脊柱推拿对脑瘫幼鼠学习记忆的影响及机制研究

目的:观察脊柱推拿对脑性瘫痪模型幼鼠学习记忆的影响,并探索其机制。方法:将40只雄性幼鼠随机分为空白对照组、正常推拿组、模型对照组、模型推拿组,每组10只。模型对照组、模型推拿组在出生后第3天制备脑瘫模型,并于出生后第5天开始进行脊柱推拿,持续28 d。采用Morris水迷宫实验和跳台实验观察幼鼠学习记忆能力,采用高效液相色谱法检测大鼠海马组织内5-羟色胺、多巴胺、肾上腺素、去甲肾上腺素含量。结果:模型对照组和模型推拿组在Morris水迷宫实验中找到平台的潜伏期高于空白对照组;正常推拿组穿越平台的次数多于空白对照组(P0.05);跳台实验中,模型对照组跳下平台的潜伏期明显低于空白对照组,跳下平台的次数明显多于空白对照组(P0.05)。模型对照组海马组织内去甲肾上腺素和5-羟色胺含量明显低于空白对照组(P0.05);正常推拿组、模型推拿组海马组织内肾上腺素均明显高于空白对照组(P0.05);正常推拿组和模型推拿组肾上腺素明显高于模型对照组,差异有统计学意义(P0.05)。模型对照组海马组织内多巴胺明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:脊柱推拿可改善脑瘫模型幼鼠学习记忆能力,可能与调节海马内5-羟色胺、去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺等单胺类神经递质有关。     

针刺联合推拿辅助治疗小儿脑瘫的效果分析

目的分析针刺联合推拿辅助治疗小儿脑瘫的效果。方法选取该院2017年7月—2018年6月收治的脑瘫患儿240例,采用随机数字法分为两组。对照组给予综合康复训练,观察组在对照组基础上给予针刺联合推拿辅助治疗,分析两组患儿治疗后的临床效果。结果观察组总有效率(90.83%,109/120)高于对照组(76.67%,92/120),差异具有统计学意义(P0.05)。两组治疗前发育商(DQ)值组间比较,差异不具有统计学意义(P0.05)。观察组治疗后DQ值(79.89±9.07)分高于对照组(P0.05)。两组治疗前白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)水平组间比较,差异不具有统计学意义(P0.05)。观察组治疗后IL-10水平高于对照组,TNF-α、VEGF水平低于对照组(P0.05)。观察组患儿下肢肌张力整体优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论针刺联合推拿辅助治疗小儿脑瘫可提高患儿发育商,调节IL-10、TNF-α、VEGF的表达水平,改善下肢肌张力。     

脊柱推拿干预脑瘫幼鼠生长发育及运动功能的时间量效实验研究

目的观察不同时长的脊柱推拿对脑瘫幼鼠生长发育及运动功能的影响,探究推拿治疗时间与疗效的关系。方法将新生40只SD幼鼠随机分为空白对照组(n=8)和实验组(n=32);实验组又随机分为4个亚组:模型对照组(n=8)和模型+推拿1组(n=8),模型+推拿2组(n=8),模型+推拿3组(n=8)。模型制备:幼鼠出生后第3天(3-day-postnatal,P3),采用单侧颈总动脉结扎联合缺氧缺血的方法制备动物模型,造模后1d(P4)开始进行脊柱推拿;各组在相同的时间点检测幼鼠的体重和睁眼时间,并进行倾斜板实验。结果空白对照组与模型对照组相比,体重、睁眼时间以及倾斜板实验结果皆具有明显统计学差异,表明造模成功。与模型对照组相比,模型+推拿1、模型+推拿2、模型+推拿3组幼鼠体重明显增加(P0.05),推拿组组间两两对比并无统计学显著差异(P0.05);睁眼时间:模型对照组模型+推拿1组模型+推拿2组、模型+推拿3组,除模型+推拿2组与模型+推拿3组比较无显著统计学差异外(P=0.285),各组间两两比较均有显著的统计学差异(P0.05)。倾斜板角度:模型+推拿2组模型+推拿3组模型+推拿1组模型对照组,各组间两两比较均有显著的统计学差异(P0.05)。结论脊柱推拿对缺氧缺血型脑瘫幼鼠的生长发育及运动功能恢复具有明显的促进作用;推拿的时长并非与效果成正比,选择适宜的时长进行推拿,效果更佳。     

电针对反复丙泊酚暴露大鼠炎症反应的影响

目的：观察电针对反复丙泊酚暴露SD大鼠炎症反应的影响。方法：SPF级SD大鼠40只,日龄10 d,体质量26～28 g,采用随机数字表法将其分为5组(每组8只):生理盐水对照(C)组,腹腔注射生理盐水100μL;脂肪乳剂(F)组,腹腔注射脂肪乳剂100μL;电针(E)组,选取大鼠“百会穴”“大椎穴”进行电针刺激,疏密波2 Hz/10 Hz, 30 min/次,1次/d,连续3 d;丙泊酚(P)组,腹腔注射异丙酚100 mg/kg;电针+丙泊酚(EP)组,先给予丙泊酚(同P组),后电针干预(同E组)。造模结束后,断头取大鼠海马组织。Western blot法检测海马组织中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达量。免疫荧光检测海马小胶质细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、离子钙结合衔接分子1(Iba-1)表达水平。结果：与C组比较,P组海马组织中TNF-α、IL-6表达量升高,差异具有统计学意义(P<0.05);海马小胶质细胞Iba-1、HMGB1表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与P组比较,EP组海马组织中TNF-α、IL-6表达量下降,差异具有统计学意义(P<0.05);海马小胶质细胞Iba-1、HMGB1表达水平明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：电针干预能减轻反复丙泊酚暴露的大鼠神经炎症反应,其部分机制可能是抑制海马组织中小胶质细胞的活化和坏死性凋亡,下调炎症因子TNF-α、IL-6水平。     

银杏酮酯对衰老大鼠海马炎症相关 细胞因子的调节作用

目的:研究银杏酮酯(Ginkgo biloba extract 50,GBE50)对衰老模型大鼠海马促炎症细胞因子白介素-1β(interleu-kin-1 beta,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)和抗炎症细胞因子白介素-4(interleukin-4,IL-4)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)的调节作用,探索GBE50对衰老动物中枢神经系统的保护机制。方法:SD大鼠随机分为4组:正常组、模型组、GBE50组和EGB761组,采用D-半乳糖100 mg.kg-1每日腹腔注射建立衰老大鼠模型,持续42 d,GBE50组和EGB761组分别在造模第21天开始给予60 mg.kg-1剂量灌胃,共21 d。采用实时荧光定量PCR检测海马细胞因子IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达,免疫组织化学法检测海马细胞因子IL-1β和TNF-α蛋白表达,酶联免疫吸附试验测定海马细胞因子IL-4和IL-10蛋白含量。结果:D-半乳糖可造成衰老模型大鼠海马促炎症细胞因子和抗炎症细胞因子的失调,GBE50和EGB761降低了海马IL-1βmRNA表达(P<0.05),减少了TNF-α和IL-1β的蛋白表达水平(P<0.01),上调了IL-10蛋白含量(P<0.01,P<0.05)。结论:GBE50保护中枢神经系统的作用机制可能与GBE50改善中枢神经系统炎症有关。     

银杏酮酯对抑郁大鼠行为及炎症细胞因子的影响

目的:研究银杏酮酯(GBE50)对抑郁大鼠行为、血清和海马内炎症细胞因子含量的影响以探讨GBE50防治抑郁症的作用及机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、氟西汀组(10mg/kg)以及GBE50(35、70和140mg/kg)组。采用孤养结合慢性不可预见性应激抑郁模型,每日给予一种应激刺激,共21d。在应激的同时每日灌胃给药,每周监测体重,造模结束后进行糖水偏爱度实验检测,之后腹主动脉取血、分离海马组织,ELISA法检测各实验组血清和海马炎症细胞因子的含量。结果:模型组体重明显低于空白对照组,各用药组体重与模型组之间没有明显区别,但GBE50各剂量组体重较模型组有增长的趋势。模型组糖水偏爱度明显高于空白对照组;与模型组相比,氟西汀组和GBE50(70和140mg/kg)组明显降低。模型组血清和海马内TNF-α、IL-1β、IL-6水平均明显高于空白对照组,血清IL-10水平明显低于空白对照组,而海马内IL-10水平明显高于空白对照组。与模型组相比,GBE50各剂量组血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及氟西汀组血清TNF-α、IL-6水平均有不同程度降低;海马内GBE50(70和140mg/kg)组以及氟西汀组这些促炎症细胞因子以及IL-10的水平均明显下降。结论:抑郁大鼠体重明显减轻,表现出对糖水的异常偏爱,其血清和海马内促炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量升高,同时血清抗炎症细胞因子IL-10的含量降低,而海马内IL-10水平升高;GBE50可以明显改善模型大鼠抑郁样行为,逆转抑郁大鼠这些血清和海马炎症细胞因子的含量,这可能是GBE50抗抑郁作用的重要机制之一。     

"痹痛方"对胶原诱导关节炎模型小鼠血清和关节组织中炎症因子表达的影响

目的:观察痹痛方对胶原诱导关节炎(CollagenInducedArthritis,CIA)模型小鼠血清和关节组织中炎症因子表达的影响,探讨痹痛方治疗类风湿关节炎的抗炎作用机制。方法:将50只DBA/1小鼠随机分为5组,每组10只,分别为空白对照组、模型组和痹痛方小、中、大剂量组。除空白对照组外,其余各组采用牛Ⅱ型胶原诱导关节炎小鼠模型。造模成功后,痹痛方小、中、大剂量组分别予痹痛方0.108、0.432、1.728g/kg灌胃,模型组和空白对照组灌胃等量生理盐水,每日1次,连续灌胃28d。末次灌胃后处死小鼠并取材,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中白介素-6(IL-6)、IL-10、IL-17、肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达,实时荧光定量法(RT-PCR)检测小鼠关节组织中炎症因子IL-6、IL-10、IL-23和干扰素γ(IFN-γ)、干扰素γ受体1(IFN-γR1)、IFN-γR2m RNA的表达,免疫印迹分析法(WesternBlot)检测小鼠关节组织中IL-6和IL-10蛋白的表达,苏木精-伊红染色法(HE)观察关节组织形态变化,免疫组织化学法(IHC)检测小鼠关节中IL-6的表达。结果:干预结束后,模型组小鼠血清中IL-6、IL-17、TNF-α表达,关节组织中IL-6、IFN-γR1m RNA和IL-6蛋白表达均较空白对照组明显升高(P0.001,P0.01)。HE染色和IHC显示模型组小鼠关节腔界限不清晰,腔内狭窄,大量炎性细胞浸润,可见大量的IL-6阳性细胞表达。痹痛方各剂量组小鼠血清中IL-6水平,关节组织中IL-6、IL-10、IFN-γR1m RNA和IL-6蛋白表达均明显低于模型组(P0.05,P0.01,P0.001);痹痛方小剂量和大剂量组小鼠关节组织中IL-23m RNA表达明显低于模型组(P0.05);痹痛方小剂量和中剂量组小鼠关节组织中IL-10蛋白表达明显低于模型组(P0.05,P0.01)。病理结果示,痹痛方各剂量组小鼠关节炎症减轻,IL-6表达减少。痹痛方各剂量组之间比较,血清中IL-17、TNF-α,关节组织中IL-6、IL-10、IL-23、IFN-γR1m RNA和IL-6、IL-10蛋白的表达均有统计学差异(P0.05,P0.01,P0.001)。结论:痹痛方可减轻胶原诱导关节炎模型小鼠关节炎症,其可能的作用机制为抑制IL-6为主的炎症因子的表达,同时升高抑炎因子IL-10的表达。     

基于核因子-κB通路研究复方柴芩退热颗粒对脂多糖介导细胞炎症模型的作用

目的:研究复方柴芩退热颗粒对脂多糖介导炎症细胞模型的作用。方法:建立脂多糖介导RAW264.7细胞炎症模型,分为空白组,模型组,复方柴芩退热颗粒高、中、低浓度组,分别使用复方柴芩退热颗粒高、中、低剂量(21.12、10.56、5.28mg/m L)进行药物干预培养。酶联免疫法检测细胞培养上清液肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β、IL-6及IL-10的含量。蛋白印迹法检测核转录因子(NF)-κB P-IκB表达水平。结果:复方柴芩退热颗粒高、中、低浓度组TNF-α、IL-1β及IL-6水平均显著低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),且呈浓度依赖性降低;IL-10水平均显著高于模型组,差异有统计学意义(P0.05),但无浓度依赖性,其中复方柴芩退热颗粒高、中浓度组IL-10水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。复方柴芩退热颗粒高、中、低浓度组P-IκB表达水平均显著低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),且呈浓度依赖性降低。结论:复方柴芩退热颗粒具有显著抗炎作用,不仅能够显著降低LPS诱导细胞炎症模型P-IκB及TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,同时还能升高IL-10的水平,其作用机制可能通过抑制IκB的磷酸化而阻断NF-κB信号通路有关。     

六味地黄膏摩对脑瘫幼鼠GAS及MTL影响的研究

目的:观察六味地黄膏摩对脑瘫幼鼠胃泌素以及胃动素表达的影响,探究其是否能够改善脑瘫幼鼠的消化吸收功能。方法:选取SD幼鼠50只,随机分为模型对照组、推拿组、涂膏组、膏摩组、假手术对照组,每组10只。推拿组采用摩肾俞进行干预;涂膏组将六味地黄膏涂于肾俞穴部位;膏摩组将六味地黄膏涂于肾俞穴部位并采用指摩法摩肾俞穴;每日1次,共28天。模型对照组、假手术对照组给予禁食处理。干预28天后处死取血,检测血清中GAS及MTL含量。结果:与假手术对照组相比较,模型对照组血清GAS含量降低,差异有统计学意义(P0.05);模型对照组血清MTL未发生明显变化,差异无统计学意义(P0.05);推拿组、涂膏组血清GAS、MTL含量与模型对照组相比较,差异无统计学意义(P0.05);膏摩组血清GAS含量高于模型对照组及推拿组,差异有统计学意义(P0.05);膏摩组血清MTL与模型对照组相比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:脑瘫幼鼠缺血缺氧损伤后GAS分泌减少,消化吸收功能减弱;六味地黄膏摩能够促进脑瘫幼鼠GAS的表达,改善其消化吸收功能;单纯摩肾俞或涂六味地黄膏未能改善脑瘫幼鼠的消化吸收功能。     

回阳生肌膏治疗糖尿病足溃疡的作用机制探讨

目的 探讨回阳生肌膏对微血管内皮细胞的影响及其促进创面修复的作用机制.方法 体外实验:将细胞分为4组,正常组:正常内皮细胞;模型组:病变内皮细胞;实验组:病变内皮细胞+回阳生肌膏;对照组:病变内皮细胞+龙珠软膏,检测肿瘤坏死因子-α(NF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达量.体内实验:将大鼠分为3组,正常组:正常大鼠;模型组:糖尿病大鼠+凡士林纱条;实验组:糖尿病大鼠+回阳生肌膏纱条.观察创面愈合及形态变化,检测血清中TNF-α、血管内皮生长因子(VEGF)的表达量.结果 体外实验:与正常组比较,模型组eNOS的表达量较高,差异有统计学意义(P＞0.05);与模型组比较,实验组和对照组中eNOS的表达量较低,差异无统计学意义(P＞0.05);与对照组比较,实验组微血管中eNOS表达较高,差异无统计学意义(P＞0.05).与正常组比较,模型组中TNF-α的表达量较高,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,实验组中TNF-α的表达量较低,差异有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,实验组中TNF-α的表达量较低,差异有统计学意义(P＜0.05).与正常组比较,模型组中IL-6的表达量较低,差异无统计学意义(P＞0.05);与模型组比较,实验组中IL-6的表达量较高,差异有统计学意义(P＜0.05),对照组中IL-6的表达量较高,差异无统计学意义(P＞0.05);与对照组比较,实验组中IL-6的表达量较高,差异无统计学意义(P＞0.05).体内实验:第3天时,与正常组比较,模型组的创面愈合率较低,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,实验组创面愈合率较高,差异无统计学意义(P＞0.05).第7天时,与正常组比较,模型组的创面愈合率较低,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,实验组创面愈合率较高,差异有统计学意义(P＜0.05).第14天时,与正常组比较,模型组的创面愈合率较低,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,实验组创面愈合率较高,差异有统计学意义(P＜0.05).第3天时,与正常组比较,模型组中TNF-α的表达量较低,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,实验组中TNF-α的表达量较高,差异有统计学意义(P＜0.05).第7天时,与正常组比较,模型组中TNF-α的表达量较低,差异无统计学意义(P＞0.05);与模型组比较,实验组中TNF-α的表达量较高,差异有统计学意义(P＜0.05).第14天时,与正常组比较,模型组中TNF-α的表达量较高,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,实验组中TNF-α的表达量较低,差异有统计学意义(P＜0.05).第3天、第7天时,与正常组比较,模型组中的VEGF表达量较低,差异有统计学意义(P＜0.05);第14天时,与正常组比较,模型组中的VEGF表达量较低,差异有统计学意义(P＜0.05).第3天、第7天、第14天时,与模型组比较,实验组中的VEGF表达量较高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 回阳生肌膏能通过增加eNOS、VEGF的表达和降低促炎因子的表达,维持内皮细胞稳态,从而降低炎症反应,促进血管再生和创面修复;且效果优于龙珠软膏.     

电针对慢性神经痛大鼠海马区高迁移率族蛋白1表达的影响

目的:观察电针对慢性神经痛大鼠海马区高迁移率族蛋白1(HMGB 1)及其下游效应促炎细胞因子的影响,探讨电针镇痛的作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组12只。结扎大鼠左侧坐骨神经建立坐骨神经慢性结扎性损伤模型。电针组电针双侧"足三里""阳陵泉",每次30min,每日1次,共7d。检测各组大鼠左后足底机械痛阈(MWT),荧光定量PCR法和Western blot法分别检测海马HMGB 1基因和蛋白的表达水平,ELISA法检测海马区肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组MWT显著降低(P0.001)。与模型组比较,造模第10天和第14天,电针组MWT显著升高(P0.05,P0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠海马HMGB 1基因及蛋白表达水平显著增加(P0.001),TNF-α和IL-1β蛋白表达水平也均显著升高(P0.001)。电针7d后,与模型组比较,电针组海马区HMGB 1基因及蛋白表达水平显著降低(P0.001,P0.01),TNF-α和IL-1β蛋白表达水平显著降低(P0.05)。结论:电针可明显提高慢性神经痛大鼠痛阈值,其作用机制可能与抑制大鼠海马区HMGB 1及其下游促炎细胞因子释放有关。     

白藜芦醇对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜细胞因子表达的影响

目的探讨白藜芦醇(Resveratro)l对溃疡性结肠炎(UC)治疗的可能机制。方法采用葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate Sodium,DSS)制作UC小鼠模型,小鼠随机分4成组:正常对照(NC)组、模型(MD)组、低剂量(RLD)、高剂量(RHD)白藜芦醇治疗组。造模7d同时给予干预治疗,停用造模药物并后续治疗7d。记录分析疾病活动指数(DAI),14d后处死小鼠,取结肠行HE染色;利用实时荧光定量RT-PCR法检测IL-10、TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA的表达,ELISA法测小鼠肠黏膜IL-10、TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白水平。结果低、高剂量白藜芦醇治疗组小鼠第5～14天DAI明显低于模型组(P0.05);模型组IL-10表达明显低于正常组(P0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白表达则高于正常组(P0.05);低、高剂量白藜芦醇治疗组结肠IL-10mR-NA表达和蛋白水平明显高于模型组(P0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白水平则低于模型组(P0.05);高剂量白藜芦醇治疗组IL-10mRNA表达和蛋白水平明显高于低剂量组(P0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白水平则低于低剂量组(P0.05)。结论白藜芦醇可以提高抗炎细胞因子IL-10的水平并降低致炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平,通过抗炎和降低肠道过度的免疫反应,对UC发挥治疗作用。     

牛大力多糖对LPS诱导的RAW264.7细胞炎性因子释放的影响

目的研究牛大力多糖对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响,并观察核转录因子-κB p65(NF-κB p65)和抑制性卡巴蛋白-α(IκB-α)表达的变化。方法选用小鼠巨噬细胞RAW264.7,随机分为空白对照组,LPS模型组,牛大力多糖低、中、高剂量组(10,100,1000 ng·m L~(-1)),加药孵育2 h后,再加入10μg·m L~(-1)LPS至培养板中继续培养10 h,ELISA法测定各组细胞炎性因子白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,Western Blot法检测IκB-α蛋白以及NF-κB p65蛋白的表达水平。结果与LPS模型组比较,牛大力多糖高、中、低剂量组均能不同程度地抑制LPS诱导的3种炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α的释放(P0.05,P0.01),提高IκB-α蛋白表达(P0.05,P0.01),降低NF-κB p65蛋白的表达(P0.05,P0.01),且牛大力多糖对上述指标的作用强度与剂量呈正相关,各组间比较差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论牛大力多糖可通过增加IκB-α蛋白和抑制NF-κB p65蛋白的表达,从而降低炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α的释放,起到抗炎作用。     

香菇多糖对部分肝切除老年小鼠术后炎症反应及认知功能的影响

目的观察香菇多糖对部分肝切除老年小鼠术后炎症反应及认知功能的影响。方法建立老年小鼠肝部分切除术模型,采用Morris水迷宫测试小鼠的认知功能,ELISA法检测外周血中炎症细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达,Western blot技术检测海马组织中TNF-α、IL-1β和IL-6蛋白的表达。结果术后手术组小鼠潜伏期显著性延长(P0.01),穿台次数明显减少(P0.01),香菇多糖明显抑制肝切除术诱导的小鼠术后潜伏期延长(P0.05)和穿台次数减少(P0.05)。术后外周血和海马组织中TNF-α、IL-1β和IL-6的表达均明显升高,香菇多糖能够明显降低TNF-α、IL-1β和IL-6的表达,差异具有统计学意义。结论香菇多糖能够有效改善部分肝切除老年小鼠术后认知功能障碍,其机制与抑制外周血和海马组织中炎症细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的释放有关。     

逍遥散对脂多糖诱导抑郁样行为的影响

目的探讨逍遥散对脂多糖诱导抑郁样行为的影响。方法脂多糖诱导抑郁样小鼠模型,小鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组(3.03 mg/kg)及逍遥散低、高剂量组(15、30 g/kg),检测强迫游泳实验、悬尾实验中不动时间,血清、海马、皮层IL-6、TNF-α水平,海马、皮层IDO、5-HT水平,尼氏染色观察海马神经元形态学变化。然后,脂多糖诱导大鼠海马神经元细胞炎症模型,细胞随机分为空白组、模型组、氟西汀组(10μmol/L)及空白血清、含药血清低、高剂量组(4%、8%),检测上清液NO、IL-6、TNF-α水平,裂解液5-HT、IDO水平,IL-6、TNF-α、5-HT1A、IDO1 mRNA表达。结果与模型组比较,逍遥散组显著缩短强迫游泳实验中不动时间(P0.01),显著降低血清IL-6水平及皮层IL-6、TNF-α、IDO水平(P0.05,P0.01),显著升高海马5-HT水平(P0.01);高剂量组显著缩短悬尾实验中不动时间(P0.01),显著上调皮层5-HT水平(P0.01),显著增加海马平均光密度(P0.05);低剂量组显著降低海马IL-6水平(P0.05)。与模型组比较,含药血清组显著下调IL-6、TNF-α、IDO1 mRNA表达(P0.05,P0.01),显著上调5-HT1A mRNA表达(P0.01);高剂量组显著下调NO、IL-6、TNF-α、IDO水平(P0.01),显著上调5-HT水平(P0.01);低剂量组显著降低IDO水平(P0.01)。结论逍遥散对脂多糖诱导抑郁样行为有拮抗作用,其机制可能与抑制炎症反应有关。     

藿朴夏苓汤对HBZY-1细胞及DN大鼠NF-κB炎症通路的影响

目的研究藿朴夏苓汤(HPXLT)对体内外核转录因子-κB(NF-κB)炎症通路的影响,探讨HPXLT对糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法体外研究:采用脂多糖(LPS)刺激大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)及Hep G2细胞,观察HPXLT对细胞炎症因子包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量及p-p65蛋白表达的影响,以免疫荧光法观察Hep G2细胞的NF-кB p65转核作用。体内研究:采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,65 mg·kg~(-1))方法制备DN大鼠模型。将大鼠随机分为对照组,模型组,HPXLT高、中、低剂量组(2,1,0.5 g·kg~(-1))和格列本脲组(5 mg·kg~(-1)),连续灌胃给药6周。采用ELISA法测定细胞上清液或大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6的水平;Western Blot法测定HBZY-1细胞或大鼠肾脏p65、p-p65、TNF-α和IL-1β的蛋白表达水平。结果体外结果:与对照组比较,LPS组的p-p65蛋白表达显著增强,炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量显著升高(P0.01);与LPS组比较,HPXLT各剂量组的p-p65蛋白表达水平显著下调,炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量显著降低(P0.05,P0.01);免疫荧光显示LPS诱导的炎症能促进NF-кB p65的转核,而HPXLT可显著抑制NF-кB p65转核作用。体内结果:与对照组比较,模型组大鼠血清的TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子水平及肾脏的IL-1β、TNF-α、p-p65蛋白表达水平均显著升高(P0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠血清的TNF-α、IL-1β和IL-6炎症因子水平均显著降低(P0.05,P0.01),HPXLT高、中剂量组的IL-1β、TNF-α及p-p65蛋白表达水平均明显下调(P0.05,P0.01),各组之间的总NF-кB p65蛋白表达水平无明显改变,差异无统计学意义(P0.05)。结论 HPXLT可能通过抑制NF-κB炎症通路的表达,从而降低DN肾脏的炎症。     

桃核承气汤对脓毒症大鼠凝血-炎症水平的调控作用研究

目的:观察血管内皮细胞蛋白C受体(EPCR)对脓毒症大鼠凝血相关因子血清凝血因子XIV(FXIV)活性及炎症相关因子血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响以及桃核承气汤对凝血-炎症系统的调控作用。方法:将大鼠分为正常组、模型组(脓毒症)、中药组(造脓毒症模型后用桃核承气汤治疗),采用二次打击法建立脓毒症模型,ELISA法检测造模后休克开始及复苏后第72h血清EPCR的表达以及FXIV、IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,第120h各组IL-6、TNF-α的含量。结果:脓毒症大鼠的EPCR水平,中药组与正常组、模型组之间差异有统计学意义(P0.05);而凝血因子FXIV、IL-1β含量中药组与正常组、模型组之间未见差异(P0.05)。脓毒症大鼠造模后TNF-α水平,在第72h时中药组(2.14±0.55)和正常组(2.04±0.52)与模型组(2.75±0.83)含量有明显差异(P0.05),第120h时中药组(3.13±0.52)和正常组(2.77±0.3)低于模型组(3.56±0.56)水平(P0.05),且三组TNF-α含量均高于第72h时。结论:桃核承气汤可能通过调节脓毒症大鼠EPCR水平的表达,抑制TNF-α水平,从而调控脓毒症的炎症反应。在脓毒症的凝血-炎症网络中桃核承气汤的调节凝血作用或弱于调节炎症作用。     

祛瘀生新方对慢性间歇性缺氧所致氧化应激及炎症反应作用研究

目的探讨中药祛瘀生新方对慢性间歇性缺氧(CIH)模型大鼠的氧化应激(OS)、炎症反应的作用及其防治机制。方法应用间歇缺氧/再氧合动物舱,建立CIH大鼠模型,将40只雄性SD大鼠随机分为CIH组、空白对照组(空白组)、祛瘀生新治疗组(QYSX组)和乙酰半胱氨酸对照组(NAC组)4组,各10只。实验结束后(第36天)测定大鼠血浆中丙二醛(MDA)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)值。结果与空白组比较,CIH组大鼠血浆中的MDA、IL-6、TNF-α水平均明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。与CIH组比较,NAC组、QYSX组MDA、IL-6、TNF-α水平均降低,差异有统计学意义(P0.01)。与NAC组比较,QYSX组MDA、IL-6水平差异无统计学意义(P0.05);QYSX组TNF-α水平降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论祛瘀生新方能减轻CIH大鼠体内的OS、炎症反应。     

强心一号配方对脓毒症小鼠海马区神经炎症反应的影响

目的:探讨强心一号配方对脓毒症小鼠认知功能障碍和海马区神经炎症反应的影响。方法:将60只C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组、强心组,每组20只。模型组和强心组采取盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型。强心组于术后2 h给予强心一号配方灌胃治疗,浓度为1 g/kg体质量,模型组和假手术组分别给予1 mL生理盐水灌胃治疗。术后10 d采用Morris水迷宫实验评价小鼠空间学习记忆能力的变化,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测小鼠海马组织中炎症介质蛋白表达水平,实时定量PCR检测海马组织炎症介质基因表达水平。结果:与假手术组比较,模型组Morris水迷宫逃避潜伏期和目标象限的时间显著降低,海马组织中白细胞介素1-β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白和基因表达水平显著增高(P<0.05);与模型组比较,强心组逃避潜伏期和目标象限时间显著升高,海马组织IL-1β和TNF-α蛋白和基因表达水平显著下降(P<0.05)。各组小鼠Morris水迷宫游泳速度差异无统计学意义(P>0.05)。结论:强心一号配方对CLP小鼠认知功能障碍具有保护作用,其机制可能与减轻海马区神经炎症反应有关。     

黄芪桂枝五物汤对膝骨关节炎大鼠软骨损伤及 NLRP3/Caspase1通路的影响

目的:探讨黄芪桂枝五物汤对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨损伤及核苷酸结合寡聚化结构域样受体3 (NLRP3)/天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase1)通路的影响。方法:将120只SD大鼠随机分成对照组、模型组、美洛昔康组、黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组建立KOA软骨损伤模型。模型制备成功后对照组、模型组给予等体积的生理盐水;美洛昔康组给予40.0 mg/kg的美洛昔康溶液;黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组分别按20.0、40.0、80.0 mg/kg的剂量给予黄芪桂枝五物汤。实验结束后,进行大鼠关节炎症积分、KOA软骨Mankin's评分,测定机械痛阈(PWPT)及热刺激潜伏期(PWTL);测定膝关节软骨组织中NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白表达水平,白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果:与对照组比较,模型组PWPT、PWTL降低(P0.05);关节炎症积分,Mankin's评分,NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白表达水平,IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平升高(P0.05)。与模型组比较,美洛昔康组和黄芪桂枝五物汤各剂量组PWPT、PWTL升高(P0.05);关节炎症积分,Mankin's评分,NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白表达水平,IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平降低(P0.05),且黄芪桂枝五物汤各剂量组存在明显的剂量-效应关系(P0.05)。与美洛昔康组比较,黄芪桂枝五物汤低、中剂量组PWPT、PWTL较低(P0.05);关节炎症积分,Mankin's评分,NLRP3、Caspase 1 mRNA及蛋白表达水平,IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平较高(P0.05);而黄芪桂枝五物汤高剂量组以上各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论:黄芪桂枝五物汤能减轻KOA软骨损伤程度,其高剂量效果尤为明显;其机制与黄芪桂枝五物汤能降低炎症信号通路NLRP3、Caspase1 mRNA及蛋白的表达,进而抑制炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达有关。