK细胞CD56^bright群上，其表达水平及与CD16及NKG2A共存关系可能受不同细胞因子调节并与NK细胞功能相关。     

CD4+CD25+调节性T细胞抑制小鼠自身免疫性甲状腺炎的发生

目的：研究CD4^ CD25^ Treg细胞对诱导小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)的影响。方法：磁性细胞分离器(MACS)分离CD4^ CD25^ T细胞，通过体外细胞增殖试验和IFN-γ的测定研究CD4^ CD25^ T细胞对CD4^ CD25^ T细胞的免疫抑制作用，同时通过过继转移试验研究CD4^ CD25^ T细胞抑制小鼠EAT的发生。结果：MACS分离的CD4^ CD25^ T细胞纯度可达到85％～94％，特异性表达FoxP3基因，体外能明显抑制效应性T细胞的增殖和IFN-γ的产生；将CD4^ CD25^ T细胞与病理性CD25^ T细胞共同注射正常小鼠，可抑制病理性T细胞诱导EAT的发生。结论：CD4^ CD25^ Treg细胞在体内外具有明显抑制效应性T细胞的功能。     

CD4+T细胞的分裂与表面标志和细胞因子产生相关性的探讨

目的：阐明抗原特异性CD4^ T细胞的分裂、细胞表面分子的表达和细胞因子产生之间的关系。方法：从T细胞受体转基因小鼠(DO11、10)的脾和淋巴结中分离CD4^ T细胞。在抗原提呈细胞存在的情况下，经OVA多肽抗原刺激后，检测细胞的分裂、表型和细胞因子的产生。结果：经抗原刺激3天后，CD4^ T细胞分裂1-5次，细胞膜表面抗原CD25、CD44的表达随着细胞的分裂而增加，相反，CD62L和CD69随着细胞分裂次数的增加而递减。细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-10随着细胞分裂次数的增加而递增。IL-12促进细胞的分裂，增加IFN-γ的产生，抑制IL-4和IL-10的产生。结论：当CD4^ T细胞活化后，随着细胞的分裂，其细胞膜表面分子的表达和细胞因子的产生均发生质和量的变化。     

CD4+CD25+调节性T细胞在约氏疟原虫感染早期作用机制的实验研究

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在约氏疟原虫感染早期的免疫调节机制。方法用抗CTLA-4 mAb和抗CD25 mAb分别与约氏疟原虫感染早期的小鼠脾细胞共同培养后,以ELISA法检测其培养上清的IL-10、TGF-β1及IFN-γ的含量。结果与抗CTLA-4 mAb共同培养后,脾细胞上清中IL-10的水平明显降低,但TGF-β1和IFN-γ水平未出现有意义的变化;与抗-CD25 mAb共同培养后,IL-10、TGF-β1和IFN-γ水平均未出现有意义的变化,但IL-10水平有一定的降低趋势。结论约氏疟原虫感染早期,IL-10可能是介导CD4^＋CD25^＋调节性T细胞参与免疫调节的关键性细胞因子,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可能通过CTLA-4发挥免疫抑制作用。     

细胞因子直接诱导正常人CD4^＋T细胞产生几-17和IFN-γ

目的：探讨细胞因子（IL-23、IL-2和IL-15）对正常人外周血单个核细胞（PBMC）和CD4^＋T细胞IL-17产生的诱导作用和调节因素。方法：将正常人PBMC和纯化的CD4^＋T细胞在不同条件下与IL-23、IL-2和IL-15进行培养，采用ELISA法检测细胞培养液中IL-17和IFN-1的水平；采用酶联免疫斑点试验（ELISPOT）在单个细胞水平上检测IL-17和IFN-γ产生细胞的频率。结果：IL-23可诱导PBMC产生IL-17和IFN-γ；Th2细胞因子和抗IL-12受体B1（IL-12Rβ1）mAb可抑制IL-23诱导的IL-17和IFN-γ产生。IL-2和IL-15均可诱导IL-17和IFN-γ产生，并与IL-23具有共同诱导作用。IL-12可诱导PBMC产生大量的IFN-γ，但不产生IL-17。进一步研究表明，IL-23、IL-2和IL-15可直接诱导纯化的CD4^＋T细胞产生IL-17和IFN-γ。结论：IL-23、IL-2和IL-15可直接作用于正常人CD4^＋T细胞诱导其产生IL-17和IFN-γ；Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb可抑制IL-23诱导的IL-17和IFN-γ产生。为探讨自身免疫性疾病等的发生机制和治疗提供了新的靶点。     

肺癌患者CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞的格局变化及意义

目的：研究肺癌患者外周血（PBMC）及肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）中CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋调节性T细胞（Treg）的比例改变，探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法：分离肺癌患者PBMC及TIL，FACS分析CD4^＋／CD8^＋T细胞的比值及CD4^＋ CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的比例。Real-time PCR检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在PBMC及TIL中的表达。结果：肺癌患者PBMC及TIL中CD4^＋／CD8^＋比值降低；而CD4^＋ CD25^high T细胞在CD4^＋T细胞中所占比例升高；Foxp3基因仅在TIL中高表达，而在PBMC中低或不表达，表明肿瘤局部的CD4^＋ CD25^high T细胞主要是CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋ Treg。结合临床资料分析显示Treg在肺腺癌比例较高。结论：CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋ Treg在肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中明显升高，可能与其通过细胞与细胞间接触抑制CD8^＋T细胞的杀伤效应，最终发挥免疫抑制效应相关。     

IL-13和CD86对9HTE细胞株和哮喘患儿PBMC表达CD86水平的影响

目的 了解IL-13和CD86在哮喘发病中的作用及anti-CD86 McAb治疗哮喘的机理。方法 随机选择门诊哮喘急性发作期患儿30例，正常健康儿童30例作为健康对照组。分别用rhIL-13、TNF-α和rhIL-13 TNF-α干预9HTE人气道上皮细胞株和哮喘患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)，用直接免疫荧光流式细胞术(FCM)检测9HTE人气道上皮细胞株表达CD86的百分率、PBMC中CD14^*细胞表达CD86的平均荧光强度(MFI)及脂多糖(LPS)刺激后PBMC中CD19^ CD86^ 双阳性细胞百分率。结果 (1)分别用TNF-α、rhIL-13和TNF-α rhIL-13干预9HTE细胞株后CD86的表达，三组之间表达的百分率差异无统计学意义；rhIL-13 anti-CD86 McAb干预9HTE细胞株后，9HTE细胞表达CD86水平较其他组降低，差异有统计学意义。(2)哮喘组中的空白组、IL-13组、TNF-α组、TNF-α IL-13组及anti-CD86组的CD14^ CD86^ 的平均荧光强度和CD19^ CD86^ 百分率均较相应的对照组高，差异有统计学意义。(3)TNF-α IL-13干预后，CD14^ CD86^ 的平均荧光强度和CD19^ CD86^ 百分率较对应的空白组、IL-13组和TNF-α组明显增高，差异有统计学意义；(4)anti-CD86 McAb干预后，CD14^ CD86^ 的平均荧光强度和CD19^ CD86^ 百分率较对应的其他组明显减低，差异有统计学意义。结论 IL-13可诱导9HTE细胞株、PBMC中的CD14^ 细胞和CD19^ 细胞表达CD86；anti-CD86 McAb可阻断9HTE细胞株、PBMC中的CD14^ 细胞和CD19^ 细胞表达CD86。提示IL-13和CD86在哮喘发病中起重要作用，anti-CD86 McAb治疗哮喘具有一定的可行性。     

CD55、CD59、CD34对AA-PNH早期诊断研究应用

目的：探讨CD55、CD59、CD34抗原在再障．阵发性血红蛋白尿综合征(AA-PNH)的早期诊断中的价值，寻找AA-PNH早期诊断敏感指标，进而达到早期发现、早期诊断、早期治疗的目的。方法：应用流式细胞仪测定AA-PNH综合征患者的CD55、CD59、CD34抗原变化关系，并与PNH、AA等疾病组以及正常对照组CD55、CD59、CD34抗原相互变化关系，经过统计学处理，找出相关性。结果：结果表明AA—PNH、PNH CD55、CD59、CD34抗原较AA及其他疾病组及正常对照组明显减低，并与溶血试验中溶血程度呈正相关，且早于其他溶血指标。结论：CD55、CD59、CD34抗原表达率可作为PNH、AA-PNH综合征早期诊断最敏感指标，并与预后转归密切相关。     

CD45RA／CD45RO临床研究进展

目的：探讨CD45RA／CD45RO的研究现状从而有效的指导临床工作。方法：查阅近年来国内外CD45RA／CIM5RO的相关文献，对其最新研究进行总结。结果：作为跨膜酪氨酸磷酸蛋白酶，CIM5RA／CD45RO在哺乳动物淋巴细胞信号传导、增殖和活化中有重要作用，是区分初始和记忆T细胞的重要标志。结论：CD45RA／CD45RO的检测在人类自身免疫疾病和病毒感染性疾病的诊断方面有重要意义。     

B cells in the aged: CD27, CD5, and CD40 expression

Ageing is characterized by numerous changes in lymphocyte subpopulations. In the present paper we have focused on B cells carrying the surface markers CD27, CD5 and CD40. CD27 is considered a marker of primed (memory) cells and its engagement promotes the differentiation of memory B cells into plasma cells. CD5 is expressed on B1 cells, which are considered to be responsible for T cell-independent antibody production other than autoantibodies. The CD40 molecule binds CD40L (CD154) and is necessary for T-dependent antibody responses. Here we show that the absolute number of CD5+ and CD40+ B cells is decreased in the elderly, while CD27+ B lymphocytes only marginally decrease in centenarians. However, there is a decrease of the percentage of CD5+ B cells, an increase of CD27+ B cells, while CD40 does not change significantly. These data, together with the increased number of NK cells during aging, suggest different regulation of antibody production in the elderly which might be another example of immune remodeling with aging, based on interactions between human B and NK cells.     

A CD44 monoclonal antibody differentially regulates CD11a/CD18 binding to intercellular adhesion molecules CD54, CD102 and CD50

We have made a monoclonal anti-CD44 antibody which is able to activate the leukocyte integrin CD11a/CD18. Activated T cells strongly aggregated, and the aggregation was shown to be intercellular adhesion molecule (ICAM)-1 (CD54) and ICAM-2 (CD102) dependent. Using purified ICAM coated on plastic, only binding to ICAM-1 was increased by the CD44 antibody, whereas activation by phorbol ester increased binding to both ICAM-1 and ICAM-3. The binding to ICAM-2 was not affected by either treatment. These findings show that the CD11a/CD18 integrin can be activated in a ligand-specific manner by engagement of CD44.     

CD70 represents the human ligand for CD27

The recently identified CD27 ligand (L) Is a type II transmembranemolecule with significant structural homology to tumor necrosisfactor (TNF)-, TNF-ß, lymphotoxin ß, CO40L,and CD30L. Using a CD27L specific mAb we examined the tissuedistribution of the molecule, and found Its expression to berestricted to B cells in occasional germinal centers, stromalcells in the thymic medulla, and scattered T cells in tonsils,skin and gut. As the limited expression of CD27L closely resembledthe reported distribution of the activation antigen CD70, wetested whether CD70 represents the human CD27L. CD70 mAb werefound to react with CD27L-expressing transfected mouse fibroblasts.Moreover a number of CD70 mAb could specifically interfere withthe cellular binding of CD27L mAb. Thus, CD70 Is Identical tothe human CD27L.     

The role of CD40 and CD154/CD40L in dendritic cells

In this review, we focus on the function of CD40–CD40L (CD154) interactions in the regulation of dendritic cell (DC)–T cell and DC–B cell crosstalk. In addition, we examine differences and similarities between the CD40 signaling pathway in DCs and other innate immune cell receptors, and how these pathways integrate DC functions. As research into DC vaccines and immunotherapies progresses, further understanding of CD40 and DC function will advance the applicability of DCs in immunotherapy for human diseases.     

Soluble CD40 ligand induces expression of CD25 and CD23 in resting human tonsillar B lymphocytes

In this report, we describe the dose-dependent increase in both CD25 and CD23 levels on resting human B cells in response to CD40 ligation, as mediated by soluble CD40 ligand (sCD40L) or anti-CD40 antibody. In combination with interleukin (IL)-4, sCD40L had limited additive effects on CD25 expression, but significantly enhanced CD23 expression on tonsillar B cells. Interferon-γ (IFN-γ) exerted no inhibitory effect upon increases in CD25 or CD23 driven by CD40 ligation with sCD40L or anti-CD40 antibody. These data suggest that the induction of CD25 and CD23 genes by IL-4 is mediated, at least in part, by an IFN-γ-sensitive component, whereas gene activation driven via CD40 ligation involves signaling pathways which are not sensitive to IFN-γ.     

CD4~+CD25~+CD127~(low)识别人外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的优势

目的:探索可用于检测人外周血中CD4+CD25+Treg 细胞的最佳标记物.方法:以 52 名健康人和 47 名非血液系统肿瘤患者为研究对象,采用多色免疫荧光素标记和多参数流式细胞术同时检测外周血中CD4+CD25high、CD4+CD25+FoxP3+和 CD4+CD25+CD127lowT 细胞,并以经典指标CD4+CD25high 和 CD4+CD25+FoxP3+为标准,分析和比较CD4+CD25+CD127low作为识别CD4+CD25+ Treg 细胞的可行性及其优势.结果:健康人和肿瘤患者外周血 CD4+CD25high、CD4+ CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CDl27+lowT 细胞占CD4+T 细胞百分比分别为(1.769±O.682)%和(2.958±1.392)%;(2.905±1.772)%和(5.128±2.227)%以及(5.396±1.306)%和(7.175±2.565)%.三者呈相同的趋势,即肿瘤患者组>健康人组,且三者之间呈显著正相关(P<0.05).用两种不同标记法高纯度分选CD4+ CD25high 和 CD4+CD25+CD127lowT 细胞群后,FoxP3 阳性率分别为90.9%和92.7%.结论:CD4+CD25+CD127low 三标记法可以帮助识别 CD4+CD25+Treg 和部分激活的 CD4+T 细胞,提高CD4+CD25+Treg细胞的可检出数量,并且不影响细胞活性度,是反映CD4+CD25+Treg 细胞更理想的指标.     

隐匿型肾小球肾炎外周血CD44、CD54、CD62P的表达及意义

目的:探讨隐匿型肾小球肾炎外周血粘附分子CD44、CD54、CD62P的表达与疾病的关系。方法:采用流式细胞全血免疫荧光直标术对25例隐匿型肾小球肾炎患者外周血进行CD44、CD54、CD62P标记后,上流式细胞仪检测。结果:隐匿型肾小球肾炎患者外周血CD44、CD54、CD62P的表达显著高于正常对照(P<0.01),而且肉眼血尿组CD44、CD54、CD62P的表达显著高于尿检异常组(P<0.01)。结论:黏附分子CD44、CD54、CD62P可能介导和参与了隐匿型肾小球肾炎的发生及发展过程,外周血粘附分子CD44、CD54、CD62P的检测可为临床隐匿型肾小球肾炎的诊断和治疗提供分子依据。     

浆细胞CD45和CD31的表达与多发性骨髓瘤细胞分化程度的关系

目的: 了解反映多发性骨髓瘤(MM)细胞生物学行为的免疫标记在骨髓不同阶段浆细胞中的表达情况,为临床调整治疗策略和判断疾病病程及预后提供依据。方法: 用流式细胞术检测MM患者及对照组浆细胞表面相关分化抗原的表达情况,分析其在良、恶性浆细胞表达的差异,及其与原始浆细胞比例的相关性。结果: MM患者浆细胞CD45和CD31表达率低于对照组浆细胞; MM细胞 CD45和CD31的表达率与原始浆细胞比例呈负相关;CD45表达与CD31表达呈现正相关。结论: 浆细胞CD45和CD31的表达率与MM细胞的分化程度呈正相关,其表达可能与MM的疾病进展有一定关系。