宽体金线蛭抗凝血有效成分分离研究

目的从宽体金线蛭中分离纯化抗凝血活性成分。方法以抗凝血活性为筛选指标,以Sephadex G50、DEAE Cellulose-52、Sephadex LH-20等凝胶进行分离,利用HPLC进行纯化。结果从宽体金线蛭加热提取液中分离纯化得到一个肽类物质。结论宽体金线蛭中存在热稳定的抗凝血肽类物质。     

地龙体外抗凝血部位的制备工艺研究

目的:采用体外活性评价法,研究地龙基于膜分离技术抗凝血部位的制备工艺.方法:以蛋白质含量和酶活性为指标,采用单因素考察和正交试验优选地龙的提取、精制、浓缩工艺.结果:地龙体外抗凝血部位的制备工艺为地龙粗粉加入15倍量0.9%NaCl溶液,37℃超声提取3次,每次40 min;将上述提取液经30×103超滤膜进行精制,超滤液经10×103超滤膜进行浓缩.结论:超声提取技术与膜分离技术相结合,能够提高地龙抗凝血部位的分离纯化效果,有利于活性部位的进一步研究.     

水蛭抗凝血活性成分的研究

目的：研究水蛭的抗凝血成分。方法：以血浆复钙时间为指标，应用Sephadex DEAE A-50阴离子交换树脂色谱、Sephadex G-25和Sephadex LH-20凝胶过滤色谱及反相高压液相色谱技术分离纯化。结果：得到3个抗凝血活性多肽，其中化合物1，2在自然条件下互相转化，它们的相对分子质量分别为7 100和5 531；采用HPLC及SDS-PAGE鉴定了化合物3的纯度，采用MALDI-TOF-MS法测定出其相对分子质量为8 608，并测定了其氨基酸组成。结论：推测化合物3为首次分离得到的抗凝血多肽，命名为蚂蟥多肽(whitmanin)。     

夜交藤改善睡眠活性成分研究

目的:分离纯化夜交藤中具有改善睡眠作用的活性成分.方法:运用改善小鼠睡眠试验确定夜交藤中的活性部位,再采用反复硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析从活性部位中分离化合物,波谱方法鉴定结构,并对化合物进行活性筛选.结果:分离并鉴定了4个化合物,分别为大黄素甲醚(1)、大黄素(2)、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(3)和大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(4).大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷具有较好的改善睡眠活性.结论:大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷是夜交藤中改善睡眠的活性成分之一.     

土鳖虫胰酶酶解物抗凝活性部位分离纯化及组成分析

目的:采用溶剂萃取和凝胶柱色谱法对土鳖虫胰酶酶解物进行分离纯化,初步确定其抗凝活性部位及化学成分组成。方法:应用胰酶酶解法制备土鳖虫胰酶酶解物,以APTT(活化部分凝血酶时间)为指标,采用溶剂萃取法,获得抗凝活性部位IV,经凝胶柱色谱法对其进行分离纯化获得胰酶酶解纯化物;采用考马斯亮蓝法对纯化物进行定量分析,通过MALDI-TOF-MS检测分离部分的分子量分布范围。结果:土鳖虫胰酶酶解物部位IV有较强的抗凝活性,其抗凝活性强度与酶解物质量浓度相关;部位IV经Sephadex G-25纯化后,通过考马斯亮蓝法测得其蛋白质量分数5.5%;进一步经Sephadex G-10脱盐的纯化物,采用MALDI-TOF-MS检测,确定为相对分子质量在850～910 Da的3组多肽混合物。结论:采用凝胶柱色谱法分离纯化土鳖虫胰酶酶解物是可行的,抗凝活性组分是<1 000 Da的小分子肽类。     

无尾果活性部位化学成分的研究

目的 研究无尾果Coluria longifolia Maxim.活性部位的化学成分.方法 无尾果80％乙醇提取物的活性部位采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱、半制备HPLC等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离得到11个化合物,分别鉴定为2-(1-oxo-2-hydrox...     

基于酶活性的复方地龙胶囊质量标准再评价研究

目的以活血和抗凝血活性为指标,对复方地龙胶囊质量标准进行再评价研究。方法采用纤维蛋白平板法,以尿激酶和凝血酶作为对照,分别测定复方地龙胶囊的抗凝血和活血活性。结果尿激酶在200~1 000 U/m L与透明圈面积呈良好线性关系,r=0.999;凝血酶在8~40 U/m L与沉淀圈面积呈良好线性关系,r=0.997。暂时规定复方地龙胶囊的抗凝血和活血活性分别不低于12 840 U/g和113 822 U/g。结论本法可以快速、简便、准确地测定复方地龙胶囊的抗凝血和活血活性,可用于复方地龙胶囊的质量控制。     

金银花中抗紫外线照射诱导的细胞凋亡作用的活性成分

目的：研究金银花中抗紫外线照射诱导的细胞凋亡作用的活性成分。方法：以体外活性筛选为活性追踪体系，采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱法和重结晶等进行化学成分分离，通过化合物的理化性质和谱学数据确定化合物的结构。结果：从金银花活性部位中分离鉴定4个化合物，分别为5-O-咖啡酰基奎尼酸丁酯（1）、4-O-咖啡酰基奎尼酸（2）、绿原酸（3）和芦丁（4），其中化合物2和3具有较强的抗紫外线照射诱导细胞凋亡的作用。     

金银花中抗紫外线照射诱导的细胞凋亡作用的活性成分

目的：研究金银花中抗紫外线照射诱导的细胞凋亡作用的活性成分。方法：以体外活性筛选为活性追踪体系，采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱法和重结晶等进行化学成分分离，通过化合物的理化性质和谱学数据确定化合物的结构。结果：从金银花活性部位中分离鉴定4个化合物，分别为5-O-咖啡酰基奎尼酸丁酯（1）、4-O-咖啡酰基奎尼酸（2）、绿原酸（3）和芦丁（4），其中化合物2和3具有较强的抗紫外线照射诱导细胞凋亡的作用。     

坛紫菜中化学成分的提取及抗脑胶质瘤活性组分的筛选

目的:本研究旨在从海南来源的红毛菜科坛紫菜(Porphyra haitanensis)中发现对神经胶质瘤具有潜在抑制活性的天然化合物。方法:通过95%乙醇水溶液静止浸提,并加以超声波辅助提取,对提取物依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分级萃取,以U87细胞增殖活性为指征,分离纯化活性组分并进行结构鉴定。结果:通过MTT实验确定活性部位为石油醚相和乙酸乙酯相。采用硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析,获得对U87细胞增殖具有显著抑制活性的单一组分F9。通过MS、1H-NMR、13C-NMR、图谱鉴定,确定F9为叶黄素。结论:从海南来源的坛紫菜中发现对神经胶质瘤细胞具有潜在抑制活性的天然化合物叶黄素。     

坛紫菜中化学成分的提取及抗脑胶质瘤活性组分的筛选北大核心CSCD

目的:本研究旨在从海南来源的红毛菜科坛紫菜(Porphyra haitanensis)中发现对神经胶质瘤具有潜在抑制活性的天然化合物。方法:通过95%乙醇水溶液静止浸提,并加以超声波辅助提取,对提取物依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分级萃取,以U87细胞增殖活性为指征,分离纯化活性组分并进行结构鉴定。结果:通过MTT实验确定活性部位为石油醚相和乙酸乙酯相。采用硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析,获得对U87细胞增殖具有显著抑制活性的单一组分F9。通过MS、1H-NMR、13C-NMR、图谱鉴定,确定F9为叶黄素。结论:从海南来源的坛紫菜中发现对神经胶质瘤细胞具有潜在抑制活性的天然化合物叶黄素。     

大孔吸附树脂分离纯化四逆散活性部位的研究

目的:应用大孔吸附树脂纯化四逆散的水煎液,以期得到与活性部位成分组成相似的纯化产物.方法:从主要成分含量、指纹图谱、总固形物得率、除杂试验等多角度不同层次比较分析不同纯化产物与活性部位成分群的相似度和纯化效果.结果:HP20大孔吸附树脂的乙醇洗脱液具有与活性部位相似的成分组成.结论:HP20大孔吸附树脂对该复方的活性成分分离效果好,吸附容量大,易洗脱.     

土荆皮抗真菌化学成分研究

目的对土荆皮Pseudolaricis Cortex抗真菌活性部位进行化学成分研究。方法土荆皮粗粉以95%乙醇回流提取,所得浸膏采用溶剂法分为不同提取部位,体外抗真菌活性测试显示其醋酸乙酯部位对白色念珠菌具有显著的抑制作用。采用硅胶、Sephadex LH-20、制备高效液相色谱对土荆皮醋酸乙酯部位进行分离纯化,并通过波谱数据分析对化合物进行结构鉴定。结果从土荆皮醋酸乙酯部位分离得到5个化合物,分别鉴定为土荆皮酸B(1)、土荆皮酸C(2)、香草酸(3)、香草酸-4-O-β-D-阿洛糖苷(4)、17-羟基土荆皮酸B(5)。结论化合物5为一新化合物,命名为土荆皮酸I;化合物4为首次从该植物中分离得到。体外抗真菌活性测试显示,化合物1对白色念珠菌生长具有显著的抑制作用,化合物2和5仅显示微弱的抑菌活性。     

桃仁凝血因子Xa抑制活性部位分析

目的:研究中药桃仁的化学成分及其对凝血因子Xa(FXa)的抑制活性。方法:采用生色底物法和连续速率法进行FXa抑制活性测定,利用多种柱色谱技术对活性部位进行分离纯化,并通过波谱分析方法鉴定各化合物的结构。结果:桃仁乙酸乙酯萃取部位对FXa的抑制率高达60.27%,为抑制FXa的活性部位;从活性部位中分离鉴定出10个化合物,分别鉴定为9-十八碳烯酸-2',3'-二羟基丙酯(1),胡萝卜苷(2),扁桃酰胺(3),苯甲酸(4),2-羟基-9-十八碳烯酸(5),正十七烷酸(6),9-十八碳烯酸甲酯(7),对羟基苯甲酸(8),棕榈酸(9),苦杏仁苷(10)。结论:桃仁乙酸乙酯萃取部位为抑制FXa的活性部位,从活性部位中分离得到的化合物1和3首次从该科植物中分离得到,化合物5~8首次从该植物中分离得到。     

刺五加抗疲劳活性部位中刺五加苷B的含量测定

目的：建立刺五加抗疲劳活性部位中刺五加苷B的含量测定方法。方法：用小鼠负重游泳实验，确定刺五加粗提物的抗疲劳活性部位；硅胶柱色谱，Sephadex LH-20柱色谱，制备液相色谱对活性部位分离纯化，并对分离所得化合物进行理化性质研究和结构鉴定；含量测定中高效液相色谱条件为Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)，流动相乙腈-水-醋酸(10∶90∶0.01)，流速1.0 mL·min-1，紫外检测波长344 nm。结果：从刺五加抗疲劳活性部位As1中分离得到一化合物，鉴定为刺五加苷B；刺五加苷B的线性范围为 0.104～20.8 μg，r=0.999 9；平均回收率为97.68%，RSD 1.4%(n=6)。结论：从刺五加抗疲劳活性部位As1中分离得到含量较高的刺五加苷B，作为质量控制的指标成分，并建立了刺五加抗疲劳活性部位中刺五加苷B含量测定方法。     

甘露子化学成分及其体外肿瘤活性

目的:研究甘露子Stachiys sieboldii Miquel的化学成分及其体外抗肿瘤活性.方法:甘露子提取物采用硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶等分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构.采用MTT法对所得化合物进行体外抗肿瘤活性筛选.结果:从甘露子中分离得到14个化合物,分别鉴定为:cycl...     

三叶木通化学成分及其抗氧化活性

目的研究三叶木通Akebia trifoliata(Thunb.)Koidaz化学成分及其抗氧化活性。方法 DPPH法筛选三叶木通95%乙醇提取物的抗氧化活性部位,通过硅胶、Sephadex LH-20、制备柱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定所得化合物的结构,再评价其抗氧化活性。结果乙酸乙酯部位抗氧化活性最显著,从中分离出8个化合物,分别鉴定为齐墩果酸(1)、6,7,10-三羟基-8-十八烯酸(2)、正三十四烷(3)、2,6-二氧甲基-1,4-苯醌(4)、β-谷甾醇(5)、香草酸(6)、咖啡酸(7)、秦皮乙素(8)。化合物7和8对DPPH自由基的清除能力较强,IC50分别为14.939μg/m L和15.631μg/m L。结论化合物3、4、6为首次从木通属植物中分离得到,而且化合物7和8抗氧化活性较好。     

土鳖虫多肽的分离纯化及溶栓活性研究

目的 对土鳖虫多肽进行分离纯化,并对其溶栓活性进行研究.方法 采用仿生酶解工艺制备土鳖虫复合多肽,以溶栓活性为指标,采用Sephadex G-25、SP Sephadex C-25凝胶柱和RP-HPLC C18半制备色谱柱对复合多肽进行分离纯化,并测定目标多肽组分(Peak b)的溶栓活性、肽含量和分子量.结果 目标多肽组分的溶栓活性为814 430 U·mg-1,肽含量为95.7％,分子量分布在3 211 ～3 547.结论 利用仿生酶解制备的土鳖虫多肽,经分离纯化后,得到一具有较强溶栓活性的多肽组分.     

土鳖虫多肽的分离纯化及溶栓活性

目的:对土鳖虫多肽进行分离纯化,并对其溶栓活性进行研究.方法:采用仿生酶解工艺制备土鳖虫复合多肽,以溶栓活性为指标,采用Sephadex G-25,SP Sephadex C-25凝胶柱和RP-HPLC C18半制备色谱柱对复合多肽进行分离纯化,并测定目标多肽组分(Peak b)的溶栓活性、肽含量和相对分子质量.结果:目标多肽组分的溶栓活性为814 430 U·mg-1,肽含量为95.7％,相对分子质量分布在3 211～3 547.结论:利用仿生酶解制备的土鳖虫多肽,经分离纯化后,可得到具有较强溶栓活性的多肽组分.     

翼首草化学成分及其神经保护活性

目的研究翼首草Pterocephalus hookeri(C.B.Clarke)Hoeck的化学成分及神经保护活性。方法翼首草95%乙醇提取物的分析采用Sephadex LH-20、DM-130大孔树脂、硅胶、HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。通过构建DAT:EGFP转基因斑马鱼帕金森疾病模型研究其神经保护活性。结果从中分离得到9个化合物,分别鉴定为大花双参苷A(1)、茶茱萸苷(2)、林生续断苷Ⅰ(3)、二甲氧基-林生续断苷Ⅲ(4)、林生续断苷Ⅲ(5)、laciniatosideⅠ-7-dibutyl acetal(6)、laciniatosideⅠ(7)、laciniatosideⅡ(8)、林生续断苷Ⅳ(9)。首次发现其中的含双环烯醚萜正丁醇活性部位具有对神经元有抗氧化方面的神经保护活性。结论化合物4为首次从该植物中分离得到,翼首草对神经元有保护活性。