荧光原位杂交技术在乳腺癌HER2的表达及其意义

目的 探讨荧光原位杂交（FISH）-5免疫组织化学（IHC）检测乳腺癌人表皮生长因子受体2（HER2）基因状态中的相关性和差异性。方法对40例原发性乳腺癌组织做石腊切片,分别用兀SH和IHC检测HER2基因扩增和HER2蛋白表达,以FISH检测结果为标准,评价IHC检测的基因扩增比率。结果IHC检测HER2蛋白表达（3＋）的基因扩增比率为88．9％（8／9）,1例无扩增者为17号染色体多体;IHC（2＋）的基因扩增比例为71．4％（5／7）,2例无扩增者中有1例为17号染色体多体;IHC（1＋和0）的无基因扩增。结论IHC可以做为HER2基因状态检测的初筛;IHC（2＋）与IHC（3＋）存在假阳性,与17号染色体多体有关,故应该做FISH检测确诊。     

乳腺癌HER2蛋白阳性表达的基因状态及其与P53蛋白相关性研究

目的研究乳腺癌HER2蛋白表达阳性的基因状态及其与P53蛋白相关性,探讨其与乳腺癌发生、发展的内在关系。方法选取257例HER2蛋白表达阳性的浸润性乳腺癌样本,分别应用荧光原位杂交（FISH）法和免疫组织化学EliVisionTMplus法对标本中的HER2基因和P53蛋白、ER和PR受体进行检测并做相关性分析。结果①HER2基因扩增率64．59％（166／257）;其中IHC（2＋）56．48％（109／193）,（3＋）89．06％（57／64）;HER2基因扩增和其蛋白阳性表达比较有显著相关性（P〈0．01）。②P53蛋白表达率52．92％（136／257）,P53蛋白表达率、HER2基因扩增率与ER、PR受体表达及腋窝淋巴结转移差异有显著性（P〈0．05）;与肿瘤大小、病理学类型、年龄无统计学意义（P〉0．05）。结论HER2基因扩增率与P53蛋白表达率呈正相关,两者指标的联合检测对乳腺癌的转移、预后评估具有重要的参考意义。     

IHC与FISH检测乳腺癌HER2状态一致性的对比研究及其临床意义

目的:对比研究免疫组织化学方法(IHC)检测乳腺癌HER2蛋白表达和荧光原位杂交技术(FISH)检测HER2基因状态的一致性,并评价其临床意义.方法:采用IHC法及FISH法分别检测77例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本的HER2蛋白表达和HER2基因状态,并进行对比分析.结果:77例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本用IHC检测H...     

荧光原位杂交检测乳腺癌HER2基因的表达及其意义

目的：探讨荧光原位杂交（FISH）在检测乳腺癌组织HER2基因表达的临床意义。方法：应用FISH法对50例乳腺癌患者进行HER2基因检测,分析基因表达程度与临床特征之间的关系,比较基因和免疫组化（IHC）法蛋白表达的差异性。结果：FISH法与IHC法检测结果总符合率为88%,我院女性乳腺癌人群中HER2基因过表达率为44%,其过表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期之间差异无统计学意义（P〉0.05） 孕激素受体（PR）阳性组高于PR阴性组,差异有统计学意义（P〈0.01） 雌激素受体（ER）阳性组与ER阴性组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：HER2基因的过表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期及ER无关,与PR成负相关。FISH法检测乳腺癌HER2基因敏感性及稳定性较高,可作为最终确诊HER2基因状态的方法。     

乳腺癌HER2基因荧光原位杂交与显色原位杂交检测对比研究

目的 对比研究荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和显色原位杂交(chromogenic in situ hybridization,CISH)在检测乳腺癌HER2基因扩增状态中的敏感性和准确性.方法 对32例经CISH法检测HER2基因状态的乳腺癌标本行回顾性...     

改良荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER2基因

目的探讨改良荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization,FISH）技术在检测乳腺癌HER2基因中的应用。方法对52例经免疫组化（immunohistochemistry,IHC）法检测HER2的乳腺癌标本行改良FISH法检测HER2基因扩增情况,Kappa检验法对两种检测结果的一致性进行统计分析。结果改良FISH法成功率高,与IHC法检测结果一致性好,两者实际一致率为88.5%（K=0.757,P=0.000）。结论改良FISH技术可作为最终确诊HER2基因状态的方法 。     

荧光原位杂交和免疫组织化学技术检测乳腺癌HER-2基因扩增和蛋白表达状态对照研究

目的 比较荧光原位杂交(FISH)与免疫组织化学技术(IHC)在检测乳腺癌患者HER-2基因扩增和表达状态方面的应用.方法 采用FISH技术对66例IHC检测结果为HER-2基因过度表达(3+/2+)和低表达或无表达(1+/-)的乳腺癌石蜡切片进行HER-2基因扩增状态检测.结果 用FISH技术检测42例IHC结果显示HER-2基因过度表达(3+/2+)的标本,31例显示HER-2基因扩增,11例无扩增.检测24例IHC检测显示HER-2基因低度表达或无表达(1+/-)的标本,均未显示HER-2基因扩增.两组之间比较,Kappa系数为0.672,P<0.001,显示两项检测技术具有良好的一致性.另外.用FISH技术检测到部分病例显示17号染色体多体性,并且该多体性在HER-2高表达(3+/2+)的病例发生率显著高于低表达或无表达(1+/-)的病例(x~2=4.688,P=0.03).结论 FISH和ICH两项技术具有良好的一致性.IHC可作为HER-2基因扩增和表达状态检测的筛查手段.FISH技术可以作为检测HER-2基因扩增和17号染色体多体性的确诊手段.

Abstract：

Objective To evaluate the application of the immunohistochemistry (IHC) and the fluorescence in situ hybridization (FISH) in detecting the amplification and the expression of HER-2 gene in the breast cancer patients. Methods Sixty-six cases of paraffin-embeded breast cancer samples with overexpression, low or no expression of HER-2 gene as detected by IHC were analyzed for HER-2 gene amplification using FISH. Results Among the 42 samples with HER-2 gene overexpression (3+/2+) detected by IHC, 31 showed positive HER-2 gene amplification and 11 showed negative HER-2 gene amplification in FISH. In the 24 samples with low or no HER-2 gene expression (1+/-) detected by IHC, no HER-2 gene amplification was detected by FISH. The results of the two testing methods showed a good consistency with the kappa coefficient of 0.672 (P<0.001). We also found that the 17 chromosome polysomy in 42% of the samples and the incidence of 17 polysomy was significantly higher in the HER-2 gene overexpression (3+/2+) group than in low or no HER-2 gene expression (1+/-) group (x~2=4.688, P=0.03). Conclusion IHC can be used as a screening method for detecting HER-2 gene amplification, and FISH should be performed in cases of HER-2 gene overexpression (3+/2+) as detected by IHC.     

乳腺癌HER2基因扩增检测方法——显色原位杂交法的应用及优化

目的:应用显色原位杂交技术(chromogenic in situ hybridization,CISH)检测乳腺癌组织人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)基因扩增情况,并对操作方法进行优化.方法:选择免疫组织化学(IHC)EnVision法检测结果2 及以上的60例乳腺癌组织作为研究对象,应用CISH技术检测其HER2基因扩增情况,分析二者结果的相关性;总结CISH操作经验,优化操作方法.结果:44例标本IHC检测HER2蛋白表达为3 ,其中40例CISH检测呈现HER2基因高倍扩增,4例无扩增;基因扩增与蛋白表达的符合率为91%.16例IHC检测HER2表达为2 标本基因扩增与蛋白表达的符合率为50%.IHC与CISH符合率为80%(48/60),二者明显相关(P＜0.01).操作过程中应严格控制切片厚度,一般要求4～5 μm;杂交变性一定要彻底,杂交后的洗涤温度和时间也很重要,最好控制在70～75℃;要严格控制苏木精衬染时间;每次实验最好有阳性对照片,可以有效进行质量控制.结论:CISH检测乳腺癌HER2基因扩增的结果与IHC检测的蛋白表达结果符合率较高,可作为乳腺癌HER2基因检测的一项新技术;但在具体操作时,应注意严格控制切片厚度、消化及杂交后洗涤温度与时间以及苏木精衬染时间等因素.     

荧光原位杂交对乳腺癌HER2基因的检测及临床应用

目的探讨荧光原位杂交法(FISH)检测乳腺癌组织中人类表皮生长因子受体2(HER2)表达的临床意义。方法采用FISH和免疫组织化学(IHC)法分别检测28例乳腺癌标本中HER2基因扩增状况和HER2蛋白表达。结果在IHC法检测HER2蛋白表达(++)的22例标本中,FISH检出6例HER2基因扩增,16例无变化。在HER-2蛋白表达(+++)的6例标本中,FISH检出5例HER2基因扩增,1例无扩增。结论对于IHC法初筛为(++)的患者应再进行FISH检测,以确定HER-2基因的状态,从而确定是否应用曲妥珠单抗治疗。     

双色银原位杂交法检测乳腺癌HER2的表达

目的通过比较双色银染原位杂交法(DSISH)检测乳腺癌的HER2蛋白表达和免疫组织化学法(IHC)检测乳腺癌的HER2基因扩增的一致性和差异性及其临床意义,探讨DSISH在临床检测乳腺癌HER2基因状态的应用价值。方法采用DSISH与免疫组织化学检测乳腺癌组织中的HER2基因扩增及蛋白表达状态。结果 156例乳腺癌组织经免疫组织化学检测HER2蛋白强阳性65例,阳性23例,弱阳性59例,无表达9例。HER2蛋白阳性表达率为56.4%(88/156)。156例乳腺癌组织HER2基因扩增107例,无扩增49例,HER2基因扩增率为68.6%(107/156)。结论 DSISH应用于乳腺癌HER2基因检测,并与免疫组织化学检测结果具有一致性,DSISH可靠性高,具有广泛的应用价值。     

乳腺癌HER2基因表达阳性者17号染色体倍体性与HER2蛋白表达及临床预后因素的相关性分析

目的 分析乳腺癌HER2基因表达阳性者17号染色体倍体性与HER2蛋白表达以及临床预后因素的相关性,以探讨其临床意义.方法 应用FISH、IHC等方法研究34例HER2基因有扩增的乳腺癌病例,分析17号染色体倍体性与HER2蛋白表达、乳腺癌临床预后因素的关系.结果 HER2基因表达阳性者17号染色体的多体性表达者较二体性表达者有更高的HER2蛋白表达级别(P<0.05),有更多的乳腺癌的不良预后因素出现概率(P<0.05).结论 FISH作为乳腺癌HER2基因检测手段不仅准确率高,而且能定量17号染色体的倍体性,从而为综合判断疾病的预后提供更多的依据.     

胃癌原发灶不同区域HER2的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌手术标本不同区域人类表皮生长因子受体2（HER2）的异质性及其临床意义,分析原发灶HER2表达与胃癌临床病理特征的关系。方法 收集2004至2012年胃癌根治手术标本70例,采用免疫组织化学（IHC）对每例胃癌3个不同区域的组织蜡块进行HER2蛋白表达检测,利用荧光原位杂交（FISH）检测HER2蛋白为2+的所有组织蜡块,参照2011年版的《胃癌HER2检测指南》中的判读标准将检测结果进行比较。结果70例胃癌手术标本3个不同区域HER2有差异表达11例（4例1+,4例2+,3例3+）,无差异表达59例（56例0,1例2+,2例3+）,结合FISH检测结果,HER2表达分别为63.6%（7/11）与5.1%（3/59）,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）;胃癌HER2表达与肿瘤Lauren分型及分化程度有关（均P＜0.05）。结论胃癌原发灶不同区域HER2表达存在明显异质性,多区域取材检测有助于全面可靠评估HER2表达,对于FISH检测无基因扩增的HER2蛋白为2+的患者应选取肿瘤其他部位再次进行FISH检测。     

Intratumoral heterogeneity of HER2 gene amplification in occult breast cancer

Occult breast cancer （OBC） is an uncommon type of breast cancer, with palpable masses in the axillary area as the initial symptom. We report a case of OBC with HER2 genetic heterogeneity and discuss the impact of an unusual HER2 amplification pattern.A 56-year-old female was discovered a palpable mass in the right axillary area. She underwent a lymph node excisional biopsy at another hospital approximately one month before referral to our hospital service for further evaluation. The biopsy showed lymph tissue with tumor cell infiltrating in the form of sheets or nests. The tumor cells were larging in size, obviously atypical, and showed prominent nucleoli and intracellular keratosis. Mammography, chest X-ray, chest computed tomography （CT）, abdominal ultrasonography （US）, and positron emission tomography- CT （PET-CT）, which were also performed at the initial hospital, showed no abnormal findings.     

HER2蛋白表达与乳腺癌转移和预后关系的研究

目的:探讨HER2基因表达与乳腺癌转移和预后的关系。方法:应用免疫组织化学方法,检测110例乳腺癌组织中HER2蛋白表达,结合随访资料分析。结果:在乳腺癌组织中,HER2蛋白阳性表达率为54.54%(60/110)。HER2蛋白阳性表达的乳腺癌转移率高(P<0.01),分化程度差和患者大于5年生存率低(P<0.01)。结论:HER2蛋白表达与乳腺癌转移和患者生存期密切相关,检测HER2蛋白表达可作为判断乳腺癌预后的参考指标。     

肺癌中EGFR蛋白表达和基因扩增相关性研究

目的对肺癌EGFR蛋白表达和基因扩增进行比较分析：方法对2004年至2006年期间本院病理科常规病理诊断中确诊为啼腺癌和BAC的病例按照2004年WHO最新肺肿瘤分类标准重新分类,应用组织芯片、免疫组织化学和FISH技术对总计89例肺癌进行EGFR蛋白表达和基因扩增的检测.结果经典型肺腺癌EGFR蛋白的阳性表达率为56．52％,基因扩增率为45．45％;混合亚型肺腺癌EGFR蛋白的阳性表达率为20．51％,基因扩增率为22．58％;BAC病例中的EGFR蛋白的表达率为3．85％,扩增率为14．81％。经典型肺腺癌EGFR的蛋白表达阳性病例和基因扩增病例均明显多于BAC和混合亚型肺腺癌,（P〈0．05）。EGFR蛋白表达和基因扩增之间存在正相关（P〈0．005）：结论EGFR基因的扩增及蛋白的表达在肺腺癌病例中均高于BAC,EGFR基因扩增与蛋白表达之间存在相关关系。