Sorcin蛋白高表达与肺癌细胞株NCI-H446多药耐药的关系

目的探讨Sorcin高表达与肺癌细胞NCI-H446多药耐药的相关性。方法研究对象为肺癌细胞NCI-H446,以顺铂为诱导药物,建立多药耐药细胞系NCI-H446/CDDP;应用反义核酸技术抑制NCI-H446/CDDP细胞Sorcin的表达建立转染细胞,为反义核酸组,同时设空白对照组。通过RT-PCR及Western-blot分别检测各组细胞中Sorcin在核酸及蛋白水平的表达;MTT法测定NCI-H446组、反义核酸组、NCI-H446/CDDP组3组细胞在不同化疗药物DDP、VCR、ADM、VP-16作用下生存率;用Pearson相关分析Sorcin高表达与肺癌细胞株NCI-H446多药耐药的相关性。结果各组细胞中Sorcin在核酸及蛋白水平的表达,NCI-H446/CDDP组与空白对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05),NCI-H446组、反义核酸组、NCI-H446/CDDP组各组间比较均具有显著性意义(P<0.05);NCI-H446/CDDP细胞中Sorcin在核酸及蛋白水平均明显高于NCI-H446细胞,分别为NCI-H446细胞的9.81倍和7.67倍。各组细胞在不同化疗药物作用下IC50:NCI-H446/CDDP组>反义核酸组>NCI-H446组,各组间比较差异具有显著性意义(P<0.05)。Pearson相关提示:Sorcin核酸及蛋白水平的表达与在不同化疗药物作用下各组细胞的IC50值呈负相关(P<0.05)。结论 Sorcin蛋白的高表达与肺癌多药耐药相关,抑制Sorcin蛋白的表达可以逆转肺癌多药耐药性。     

多药耐药相关蛋白与胃癌的研究

多药耐药相关蛋白（multidrug resistance-associated protein,MRP）是1992年发现的耐药基因,它的高表达与多种实体瘤的多药耐药有关,有研究认为MRP的高表达也反映肿瘤侵袭转移的生物学行为[1].现就多药耐药相关蛋白在胃癌中的研究进行综述.     

胃癌多药耐药的研究

胃癌治疗方法很多,化疗是其中之一.然而由于肿瘤的耐药,影响了疗效.为此我们对可能发生的机制进行阐述. 肿瘤的耐药性可分为原药耐药和多药耐药两种.前者是指仅对诱发耐药的原药产生耐受,对其它药物无交叉耐药.多药耐药则是指由一种药物引发,同时对其它多种结构和作用机制完全不同的药物产生交叉耐药,从而导致联合化疗的失败.     

胃癌多药耐药基因1表达及其与生物学行为的关系

目的了解胃癌多药耐药基因1(mdr1)的表达及其与生物学行为的关系。方法应用现代信息技术,收集有关文献进行综合分析。结果正常和病理胃均可表达mdr1,胃癌的mdr1表达水平最高。胃癌的mdr1表达和胃癌对抗肿瘤药物敏感性及病人的生存期、生存率呈负相关,和组织分化、肿瘤浸润、分期及转移的关系不肯定,和肿瘤发生部位、大小、组织类型、患者年龄、性别之间无相关性。结论胃癌mdr1基因表达和生物学行为相关。     

多药耐药相关蛋白和肺耐药蛋白在胃癌中的表达

目的：检测多药耐药相关蛋白（MRP）和肺耐药蛋白（LRP）在胃癌组织中的表达，并探讨其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学法，检测52例患者胃癌组织和30例慢性胃炎组织中MRP及LRP的表达。结果：在52例胃癌组织和30例胃炎组织中，MRP的阳性表达率分别为32.69%（17例）、10％（3例），LRP的阳性表达率分别为63.46%（33例）、33.33%（10例），差异均有显著性意义（P＜0.05）。MRP的表达与胃癌病理分期和分化程度相关（P＜0.05）；LRP的表达与淋巴结转移相关（P＜0.05）。两蛋白在胃癌中的表达呈正相关（P＜0.05）。结论：MRP和LRP在胃癌组织中均有较高的表达，两者均可能是胃癌原发性多药耐药（MDR）的一种重要机制，且两者可能具有协同作用；临床上检测该两蛋白的表达，有利于为胃癌患者制定更加合理的综合治疗方案。     

多药耐药相关蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶π、拓扑异构酶Ⅱα及环氧合酶-2在卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌患者耐药和预后的关系

目的 探讨多药耐药相关蛋白（MRP）、谷胱甘肽-S-转移酶π（GST-π）、DNA拓扑异构酶Ⅱα（TopoⅡα）及环氧合酶-2（COX-2）在卵巢癌组织中的表达情况,及其与耐药及预后的关系。方法选择北京协和医院2000至2004年间收治的上皮性卵巢癌患者60例,肿瘤细胞减灭术后经铂类和紫杉醇一线化疗6-9个疗程,随诊资料完整。其中浆乳癌35例,黏液性囊腺癌2例,透明细胞癌11例,移行细胞癌4例,子宫内膜样癌8例,患者平均年龄51．2岁。采用免疫组化法检测卵巢癌标本中MRP、GST-π、TopoⅡα及COX-2的表达情况,并分析其表达与卵巢癌患者耐药和预后的关系。结果MRP,GST-π,Topoπ和COX-2在卵巢癌标本中的阳性表达率分别为26．7％、93．3％、61．7％和78．3％。透明细胞癌组织中MRP的阳性表达率显著高于非透明细胞癌（54．5％V820．4％,P〈0．05）;Ⅲ-Ⅳ期组织中Topoπ的阳性率显著低于Ⅰ～Ⅱ期（56．6％V878．6％,P〈0．05）。将MRP阳性、GST-π强阳性、TopoⅡα阴性和COX-2强阳性表达作为4个与复发、耐药及预后不良有关的危险因素。复发组具有≥2个危险因素者显著多于未复发组（81．6％V854．5％,P〈0．05）。化疗耐药组中具有≥2个危险因素者显著多于化疗敏感组（100％V855．6％,P〈0．01）。具有≥2个危险因素者和危险因素不足2个者的3年生存率分别为69．9％和91．7％（P〉0．05）。结论MRP、GST-π、TopoⅡα及COX-2在卵巢癌组织中呈中等到高等程度的表达。具有MRP阳性、GST-π强阳性、TopoⅡα阴性和COX-2强阳性中的2个以上危险因素可作为预测卵巢癌患者复发和耐药的重要指标。     

胃癌细胞多药耐药基因相关蛋白和p53表达及其相互关系

目的：研究胃癌细胞中多药耐药基因相关蛋白（multidrug resistance-associated protein,MRP)和抑癌基因p53的表达以及与胃癌生物学行为之间的关系。方法：用免疫组织化学方法对40例胃癌组织标本MRP及p53表达进行检测。结果：MRP阳性率为45％（18／40）。MRP阳性病例中p53阳性率为44．4％（8／18）。MRP阴性病例中p53阳性率为40．8％。MRP的表达与胃癌大体类型、组织类型、浸润深度、淋巴转移、远隔转移等因素无关。与p53的表达之间关系无显著意义。结论：MRP在胃癌组织中有较高水平的表达，其表达水平与胃癌生物学行为特点无关。p53对MRP的表达无调控作用。     

多药耐药相关蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的　探讨胃癌组织中多药耐药相关蛋白 (MRP)的表达与预后以及预测辅助化疗疗效的关系。方法　采用S -P免疫组化法检测 6 4例胃癌组织和 34例癌旁组织中MRP的表达水平。分析 4 5例术后化疗疗效与MRP表达的关系。结果　MRP在胃癌组织中表达阳性率 34.4 % ,与癌旁组织相比有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;胃癌组织中MRP阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤部位及大小、淋巴结转移及浸润深度、病理分化程度和临床分期无显著相关性 (P >0 .0 5 ) ,MRP表达阳性与 5年生存率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;在行术后辅助化疗的患者中 ,MRP表达阳性与生存率间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　MRP在胃癌组织中呈异常高表达 ,与癌旁组织有显著性差别。提示胃癌中存在MRP介导的原发性耐药。     

人结肠上皮蛋白质表达谱的建立

目的:建立人正常结肠上皮的蛋白质表达谱。方法:应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离20例人正常结肠上皮的总蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorp-tion/ionizationtimeofflightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)和电喷雾串联质谱(electrosprayionizationtan-demmassspectrometry,ESI-Q-TOF)鉴定其表达的蛋白质,利用生物信息学资源对所鉴定蛋白质的功能和亚细胞定位等进行分析。结果:建立了人类正常结肠上皮蛋白质的2-DE参考图谱,2-DE图谱展示了1020±50个蛋白质点,代表162种非冗余蛋白质的204个蛋白质点被鉴定,其中37种蛋白质存在翻译后修饰,并按功能和亚细胞定位对162种蛋白质进行了初步分类,这些数据可从作者的网站(http://www.xyproteomics.org)上进行查询。结论:首次建立了人正常结肠上皮的蛋白质表达谱,为研究结肠上皮的生理功能和病理过程提供了有意义的资料。     

Survivin反义寡核苷酸治疗耐顺铂人肺腺癌细胞裸鼠移植瘤的实验研究

目的:探讨以存活素基因(survivin)为靶点反义基因治疗耐顺铂(CDDP)人肺腺癌移植瘤的可行性。方法:常规体外培养A549/CDDP细胞,采用皮下注射法建立移植瘤裸鼠动物模型。以脂质体包裹的survivin反义寡核苷酸(ASODN)直接移植瘤内注射,观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率和肿瘤生长指数。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学分别检测survivinmRNA和蛋白的表达。结果:单用ASODN组的抑瘤率和肿瘤生长指数分别为35.4%和4.230±0.886,和空白对照组比较,抑瘤率较高,肿瘤生长减缓(P<0.05)。而ASODN联合CDDP组的抑瘤率和肿瘤生长指数则分别为63.7%和1.700±0.436,与CDDP组、Lip与CDDP联用组及单用ASODN组比较均有统计学差异(P<0.05)。RT-PCR半定量和免疫组织化学显示,ASODN组和ASODN联合CDDP组肿瘤组织中survivinmRNA及其蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:Survivin反义寡核苷酸可以抑制耐顺铂人肺腺癌移植瘤的生长,可能主要与其特异性下调survivin基因表达有关。特异性靶向survivin反义寡核苷酸可用于肺癌顺铂耐药的辅助治疗,其临床实际应用有待进一步研究。     

经导管封堵治疗儿童动脉导管未闭

目的:观察不同封堵器治疗儿童动脉导管未闭(patentductusarteriosus,PDA)的结果。方法:体检及经胸二维超声心动图(trans-thoracicechocardiograph,TTE)诊断为PDA的儿童,用原所报道过的方法作心导管检查、降主动脉造影及PDA封堵术。0.7~14岁的儿童行封堵术者78例,其中行螺旋弹簧(coil)治疗者16例;行Amplatzerductoccluder(ADO)治疗者9例;行国产PDA封堵器治疗者53例。结果:78例封堵成功,术后次日TTE检查,76例PDA完全堵塞,2例用coil堵塞者有少量残余分流。术前64例左室舒张末期内径增大者术后明显缩小。用ADO和PDA封堵器堵塞的62例无残余分流。3月末TTE检查,77例PDA完全堵塞,左室内径完全正常,1例用coil堵塞者仍有少量残余分流,且持续4年以上。追踪3~80平均(30±8)月,77例PDA完全堵闭,左室大小正常,降主动脉、左肺动脉口无明显狭窄,无封堵器械脱落。结论:用ADO,国产PDA封堵器和coil可安全有效地治愈儿童PDA。因创伤小,并发症少,远期无不良反应,可替代开胸手术。     

RNA干扰抑制MDR1表达并逆转Bel7402/5-Fu肝癌细胞耐药性的研究

目的：研究小片段RNA干扰对肝癌耐药细胞系Bel7402／5-Fu中多药耐药基因（muhidrug resistance 1,MDR1）及其蛋白产物P-gP表达的抑制作用和逆转其耐药性的效果。方法：合成针对MDR1启动子区域的RNA干扰小片段,转染肝癌耐药细胞Bel7402／5-Fu。通过RT-PCR和Westem blot方法,在mRNA和蛋白水平评价RNA干扰对MDR1表达的影响。MTT法检测RNA干扰逆转Bel7402／5-Fu细胞耐药性的效果,按实验组和对照组细胞的半数抑制剂量（IC50）计算RNA干扰对细胞耐药倍数的改变和RNA干扰组细胞的耐药逆转倍数。以流式细胞仪比较各组细胞在相同浓度化疗药物作用时细胞的凋亡情况。结果：在耐药肝癌细胞Be17402／5-Fu中,RNA干扰明显抑制了MDR1 mRNA和蛋白产物P-gP的表达水平,其表达仅为对照组细胞的22．55％和25．49％（P〈0．01）。在相同浓度化疗药物的作用下,RNA干扰组Bel7402／5-Fu细胞凋亡比例显著高于对照组（P〈0．01）,表明细胞耐药性显著下降,对5-Fu的耐药逆转倍数为14．88倍。结论：肝癌耐药细胞Bel7402／5-Fu中,RNA干扰对MDR1 mRNA及其蛋白产物P-gP的表达水平有显著抑制作用,具有良好的逆转耐药性的效果。     

重症监护病房医院感染病原菌分布及其耐药性分析

目的：了解重症监护病房（ICU）医院感染病原菌及其药敏特征,为临床抗感染治疗提供依据。方法：对我院2002年至2004年在ICU发生的感染送检标本所分离的细菌及药敏特征进行回顾性分析。结果：ICU的医院感染病原菌以革兰阴性杆菌为多（占48．2％）,其次为革兰阳性菌（占43．3％）和真菌（占8．5％）;革兰阴性杆菌以铜绿假单胞菌和大肠杆菌为主,革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌为主;革兰阴性杆菌对4种及4种以上的抗生素的耐药率超过40％,耐苯唑西林葡萄球菌对7种常用抗菌素耐药率均在50％以上;大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）与头孢菌素酶（AmpC酶）检出率分别为34．0％,30．7％和13．2％,23．1％;耐苯唑西林葡萄球菌检出率为66．3％,其对大多数常用抗菌素均显示较高的耐药率（〉55％）,与非耐药株有统计学差异。结论：ICU中医院感染虽以革兰阴性杆菌感染为主,但革兰阳性球菌仍是重要的致病菌;抗生素耐药率逐渐升高,且具有高耐药与多重耐药的特点,产ESBLs与AmpC酶是革兰阴性杆菌产生耐药性的重要因素,耐苯唑西林葡萄球菌对抗生素耐药率高。     

从治疗干预的角度评价胰岛素抵抗与内皮功能紊乱的相互关系

内皮功能障碍可导致兼具胰岛素抵抗特征的心血管疾病。胰岛素抵抗是2型糖尿病、肥胖以及代谢综合征等一系列代谢紊乱的标志,而这些代谢紊乱具有内皮功能障碍的特征。促进葡萄糖处理的胰岛素代谢反应可被内皮中胰岛素的血管反应增强以刺激血管扩张剂NO的产生。事实上,由胰岛素刺激所产生的葡萄糖摄取量的增加中,25％～40％可通过骨骼肌中NO-依赖性血流的增加来解释。与NO产生相关的内皮中3-磷酸激酶依赖的胰岛素信号通路,与骨骼肌中促进葡萄糖摄取的代谢通路有着惊人的相似。其他已经明确的非代谢性旁路调节内皮中血管收缩药内皮因子-1（ET-1）的分泌。代谢性胰岛素抵抗具有在3-磷酸激酶依赖信号通路特异性损坏的特征,在内皮中,这也许会引起NO产生和ET-1分泌的失衡,从而导致血流减少继而使胰岛素抵抗加剧。在动物和人类中开展的治疗性干预证明,改善内皮功能可改善胰岛素抵抗,同时改善胰岛素敏感性可改善内皮功能障碍。总之,细胞学、生理学、临床医学以及流行病学研究都强烈支持内皮功能障碍与胰岛素抵抗存在相互关系,这种关系有助于将心血管疾病和代谢疾病联系起来。本综述将讨论内皮功能障碍和胰岛素抵抗的相关病理生理学机制,并重点强调这个机制对代谢综合症的冶疗意义。     

多囊卵巢综合征患者腹腔液瘦素水平与有关内分泌激素的关系

目的：研究多囊卵巢综合征（PCOS）相关性不孕患者腹腔液和血清中瘦素水平，并探讨瘦素与有关内分泌激素的关系。方法：应用放射免疫法（RIA）测定20例PCOS性不孕患者和20例输卵管性不孕患者腹腔液与血清中瘦素、胰岛素、胰岛素抗体（Ins抗体）、睾酮（T）、雌二醇（E2）及孕酮（P）水平。结果：PCOS组腹腔液中瘦素、胰岛素、T、Ins抗体水平均显著高于对照组（除Ins抗体P=0．01外，其他指标均P〈0．01）。PCOS组血清中瘦素、T显著高于对照组（P〈0．05）。在PCOS患者中，体质量指数（BMI）≥23kg／m^2组患者腹腔液与血清中瘦素、胰岛素、T水平均显著高于BMI〈23kg／m^2组（P〈0．01）。相关分析表明：PCOS患者腹腔液与血清中瘦素水平与BMI，胰岛素，T及Ins抗体呈正相关，与E2呈负相关，与P无明显相关。多元逐步回归分析显示对瘦素水平的影响因素从大到小依次为BMI，胰岛素，T和E2。结论：PCOS患者腹腔液与血清中均存在瘦素水平异常，并伴有胰岛素，T，Ins抗体等的异常，BMI是影响瘦素水平的主要因素。     

髂内动脉栓塞化疗在腹会阴联合切除术中的应用

目的：对髂内动脉栓塞化疗在直肠癌腹会阴联合切除术的应用进行前瞻性研究,并探讨其近、远期效果。方法：113例低位直肠癌病人,随机分为两组。治疗组68例,在腹会阴联合切除术中,应用抗癌药明胶海绵栓塞双侧髂内动脉;对照组45例,行腹会阴联合切除术。观察并比较两组间的手术出血量、手术时间、局部复发率、5年生存率。结果：治疗组与对照组比较,手术时间及切口感染发生率差异无统计学意义（P〉0．05）;治疗组术中出血量、局部复发率明显低于对照组,而5年生存率则明显提高（P〈0．05）。结论：在直肠癌腹会阴联合切除术中,髂内动脉栓塞化疗是一种安全有效的治疗方法,可显著提高病人的近、远期治疗效果。     

血糖对血管内皮功能的影响及相关影响因素的分析

目的：比较新诊断糖耐量异常（IGT）、2型糖尿病（T2DM）患者和正常对照血管内皮依赖性舒张功能（FMD）并探讨不同血糖水平时FMD的影响因素。方法：新诊断IGT和T2DM患者119人根据血糖高低分为3组：IGT组34人、DM1组（空腹血糖7～9mmol／L）52人、DM2组（空腹血糖9～10mmol／L）33人及正常对照组（NC）25人。所有受试者均进行血糖、血脂、胰岛素、糖化血红蛋白的检测,随后肱动脉超声检查评价FMD。结果：IGT组、DM1组、DM2组及NC组间FMD的差异有统计学意义（P=0．008）。偏相关分析显示FMD与胰岛素抵抗指数（HOMA—IRI）、血糖差值（DPG）、空腹血糖（FPG）、餐后血糖（PPG）呈高度负相关（P〈0．01）,与HbA1c呈负相关（P〈0．05）;多元逐步回归分析显示与FMD有关的入选因子,在IGT组为WHR和HOMA—IRI;DM1组为HOMA—IRI,PPG和DPG;在DM2组为FIG和HOMA—β。结论：新诊断IGT和T2DM患者FMD与血糖尤其是血糖的波动相关;不同血糖水平时FMD的影响因素不同。     

吉西他滨联合外照射诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的：研究吉西他滨联合外照射诱导人乳腺癌细胞系MCF-7细胞产生凋亡的作用。方法：采用MTT法检测吉西他滨（D）,外照射（R）,吉西他滨和外照射（R＋D）分别对MCF-7细胞的抑制作用,流式细胞仪检测各组细胞凋亡指数,电子显微镜观察MCF-7细胞凋亡的形态学特征,结果：细胞生长抑制率随吉西他滨作用浓度的增加而逐渐增大;（R＋D）组与D组及R组凋亡指数比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：吉西他滨能诱导人乳腺癌细胞产生凋亡,并能明显增强放疗对MCF-7细胞凋亡的诱导作用。