健脾解毒方对裸鼠皮下移植瘤Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响

目的观察中药复方健脾解毒方对裸鼠皮下移植瘤Bax及Bcl-2 mRNA表达的影响。方法采用HCT8/V细胞制作裸鼠皮下移植瘤,将32只造模成功的裸鼠随机分为4组,每组8只。空白组予0.9%Na Cl溶液腹腔注射,化疗组予长春新碱腹腔注射,中药组予健脾解毒方灌胃,联合组予长春新碱腹腔注射和健脾解毒方灌胃。测量各组皮下移植瘤的瘤重及抑瘤率,光镜观察肿瘤组织病理情况,并采用Real-time PCR法测定Bax、Bcl-2 mRNA的表达。结果与空白组比较,化疗组、中药组、联合组瘤重明显降低,差异有统计学意义(P0.01);与化疗组比较,中药组、联合组瘤重均降低,差异有统计学意义(P0.01);相对于空白组,化疗组、中药组、联合组瘤体抑制率分别为22.84%、38.44%、51.53%,以联合组抑瘤效果最佳。与空白组比较,化疗组、中药组、联合组Bax mRNA表达水平显著升高(P0.05,P0.01),Bcl-2 mRNA表达水平均显著降低(P0.01);与化疗组比较,中药组、联合组Bax mRNA相对表达量高于化疗组(P0.05,P0.01),中药组、联合组Bcl-2 mRNA相对表达量均低于化疗组(P0.01)。结论健脾解毒方通过上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达,促进肠癌细胞的凋亡,且与化疗药具有协同作用。     

健脾化痰方对裸鼠前胃癌肝转移作用及其机制的研究

目的 探讨健脾化痰方对裸鼠前胃癌(murine foregastric carcinoma,MFC)肝转移的影响及其作用机制.方法 将MFC细胞接种于裸鼠脾脏,建立裸鼠肝转移模型后用随机数字表法分为模型组、5-fu注射液组及健脾化痰方高、中、低剂量组,健脾化痰方高、中、低剂量组分别灌胃80、40、20g/kg的健脾化痰方煎剂,5-fu组腹腔注射60mg/kg 5-fu注射液,模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,共4周.实验结束时计算裸鼠体重、脾脏瘤重,评估肝脏转移情况,用RT-PCR法、免疫组织化学法分别检测P53、Bcl-2基因和相应蛋白表达的情况.结果 与模型组比较,健脾化痰方中剂量组、高剂量组裸鼠体重[(21.40±1.43)g、(21.70±1.02)g比(20.37±1.17)g]明显增加(P<0.05),脾脏瘤重[(0.26±0.13)g、(0.16±0.05)g比(0.63±0.17)g]明显减轻(P<0.05);健脾化痰方中、高剂量组裸鼠肝脏表面转移瘤数目较少(P<0.05);与模型组比较,健脾化痰方低、中、高剂量组P53 mRNA表达[(8.32±0.38)、(5.42±0.45)、(3.09±0.26)比(9.67±1.31)]、Bcl-2 mRNA表达[(4.65±0.61)、(3.22±0.21)、(2.49±0.19)比(5.32±0.42)]均降低(P<0.05);健脾化痰方低、中、高剂量组脾脏接种瘤组织中P53蛋白的阳性表达率[(76.11±5.23)、(45.20±3.77)、(23.11±3.14)比(81.63±5.01)]均低于模型组(P<0.05),Bcl-2蛋白[分别为(58.67±5.27)、(32.00±3.13)(19.00±2.54)比(63.00±4.10)]均低于模型组(P<0.05).结论 健脾化痰方可抑制裸鼠前胃癌移植瘤的生长及肝转移,下调P53、Bcl-2基因和相应蛋白的表达.     

益气养阴方对实验性糖尿病大鼠视网膜P53、Bcl-2基因表达的影响

目的 探讨益气养阴方对糖尿病视网膜病变的防治机制,为中医药防治糖尿病视网膜病变提供理论依据.方法 将60只wistar大鼠随机分为6组,正常对照组腹腔注射等量无茵枸橼酸一枸橼酸钠缓冲液,其余各组大鼠均采用单次左下腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)造成糖尿病大鼠模型.造模成功后第3天开始根据组别给予不同药物灌胃,30天后取大鼠视网膜组织检测各组凋亡相关基因P53、Bcl-2的表达情况.结果 益气养阴方能明显降低P53在视网膜组织中的阳性表达率.升高Bcl-2阳性表达率,与模型对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 益气养阴方能通过影响P53及Bcl-2的表达抑制视细胞的凋亡,在一定程度上起到了保护视细胞的作用,对DR的发生发展具有预防和延缓作用.     

活血行气方药物血清对人胃癌SGC-7901细胞P53和Bcl-2基因表达影响的实验研究

目的:研究活血行气方健脾理气方对人胃癌SGC-7901细胞株p53和Bcl-2基因表达的影响。方法:利用血清药理学方法制备药物血清,应用Western-blot分析方法观察活血行气方对人胃癌SGC-7901细胞株p53、Bcl-2基因表达的影响。结果:药物血清作用后,p53表达明显增强;Bcl-2表达明显降低。结论:活血行气方药物血清上调p53、下调Bcl-2,达到抑制人胃癌SGC-7901细胞株的作用。     

增效抗癌汤诱导裸鼠种植性胃癌细胞凋亡和对P53、Bcl-2表达的影响

笔者应用增效抗癌汤治疗胃癌患者取得满意疗效，为了明确其作用机理，笔者制作裸鼠种植性胃癌动物模型进行实验研究。     

健脾解毒方诱导裸鼠人胃癌细胞凋亡相关基因表达的研究

目的:研究健脾解毒方对裸鼠人胃癌皮下移植瘤的抑制作用,利用基因芯片筛选其诱导裸鼠人胃癌细胞凋亡相关基因表达,分析其可能的作用靶点。方法:建立人胃癌MKN-45细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组:生理盐水对照组、替加氟化疗组100mg·kg-1·2d-1、中药健脾解毒方组(40g/kg)、健脾解毒方联合化疗药组(健脾解毒方40g/kg联合替加氟100mg·kg-1·2d-1,每组12只。给药14d后观察各组瘤体质量量和动物生存期,并利用Affymetrix Genechip U133 Plus2.0基因芯片筛选健脾解毒方诱导凋亡相关基因表达。结果:与对照组相比,健脾解毒方组瘤体质量量明显降低(P<0.01),生存期显著延长(P<0.01)。且健脾解毒方联合化疗药组对肿瘤的生长抑制作用明显优于单纯化疗组和单纯健脾解毒方组(P<0.05)。基因芯片分析结果显示,健脾解毒方治疗后表达丰度相差在2倍以上基因的有879个,其中与细胞凋亡相关的基因有358个。结论:健脾解毒方抗裸鼠人胃癌作用,联合化疗药可提高疗效,其抗癌机制与诱导胃癌细胞凋亡有关。     

健脾解毒方对裸鼠胃癌皮下移植瘤氟尿嘧啶治疗的增效作用

目的:探讨健脾解毒方对氟尿嘧啶(5-Fu)治疗人胃癌细胞皮下移植瘤的增效作用。方法:采用皮下接种构建裸鼠人胃癌MKN45异位移植瘤模型,建立模型后,随机分为6组:A生理盐水组;B健脾解毒方低剂量组;C健脾解毒方中剂量组;D健脾解毒方高剂量组;E5-FU组;F健脾解毒方联合5-FU组。治疗4周后处死各组老鼠,观察健脾解毒方对移植瘤体积及裸鼠体质量的影响及对5-FU治疗效果的影响。结果:(1)对体质量的影响:经健脾解毒方及5-Fu干预后,除5-Fu组体质量增加不显著外,其余各组组间比较无统计学意义(P0.05)。(2)对抑瘤率的影响:治疗后,健脾解毒方低、中、高剂量组、5-FU组及联合组各组的瘤体抑瘤率分别为18.96%、40.97%、50.94%、51.03%、54.43%。(3)对瘤重的影响:健脾解毒方组及5-FU组瘤体质量虽然小于模型组,但是差异无统计学差异(P0.05);联合给药组同模型组及低剂量组比较有统计学差异(P=0.011、P=0.032)。结论:健脾解毒方煎剂具有一定抑制肿瘤生长的能力,在联合化疗药物作用下,其抑制效果明显,在有效治疗剂量中,健脾解毒方以剂量依赖性方式抑制裸鼠异位瘤的生长。     

消痰散结方对裸鼠胃癌原位移植瘤模型P16基因甲基化的影响

目的观察消痰散结方对胃癌裸鼠原位移植瘤模型P16基因甲基化的影响,探讨消痰散结方抗癌作用机制。方法培养胃癌细胞系MKN-45,制备胃癌裸鼠原位移植瘤模型,分为模型对照组和中药组。中药组给予消痰散结方水煎剂(含原药材2.51g/mL),模型对照组给予生理盐水,连续6周。称重法测定抑瘤率,RT-PCR法测定P16基因表达,Methylight法测定P16基因甲基化水平。结果消痰散结方能抑制肿瘤生长,抑瘤率达54.82%。消痰散结方能逆转P16基因甲基化,增加P16mRNA表达,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论消痰散结方可以有效抑制胃癌细胞生长,逆转P16基因甲基化可能是其作用机制之一。     

敦煌遗方神仙粥对AD模型大鼠学习记忆能力及海马组织Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的:探讨敦煌遗方神仙粥对阿尔兹海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马组织Bcl-2、Bax基因表达的影响。方法:购置48只SPF级健康SD大鼠,雌雄各半,2月龄,体质量(150±30)g,从中随机抽取出8只作为空白组,其余40只大鼠皮下注射D-半乳糖制作AD模型[125 mg/(kg·d)],空白组则注射与之等剂量的生理盐水。造模成功后,将40只AD模型大鼠随机分为模型组,阳性对照组,神仙粥低、中、高剂量组,每组8只,雌雄各半,进行干预实验。采用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,免疫组织化学检测海马组织Bcl-2、Bax基因表达情况。结果:1)各组大鼠定向航行试验平均逃避潜伏期在不同时点与不同组别维度差异均有统计学意义(P0.05),且后续两天较之于第一天组大鼠定向航行试验平均逃避潜伏期缩短;此外,神仙粥高、中、低组与模型组和空白组差异均有统计学意义(P0.05),且平均逃避潜伏期均高于空白组,低于模型组。2)各组在目的象限停留时间、有效区域停留时间、平台停留时间上差异均有统计学意义(P0.05),且神仙粥高、中、低组在目的象限停留时间和有效区域停留时间均大于模型组,神仙粥高、中组以及空白组在平台停留时间均大于模型组。3)各组大鼠海马组织Bcl-2比较,空白组与其余各组差异均有统计学意义(P0.05),且值均低于其余各组;模型组与阳性对照组、神仙粥高剂量组差异均有统计学意义(P0.05),且值低于其余2组;阳性对照组与神仙粥中、低剂量组差异均有统计学意义(P0.05),且值高于后两者;各组大鼠脑皮质Bax比较,空白组与其余各组差异均有统计学意义(P0.05),且值均低于其余各组;模型组与阳性对照组、神仙粥高剂量组差异均有统计学意义(P0.05),且值高于其余2组。结论:敦煌遗方神仙粥可通过调节海马组织Bcl-2、Bax基因表达来抑制细胞凋亡,从而改善AD模型大鼠的学习记忆能力,具有一定的抗衰老作用。     

化痰散结中药对甲状腺细胞凋亡及Bax Bcl-2表达的影响

目的：研究化痰散结中药甲肿消对甲状腺细胞凋亡及Bax、Bcl-2表达的影响，探讨其治疗甲状腺肿大的作用机制。方法：甲肿消大鼠含药血清培养甲状腺FRTL细胞株，采用流式细胞仪检测细胞凋亡指数（AI％）；实时荧光定量PCR法检测Bax、Bcl-2的mRNA表达，Western—Blot检测其蛋白表达。结果：甲肿消可以显著升高细胞的凋亡指数；大剂量和中剂量组Bax的mRNA和蛋白表达明显升高，具有统计学意义，Bax／Bcl-2的mRNA比值有升高趋势，中剂量组差异显著（P〈0．05）。结论：化痰散结中药能促进甲状腺细胞凋亡，提示甲肿消治疗甲状腺肿大可能是通过促进细胞凋亡而实现，而Bax可能是其主要作用位点。     

健脾疏肝饮对乳腺癌裸鼠移植瘤组织血管的影响

目的:观察健脾疏肝饮对乳腺癌裸鼠移植瘤组织血管的影响.方法:采用人乳腺癌细胞MDA-MB-231建立裸鼠乳腺癌皮下移植瘤模型,造模后将60只裸鼠随机分为对照组,健脾疏肝饮低、高剂量组,恩度组,每组15只.健脾疏肝饮高、低剂量组分别予健脾疏肝饮混悬液10、20g·kg-1 d-1灌胃,恩度组小鼠腹腔注射重组人血管内皮抑制...     

固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2及Bax mRNA表达的影响

目的 观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2、Bax mRNA蛋白表达的影响。     

电针对前列腺增生模型大鼠前列腺组织Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的观察电针对前列腺增生大鼠前列腺组织Bcl-2、Bax基因表达的影响。方法用去势加丙酸睾酮注射法制作前列腺增生模型大鼠,RT-PCR法检测5组前列腺增生大鼠前列腺组织Bcl-2、BaxmRNA基因表达。结果电针组对前列腺组织Bcl-2mRNA基因的表达有抑制作用,对Bax mRNA基因的表达有增强作用。结论电针前列腺组织能抑制Bc1-2的基因表达,增强Bax的基因表达,抑制前列腺增生。     

斑蝥酸钠对人胃癌细胞BGC823中Bcl-2、p53基因表达的影响

目的研究斑蝥酸钠对人胃癌细胞BGC823中Bc1-2、p53基因表达的影响。方法采用流式细胞仪检测、分析斑蝥酸钠处理前后人胃癌细胞BGC823中Bc1-2、p53基因表达的变化。结果不同剂量斑蝥酸钠作用24h均可使Bc1-2、p53基因在人胃癌细胞BGC823中的表达下降。结论斑蝥酸钠可抑制Bc1-2、p53基因在人胃癌细胞BGC823中的表达。     

藤梨根提取物对人胃癌SGC-7901细胞瘤p53、Bcl-2基因表达的影响

目的:研究藤梨根提取物对人胃癌SGC-7901细胞株p53、bcl-2基因表达的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测p53、Bcl-2基因表达。结果:藤梨根提取物大、中、小剂量组对人胃癌SGC-7901细胞p53和Bcl-2表达阳性灰度值分别为185.48±1.05,124.05±1.53,95.51±0.19;103.41±1.01,104.05±1.23,90.52±1.09。结论:藤梨根提取物能够抑制人胃癌SGC-7901细胞p53和Bcl-2的表达。     

健脾祛湿化痰方对2型糖尿病胰岛素抵抗的影响

2002年10月～2005年10月,笔者运用中西医结合方法治疗2型糖尿病143例,并设对照组143例进行疗效对照观察.现将结果报告如下.     

黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax 及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。方法:建立H22荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤试验,将50只荷瘤小鼠随机分为空白对照组(模型组)、环磷酰胺组(CTX组)、黄芪注射液(高、中、低剂量)组,连续ip给药10 d,观察肿瘤生长情况以及小鼠一般情况,绘制肿瘤生长曲线。10 d后处死小鼠,剥取瘤组织称重,计算抑瘤率;采用流式细胞术测定药物作用后肿瘤细胞凋亡率;免疫组化方法检测肿瘤组织Bax及Bcl-2的蛋白表达。结果:小鼠移植瘤H22试验结果显示,在128,,4 g.kg-1的剂量下黄芪注射液的抑瘤率分别为52.36%,33.68%,17.28%。流式细胞术及免疫组化结果表明黄芪注射液各剂量组均可明显增加肿瘤细胞凋亡率;增强Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,且Bax/Bcl-2明显增高(P<0.05)。结论:黄芪注射液通过促进Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达来诱导H22肿瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应。     

加味香砂六君子汤对大鼠胃癌前病变胃黏膜Bax、Bcl-2、P53mRNA表达的影响

目的:加味香砂六君子汤在胃癌前病变(PLGC)模型大鼠胃黏膜的Bax、Bcl-2、P53mRNA表达方面的影响及作用机理研究。方法:120只健康Wistar大鼠按照随机数字表法分为空白对照组和模型组、维霉素组、加味香砂六君子汤高、中及低剂量组,造模后给予药物干预治疗,通过免疫组化法,检测Bcl-2、Bax及P53mRNA表达水平。结果:加味香砂六君子汤各剂量组Bcl-2蛋白阳性表达率较模型组及维霉素组显著降低(P0.05),各剂量组Bax蛋白阳性表达率较模型组及维霉素组明显增高(P0.05)。各干预组p53mRNA蛋白表达不同程度降低,且明显低于模型组(P0.05);其中加味香砂六君子汤中剂量组的作用效果最显著,与其他各组相比,差异显著(P0.05)。结论:加味香砂六君子汤可调控胃癌前期病变大鼠胃黏膜Bcl-2、Bax表达水平,降低p53mRNA的表达,具有治疗PLGC的作用。     

健脾消萎方治疗慢性萎缩性胃炎的临床疗效及对Bcl-2和Bax表达的影响

目的:观察健脾消萎方治疗慢性萎缩性胃炎的临床疗效及对Bcl-2和Bax表达的影响。方法:将60例胃阴亏虚型慢性萎缩性胃炎患者分为治疗组与对照组,每组30例。对照组采用胃复春治疗,治疗组采用健脾消萎方治疗。两组分别治疗6个月。比较两组治疗前后病理积分变化、胃镜积分变化、血清Bcl-2和Bax水平和临床疗效。结果:研究结果显示,治疗组治疗总有效率为90.00%高于对照组治疗总有效率的66.67%(P0.05);治疗组治疗后萎缩、肠化、异型增生以及慢性炎症病理积分低于对照组(P0.05);治疗组治疗后胃镜积分低于对照组(P0.05);治疗组治疗后血清Bcl-2水平低于对照组,血清Bax水平高于对照组(P0.05)。结论:健脾消萎方可有效的修复胃黏膜损伤,改善患者临床症状,恢复Bcl-2和Bax失调的比例关系,提高治疗疗效。