急性淋巴细胞白血病中T细胞受体δ基因Vδ2－Dδ3及Dδ2－Dδ3重排结合部顺序的研究

为了探讨中国人Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）δ基因的Ｖ－Ｄ－Ｊ结合部顺序（Ｎ顺序）的组成，及其在急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者中的重组规律，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对４６例ＡＬＬ标本进行了ＴＣＲδ基因重排的研究，发现１６例患者出现Ｔ细胞受体δ基因不完全重排，其中１３例为Ｖδ２－（Ｄ）－Ｄδ３重排，３例为Ｖδ２－（Ｄ）－Ｄδ３合并Ｄδ２－Ｄδ３重排。进而应用ＤＮＡ直接测序技术，对这１６例ＡＬＬ标本ＴＣＲδ基因重排结合部进行了分析，证实由于Ｖδ２或Ｄδ２的３＇端和Ｄδ３的５＇端碱基缺失、部分Ｄδ１或Ｄδ２顺序存在、Ｎ顺序的插入以及未发生缺失的Ｖδ２，Ｄδ２或Ｄδ３编码顺序端Ｐ核昔酸的非随机插入，使得每例患者的结合部顺序均存在高度个体特异性。此外，对Ｎ顺序碱基成份的分析表明，其脱氧鸟嘌呤和脱氧胞嘧啶含量大于７０％，而脱氧腺嘌呤和脱氧胸腺嘧啶小于３０％，说明碱基插入并非完全随机。本文结果提示ＴＣＲδ基因重排是淋巴细胞发育中的一个早期事件，其结合部顺序的测定，可作为检测ＡＬＬ患者微小残留病变的特异性克隆标志。     

克隆演化与中枢神经系统白血病复发的关系

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测４５份急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）脑脊液标本ＩｇＨ、ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ及ＴＣＲＶδ２－Ｄδ３基因重排，从２２份标本（４８．９％）发现基因重排阳性，而用形态学方法检查，阳性率为２４．４％（１１／４５）；２２例阳性病人中的２例（９．１％）脑脊液白血病细胞基因重排类型同骨髓标本不一致，此两例均为中枢神经系统白血病（ＣＮＳＬ）复发。上述结果表明，应用ＰＣＲ技术检测ＡＬＬ脑脊液标本重排基因有助于隐匿ＣＮＳＬ诊断；克隆演化现象可能是某些单独ＣＮＳＬ复发的主要原因     

急性白血病复发时克隆演化的研究

为研究克隆演化在急性白血病复发发病机制中作用，应用聚合酶锭反应（ＰＣＲ）联合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测７５例及其中３６例复发急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）ＩｇＨ重排基因，ＰＣＲ检测８１便及其中３５例复发急性淋巴细胞病（ＡＬＬ）ＩｇＨ、ＴＣＲＶｘ２－Ｊｘ、ＴＣＲＶδ－Ｄδ３重排基因及ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ，配合形态学和免疫学检查发现８例ＡＬＬ（２２．９％）和４例（１１．１％）ＡＮＬＬ复发时形态学，免     

24例儿童非霍奇金淋巴瘤IgH和TCR基因重排的研究

目的 检测２４例儿童非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）ＩｇＨ和ＴＣＲ基因重排,以便选择恰当的引物组合用于ＮＨＬ ＶＩ期患儿微小残留病（ＭＲＤ）的检测。方法 以Ｃｈｅｌｅｘ１００为介质,从初诊的ＮＨＬ患儿病理切片中提取ＤＮＡ,采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测ＩｇＨ、ＴＣＲβ、ＴＣＲδ和ＴＣＲγ基因重排。结果 在Ｂ－ＮＨＬ中,ＩｇＨ、ＴＣＲβ、ＴＣＲδ和ＴＣＲγ基因重排的检出结果分别为１０／１３（７７％）例、     

IgH超基因家族及其相关基因在急性淋巴细胞白血病微小残留病检测中的应用

探讨免疫球蛋白超基因家族及其相关基因在急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）微小残留病（ＭＲＤ）检测中的应用。方法应用免疫学和聚合酶链反应技术。对１５例ＡＬＬ进行免疫表型测定。结果发现其中１１例为Ｂ－ＡＬＬ，３例为Ｔ－ＡＬＬ。ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ分析发现，１１例Ｂ－ＡＬＬ均有ＩｇＨ基因的重排，且有ＩｇＨ基因重排的病例均能用ＩｇＨ基因ＣＤＲ３区及Ｊ区引物得到聚合酶链反应扩增条带。对其中３例Ｂ－ＡＬＬ的ＩｇＨ基因Ｖ－Ｄ－Ｊ结合部区域进行了顺序分析，并合成了２个针对ＩｇＨＶ－Ｄ－Ｊ结合部的寡核苷酸作为探针用来检测ＭＲＤ，显示其灵敏度为１０－４。另外还对１例Ｔ－ＡＬＬ病例同时进行了ＴＣＲγ基因和ＳＩＬ－ＴＡＬ－１融合基因在ＭＲＤ检测中的比较研究，显示二者具有相同的ＭＲＤ阳性检出率，但后者的敏感度更高。结论ＩｇＨ基因重排及其ＴＣＲ基因重排、肿瘤融合基因等均可作为ＡＬＬ患者ＭＲＤ检测的特异性标记     

急性淋巴细胞白血病微量残留病的PCR监测

探讨急性淋巴细胞白血病微量残留病检测的临床意义。方法：应用筑巢式多聚酶链反应对３２例ＡＬＬ进行了Ｔ细胞受体Ｖδ２Ｄδ３基因重排检测。结果 １８例Ｂ系ＡＬＬ中有１５例，４例Ｔ系ＡＬＬ中有１例，存在ＴＣＲＶδ２δ３基因重排。同时对１６例进行３９例次微量残留病动态监测，其中６例ＭＲＤ－ＰＣＲ阴性病人随访５．１７－１６．１７年，无１例复发，１０例ＭＲＤ－ＰＣＲ阳性者，２例分别于阳性后０．２５，１．００年骨     

急性淋巴细胞白血病微量残留病的PCR监测

①目的探讨急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）微量残留病（ＭＲＤ）检测的临床意义。②方法应用筑巢式多聚酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）对３２例ＡＬＬ进行Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖδ２Ｄδ３基因重排检测。③结果１８例Ｂ系ＡＬＬ中有１５例（７２．２％）、４例Ｔ系ＡＬＬ中有１例（２５．０％）存在ＴＣＲＶδ２Ｄδ３基因重排。同时对１６例进行３９例次微量残留病动态监测，其中６例ＭＲＤ－ＰＣＲ阴性病人随访５．１７～１６．１７年，无１例复发；１０例ＭＲＤ－ＰＣＲ阳性者，２例分别于阳性后０．２５，１．００年骨髓复发，１例有复发倾向，余７例随访４．３３～６．２５年无复发。④结论ＭＲＤ－ＰＣＲ阴性者预后良好，可望长期生存，治疗时应以ＭＲＤ－ＰＣＲ转阴为停止化疗的可靠指标，对ＭＲＤ－ＰＣＲ阳性者应定期监测ＭＲＤ变化，结合病人情况进行综合评价。     

中线恶网的T细胞受体基因重排分析：14例PCR研究

应用ＰＣＲ方法对１４例中线恶网进行Ｔ细胞受体－β链（ＴＣＲ－β）基因重排分析的结果显示，１２例（８５．７％）有单克隆型的ＴＣＲ－β基因重排；１０例淋巴结Ｔ细胞性淋巴瘤仪有６例有ＴＣＲ－β基因重排。反应性淋巴增生性则为多克隆型重排。该实验从基因水平证实了中线恶网为来自Ｔ细胞的单克隆性肿瘤性疾病。用ＴＣＲ－β通用经物行ＤＮＡ扩增是检测Ｔ细胞性的克隆性增生的方便、快速的方法，有一定的实用意义。     

系列PCR方法检测淋巴细胞白血病克隆性基因重排的选择应用

以１次、半巢式及多重ＰＣＲ方法扩增５８例淋巴细胞白血病ＩｇＨ及ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ克隆性基因重排。结果显示：多重ＰＣＲ和１次ＰＣＲ的敏感度为１０￣（－４）～１０￣（－５）水平；半巢式ＰＣＲ敏感度可达１０￣（－５）～１０￣（－６）水平。ＩｇＨ和ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ重排阳性率为６７．２％和６２．０％；半巢式ＰＣＲ检测ＩｇＨ重排阳性率为７０．７％。上述结果表明：多重ＰＣＲ可同时检测两对目的基因，适于初治病例检测，而对缓解病例的检测则需采用敏感度较高的半巢式ＰＣＲ方法。     

中线恶网的T细胞受体基因重排分析——14例PCR研究

应用ＰＣＲ方法对１４例中线恶网进行Ｔ细胞受体β链（ＴＣＲ－β）基因重排分析的结果显示，１２例（８５．７％）有单克隆型的ＴＣＲ－β基因重排；１０例淋巴结Ｔ细胞性淋巴瘤仅有６例有ＴＣＲ－β基因重排。反应性淋巴增生性则为多克隆型重排。该实验从基因水平证实了中线恶网为来自Ｔ细胞的单克隆性肿瘤性疾病。用ＴＣＲ－β通用引物行ＤＮＡ扩增是检测Ｔ细胞性的克隆性增生的方便、快速的方法，有一定的实用意义     

用多种特异性基因标志跟踪检测儿童微量残留白血病的研究

用多种特异性基因标志跟踪检测儿童微量残留白血病的研究顾龙君，等。中华血液学杂志１９９６；１７（５）：２２７用多聚酶链反应技术，以Ｔ细胞受体（ＴＣＹ）γ、ＴＣＲδ、ＩｇＨ基因的Ｖ－（Ｄ）－Ｊ结合部Ｎ顺序三种克隆特异基因标志；ＳＩＬ－ＴＡＬ－１、ＨＲＸ基...     

急性淋巴细胞白血病T细胞受体γ、δ链基因的重组

本文对３７例形态学上确认为急性淋巴细胞白血病患者（ＡＬＬ）的免疫表型、Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）γ、δ链基因以及免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因的重组进行了研究。根据免疫表型分析，有２６例为Ｂ系ＡＬＬ，８例为Ｔ－ＡＬＬ，２例为急性未分化白血病（ＡＵＬ）及１例粒系白血病。发现在Ｔ－ＡＬＬ中ＴＣＲ基因的重组有时序性，δ基因的重组先于γ基因；在Ｂ系ＡＬＬ中，绝大多数均发生γ和δ基因的重组和（或）缺失，且重组类型与Ｔ－ＡＬＬ不同；相反，ＩｇＨ基因的重组仅见于Ｂ系ＡＬＬ。ＡＬＬ基因型分析是非常有用的克隆标志，并为了解人类早期的淋巴细胞分化提供了重要资料。另外还证实ＴＣＲγ基因Ｖ－Ｊ接头部顺序的测定可以作为检测临床缓解期患者微小残余病变的克隆标志。     

系列PCR方法检测淋巴细胞白血病克隆性基因重排的选择应用

以１次、半巢式及多重ＰＣＲ方法扩增５８例淋巴细胞白血病ＩｇＨ及ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ－克隆性基因重排，结果显示：多重ＰＣＲ和Ｉ次ＰＣＲ的敏感度为１０－１０＾５水平；半巢式ＰＣＲ敏感度可达１０＾－５－１０＾－６水平。ＩｇＨ和ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ重排阳性率为６７．２％和６２．０％；半巢式ＰＣＲ检测ＩｇＨ重排阳性率为７０．７％。上述结果表明，多重ＰＣＲ可同时检测两对目的基因，适于初治病例检测，而地缓解病例的检     

应用PCR检测恶性淋巴瘤骨髓浸润及其临床意义

目的：检测恶性淋巴瘤（ＭＬ）的骨髓浸润（ＩＢＭ）并探讨其与临床分期、疗效和预后的关系。方法：以克隆性ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分别作为Ｂ和Ｔ细胞淋巴瘤克隆基因标志，应用ＰＣＲ基因扩增技术检测ＭＬ患者ＩＢＭ。结果：（１）３４份ＭＬ患者骨髓标本ＩＢＭ检出率为７０．６％（２４／３４），明显高于形态学检测方法（３８．６％，Ｐ＜０．０５）。（２）１９例形态学检测正常的非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）骨髓标本，ＩＢＭ阳性率５７．９％（１１／１９），其中８例Ｂ－ＮＨＬ（８／１４）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排；５例同时还检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，２例Ｔ－ＮＨＬ（２／３）检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，无克隆性ＩｇＨ基因重排；２例免疫分型不明确ＮＨＬ患老中１例（１／２）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，无克隆性ＴＣＲ，基因重排。２例霍奇金病（ＨＤ）和１０例非淋巴系肿瘤骨髓ＩＢＭ均阴性。（３）Ⅲ，Ⅳ期ＮＨＬ患者ＩＢＭ检出率显著高于ＩＩ期（ｐ＜０．０１），初诊未治及复发患者也显著高于部分或完全缓解患者（Ｐ＜０．０１）。（４）ＩＢＭ阳性组ＮＨＬ２年死亡率５４．５％（６／１１），明显高于ＩＢＭ阴性（ｐ＜０．０５）。结论：ＰＣＲ方法检测ＩＢＭ有助于估     

竞争性定量PCR检测TCRVγＩ—Ｊγ基因重排方法的建立及应用＊

目的 为提高急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）微小残留检测的临床意义。方法 建立竞争性定量聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ基因重排技术并定量分析１６例ＡＬＬ病人残留白血病细胞。结果 建立定量ＰＣＲ方法的灵敏度为１０－＾５水平。１６例ＡＬＬ缓解期残留白血病细胞为（４２７±３６４）×１０－＾５病人。３例病人可检测出寡／亚克隆重排,白血病细胞定量为１１７×１０－＾５、１９６×１０－＾５及２１１×１     

非霍奇金淋巴瘤Ig和TCRβ链基因重排与相关抗原的表达

用１４种抗人白细胞的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）与２种克隆抗体（ＰｃＡｂ）和人类免疫球蛋白（Ｉｇ）基因簇重链（ＩｇＨ）ＪＨ、Ｃｕ、轻链（ＩｇＬ）Ｃｘ、Ｃλ以及Ｔ细胞受体β链（ＴＣＲβ）基因作为探针，以ＡＢＣ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹交法对１１例非霍奇金恶性淋巴瘤（ＮＨＬ）的抗原表达与Ｉｇ基因簇、ＴＣＲβ基因重排作了研究。结果显示：抗原表达和基因重排具有非常明确的相关性（Ｐ＝０．００２）。从ＩｇＬ的ｘ链重排中     

非何杰金淋巴瘤患者基因克隆性标记的研究

对非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ）２５例、良性反应性淋巴结细胞增生１０例，在单克隆抗体免疫学分型的基础上，用体外基因扩增聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排。结果表明，ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分析有助于从分子水平上确定肿瘤细胞的来源及其分化阶段，是恶性淋巴瘤可靠的分子克隆性标记，对鉴别诊断良、恶性淋巴结肿大疾病有重要的临床应用价值。     

非何杰金淋巴瘤患者基因克隆性标记的研究

对非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ）２５例，良性反应淋巴结细胞增生１０例，在单克隆抗体免疫学分型的基础上，用体外基因扩增聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排，结果表明，ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分析有助于从分子水平上确定肿瘤细胞的来源及其分化阶段，是恶性淋巴瘤可靠的分子克隆性标记，对鉴别诊断良，恶性淋巴结肿大疾病有重要的临床应用价值。     

应用PCR技术检测淋巴结病理切片中的IgCDR—Ⅲ基因重排

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测Ｂ细胞－非何杰金淋巴瘤（Ｂ－ＮＨＬ）的单克隆性ＩｇＣＤＲ－Ⅲ基因重排，ＰＣＲ扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后为１００￣１２０ｂｐ的特异性ＤＮＡ区带。检测石蜡病理切片标本中非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ）１７／２３例、反应性增生２／５例发现单克隆性ＩｇＣＤＲ－Ⅲ基因重排；反应性增生３／５例及淋巴结转移癌４例未见单克隆性ＩｇＣＤＲ－Ⅲ基因重排。     

中线T细胞淋巴瘤的TCR—γ基因重排研究

目的 对中线Ｔ细胞淋巴瘤的克隆性进行研究。方法：用一组针对Ｔ细胞受体γ链基因Ｖ区片段的家族特异性引物和ＰＣＲ方法，对１１例（２２个标本）中线Ｔ细胞淋巴瘤病例进行了Ｔ细胞受体γ基因重排的检测，结果：２２个标本中的２１个有Ｔ细胞受体γ链基因的克隆性重排（９４．４５％），在９例原发灶的连续活检和１例原发灶及其转移灶的标本中未发现曾生的克隆家族的改变。结论：中线Ｔ细胞淋巴瘤的病变组织中存在Ｔ细胞的单克隆性