胚胎生理特征在胚胎早期发育潜能评估中的应用进展

形态学分级是胚胎评分最常用的方法,但它只反映了胚胎发育潜能的一部分。随着对胚胎生理状况的深入研究以及微量分析技术的进步,目前出现了一些新方法对胚胎的发育能力进行量化评估。本文就胚胎生理特征的研究用于胚胎发育能力评估方面的进展做一综述。     

代谢组学预测人卵母细胞质量与胚胎体外发育潜能的研究现状

筛选高质量配子和高发育潜能胚胎是辅助生殖技术关注的重点.代谢物检测是一种非侵入性方法,如果可以应用在配子或胚胎质量的评估中,就可以开发出快速且无创的检测方法,客观地评价配子及胚胎质量,从而有效改善生殖结局.本文总结了代谢物预测卵母细胞质量及胚胎发育潜能的已发表研究,提示在预测配子及胚胎发育的过程中,多参数建模是颇具潜能...     

卵裂期胚胎冻融后发育速度可能作为胚胎植入潜能的评估参数

目的分析卵裂期胚胎冻融后的发育速度与其临床结局的关系,探讨胚胎解冻后的发育速度能否成为评估其植入潜能的参数。方法回顾性分析卵裂期胚胎解冻后继续培养情况,比较1 426个移植时无囊胚形成的周期(无囊胚形成组)及113个移植时已有囊胚形成的周期(囊胚形成组,根据囊胚个数分为1个囊胚组和1个以上囊胚组)的种植率及临床妊娠率。结果无囊胚形成组与囊胚形成组的种植率(26.49%vs.34.96%)及临床妊娠率(45.09%vs.59.29%)均有统计学差异(P0.05),且1个以上囊胚组的种植率(48.81%)、临床妊娠率(74.29%)均显著高于1个囊胚组(分别为28.57%、52.56%)及无囊胚形成组(分别为26.49%、45.09%)(P0.05),囊胚形成组及其两个亚组的多胎率较无囊胚形成组有升高趋势,但无统计学差异(P0.05);8-细胞胚胎组及融合胚胎组移植时形成囊胚的比例都显著高于8-细胞以下胚胎组(5.21%vs.11.50%vs.0.85%)(P0.05);且8-细胞胚胎组与融合胚胎组形成囊胚的比例也有显著差异(P0.05)。Logistic分析表明,移植个数及移植的囊胚数与临床妊娠显著相关(P0.05)。结论卵裂期优质胚胎解冻后继续培养18~24h,部分胚胎已发育为囊胚,且这些胚胎的植入能力和发育潜能更好。对于解冻后培养有1个以上囊胚形成的患者,建议行选择性单胚胎移植。     

胰岛素对小鼠早期胚胎体外发育的影响

目的　探讨胰岛素对小鼠体内外来源早期胚胎体外发育的影响。　方法　用添加不同浓度胰岛素和胰岛素+葡萄糖的CZB培养液对小鼠体内外来源胚胎进行体外培养 ,观察囊胚发育率和囊胚细胞数的变化。　结果　小鼠 2 细胞胚胎体外培养 10 2h后 ,0 .0 5 μg/ml胰岛素添加组扩张囊胚率、孵化囊胚率和囊胚细胞数均显著高于其他各浓度添加组。葡萄糖加入显著提高了这一效应。添加 0 .0 5 μg/ml胰岛素和葡萄糖的CZB培养液同样显著提高体外受精 (IVF)胚胎的孵化囊胚率和囊胚细胞数。　结论　添加胰岛素和葡萄糖培养液对体内或IVF小鼠胚胎发育具有相同的促进作用。     

利用Time-lapse技术筛选早期胚胎对IVF-ET妊娠结局的影响

目的探索利用Time-lapse系统筛选早期胚胎的临床应用价值。方法回顾性分析本中心2016年7月至2017年12月,第一次新鲜或复苏周期D3卵裂期胚胎移植的患者资料,根据胚胎评估方法分为Time-lapse系统组(TLM组,n=74)和传统形态学评分组(CMA组,n=951),比较这两种不同胚胎筛选方法对临床结局的影响。结果患者的不孕年限、体重指数、基础FSH、基础LH、E2、AMH、窦卵泡数、内膜厚度和周期类型等一般情况,在TLM组和CMA组均无显著差异(P均0.05);TLM组年龄显著高于CMA组[(31.8±4.2)vs.(30.8±4.4),P0.05],而平均移植胚胎数显著少于CMA组[(1.7±0.5)vs.(1.9±0.3),P0.05];患者的临床结局,包括临床妊娠率、种植率、流产率、宫外孕率、双胎率和移植两个胚胎的双胎率等在两组间均无显著差异(P均0.05)。进一步按照年龄分层分析,在35岁患者,患者的一般情况在两组间均无显著差异(P均0.05),TML组的平均移植胚胎数显著少于CMA组[(1.7±0.5)vs.(1.9±0.3),P0.05],而患者临床结局在两组间亦无显著差异(P0.05);在≥35岁患者,TML组的平均移植胚胎数显著少于CMA组[(1.7±0.5)vs.(1.9±0.4),P0.05],而患者的一般情况和临床结局在两组间亦无显著差异(P0.05)。结论利用Time-lapse技术选择早期胚胎,可以在显著减少移植胚胎数的基础上,维持稳定的临床妊娠结局。因此,认为Time-lapse技术可以在一定程度上优选出更具发育潜能的胚胎,为早期胚胎单胚胎移植提供新方法。     

人类胚胎致密化开始时间和细胞数对胚胎发育潜能的预测

目的 探讨胚胎致密化开始时间和细胞数对胚胎发育潜能的预测价值。方法 使用延时成像(TLI)技术记录发育到囊胚期的203枚胚胎。根据胚胎致密化开始前细胞数划分为4～6细胞、7～9细胞、10～12细胞、13～15细胞、16～18细胞5个组,比较5组的胚胎发育情况;根据Gardner分级将囊胚分为可用囊胚组和不可用囊胚组,比较同细胞数阶段下两组囊胚的致密化开始时间;比较在第4天(D4)单胚移植妊娠组与非妊娠组的胚胎致密化开始时间和细胞数。结果 胚胎致密化开始于10～12细胞和13～15细胞的可用囊胚形成率显著高于4～6细胞、7～9细胞和16～18细胞(P<0.05)。可用囊胚的致密化开始时间显著早于不可用囊胚致密化开始时间(P<0.05),且可用囊胚在在7～9细胞、10～12细胞以及13～15细胞阶段的致密化开始时间均显著早于不可用囊胚(P<0.05)。D4单胚胎移植妊娠组的胚胎致密化开始集中在10～15细胞阶段;致密化开始时间早于未妊娠组,但差异不显著(P>0.05)。结论 在10～15细胞阶段开始致密化的胚胎有更好发育潜能,且发育潜能高的胚胎致密化开始的时间较早。     

不同年龄女性D3卵裂期胚胎细胞数对囊胚发育潜能的影响

目的 探讨不同年龄女性D3卵裂期胚胎细胞数对囊胚发育潜能的影响,为临床优选胚胎提供参考。方法 回顾性分析行囊胚培养的29 314枚D3卵裂期胚胎情况,按照女方年龄分为<35岁组和≥35岁组,再按照卵裂期胚胎细胞数分为4细胞～11⁺细胞和融合期胚胎9个亚组,比较不同年龄组中不同细胞数亚组的囊胚形成率。行单囊胚冻融移植的共2 402个周期,其中<35岁组和≥35岁组中又根据囊胚来源的D3胚胎细胞数分为4～6细胞、7～9细胞和≥10细胞+融合期3个亚组,比较不同年龄不同细胞数胚胎来源的囊胚冻融移植临床结局。同时分析1 069个行胚胎植入前非整倍体检测(PGT-A)囊胚中<35岁组和≥35岁组4～6细胞、7～9细胞和≥10细胞+融合期3个亚组的整倍体率情况。结果 (1)<35岁组和≥35岁组中,8细胞亚组发育成囊胚的潜能最高,融合期胚胎次之,而6细胞以下亚组明显劣于其他细胞数目亚组(P<0.05)。(2)<35岁组中,各细胞数D3胚胎发育潜能层次明显,按照可利用囊胚形成率从高到低依次排序为：8细胞>融合期>11^+<...     

固定时间原核评估中0PN来源胚胎的发育潜能及其染色体整倍体率研究

目的 分析常规IVF后固定时间原核评估中零原核(0PN)来源胚胎的发育潜能及其染色体整倍体率。方法 回顾性分析2019年10月至2020年9月于本中心行常规IVF治疗的20对不孕不育夫妇的临床资料。共纳入183枚卵母细胞,剔除14枚0PN卵母细胞(处于未受精状态)后,根据原核评估以及细胞分裂情况分为两组：2个原核(2PN)来源胚胎为2PN胚胎组(n=116),0PN来源胚胎为0PN胚胎组(n=53),比较两组患者的胚胎发育情况;同时,为了分析0PN来源胚胎的染色体是否正常,选取0PN来源囊胚为0PN囊胚组(n=42),选取同一时期的植入前遗传学检测-单基因病(PGT-M)周期中2PN来源囊胚为2PN囊胚组(n=251),比较两组患者的染色体整倍体率。结果 0PN胚胎组Day 2(D2)卵裂球数[(5.74±1.40)个vs.(4.32±1.01)个]、D3卵裂球数[(10.15±2.29)个vs.(7.95±1.97)个]、囊胚形成率(86.8%vs. 60.3%)、可利用囊胚率(91.3%vs. 66.0%)均显著高于2PN胚胎组(P<0.05);0PN胚胎组的优质囊胚率(47...     

促性腺激素释放激素及其受体在人类胚胎着床与早期发育中的作用

促性腺激素释放激素(GnRH)与其受体(GnRHR)对人类生殖过程调控具有关键作用,在胚胎着床与早期发育中扮演着重要角色。GnRH不仅通过下丘脑-垂体-性腺轴调控生殖功能与内分泌平衡,还能够与卵巢、子宫内膜、胎盘、胚胎上的GnRHR结合产生直接作用,实现对胚胎植入与早期发育过程的全面调控。目前,GnRH激动剂(GnRH-a)也已广泛应用于控制性促排卵过程,除降调节作用外,其黄体支持作用亦能有效改善妊娠结局。本文就GnRH/GnRHR在人类胚胎发育及GnRH-a在助孕治疗黄体支持中的应用进行综述。     

咪唑安定对斑马鱼胚胎血管发育的影响

目的 观察眯唑安定对斑马鱼胚胎血管发育的影响.方法 根据培养液成分将特异性标记血管内皮细胞的转基因斑马鱼胚胎随机分为四组.每组120个.A组咪唑安定浓度1 mg/L、B组10 nag/L、C组20 mg/L、D组不加咪唑安定作为对照.咪唑安定处理时间为胚胎受精后4.3～30 h.随后用共聚焦显微镜观察斑马鱼胚胎血管发育情况.结果 与D组比较,A组斑马鱼胚胎无明显血管发育改变;C组胚胎发育停滞在原肠胚时期;B组胚胎体节间血管和尾部血管发育均受到明显的抑制(P<0.01).结论 10 mg/L 的咪唑安定干预可抑制斑马鱼胚胎血管发育.     

卵母细胞发育潜能与颗粒细胞凋亡关系的初步研究

目的　探讨卵母细胞发育潜能与颗粒细胞凋亡之间的关系。　方法　将卵母细胞在体外培养 28~30 h后,取其颗粒细胞,采用TUNEL法进行凋亡率的分析,并与卵子的成熟情况和卵子的评分及形成胚胎结果进行对照。　结果　经培养后,随着卵母细胞成熟度的降低,凋亡率升高;而且随着卵母细胞评分和发育潜能的降低,颗粒细胞凋亡率逐渐升高。　结论　卵子发育潜能与颗粒细胞凋亡密切相关,通过测定颗粒细胞的凋亡率可预测未成熟卵母细胞的发育潜能。     

宫颈支原体感染与胚胎停止发育的关系

目的探讨宫颈支原体感染与胚胎停止发育的关系,及支原体药物敏感试验结果。方法收集60例正常早孕人工流产妇女(正常组)和60例胚胎停止发育的自然流产妇女(胎停育组)的宫颈分泌物进行解脲支原体和人型支原体培养,比较2组妇女支原体检出的阳性率,并对支原体结果培养阳性者进行司怕沙星、罗红霉素、加替沙星、氧氟沙星药物敏感试验,观察支原体感染与胎停育组胚胎停止发育次数之间的相关性。结果胎停育组解脲支原体阳性45例,阳性率75.0%,人型支原体阳性17例,阳性率28.3%,解脲支原体、人型支原体均阳性13例,阳性率21.7%。正常组解脲支原体阳性23例,阳性率38.3%,人型支原体阳性5例,阳性率8.3%,解脲支原体、人型支原体均阳性2例,阳性率3.3%,2组阳性率比较差异有极显著性(P0.01,P0.05)2组妇女中支原体阳性患者的药物敏感率分别为司怕沙星91.4%,罗红霉素73.2%,加替沙星51.6%,氧氟沙星28.8%。支原体感染与胚胎停止发育次数间无正相关关系。结论宫颈支原体感染与胚胎停止发育有关,是导致胚胎停止发育的原因之一,支原体药物敏感试验以司怕沙星最为敏感。     

BMP-4对胚胎鼠肺发育的影响

骨形态构建蛋白（BMPs）控制着细胞的分裂、增殖。BMP-4在胚胎鼠肺发育过程中必不可少。在早期支气管形态构建过程中,可以观察到BMP-4动态的表达。BMP家族其他成员的临床意义显著,提示我们BMP-4对于成年鼠肺损伤保护作用值得深入的研究探索。     

丙烯酰胺对小鼠卵母细胞成熟及发育潜能的研究

目的探讨丙烯酰胺对小鼠卵母细胞成熟及发育潜能的影响。方法选择成年雌性小鼠分别给予生理盐水及丙烯酰胺5mg/kg(低剂量组)、10mg/kg(中剂量组)、20mg/kg(高剂量组),连续给药7d,统计卵母细胞成熟率、孤雌激活率;观察卵母细胞纺锤体和染色体形态;分析卵母细胞外卵丘颗粒细胞的凋亡。结果 (1)丙烯酰胺低、中、高剂量组卵母细胞的体外成熟率分别为(88.5±1.5)%、(79.5±1.7)%、(76.5±1.8)%,均低于对照组的(92.5±1.2)%,但只有中、高剂量组与对照组有统计学差异(P0.05);(2)低剂量组卵母细胞的孤雌激活率[(78.5±2.6)%]与对照组[(81.5±1.2)%]相仿(P0.05),而中、高剂量组卵母细胞的孤雌激活率[分别是(61.6±3.2)%、(40.3±5.6)%]均显著低于对照组(P0.01);(3)丙烯酰胺处理组卵母细胞纺锤体形态不正常,呈现筒形和染色体排列不规则,散乱;(4)丙烯酰胺促进了颗粒细胞的凋亡。结论小鼠卵母细胞在丙烯酰胺处理后细胞成熟延迟,发育潜能降低。     

利用实时分子成像技术探索膀胱癌诊疗的新策略

绝大多数膀胱移行细胞癌（TCC）属表浅型，经尿道切除后复发率高。目前，TCC已位居美国泌尿生殖系统恶性肿瘤发病的第二位，并占到尿路肿瘤病死率的第二位。在过去的20年间，膀胱癌的发病率有所升高。70％-80％的TCC患者表现为低度恶性、非浸润性或局限于黏膜内的浅表型乳头状瘤，经尿道切除后膀胱内灌注化疗或免疫治疗能延长肿瘤非进展期。     

胚胎累积评分系统选择早期胚胎进行囊胚培养的应用研究

本实验室通过对71个周期共456个胚胎的囊胚培养，结合胚胎累积评分进行回顾性分析，探讨胚胎选择的合理方式。[第一段]     

零原核胚胎利用价值的探讨

目的比较未见原核(0PN)与正常原核(2PN)来源优质囊胚的妊娠结局,探讨0PN胚胎的利用价值。方法收集2013年1月至2014年12月在本中心行助孕治疗、鲜胚移植失败或取消移植后行冻融优质囊胚移植的784例患者为研究对象,以移植0PN来源冻融优质囊胚的患者为0PN组,移植2PN来源冻融优质囊胚的患者为2PN组,分析0PN、2PN卵裂胚的优质囊胚形成率,并比较两组患者的胚胎种植率、临床妊娠率和流产率等。结果 0PN卵裂胚的总优质囊胚形成率显著低于2PN卵裂胚(37.17%vs.44.49%),但第3天卵裂球8细胞以上胚胎优质囊胚形成率0PN胚胎显著高于2PN胚胎(67.45%vs.57.16%)(P均0.01)。囊胚移植后0PN组的种植率(71.15%vs.53.74%)、临床妊娠率(80.00%vs.64.32%)、抱婴率(68.00%vs.55.71%)显著高于2PN组(P均0.05);两组出生婴儿体重、身长、Apgar评分、畸形率等比较无显著性差异(P0.05)。结论 0PN来源优质囊胚的利用价值值得关注。0PN胚胎可能只是在设定的观察时间内未观察到原核,而并不一定是异常受精。对于无可利用优质胚胎的患者,临床上可以将0PN胚胎继续培养至囊胚,然后进行移植,以提高患者的胚胎利用率和临床妊娠率。但因为0PN胚胎存在染色体异常的可能性仍较大,建议能结合遗传学筛查技术,以获得更确切的信息,指导临床应用。     

体外受精与体外培养对小鼠囊胚发育潜能的影响

目的评估体外受精和体外培养对囊胚期胚胎细胞数及发育潜能的影响。方法 (1)雌性ICR小鼠,自然交配获取囊胚为In vivo组,体内受精-体外培养获取囊胚为IVC组,体外受精获取囊胚为IVF组;(2)对三组囊胚行免疫杀伤法检测并在荧光显微镜下计数总细胞数、内细胞团细胞数、内细胞团与总细胞数的比值;(3)提取三组小鼠囊胚mRNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测Pou5f1等细胞因子的mRNA表达水平;(4)三组囊胚移植入D3.5假孕鼠,取D10.5胚胎进行形态学检测,计算胚胎植入率、成活率、流产率。结果 (1)IVF组和IVC组囊胚与In vivo组相比,细胞总数、滋养外胚层(TE)细胞数、内细胞团(ICM)细胞数均显著降低(P0.01),TE/ICM细胞数的比值三组之间无显著差异(P0.05);(2)IVF组和IVC组囊胚与In vivo组相比,多潜能基因OCT4、Nanog、Sox2表达水平相对上调,而早期细胞命运分化相关基因Fgf4、Gata4、Sox17、Eomes、Elf5、Lif表达水平下调,差异有统计学意义(P0.05);(3)三组间胚胎植入率无显著性差异(P0.05),而IVC组、IVF组活产率显著低于In vivo组,流产率显著高于In vivo组,差异有统计学意义(P0.05)。结论体外受精会导致囊胚质量下降,并影响胚胎植入后的进一步发育,导致胚胎成活率降低。     

早产儿髋关节发育的早期演变进程

[目的]探讨早产儿髋关节早期演变进程.[方法]对2019年1月—2021年6月扬州市妇幼保健院出生的4 102例新生儿进行前瞻性研究.分别于出生后1、7、42及90 d行Graf法髋关节超声检查,观察其髋关节早期发育及转归情况.[结果]依据早产儿诊断标准,早产儿393例,占总数9.58％;足月儿3 709例,占90.4...