银屑1号含药血清对银屑病中性粒细胞分泌NE、trappin-2的影响

目的:观察银屑1号含药血清对银屑病患者体外培养的中性粒细胞分泌NE、trappin-2的影响,探讨其治疗银屑病的机制。方法:分离培养18例寻常型银屑病患者外周血中的中性粒细胞,实验设置6组:4个浓度的中药含药血清(即原液中药组、1/2中药组、1/4中药组、1/8中药组)、雷公藤多苷阳性对照、生理盐水空白对照。采用ELISA法检测各组分泌的NE、trappin-2表达水平。结果:NE表达水平:与生理盐水组比较,原液中药组NE表达水平最低,生理盐水组表达水平最高,随着中药含药血清浓度的降低,NE的表达水平随之升高(P<0.05)。trappin-2表达水平:与生理盐水组比较,原液中药组trappin-2表达水平最低,生理盐水组最高,随着中药含药血清浓度的升高,trappin-2的表达水平逐渐降低。NE/trappin-2比值方面:生理盐水组比值显著高于其余5组。原液中药、1/2、1/4、1/8中药组显著低于阳性对照雷公藤组与对照组生理盐水组,并且NE/Trappin-2的比值伴随中药含药血清浓度的升高而降低(P<0.05)。结论:银屑1号治疗银屑病的机理可能是通过降低银屑病患者外周血中中性粒细胞NE、trappin-2的表达,使两者达到平衡,从而减轻炎症反应。     

中药银屑1号对银屑病中性粒细胞分泌IFN-γ、IL-4的影响

目的:观察中药银屑1号对寻常型银屑病患者外周血中性粒细胞分泌IFN-γ、IL-4的影响,探讨其治疗银屑病的机制。方法:分离培养18例寻常型银屑病患者外周血中性粒细胞,分别给予4个浓度(原液、1/2浓度、1/4浓度及1/8浓度)中药银屑1号,对照组加雷公藤多苷片、生理盐水,采用ELISA法检测各组IFN-γ、IL-4表达水平。结果:IL-4:1/4中药组可明显升高IL-4水平,与对照组比有统计学差异(P0.05)。IFN-γ:中药组IFN-γ表达水平明显降低,且与药物浓度呈依赖关系,原液中药组与对照组比有统计学差异(P0.05)。结论:银屑1号方治疗银屑病的机理之一可能是通过降低寻常型银屑病患者外周血中性粒细胞IFN-γ的表达,上调IL-4的表达,从而纠正Th1/Th2漂移。     

银屑I号治疗寻常性银屑病作用机理的临床和实验研究

目的:探讨银屑I号治疗寻常性银屑病的作用机理.方法:用ELISA方法检测银屑I号治疗前后寻常性银屑病患者血清单核细胞趋化蛋白-1(MPC-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素8(IL-8)表达的变化;用MTT法检测大鼠银屑I号含药血清对HaCaT细胞增殖的影响.结果:银屑病患者治疗后血清MCP-1、TNF-α、IL-8水平较治疗前显著降低,差异有统计学意义(P＜0.01);5%及10%的大鼠银屑I号含药血清对HaCaT细胞的增殖均有显著抑制作用,其中10%含药血清对细胞增殖的抑制最明显.结论:银屑I号治疗银屑病的作用机理可能与下调MCP-1、TNF-α、IL-8的表达有关,银屑I号含药血清对角质形成细胞有显著抑制作用.     

银屑1号对Trappin-2刺激下肿瘤坏死因子α干预造模的HaCaT细胞分泌NE、Trappin-2的影响

目的探讨银屑1号治疗银屑病的可能作用机制。方法 24只大鼠随机分为银屑1号组、雷公藤组、空白组,每组8只。银屑1号组大鼠给予银屑1号煎煮浓缩液196 g/(kg·d)灌胃,雷公藤组给予雷公藤多甙片混悬液6 mg/(kg·d)灌胃,空白组给予生理盐水灌胃,均每日2次,每次5 ml,连续5天,制备含药血清。体外培养Ha Ca T细胞,以肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激Ha Ca T细胞建立银屑病细胞模型。实验设置空白组、雷公藤组、抑制剂组、银屑1号组、抑制剂+银屑1号组。空白组、雷公藤组、银屑1号组分别加入基础培养基3.8 ml与相应含药血清,抑制剂组、抑制剂+银屑1号组分别加入空白含药血清和银屑1号含药血清,同时均加入Trappin-2(0.3μg/ml)培养基3.8 ml。体外培养48 h,检测Ha Ca T细胞中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、Trappin-2含量及NE、Trappin-2 mRNA表达。结果与空白组比较,雷公藤组、抑制剂组、银屑1号组、抑制剂+银屑1号组NE、Trapppin-2含量及mRNA含量明显降低(P0.05或P0.01)。与雷公藤组比较,抑制剂组、银屑1号组、抑制剂+银屑1号组NE、Trapppin-2含量及mRNA表达明显升高(P0.01)。与抑制剂组比较,银屑1号组、抑制剂+银屑1号组NE、Trapppin-2表达明显降低(P0.05或P0.01);银屑1号组NE mRNA表达明显升高(P0.01);抑制剂+银屑1号组Trapppin-2mRNA表达降低(P0.05)。与银屑1号组比较,抑制剂+银屑1号组NE、Trapppin-2含量及mRNA表达明显降低(P0.05或P0.01)。结论银屑1号可降低Ha Ca T细胞中NE、Trappin-2含量及基因表达水平,从而减轻炎症反应,可能是其治疗银屑病的作用机制之一。     

银屑I号治疗寻常型银屑病的疗效及对外周血中NE、Trappin-2表达的影响

目的:观察银屑I号方对寻常型银屑病患者外周血中NE及Trappin-2表达水平的影响。方法:将135例银屑病患者随机分为雷公藤组、中药组、中药+雷公藤组。根据PASI评分评价疗效,并通过ELISA法检测NE和Trappin-2表达水平。结果:雷公藤组总有效率为61.9%,中药组总有效率为67.4%,雷公藤+中药组总有效率为83.0%;雷公藤+中药组优于雷公藤组、中药组,差异有统计学意义(P0.05)。3组治疗后PASI评分、NE及Trappin-2表达水平均较治疗前下降,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:银屑I号联合雷公藤治疗寻常型银屑病具有较好疗效,其作用机制可能是通过减少NE、Trappin-2的表达,维持两者平衡,从而抑制炎症反应。     

中药复方银屑1号对角质形成细胞增殖影响的相关研究

目的:探讨中药复方银屑1号方对人角质形成细胞增殖及细胞生长周期的影响,从细胞水平为银屑1号方临床治疗寻常型银屑病提供理论依据。方法:将浓度为8%的PBS、雷公藤多甙片、复方银屑1号含药血清,分别处理HaCaT细胞,于24h、48h采用酶联免疫法检测其对细胞增值的影响,用流式细胞术分析细胞周期。结果:银屑1号方能抑制HaCaT细胞增殖,并导致HaCat细胞G1期比例显著增加,S期与G2期比例则显著下降,并可抑制G1/G2期转换。中药组与雷公藤组和PBS组比较,P<0.01,均有统计学意义。结论:中药银屑1号能对人角质形成细胞可产生明显抑制并诱导其分化的作用,为其治疗银屑病提供理论依据。     

蜈蚣败毒饮对银屑病患者血清TNF-α影响的临床研究

目的：观察中药蜈蚣败毒饮对银屑病患者血清TNF-α水平的影响,初步探讨其治疗银屑病的作用机理。方法：选取符合寻常型银屑病（风热证）患者143例,采用随机的方法,分为治疗组73例,对照组70例,治疗组口服中药复方蜈蚣败毒饮,对照组口服复方青黛胶囊,采用放免法检测患者治疗前后血清TNF-α的水平,观察患者血清TNF-α水平的变化情况。结果：两组治疗后患者血清TNF-α的水平均有所下降,且治疗组TNF-α水平的改善优于对照组（P〈0.05）。结论：蜈蚣败毒饮可降低银屑病患者血清TNF-α的水平。     

银屑平丸对寻常型银屑病患者血清IL-2和IFN-γ的影响

目的:观察银屑平丸治疗寻常型银屑病患者的疗效及对外周血血清IL-2和IFN-γ表达的影响,探讨银屑平丸治疗寻常型银屑病的作用。方法:记录37例寻常型银屑病患者在银屑平丸治疗前及治疗3个月后PASI积分,并采用ELISA检测其治疗前后IL-2和IFN-γ的表达水平,并与35名正常健康人作比较。结果:治疗前寻常型银屑病患者血清IL-2水平显著地低于正常人组(P<0.05),而血清IFN-γ水平则显著地高于正常人组(P<0.05)。治疗后IL-2水平显著升高,与治疗前比较,差异具有统计学意义(P<0.05);IFN-γ水平显著降低,与治疗前比较,差异具有统计学意义(P<0.05)结论:银屑平丸对寻常型银屑病患者血清IL-2和IFN-γ具有调节作用,银屑平丸治疗银屑病的作用机理可能与免疫调控有关。     

消银脐贴治疗寻常型银屑病24例临床研究

本研究采用中药新剂型脐贴剂治疗寻常型银屑病,疗效较好,并同时检测患者治疗前后外周血TNF-α、IL-6、IL-8水平,探讨其治疗寻常型银屑病的可能作用机制,现报道如下。     

银屑平丸对BALB/c小鼠银屑病样模型血清中IL-6与IL-21表达的影响

目的:探究银屑平丸对BALB/c小鼠银屑病样模型血清中IL-6与IL-21表达的影响。方法:将30只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、雷公藤组、银屑平丸高剂量组及低剂量组,每组6只。除正常组小鼠背部皮肤每日涂抹1次凡士林乳膏外,其余各组小鼠均每日外涂1次咪喹莫特乳膏,连续8 d。造模期间,各组小鼠同时进行灌胃给药:正常组与模型组每日用生理盐水灌胃1次,0.4 mL/次;雷公藤组每日用雷公藤多苷溶液药液灌胃1次,0.4 mL/次;银屑平丸高、低剂量组则每日分别用不同浓度的银屑平丸溶液药液灌胃1次,0.4 mL/次。每日给药24 h后观察各组小鼠背部皮肤的校正PASI评分;末次给药24 h后取血与皮肤组织。通过光镜下观察各组小鼠皮损组织形态学的改变,检测小鼠血清中IL-6与IL-21表达。结果:正常组的校正PASI评分趋势一直为0,其余各组的评分均为上升趋势。模型组、银屑平丸低剂量组、雷公藤组、银屑平丸高剂量组的PASI评分依次降低。模型组小鼠皮损组织为典型的银屑病样病理改变,除正常组小鼠无皮损外,其余各组小鼠均出现不同程度的角化过度及角化不全的病理改变。银屑平丸高剂量组小鼠血清IL-6、IL-21水平低于雷公藤组与银屑平丸低剂量组;雷公藤组小鼠血清IL-6、IL-21水平低于银屑平丸低剂量组。结论:银屑平丸可抑制BALB/c小鼠银屑病模型血清中IL-6与IL-21表达,这可能是银屑平丸治疗银屑病的作用机制之一。     

解毒化浊方含药血清调控TANs对HER-2阳性乳腺癌肿瘤微环境的影响

目的 通过解毒化浊方含药血清干预乳腺癌细胞和中性粒细胞共培养的体外肿瘤微环境的实验研究，探讨其抑制乳腺癌复发转移的作用机制。方法 选用雌性SD大鼠分为生理盐水组、中药组，分别给药制备含药血清，给药血清干预共同培养的乳腺癌MDA-MB-453细胞和小鼠外周血中性粒细胞，采用流式细胞术检测MDA-MB-453细胞和中性粒细胞凋亡率。结果 解毒化浊方含药血清干预肿瘤微环境中性粒细胞24h后，中药组与生理盐水组比较中性粒细胞的凋亡率增加，但不明显(P>0.05);干预48h后，中药组与生理盐水组比较中性粒细胞的凋亡率明显增加(P<0.05);中药组与中药对照组比较中性粒细胞的凋亡率明显减少(P<0.05),生理盐水组与生理盐水对照组比较中性粒细胞的凋亡率明显减少(P<0.05)。解毒化浊方含药血清干预肿瘤微环境中乳腺癌MDA-MB-453细胞48h后,中药组与生理盐水组比较乳腺癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05),中药组与中药对照组乳腺癌细胞比较凋亡率明显增加(P<0.05)。结论 解毒化浊方中药重塑肿瘤微环境后，能促进中性粒细胞的凋亡。且能阻止中性粒细胞驯...     

退银汤对寻常性银屑病患者外周血NE表达水平的影响

目的:探讨退银汤对寻常性银屑病外周血中中性粒细胞蛋白酶(NE)表达的影响。方法:采用酶联免疫吸附竞争法检测40例寻常性银屑病患者在使用退银汤前后外周血血清NE水平,并与40例正常对照组进行比较。结果:40例寻常性银屑病血清NE水平为(16.90±3.30)mg.L-1,正常人对照组NE水平为(3.67±1.49)mg.L-1,两组有极显著性差异(P<0.01)。经退银汤治疗12周后,银屑病患者血清NE水平明显下降[(9.16±2.43)mg.L-1]与治疗前有极显著性差异(P<0.01)。结论:退银汤可以降低寻常性银屑病血清中NE的表达水平,NE可能参与了角质形成细胞的增殖,参与银屑病的发病过程。     

半枝莲方对寻常型银屑病血热证患者血清TNF-α及VEGF的影响

目的:观察半枝莲方对寻常型银屑病血热证患者的临床疗效及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:采用PASI及中医症候评分标准评估半枝莲方对寻常型银屑病血热证患者的临床疗效;采用双抗体夹心ELISA法检测治疗前后患者血清中TNF-α、VEGF水平。结果:与治疗前相比半枝莲方能有效改善患者PASI评分及中医症候评分,临床有效率为76.59%(P<0.05,P<0.01);与治疗前相比,半枝莲方能明显降低患者血清TNF-α、VEGF的表达水平(P<0.01)。结论:半枝莲方能有效的治疗寻常型银屑病血热证,其机制可能是通过降低血清中TNF-α、VEGF水平来实现的。     

NE刺激对HaCaT细胞分泌NE、Trappin-2的影响及银屑1号的干预

目的:观察银屑1号含药血清对中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)刺激HaCaT细胞分泌NE、Trappin-2的影响。方法:体外培养HaCaT细胞,以10 ng/mL的肿瘤坏死细胞因子(TNF)-α刺激HaCaT细胞,建立银屑病细胞模型。实验设置5组:空白组、模型组、NE组、1/3中药组、NE+1/3中药组,体外培养48 h。采用ELISA法检测培养上清中NE、Trappin-2水平,采用RTq-PCR法检测HaCaT细胞中NE、Trappin-2水平。结果:模型组的NE、Trapppin-2的蛋白表达及mRNA表达与空白组比较均显著升高(P <0. 01)。与模型组比较,NE组、1/3中药组、NE+1/3中药组的NE、Trapppin-2的蛋白表达及mRNA表达均显著下降(P <0. 01)。与NE组比较,1/3中药组、NE+1/3中药组的NE、Trapppin-2蛋白表达明显下降(P <0. 01)。NE+1/3中药组Trappin-2的mRNA表达下降(P <0. 05),NE+1/3中药组NE的mRNA表达未见明显差异(P> 0. 05)。与1/3中药组比较,NE+1/3中药组的NE、Trapppin-2的蛋白表达及mRNA表达明显下降(P <0. 01)。结论:银屑1号能降低HaCaT细胞中NE、Trappin-2的浓度,调节NE、Trappin-2的表达水平,达到动态平衡,减轻炎症反应,治疗银屑病。     

银屑Ⅰ号抑制TNF-α诱导Hacat细胞炎症反应的机制研究

目的:观察银屑I号对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人永生化角质形成细胞(Hacat)炎症反应的影响并探讨其机制。方法:采用低、中、高浓度的银屑I号含药血清干预Hacat细胞,ELISA法检测细胞上清液25HVD3、IL-1、IL-17、IL-22浓度,Western-blot法检测维生素D受体(vitamine D receptor,VDR)蛋白表达量,RT-PCR检测VDRmRNA相对表达量。结果:与空白组比较,模型组VDR蛋白、VDRmRNA、25HVD3表达量明显降低,IL-1、IL-17、IL-22明显升高(P0.01);与模型组比较,银屑I号各组VDR蛋白、VDRmRNA、25HVD3表达量明显升高,IL-1、IL-17、IL-22明显降低(P0.05),且呈剂量依赖性。讨论:银屑I号可能通过促进VDR蛋白、VDRmRNA及25HVD3因子信号表达发挥对银屑病的治疗作用。     

竹黄颗粒剂Ⅱ号对寻常性银屑病患者血清MMP-2 MMP-9水平的影响

目的：本研究旨在前期研究基础上进一步探讨竹黄颗粒剂Ⅱ号对寻常型银屑病的作用机理。方法：36例寻常性银屑病患者，按随机数字表分竹黄颗粒剂Ⅱ号治疗组（竹黄组）19例与银屑灵冲剂治疗组（银屑组）17例，分别于治疗前、后ELISA检测血清中MMP-2和MMP-9水平，并以15例正常人作为对照组。结果：治疗后血清中MMP-2、MMP-9水平均显著下降（P〈0．05）；其中竹黄组效果优于银屑组（P〈0．01）。结论：竹黄颗粒剂Ⅱ号能显著降低寻常型银屑病患者血清中MMP-2、MMP-9水平。     

雷公藤多甙片对静止期银屑病患者血清TNF-α及IL-8的影响

目的 观察静止期银屑病患者血清肿瘤坏死因子-α( TNF-α) 、白细胞介素-8 ( IL-8)的水平,并探讨雷公藤多甙片对银屑病的治疗作用及对血清肿瘤坏死因子-α( TNF-α) 、白细胞介素-8 ( IL-8)的调节作用.方法 应用双抗体夹心酶联免疫吸附法( ELISA) 检测39例静止期银屑病患者经雷公藤多甙片治疗前后外周血清中TNF-α、IL - 8的水平.结果 静止期银屑病患者经雷公藤多甙片治疗后,PASI评分明显下降;患者治疗前血清中TNF - α及IL - 8 水平显著增高,治疗后血清中TNF-α及IL-8 较治疗前显著下降.结论 雷公藤多甙片可通过调节血清中TNF-α及IL-8 水平而起到治疗银屑病作用.     

血清蛋白质组学技术筛选寻常型银屑病不同中医证型的差异蛋白

目的:研究不同证型寻常型银屑病患者血清中的差异表达蛋白,从蛋白质组学探讨寻常型银屑病的发病机理及微观辨证物质基础。方法:收集寻常型银屑病患者血瘀证、血虚证、血热证各10例,健康人10例的血清。应用蛋白提取、定量、双向电泳技术、质谱鉴定和数据库检索,找出寻常型银屑病组与正常组、寻常型银屑病组不同证型之间的差异蛋白。结果:寻常型银屑病组与正常组间差异蛋白有20种,寻常型银屑病组患者血液中纤维蛋白原β链、血液结合素、纤维蛋白γ链、HPX蛋白、α-胰蛋白酶、载脂蛋白A-Ⅳ、补体C3、凝聚素(载脂蛋白,片段)、血清转铁蛋白、间-α-胰蛋白酶抑制剂H4重链(片段)、载脂蛋白E、补体C4-B、甘露糖结合蛋白-C、富亮氨酸-α-2-糖蛋白及血清白蛋白的表达明显升高,而血清白蛋白(片段)、甲状腺素转运蛋白、IgαC链、载脂蛋白L1、结合珠蛋白的表达则显著降低。其中,寻常型银屑病组不同证型之间也存在一定差异,补体C3、凝聚素、血清转铁蛋白等在血虚型寻常型银屑病患者的血清中表达高于其他两种证型的银屑病;纤维蛋白原β链、血液结合素等的表达在血热型寻常型银屑病患者血清中的表达水平高于血瘀型寻常型银屑病患者。结论:寻常型银屑病组和正常组以及寻常型银屑病不同中医证型间出现的血清蛋白差异表达,可能与寻常型银屑病的发病机制和银屑病不同证型的物质基础有关。     

温阳和营、凉血化瘀法配合复方甘草酸苷治疗寻常型银屑病疗效及对血清TNF-α影响

目的观察温阳和营、凉血化瘀法配合复方甘草酸苷注射液治疗寻常型银屑病的临床疗效及对血清TNF-α的影响。方法将98例寻常型银屑病患者随机分为2组,对照组给予复方甘草酸苷注射液静滴,1次/d,连续12 d,配合维A酸乳膏外涂(1次/d)+0.05%卡泊三醇软膏外涂(2次/d),4周为1个疗程;试验组在静滴复方甘草酸苷注射液的基础上给予温阳和营、凉血化瘀中药口服,4周为1个疗程。观察2组治疗1个疗程后临床疗效及治疗前后银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)评分、血清TNF-α水平变化情况。结果试验组总有效率明显高于对照组(P<0.05);2组治疗后PASI评分和血清TNF-α水平均较治疗前明显降低(P均<0.05),且试验组明显低于对照组(P均<0.05)。结论温阳和营、凉血化瘀法配合复方甘草酸苷注射液能有效缓解寻常型银屑病患者临床症状,降低血清TNF-α水平,值得临床深入研究。     

黄连解毒汤含药血清调控中性粒细胞功能的实验研究

目的 观察黄连解毒汤含药血清对体外调控中性粒细胞功能的影响。 方法 20 只 SD 大鼠每天给予黄连解毒汤 5 g/kg 灌胃，每 12 小时 1 次，共 5 次，制备黄连解毒汤含药血清。 采用流式细胞仪分选C57 BL/6 小鼠骨髓和外周血中性粒细胞，给予不同剂量的黄连解毒汤含药血清和脂多糖（LPS）刺激 3 h，采用实时荧光定量 PCR 检测中性粒细胞炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-1β、IL-6 及 IL-12b 表达，确定 10%黄连解毒汤含药血清为最佳剂量。 将 10%黄连解毒汤含药血清用于干预活化的中性粒细胞功能：（1）中性粒细胞给予佛波醇 12-十四酸酯 13-乙酸酯（PMA）刺激 5 min，流式细胞仪检测骨髓中性粒细胞产生活性氧（ROS）情况；（2）中性粒细胞给予 LPS 刺激 3 h，采用 PicoGreen dsDNA 定量检测试剂盒检测培养上清游离 DNA （cf-DNA） 的含量；（3） 免疫荧光法检测中性粒细胞形成的中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）情况；（4）中性粒细胞给予趋化因子 CXCL2、CXCL10、CCL3 诱导 3 h，流式细胞仪检测趋化的中性粒细胞数量；（5） 中性粒细胞给予 LPS 刺激 20 h，流式细胞仪检测外周血中性粒细胞凋亡情况。 结果 PMA 刺激中性粒细胞使 ROS 显著增多（P<0.05）；LPS 刺激 3 h，中性粒细胞产生的 cf-DNA 含量增多，NETs 形成增加，CXCL2，CXCL10、CCL3 使中性粒细胞趋化增多（P<0.05， P<0.01）；LPS 刺激 20 h 后，外周血中性粒细胞凋亡减少（P<0.05）；10% 黄连解毒汤含药血清可减少 ROS 产生，降低 cf-DNA 含量和NETs 形成，减少中性粒细胞趋化，促进中性粒细胞凋亡（P<0.05， P<0.01）。 结论 黄连解毒汤可调节中性粒细胞功能。