自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞缺氧预处理的延迟保护作用

目的；观察缺氧预处理（ＰＣ）对于自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）缺氧复氧（Ｈ／Ｒ）损伤的延迟保护作用，并探讨其可能机制，方法：对ＶＳＭＣ于缺氧ＰＣ２４ｈ后进行Ｈ（２ｈ）／Ｒ（１ｈ）结束实验时测定其Ｈ／Ｒ后细胞存活率，乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放和ＡＴＰ含量，并测定其金属硫蛋白（ＭＴ）量，结果：缺氧ＰＣ明显减轻Ｈ／Ｒ造成的ＳＨＲ的ＶＳＭＣ存活率下降，ＡＴＰ耗竭和ＬＤＨ释放，并使细胞内     

自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞缺氧预处理的延迟保护作用

目的：观察缺氧预处理（ＰＣ）对于自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）缺氧复氧（Ｈ／Ｒ）损伤的延迟保护作用，并探讨其可能机制。方法：对ＶＳＭＣ于缺氧ＰＣ２４ｈ后进行Ｈ（２ｈ）／Ｒ（１ｈ），结束实验时测定其Ｈ／Ｒ后细胞存活率、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放和ＡＴＰ含量，并测定其金属硫蛋白（ＭＴ）量。结果：缺氧ＰＣ明显减轻Ｈ／Ｒ造成的ＳＨＲ的ＶＳＭＣ存活率下降、ＡＴＰ耗竭和ＬＤＨ释放，并使细胞内应激蛋白ＭＴ含量升高１．３倍，上述指标与正常血压对照组ＷＫＹ大鼠ＶＳＭＣ的结果相近。结论：培养的ＳＨＲ的ＶＳＭＣ亦存在ＰＣ的延迟保护作用，其保护机制涉及ＭＴ合成增多。     

实验性病毒性心肌炎药物治疗及凋亡的机制

目的以病毒性心肌炎（ＶＭＣ）细胞感染模型为基础，研究柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）细胞感染与心肌细胞凋亡的关系，并观察板蓝根对实验性ＶＭＣ的治疗效果。方法第一步建立稳定的ＶＭＣ细胞感染模型；第二步在ＣＶＢ３病毒感染心肌细胞后２４ｈ电镜观察超微结构改变，流式细胞仪检测“凋亡峰”，ＥＬＩＳＡ法定量检测ＣＶＢ３病毒感染后１，２，４，７，２４ｈ心肌细胞凋亡的情况；第三步将不同浓度的板蓝根与ＣＶＢ３病毒作用后在心肌细胞上检测病毒的ＴＣＩＤ５０。根据药物毒性测定的结果，取最大无毒浓度以下两种不同浓度的板蓝根按两种方式加药：（１）ＣＶＢ３病毒感染细胞后加药；（２）病毒先与药物作用后再感染细胞进行实验。以黄芪作为治疗阳性对照组，另设病毒感染组、正常细胞对照组。于药物作用４８ｈ后观察各组细胞搏动百分比、细胞病变（ＣＰＥ）、超微结构变化，并测定培养液中心肌酶水平，进行体外、细胞内药物疗效观察。结果（１）对ＣＶＢ３病毒感染后细胞的形态学检测（ＣＰＥ３＋～４＋），电镜下细胞内见包涵体，病毒颗粒及细胞培养液心肌酶（ＡＳＴ、ＬＤＨ、ＣＫ、ＣＫＭＢ、ＨＢＤＨ）水平升高，证实所建立的ＶＭＣ细胞感染模型是稳定的。（２）电镜观察ＣＶＢ３病毒感染心     

AVP对VSMC脂质过氧化的影响及CGRP,SP的调节作用

研究ＡＶＰ对ＶＳＭＣ脂质过氧化的影响及ＣＧＲＰ，ＳＰ的调节作用。方法；以培养的大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）为模型，动态观察了精氨酸加压素（ＡＶＰ）为ＶＳＭＣ脂质过氧化的影响，及降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ），Ｐ物质（ＳＰ）对ＡＶＰ作用的调节，旨在探讨它们在高血压病发病中的意义。结果：（１）１０＾－７Ｍ的ＡＶＰ作用后，ＶＳＭＰ的丙二醛（ＭＤＡ），含量明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）；（２）１０＾－７Ｍ     

PCR检测白血病,再生障碍性贫血患者3种疱疹病毒

目的：观察白血病、再生障碍性贫血患者治疗前后巨细胞病毒（ＣＭＶ）、单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）、爱博斯坦巴尔病毒（ＥＢＶ）的感染状况。方法：用ＰＣＲ法检测急性白血病患者骨髓单个核细胞内ＣＭＶ－ＤＮＡ、ＨＳＶ－ＤＮＡ、ＥＢＶ－ＤＮＡ，以及再生障碍性贫血患者血浆中ＣＭＶ－ＤＮＡ感染情况。结果：急性白血病患者骨髓单个核细胞内ＣＭＶ－ＤＮＡ的检出率高于血浆的检出率；初治白血病患者骨髓单个核细胞内及初治再生障碍性     

单纯疱疹病毒感染3T3膜脂的变化

利用气相色谱（ＧＣ）方法对单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－Ⅰ、ＨＳＶ－Ⅱ）感染后的３Ｔ３细胞与未感染病毒的３Ｔ３细胞的膜脂成分进行色谱分析。结果表明，细胞受病毒感染的病变初期和后期存在膜脂成分的构象互变现象。感染１２ｈ后膜不饱和脂肪酸（Ｃ１８：２、Ｃ１８：１）的含量增多，感染３６ｈ后情况与上述相反，不饱和脂肪酸均趋于减少，而饱和２０碳酸却明显增加。     

丝裂素活化蛋白激酶介导同型半胱氨酸诱导的血管平滑 …

目的；研究同型半胱氨酸（ＨＣＹ）促进血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的增殖及其机制。方法：采用同位素技术测量＾３Ｈ－ＴｄＲ参入和丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性。结果：ＨＣＹ促进ＶＳＭＣ增殖，同时ＨＣＹ增加ＭＡＰＫ活性，二者均具有剂量效应关系，而且二者之间呈显著正相关。结论：ＨＣＹ促进ＶＳＭＣ增殖，可能是通过增加ＭＡＰＫ活性的途径实现的。     

半套式荧光定量聚合酶链反应检测肾移植前后人巨细胞病毒感染状态

目的：研究肾移植受者手术前后人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）的感染率及ＨＣＭＶＤＮＡ含量变化。方法：采用半套式荧光定量聚合酶链反应（ＡｍｐｌｉＳｅｎｓｏｒＰＣＲ）方法定量检测术前肾移植受者６１例，术后３２例，用四格表比较手术前、后的感染率，用ｔ检验比较病毒含量。结果：手术前、后肾移植受者ＨＣＭＶ的感染率分别为７７％和８７５％；ＨＣＭＶＤＮＡ平均含量（拷贝数每升）分别是１０７×１０７Ｌ－１和７４１×１０７Ｌ－１，两者之间感染率无显著差异（χ２＝１６５Ｐ＞００５），但病毒平均含量存在极显著差异（ｔ＝６４６Ｐ＜００１）。结论：研究结果显示：①免疫抑制治疗激活了潜伏性ＨＣＭＶ感染，导致术后ＨＣＭＶ含量显著增加；②决定肾移植受者ＨＣＭＶ感染状态的主要是机体本身的免疫力，减少ＨＣＭＶ感染，术后合理使用免疫抑制剂，避免过度抑制可能更重要     

MCP-1 McAb和Losartan拮抗VSMCs的增殖与迁移效应的实验研究

目的 探讨单核细胞趋化蛋白０１单克隆抗体（ＭＣＰ－１ ＭｃＡｂ）或Ｌｏｓａｒｔａｎ拮抗血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）介导的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）增殖与迁移效应的可能性,为防治动脉硬化（ＡＳ）提供一定的理论依据。方法 采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测ＶＳＭＣｓ的移迁效应;以ＭＴＴ法、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法、＾３Ｈ－脯氨酸标记法和ＶＳＭＣｓ计数评价ＶＳＭＣｓ的增殖效应;将培养的ＶＳＭＣｓ分为５组：２％胎     

丙烷盐酸盐抑制自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对HSP70和P53的影响

丙烷盐酸盐抑制自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对ＨＳＰ７０和Ｐ５３的影响熊一力钱家庆血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的异常增殖是高血压病的主要病理特征，此病变涉及许多ＶＳＭＣ促增殖因子及基因调控［１，２］。１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二...     

反义N-ras-1基因对成纤维细胞生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的应用反义Ｎ－ｒａｓ１基因阻断成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的促增殖作用，为防治以血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖为主要特征的血管损伤后再狭窄等心血管疾病提供进一步探索的途径。方法利用构建的含反义Ｎ－ｒａｓ１基因的逆转录病毒质粒（ｆｐＧｖ１－ＭＴ－ＡｎｔｉｓｅｎｓｅＮ－ｒａｓ１）转染于培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ），ｆｐＧｖ１－ＭＴ逆转录病毒空载质粒及未转染质粒的细胞为对照，观察其对ｂＦＧＦ诱导的ＶＳＭＣ的影响。结果反义Ｎ－ｒａｓ１细胞数为（１６．８±１．３）×１０４（细胞／ｍｌ），空载质粒对照细胞为（３０．１±１．２）×１０４，两者差异有显著意义（Ｐ＜０．００１）；反义Ｎ－ｒａｓ１细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入率为７６４３±６７２（ｃｐｍ），空载质粒对照细胞为１５１３１±１３８（ｃｐｍ），两者差异有非常显著意义（Ｐ＜０．００１），同时应用反义Ｎ－ｒａｓ１基因的细胞ＲａｓｍＲＮＡ表达水平明显降低，其表达蛋白ｐ２１也明显降低。结论反义Ｎ－ｒａｓ１基因对ＶＳＭＣ及ｂＦＧＦ诱导ＶＳＭＣ增殖有抑制作用。     

人巨细胞病毒特异性转移因子对小鼠脾细胞分化增殖的作用

①目的检测人巨细胞病毒特异性转移因子（ＨＣＭＶ－ＳＴＦ）对小鼠脾细胞分化增殖作用。②方法采用微量细胞培养法培养小鼠脾细胞，共分５组，分别加入１６４０培养液（空白对照），ＰＨＡ，ＨＣＭＶ－Ａｇ，ＨＣＭＶ－ＳＴＦ，ＨＣＭＶ－Ａｇ＋ＨＣＭＶ－ＳＴＦ．培养４８ｈ后加入氚－胸腺嘧啶（３Ｈ－ＴＤＲ），再培养２４ｈ，收集细胞，用液体闪烁计数器计数（ｃｐｍ），计算促进率。③结果ＨＣＭＶ－Ａｇ＋ＨＣＭＶ－ＳＴＦ组与ＨＣＭＶ－Ａｇ，ＨＣＭＶ－ＳＴＦ组比较具有明显的促进小鼠脾细胞分化增殖的作用（ｑ＝３．３５，４．７５，Ｐ＜０．０５）。④结论ＨＣＭＶ－ＳＴＦ具有相应抗原的依赖活性；同时也证明３Ｈ－ＴＤＲ掺入法检测小鼠脾细胞分化增殖效应，是特异性转移因子质控的一种较为理想的测试方法。     

人巨细胞病毒特异性转移因子对小鼠脾细胞分化增殖的作用

目的 检测人巨细胞病毒牧场卉性转移因子（ＨＣＭＶ＿ＳＴＦ）对小鼠脾细胞分化增殖作用。２）方法采用微量细胞培养法２小鼠脾细胞，共分５组，分别加入１６４０培养液（空白对照），ＰＨＡ，ＨＣＭＶ－Ａｇ，ＨＣＭＶ－ＳＴＦ，ＨＣＭＶ－Ａｇ＋ＨＣＭＶ－ＳＴＦ，培养４８ｈ后加入氚－胸腺嘧（＾３Ｈ－ＴＤＲ），再培养２４ｈ，收集细胞，用流体闪烁计数器计数，计算促进率。（３）结果 ＨＣＭＶ－Ａｇ＋ＨＣＭＶ－ＳＴＦ组与Ｈ     

17—β雌二醇对原代人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶基因表？…

目的：阐明雌二醇对内皮细胞一氧化氮（ＮＯ）生成及一氧化氮化合酶（ｃＮＯＳ）基因表达的影响，方法；观察雌二醇作用于原代人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）一定时间（１－２４ｈ）后的ＮＯ产量，采用Ｇｒｅｉｓｓ反应测定代谢产物ＮＯ２的量及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术分析雌二醇作用于ＨＵＶＥＣ１８ｈｃＮＯＳｍＲＮＡ的表达，结果：１００，３０，１０及１ｎｍｏｌ．Ｌ＾－１的雌二醇作用下，ＨＵＶＥＣ分别于１，４，１２及１     

机械性血管损伤对血管平滑肌细胞增殖的影响

进行了粥样硬化血管段、球囊拉伤血管段以及球囊扩张后再狭窄血管段的组织细胞培养，以＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定血管平滑肌细胞血管平滑肌细胞（ＤＮＡ）合成速率。观察损伤血管段培养液对培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖过程的影响，结果显示：球囊成形术组的血管组织培养液对ＶＳＭＣ增殖有明显的刺激作用。单纯血管损伤组次之。本研究中的粥样硬化血管段培养液对培养的ＶＳＭＣ增殖无明显影响。     

机械性血管损伤对血管平滑肌细胞增殖的影响

进行了粥样硬化血管段、球囊拉伤血管段以及球囊扩张后再狭窄血管段的组织细胞培养，以３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定血管平滑肌细胞血管平滑肌细胞（ＤＮＡ）合成速率。观察损伤血管段培养液对培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖过程的影响，结果显示：球囊成形术组的血管组织培养液对ＶＳＭＣ增殖有明显的刺激作用。单纯血管损伤组次之。本研究中的粥样硬化血管段培养液对培养的ＶＳＭＣ增殖无明显影响。     

单纯疱疹病毒胸苷激酶基因表达对人肝癌细胞的生长抑制

使用转导有单纯疱疹Ｉ型病毒胸苷激酶（ＨＳＶ１－ＴＫ）基因的人肝癌ＳＭＭＣ７７２１细胞株建立了裸鼠移植瘤模型，并进行了在体和体外试验性无不环鸟苷（ＡＣＶ）治疗。结果发现基因转导后的肝癌细胞表现出对ＡＣＶ的敏感性，肝癌细胞生长抑制与ＡＣＶ的剂量有关；用药组裸鼠除平均瘤重明显低于对照组外，不凶细胞核分型指数降低，伴有细胞变性和坏死。结果表明：ＨＳＶ１－ＴＫ基因经逆转录病毒转导后，用ＡＣＶ诱导表达明显抑制     

白介素1对鼠甲状腺细胞钙离子的作用

目的：利用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ）观察ＩＬ－１β及ＴＳＨ对鼠甲状腺ＦＲＴＬ－５细胞内Ｃａ２＋的影响，以进一步了解ＩＬ－１β对甲状腺细胞的作用及机制。方法：将待测ＦＲＴＬ－５细胞以Ｆｌｕｏ－３负载，以ＬＳＣＭ扫描测定细胞内Ｃａ２＋，分别加入不同浓度的ＴＳＨ或ＩＬ－１，观察细胞内Ｃａ２＋变化。结果：（１）ＴＳＨ可使细胞内Ｃａ２＋的水平上升，与ＴＳＨ浓度有关。（２）ＩＬ－１β可降低ＦＲＴＬ－５细胞内基础Ｃａ２＋和ＴＳＨ刺激的细胞内Ｃａ２＋的水平。结论：ＴＳＨ对甲状腺细胞磷酸肌醇／钙离子系统有刺激作用，Ｃａ２＋作为第二信使可介导ＴＳＨ的效应。Ｉ－１β可以通过抑制甲状腺细胞磷酸肌醇／钙离子系统而发挥其抑制效应     

原癌基因c—fos和c—jun在血管平滑肌细胞增殖调控中的作用

体外培养大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）。通过＾３Ｈ－ＴｄＲ参入实验和ＲＮＡ印迹分析，观察内皮素－１对ＶＳＭＣＤＮＡ合成，原癌基因ｃ－ｆｏｓ与ｃ－ｊｕｎ表达及ｃ－ｊｕｎ反义ＲＮＡ对ＶＳＭＣ增殖的影响，结果表明，内皮素－１作用于ＶＳＭＣ１２小时，＾Ｈ－ＴｒＲ参入开始增加，２４小时达到峰值，在内皮素－１作用下，原癌基因ｃ－ｆｏｓ与ｃ－ｊｕｎ的表达活性的３０分钟达到高峰３小时后恢复到原来水平，将可合成ｃ－     

低氧对人胚肺成纤维细胞表型与增生的影响

采用单层细胞超薄切片技术和免疫细胞化学方法， 观察常氧（Ｎ）、低氧（Ｈ）、常氧和低氧猪肺动脉内皮细胞条件培养液（ＮＥＣＣＭ 和ＨＥＣＣＭ） 等不同条件， 对肺血管外膜成纤维细胞的表型与增殖的影响。结果表明： （１） 仅ＨＥＣＣＭ 组成纤维细胞显示表型转变，胞浆内出现微肌丝、致密体、基膜等平滑肌细胞超微结构，粗面内质网明显减少；且此组细胞α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ） 表达较其余３ 组明显增高（Ｐ＜ ０． ０１）； （２） Ｈ 和ＨＥＣＣＭ 组增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ） 表达较Ｎ 和ＮＥＣＣＭ 组明显升高（Ｐ＜ ０． ０１）。结果提示： （１） 低氧可经肺动脉内皮细胞介导， 引起人胚肺成纤维细胞向平滑肌样细胞转化，而单纯低氧无此作用；（２） 低氧可直接或经内皮细胞介导，刺激人胚肺成纤维细胞增殖。