HPLC法同时测定防己药材中防己诺林碱和粉防己碱

防己为防己科粉防己Stephania tetrandra S.Moore的干燥根,粉防己根中含有粉防己碱、防己诺林碱、轮环藤酚碱等成分,具有解热镇痛、风湿止痛、利尿消肿之功效.其中粉防己碱（TET）和防己诺林碱（FAN）是其主要活性成分,TET能够有效抑制由胶原、凝血酶、肾上腺素等引起的血小板聚集,FAN能够在体外抑制组胺的释放.因此,以粉防己碱和防己诺林碱的量来作为防己药材的质量控制指标具有十分重要的意义.     

粉防己中粉防己碱和防己诺林碱的分离制备研究

目的:建立粉防己中粉防己碱和防己诺林碱的分离制备方法。方法:采用柱色谱法对粉防己碱和防己诺林碱进行分离,采用薄层色谱法对粉防己碱和防己诺林碱的纯化品进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对其进行含量测定。结果:经薄层色谱法鉴定粉防己碱与防己诺林碱的纯化品与标准品图谱一致;经高效液相色谱法测定,所得样品中粉防己碱和防己诺林碱的百分含量分别为100.97%和98.54%。结论:本方法简便易行,所得粉防己碱与防己诺林碱纯度高。     

HPLC法测定防己配方颗粒中两种生物碱的含量

目的 建立防己配方颗粒中两种生物碱的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法定量防己诺林碱和粉防己碱,色谱柱:Diamonsil C18反相柱(5 μm×250 mm×4.6 mm),流动相:甲醇-乙腈-0.03mol/L磷酸二氢钾水溶液-三乙胺(45:25:30:0.3),柱温为35℃,流速:1.0mL/min,检测波长:280nm.结果 HPLC法测定结果 显示,色谱峰形好,分离度高,阴性对照无干扰.防己诺林碱在0.3145～3.774μg(r＝1)呈良好的线性关系,粉防己碱在0.9525～11.43μg(r＝1)呈良好的线性关系;供试品在24h内稳定(防己诺林碱RSD＝1.05%,粉防己碱RSD=1.37%);该方法 精密度高(防己诺林碱RSD＝0.92%,粉防己碱RSD=0.04%),重复性良好(防己诺林碱RSD＝1.73%,粉防己碱RSD=1.28%),平均加样回收率为:防己诺林碱99.285%(RSD＝2.49%)和粉防己碱99.33%(RSD=2.22%).结论 所建立的方法 适合作为防己配方颗粒的含量测定方法.     

HPLC同时测定复方防己注射液中延胡索乙素、粉防己碱和防己诺林的含量

目的:建立同时测定复方防己注射液中延胡索乙素、粉防己碱和防己诺林的含量的方法。方法:色谱条件Diamonsil C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%三乙胺梯度洗脱,检测波长为280 nm。结果:延胡索乙素、粉防己碱和防己诺林碱线性范围分别为0.5556~4.630μg,8.772~73.10μg和5.133~42.775μg(r=0.9999)。方法回收率分别为98.9%,102.5%,100.6%(RSD2%)。结论:本方法准确,简便,可为复方防己注射液中延胡索乙素、粉防己碱和防己诺林的含量测定方法提供依据。     

梯度洗脱联合波长切换HPLC法同时测定豨莶风湿丸中的豨莶苷、奇壬醇、豨莶精醇、防己诺林碱和粉防己碱

目的 建立梯度洗脱联合波长切换HPLC法同时测定稀莶风湿丸中稀莶苷、奇壬醇、稀莶精醇、防己诺林碱和粉防己碱.方法 采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),以流动相A:乙腈-甲醇(2∶1)、流动相B:0.05％冰醋酸溶液进行梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;样量为20 μL;豨莶苷、奇壬醇和稀莶精醇检测波长为215 nm,防己诺林碱和粉防己碱检测波长为280 nm.结果 豨莶苷、奇壬醇、稀莶精醇、防己诺林碱和粉防己碱在给定浓度范围内的线性范围分别为6.45～129.00 μg/mL(r=0.999 5)、5.61～112.20 μg/mL(r=-0.999 9)、4.25～85.00 μg/mL(r=0.999 3)、9.19～183.80 μg/mL(r=0.999 8)和11.05～221.00 μg/mL(r=0.999 7),线性关系良好;平均加样回收率和相对标准偏差(RSD)值分别为98.73％(1.43％)、97.63％(1.28％)、99.44％(1.29％)、98.33％(1.38％)、97.36％ (1.37％).结论 建立的梯度洗脱联合波长切换HPLC法能同时测定豨莶风湿丸中稀莶苷、奇壬醇、稀莶精醇、防己诺林碱和粉防己碱含量,方法简便、准确、重现性好,为稀莶风湿丸质量控制提供了可靠方法.     

TLC鉴别骨节康片中的防己

目的 建立骨节康片中防己的TLC鉴别法．方法 薄层板为硅胶G板，以氟仿-丙酮-甲醇（7：2：1，v/v／v）为展开刑，稀碘化铋钾溶液为显色刑，鉴别防己中的粉防己碱和防己诺林碱。结果 粉防己碱和防己诺林碱TLC斑点清晰，与其他成分分离良好，防己阴性无干扰．结论 本文建立的方法为骨节康片的质量标准提供了可靠的定性分析依据。     

不同产地粉防己药材中主要生物碱含量对比研究

目的比较不同产地粉防己药材中粉防己碱和防己诺林碱的含量差异,探讨产地对于药材品质的影响。方法采用高效液相色谱法配合紫外检测器,运用外标标准曲线法测定样品液中粉防己碱和防己诺林碱的含量,并换算出药材中折算含量。色谱条件:色谱柱为Kromasil-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-水-冰醋酸(40∶30∶30∶1)(每100 mL含十二烷基磺酸钠0.41 g),流速1.0 mL/min,检测波长280 nm,进样量25μL。结果准确测定出各产地药材中2种生物碱的含量,通过比较,发现不同产地粉防己中生物碱含量有显著差异。结论该定量测定方法稳定可靠,且产地因素对于粉防己药材品质有显著影响。     

粉防己碱药理及其在消化系统疾病中的应用研究进展

粉防己碱(tetrandrine,Tet),又名汉防己甲素,是从千金藤属防己科植物粉防己根中提取的主要生物活性成分,其分子式为:C33H42N2O6,化学结构属双苄基异喹啉化合物.近年来,国内外对其药理作用进行了较为广泛而深入的研究.研究表明,粉防己碱具有多种生物学效应,在消化系统、心血管系统、肿瘤防治等方面具有良好的临床应用前景.本文仅对粉防己碱的药理及其在消化系统疾病中的临床应用研究作一综述.     

反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中6种活性成分的含量

目的 建立反相高效液相色谱法测定防己黄芪汤中粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸和白术内酯Ⅰ的含量.方法 采用Diamonsil C18(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.2 mol/L乙酸铵0.1％甲酸溶液(A)-乙腈(B);流速为1.0 mL/min;柱温为30℃;进样量为20μL.测定粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸时采用梯度洗脱(0～5 min,15％～20％B;5～10 min,20％～30％B;10～15 min,30％～35％B;15～20 min,35％～45％B,V/V),平衡时间为10 min,检测波长为254 nm;测定白术内酯Ⅰ时采用等度洗脱(0～8 min,80％-80％B,V/V),检测波长为220 nm.结果 粉防己碱、防己诺林碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷和甘草酸分别在5～250 mg/L(R=0.9999)、1～50 mg/L(R=0.9999)、1～50 mg/L(R=0.9996)、5～250 mg/L(R=0.9996)、5～250 mg/L(R=0.9999)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率(n=9)分别为99.3％、98.7％、97.5％、99.1％和99.2％.白术内酯Ⅰ在0.05～2.5 mg/L(R=0.9996)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率(n=9)为97.6％.结论 方法结果准确,操作简便,具有良好的重现性和稳定性,可用于防己黄芪汤的质量控制.     

粉防己地上部分的阿朴啡类生物碱成分

从防己科植物粉防己(Stephania tetrandra)的地上部分得到的单体,经光谱测试等结构研究手段鉴定为新化合物防己醌碱(stephadione)及己知化合物紫堇醌碱(corydione)、氧化南天竹啡碱(oxonantenine)、无根藤米里丁(cassameridine),南天竹啡碱(nantenine)和无根藤新碱(cassythicine)。该6种化合物均系首次自粉防己中得到且化学结构皆为阿朴啡生物碱类,这与该植物地下部分的化学成分迥然不同,反映了同一植物不同部位内次生代谢产物的生物合成方式有相当大的差别。     

粉防己碱对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的 观察粉防己碱对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响,探讨粉防己碱对宫颈癌的体外抗肿瘤效应.方法 采用MTT比色法观察粉防己碱对Hela细胞的增殖抑制效应,利用细胞DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术检测粉防己碱诱导肿瘤细胞凋亡的作用,以免疫细胞化学法检测粉防己碱对Bcl-2和Bax表达水平的影响.结果 粉防己碱对Hela细胞增殖有抑制作用,其抑制效应具有剂量依赖的特点.粉防己碱可诱导Hela细胞凋亡,可上调Bax基因表达,下调Bcl-2基因表达.结论 粉防己碱对Hela细胞增殖的抑制效应具有剂量依赖性,并可诱导细胞凋亡,其抗肿瘤效应可能与凋亡相关基因表达的调控有关.     

粉防己碱对人乳腺癌细胞MCF-7细胞株的作用

目的:观察粉防己碱对体外培养的人乳腺癌细胞MCF-7细胞株增殖的影响.方法:MTT法检测MCF-7细胞对粉防己碱的敏感性;流式细胞仪检测粉防己碱对MCF-7细胞的细胞周期、凋亡率的影响.结果:随着粉防己碱浓度的增加,作用时间延长,MTT试验中试验组细胞光吸收值降低;流式细胞试验中S期细胞数减少,凋亡细胞比例增加.结论:粉防己碱对MCF-7细胞株的生长有明显的抑制作用,并且这种抑制效应存在剂量和时间的依赖关系;粉防己碱可阻滞MCF-7细胞周期活动,诱导细胞凋亡,且其调亡率和浓度及作用时间呈正相关.     

粉防己碱对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响

目的 了解粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的超微结构的影响;方法 培养来自增生性瘢痕的成纤维细胞,在加入粉防己碱后．用透射电镜观察其超微结构;结果 使用粉防己碱后,成纤维细胞胞体变小,胞质突起变少．核变小．核仁不明显．细胞器变少且小;结论 粉防己碱可影响瘢痕成纤维细胞的超微结构,从而可能降低其胶原蛋白等细胞外基质的合成。     

粉防己碱对敌百虫中毒小鼠的保护作用

目的：验证粉防己碱对有机磷酸酯中毒动物的保护作用。方法：采用急性毒性试验,以判断粉防己碱对LD100剂量敌百虫中毒小鼠的保护作用。应用和未用粉防己碱处理的中毒小鼠死亡率间的差异显著性,以卡方测验进行检验。结果：粉防己碱（20～40 mg/kg,i.p.）对中毒小鼠有确切的保护效果,因为粉防己碱处理的动物死亡率明显低于用生理盐水处理的对照组死亡率（P＜0.05）;粉防己碱处理组的死亡率接近阿托品（10 mg/kg,i.p.）处理组的死亡率,二者之间无显著差异（P＞0.05）。结论：粉防己碱具有近似阿托品的对抗有机磷酸酯中毒功效,并提示它可被用作阿托品治疗此类毒物中毒时的协同剂。粉防己碱的作用机理目前尚不清楚,有待进一步探讨。     

粉防己碱对瘢痕成纤维细胞超微结构的影响

目的了解粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的超微结构的影响.方法培养来自人体瘢痕的成纤维细胞,在加入粉防己碱后,用透射电镜观察其超微结构.结果使用粉防己碱后,成纤维细胞胞体变小,胞质突起变少,核变小,核仁不明显,细胞器变少且小.结论粉防己碱可影响瘢痕成纤维细胞的超微结构,从而可能降低其胶原蛋白等细胞外基质的合成.     

粉防己碱逆转膀胱癌BIU-87/ADM的凋亡抗性及可能机制的研究

目的 探讨粉防己碱(Tet)逆转人膀胱癌耐阿霉素细胞株BIU-87/ADM的凋亡抗性及其可能机制.方法 将膀胱癌耐药株和敏感株分为对照组、粉防己碱组、阿霉素组和阿霉素联合粉防己碱组(n=6),其中阿霉素药物作用浓度为1.5 μg/ml,粉防己碱为1 μg/ml.应用AO/EB染色结合荧光显微镜技术检测细胞凋亡,JC-1...     

HPLC法测定北豆根药材中粉防己碱和青藤碱

目的 建立北豆根中粉防己碱和青藤碱的定量测定方法,为北豆根质量标准的研究提供科学依据.方法 采用高效液相色谱法测定北豆根中粉防己碱和青藤碱的量.色谱条件为Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),测定粉防己碱采用流动相:甲醇-水-三乙胺(72:28:0.05),检测波长:282 nm;测定青藤碱采用流动相:乙腈-水-三乙胺(21:79:0.05),检测波长:262 nm.结果 线性良好,粉防己碱和青藤碱的平均加样回收率分别为98.8%,101.5%;RSD分别为2.9%;2.0%.结论 本方法精密度高,分离度良好,可用于测定北豆根药材中粉防己碱和青藤碱的量.     

粉防己碱缓释片体外释放度试验

粉防己碱(汉防己甲素,tetrandrine)是从防己科植物粉防己StephaniatetrandraS.Moore的干燥根中提取的一种双苄基异喹啉生物碱,具有抗心律失常、抗高血压、抗炎、抗肿瘤等作用,在心血管、免疫系统及抗肿瘤等领域的临床应用中具有广阔的前景[1,2]。近年来,为了研究粉防己碱降压、逆转血管重构作用,笔者根据粉防己碱的性质、治疗目的、给药途径和患者重要的生理病理因素,研制了粉防己碱缓释片。本实验对粉防己碱缓释片进行了体外释放度研究。1仪器与试药ZRS—4型智能溶出试验仪(天津大学无线电厂),7520型分光光度计(上海分析仪器厂),UV—32…     

粉防己碱与利多卡因抗心律失常作用比较

目的：探索粉防己碱的抗心律失常作用并与利多卡因相比较。方法：采用5个化学物质诱导的动物实验性心律失常模型。结果：粉防己碱和利多卡因在同等剂量（20mg/kg)时均可明显降低氯仿诱发的小鼠室颤发生率（P＜0．05），但利多卡因利用强于粉防己碱；在Cacl2或BaCl2诱发大鼠心室颤动模型上，粉防己碱和利多卡因在同等剂量（10mg/kg)明显提高存活率（P＜0．05）；两药的作用强度无明显差异；粉防己碱和利多卡因在同等剂量（10mg/kg)明显提高哇巴因或乌头碱诱发大鼠心律失常的剂量（P＜0．05）。结论：粉防己碱和利多卡因具有抗实验性室性心律失常作用。两药作用强度接近。     

粉防己碱对肾性高血压大鼠小血管重构的影响

目的：探讨肾血管性高血压大鼠小血管重构特点及粉防己碱的预防作用。方法：用两肾一夹法制备肾血管性高血压大鼠病理模型，术后第5周给予粉防己碱（Tet,50mg.kg^-1.d^-1）或依那普利（Ena,6mg.kg^-1.d^-1)连续8周，观察两药对高血压大鼠小动脉血管结构的影响，结果：肾血管性高血压（RH）大鼠尾动脉和股动脉湿重增加；尾动脉，冠状动脉，肾小动脉管壁厚度和壁／腔比值均明显增大；肾小动脉管壁平滑肌细胞数明显增加，粉防己碱和依那普利用药后上述变化明显减轻。结论：肾血管性高血压大鼠小动脉主要呈肥厚性重构。粉防己碱烽依那普利可有效防止RH大鼠小血管重构。