实验性糖尿病大鼠早期视网膜电图的变化

目的: 观察实验性糖尿病早期对大鼠视网膜电图的影响. 方法: 链脲佐菌素诱导的糖尿病组大鼠和日龄相匹配的对照组正常大鼠,采用国际临床视觉电生理学会推荐的标准化方案,在糖尿病早期阶段(5 wk内)对其进行杆细胞反应、最大反应、振荡电位、明适应视网膜电图和20 Hz闪烁反应5个项目的检查. 结果: 在诱导糖尿病前和建模后1 wk时,糖尿病组大鼠与对照组相比未发现视网膜电图的异常;在建模后2 wk和5 wk时,糖尿病组杆细胞反应b波、最大反应 b波、振荡电位O2波和明适应视网膜电图b波的潜伏期都比对照组相应各波的潜伏期显著延长;两组大鼠各波的幅值始终未发现显著改变. 结论: 糖尿病大鼠在早期阶段杆细胞反应b波、最大反应b波、振荡电位O2波和明适应视网膜电图b波的潜伏期显著延长,这有可能成为监测糖尿病视网膜病变早期发展的指标.     

糖尿病早期大鼠视网膜功能损伤及白藜芦醇防护作用研究

目的 探讨糖尿病早期大鼠视网膜功能的损伤及白藜芦醇的防护作用.方法 采用链脲佐菌素一次性腹腔注射SD大鼠建立大鼠糖尿病模型,随机分为正常对照组和糖尿病组,低剂量(5 mg/kg/d)和高剂量(10mg/kg/d)白藜芦醇干预正常对照组和糖尿病组,分别在实验1、3、5、7月测定视网膜电图.结果 糖尿病早期视网膜scotopic 0.01 ERG b波振幅、scotopic 3.0 ERG a波和b波振幅、scotopic 3.0OPS OP2潜时和振幅发生改变,低剂量和高剂量白藜芦醇干预对上述视网膜功能损伤有明显抑制效应(P＜0.05).结论 白藜芦醇对糖尿病早期大鼠视网膜功能损伤有防护作用.     

自噬在早期糖尿病大鼠视网膜神经病变中的作用

目的 探索自噬在糖尿病大鼠视网膜损伤中的表达变化及其与视网膜神经节细胞(RGC)损伤的相关性.方法 共有60只Wistar大鼠经链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病大鼠模型.造模成功后,分别在糖尿病0、4、12周检测RGC数量、视网膜电图(ERG)、视网膜血管形态学变化,Western blot法检测自噬标记物LC3b-Ⅱ与Beclin-1的蛋白表达,免疫组化法检测LC3b-Ⅱ在视网膜上的表达部位.结果 糖尿病造模成功后,视网膜RGC数在第12周时减少至0周时的(88.6±2.2)%,差异有统计学意义(P<0.05).并且ERG的b波以及总振幅在第4周时就出现降低,差异有统计学意义(P<0.01).Western blot检测显示,糖尿病4周和12周大鼠视网膜中的LC3b-Ⅱ和Beclin-1表达均逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化方法显示LC3b-Ⅱ在各时期糖尿病大鼠视网膜中的视网膜神经节细胞层表达阳性.结论 糖尿病视网膜病变中自噬参与了RGC的损伤.     

糖尿病大鼠视网膜电图改变及生长抑素水平变化的研究

目的:观察糖尿病大鼠早期视觉电生理改变及生长抑素的水平动态变化。方法:将30只大鼠随机分为正常对照组和糖尿病实验组。腹腔注射链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型。分别测定两组大鼠的视网膜电图改变及生长抑素的变化,并对各指标进行统计学分析。结果:成功建立大鼠糖尿病模型。建模后1周糖尿病组杆细胞反应及最大反应的a波和b波的潜伏期都比对照组显著延长,差异有统计学意义(P<0.05),但振幅无改变,生长抑素水平下降,差异有统计学意义(P<0.05)。建模后6周时糖尿病组除潜伏期持续延长外,振幅也开始下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠早期即出现杆细胞反应及最大反应的a波和b波的潜伏期显著延,振幅明显下降,生长抑素水平亦明显下降。     

生长抑素对糖尿病大鼠早期视网膜电图的影响

目的：探讨生长抑素对糖尿病(DM)大鼠早期视觉电生理改变的影响,阐明生长抑素对DM大鼠早期视网膜病变的治疗作用。方法：选取20只Wistar雄性大鼠作为研究对象,腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导建立DM大鼠模型后,随机分为生长抑素治疗组和模型对照组,每组10只。生长抑素治疗组大鼠腹腔注射生长抑素10 μg/kg/d,连续8周,模型对照组大鼠给予同体积生理盐水。另取Wistar雄性大鼠10只作为正常对照组。分别测定各组大鼠血糖及视网膜电图改变,并对各指标进行统计学分析。结果：与模型对照组比较,生长抑素治疗组大鼠8周时血糖水平下降 (P<0.05)。与正常对照组比较,生长抑素治疗组与模型对照组大鼠1、2、4、6和8周时杆细胞反应、最大反应的a波和b波的潜伏期均延长(P<0.05),幅值于第6和8周时下降(P<0.05);与模型对照组比较,生长抑素治疗组大鼠8周时杆细胞反应、最大反应的a波和b波的潜伏期缩短(P<0.05),生长抑素治疗组各观察时间点幅值均无改变(P>0.05)。结论：生长抑素对于DM大鼠早期视网膜病变具有治疗作用。     

电镜观察糖尿病模型大鼠神经网膜的超微结构

为观察糖尿病大鼠早期视网膜神经细胞的损害是否早于视网膜微循环改变 ,用链脲佐菌素 (STZ ,6 0mg/kg)建立糖尿病动物模型 ,分别于模型建立后 1周、2周、1月处死大鼠 ,电镜观察大鼠视网膜及其微血管的变化。结果 :与正常对照组比较 ,糖尿病大鼠于模型建立后 1周、2周 ,其神经网膜神经细胞和视网膜微血管无明显改变 ;模型建立后 1月 ,其视网膜色素上皮层、神经网膜微血管基底膜和周细胞无明显改变 ,但其神经网膜从外丛状层至神经纤维层有明显变化 ,表现为线粒体数目减少 ,线粒体肿胀 ,嵴变短、消失和髓样变性。神经纤维层和内、外网状层细胞突起水肿 ,在神经纤维层尤其明显 ,在神经节细胞层可见暗细胞形成。由于神经纤维层细胞突起水肿明显 ,压迫其周围微血管 ,导致微血管管腔狭窄 ,甚至闭锁 ,但微血管内皮细胞及基底膜未见异常。结果提示 :糖尿病早期大鼠在视网膜神经细胞损害已发生时 ,视网膜微血管内皮细胞和基底膜超微结构未见异常 ,神经网膜神经细胞的损害可能是糖尿病视网膜病变 (DR)的早期表现。     

Lazaroid对早期糖尿病大鼠视网膜的保护作用

目的探讨Lazaroid对早期糖尿病大鼠视网膜的保护作用。方法20只SD大鼠采用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病动物模型,10只于成模2周后经尾静脉注射Lazaroid进行干预(糖尿病Lazaroid干预组),其余10只不予干预(糖尿病不干预组)。另设立不建模且不干预的空白对照组(n=10)。分别于实验前后进行视网膜电流图检查,对视网膜组织切片进行透射电子显微镜观察。结果糖尿病Lazaroid干预组和空白对照组在实验前后的暗适应最大电反应b波、振荡电位(OPs)振幅值差异无统计意义(P>0.05)。糖尿病不干预组实验前后的暗适应最大电反应b波、OPs振幅值明显下降(P<0.05);与空白对照组比较,成模4周后的糖尿病不干预组大鼠的神经节细胞内出现线粒体的改变;而同期糖尿病Lazaroid干预组大鼠视网膜未出现明显神经节细胞的改变。结论糖尿病动物模型在建立的早期已经出现视觉电生理的变化,并且有神经细胞超微结构的改变;全身使用Lazaroid对早期糖尿病大鼠模型视网膜神经元具有保护作用。     

糖尿病大鼠视网膜超微结构的改变

目的:观察7个月病程的糖尿病大鼠视网膜毛细血管及视网膜神经节细胞的组织病理学改变.方法:链脲佐菌素诱导实验性糖尿病大鼠模型,在模型建立7个月后摘取大鼠眼球,制作视网膜病理切片和视网膜消化铺片,在光镜和透射电镜下观察视网膜毛细血管及视网膜神经节细胞的形态改变.结果:光镜下大鼠视网膜各层组织排列极度紊乱,毛细血管极度扩张,周细胞核固缩,内皮细胞增生,出现无细胞毛细血管、影周细胞及内皮细胞凋亡等糖尿病视网膜病变的特征性改变,视网膜神经纤维层明显水肿.神经节细胞数目减少,胞核固缩,染色质边缘聚集,内外颗粒层排列紊乱.电镜下视网膜毛细血管内皮细胞明显肿胀,胞体变圆,突向管腔,线粒体肿胀,空泡化,基底膜增厚,视网膜神经节细胞胞体变形,核明显同缩,核膜消失,胞浆空泡化,线粒体肿胀,细胞表面突起减少,多聚核糖体及粗面内质网显著减少.结论:糖尿病大鼠在视网膜微血管病变的同时,视网膜神经节细胞也发生损害.     

Lazaroid对早期糖尿病大鼠视网膜的保护作用

目的 探讨Lazaroid对早期糖尿病大鼠视网膜的保护作用.方法 20只SD大鼠采用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病动物模型,10只于成模2周后经尾静脉注射Lazaroid进行干预(糖尿病Lazaroid干预组),其余10只不予干预(糖尿病不干预组).另设立不建模且不干预的空白对照组(n=10).分别于实验前后进行视网膜电流图检查, 对视网膜组织切片进行透射电子显微镜观察.结果 糖尿病Lazaroid干预组和空白对照组在实验前后的暗适应最大电反应b波、振荡电位(OPs)振幅值差异无统计意义(P>0.05).糖尿病不干预组实验前后的暗适应最大电反应b波、OPs振幅值明显下降(P<0.05);与空白对照组比较,成模4周后的糖尿病不干预组大鼠的神经节细胞内出现线粒体的改变;而同期糖尿病Lazaroid干预组大鼠视网膜未出现明显神经节细胞的改变.结论 糖尿病动物模型在建立的早期已经出现视觉电生理的变化,并且有神经细胞超微结构的改变;全身使用Lazaroid对早期糖尿病大鼠模型视网膜神经元具有保护作用.     

视网膜神经节细胞与糖尿病视网膜病变

糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy, DR)是糖尿病最常见的并发症.多年来对其发病机理的研究主要集中在视网膜毛细血管微循环的改变上,对视网膜神经组织的研究较少.20世纪80年代中期已有学者提出DR的主要发病机理可能不仅是视网膜血管本身,而且与血管周围的神经元或神经胶质组织关系更为密切.视网膜的神经元和/或神经胶质可能对长期的高血糖影响特别敏感,微血管损害就成为其代谢紊乱的继发结果[1].近年大量临床电生理学研究表明,糖尿病患者在DR临床发病前,起源于神经网膜内层的振荡电位视网膜电图波振幅下降,潜伏期延长,其异常早于血-视网膜屏障通透性异常.应用持续固定聚焦视网膜电图研究发现,DR病变前期和/或早期,视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells ,RGCs)和双极细胞功能已发生异常.实验动物研究也显示,发生DR前,视网膜神经节细胞和苗勒氏(Müller)细胞已出现凋亡[2].有学者推测,糖尿病因耗尽了神经元所依赖的神经营养因子而导致DR的发生[3],神经网膜、神经细胞与DR的关系探讨成为目前DR发病机制的研究热点.本文就与DR神经网膜关系密切RGCs的研究现状作一综述.     

糖尿病患者闪光ERG、OPs和图形VEP的联合检测

探讨糖尿病患者早期F-ERG、OPs和P-VEP的改变情况。方法本实验分三组①观察A组单纯型糖尿病视 网膜病变(DR)患者22例(44只眼);②观察B组无DR的糖尿病患者42例(84只眼);③对照组正常受检查32例(64只眼)。所有 受检者均常规检测瞬态F-ERG、OPs和P-VEP,记录各项检测指标。结果与正常组比较①观察A组用F-ERG、OPs和P- VEP检测均发现有显著差异(P＜0.05);②观察B组用F-ERG检测未发现有显著差异(P＞0.05),用OPs检测发现第1、2子波波 幅明显降低(P＜0.05),各子波的潜伏期明显延长(P＜0.05)。用P-VEP检测发现P100潜伏期延长(P＜0.05)、波幅降低(P＜ 0.05)。结论用OPs和P-VEP联合检测,可以早期发现糖尿病时视网膜的损害。     

一氧化氮合酶在糖尿病大鼠视网膜中表达模式的研究

目的 研究一氧化氮合酶(NOS)在8周糖尿病大鼠视网膜的表达,探讨其与一氧化氮在糖尿病视网膜病变(DR)中可能的分子作用机制.方法 采用限制片段差异显示PCR(RFDD-PCR)技术建立正常和8周糖尿病大鼠视网膜基因表达谱,经生物信息学分析两者差异,初步确定NOS三种亚型-eNOS、nNOS和iNOS为DR相关基因,并以半定量RT-PCR和免疫组化方法进行验证.结果 RFDD-PCR结果显示,糖尿病组eNOS和nNOS表达下调,iNOS表达上调.RT-PCR结果显示,糖尿病组eNOS和nNOS表达比正常组明显降低(eNOS:0.23±0.03,0.32±0.03,P＜0.05;0.25±0.02,0.36±0.02,P＜0.05),iNOS比正常组明显增高(0.27±0.02,0.20±0.03,P＜0.05).免疫组化结果显示,正常组eNOS、nNOS和iNOS阳性细胞均见于内核层(INL)和节细胞层(GCL),eNOS阳性细胞也分布于血管内皮层;糖尿病组eNOS和nNOS阳性细胞较正常组明显减少(eNOS:14.33±3.19,22.13±3.60,P＜0.05;nNOS:21.87±3.62,34.40±7.09,P＜0.05),iNOS较正常组明显增多(17.60±2.58,11.73±2.70,P＜0.05).结论 eNOS、nNOS和iNOS表达变化与DR发生发展有关.     

糖尿病患者22例眼的电生理变化研究

目的:观察糖尿病患者图形视觉诱发电位(PVEP)、图形视网膜电图(PERG)的改变。方法:对10例(20只眼)正常人及22例(37只眼)糖尿病患者(无糖尿病视网膜病变8眼,单纯型糖尿病视网膜病变21眼,增殖型糖尿病视网膜病变8眼)进行PVEP、PERG检测。结果:糖尿病患者与正常对照组PVEP之间的差异有显著性(P<0.001),表现为P100波潜伏期延长和幅值降低;糖尿病患者与正常对照组、PDR组与其他各组PERG之间的差异均有显著性(P<0.001),表现为q波潜伏期延长和幅值降低,糖尿病组PVEP的P100波潜伏期延长和糖尿病患者空腹血糖呈正相关。结论:联合检测PVEP、PERG对糖尿病患者早期诊断和预后评估有一定的临床应用价值。PERG能比PVEP更好的反映糖尿病视网膜病变的损害程度。     

酒精对大鼠图形视网膜电图和视觉诱发电位的影响

目的：观察酒精对大鼠图形视网膜电图(PERG)、视觉诱发电位(PVEP)的影响及其剂量依赖关系，分析其对视功能损害机制。方法：33只大鼠随机分为对照组、低剂量酒精组、中等剂量组、高剂量组。首先记录60min内正常大鼠PERG、PVEP正常值，然后观察3种剂量酒精对大鼠PERG、PVEP影响。结果：低剂量酒精对大鼠PVEP—P100波潜时无明显延长(P〉0．05)。中等剂量酒精使大鼠PERG—q波及PVEP—P100波潜时均明显延长(p〈0．001)，且前者延长程度较后者显著(P〈0．005)。高剂量酒精对PVEP—P100波潜时延长(P〈0．001)更显著，且呈剂量依赖关系(P〈0．01)。结论：低剂量酒精对视功能无明显影响，中、高剂量酒精对视功能具有损害作用，并呈量效关系。酒精对视网膜损害程度较球后视功能损害显著。     

贞清胶囊对1型糖尿病大鼠周围神经病变改善作用的初步研究

目的：观察贞清胶囊对1型糖尿病大鼠周围神经病变的影响，并初步探讨其作用机制。 方法：40只雄性Wistar大鼠。大剂量链脲佐菌素尾静脉注射造成1型糖尿病动物模型。成模大鼠随机分成3组：模型组、氯基胍组及贞清胶囊组，另设正常对照组。治疗10周后，观察治疗前后体质量和血糖变化以及治疗后血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）和神经电生理变化。并留取坐骨神经标本做形态学观察。 结果：贞清胶囊能显著降低1型糖尿病大鼠血清MDA水平（P〈0，01）；与模型组比较，贞清胶囊组的坐骨神经传导速度明显加快（P〈0，05），潜伏期缩短（P〈0，01），波幅增加（P〈0，05）；贞清胶囊治疗后坐骨神经髓鞘染色表现为部分神经纤维节段性脱髓鞘。与模型组的大部分神经纤维脱髓鞘相比有改善。 结论：贞清胶囊能明显改善糖尿病大鼠的神经电生理功能，改善周围神经的病理变化，其机制有可能是通过清除自由基，抗脂质过氧化作用来实现。     

色素上皮衍生因子对早期糖尿病大鼠视网膜谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响

目的 观察色素上皮衍生因子(PEDF)对糖尿病大鼠视网膜谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)的影响,探讨PEDF视网膜神经保护作用的机制.方法 链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射建立糖尿病模型,随机分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病PEDF干预组和干预对照组.PEDF干预组于成模后第4周玻璃体腔注射重组大鼠PEDF...     

链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病合并脑缺血损伤模型的建立

目的：建立稳定的大鼠糖尿病合并局灶性脑缺血损伤模型,并对有关建模成功的标准进行探讨与分析。方法：40只健康雄性SD大鼠随机分为正常饲养假手术组,正常饲养脑缺血再灌注损伤模型组,糖尿病脑缺血再灌注损伤模型组。糖尿病模型组一次性腹腔注射链脲佐菌素60 mg·kg ^-1建立I型糖尿病大鼠模型,分别在造模后1,4周检测各组大鼠的体质量和空腹血糖。在腹腔注射(ip) STZ后4周采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血30 min,复灌注24 h,进行神经功能评分,测定脑梗死体积并计算梗死体积百分比。结果：腹腔注射链脲佐菌素4周后,糖尿病模型组与正常组大鼠相比,体质量显著下降（P<0.001）,血糖值显著升高（P<0.001）。缺血复灌注损伤手术后,糖尿病模型组与正常组大鼠相比,再灌注损伤加重,脑梗死体积百分比显著增加（P<0.001）。模型成功率为73%。结论：本实验方法制备的大鼠糖尿病合并局灶性脑缺血损伤模型成功率较高,具有较好的重复性和稳定性。     

糖尿病小鼠玻璃体视网膜中Opticin的表达

目的:观察opticin在1型、2型糖尿病小鼠及正常小鼠玻璃体视网膜mRNA和蛋白表达的变化。方法:50只雄性小鼠随机分为柠檬酸钠缓冲液对照组(A)10只,链脲佐菌素诱导1型糖尿病组(B)10只,2型糖尿病组30只,并将其随机分为1,2,3月组(C、D、E),各10只。于1,2,3月后处死2型糖尿病组小鼠,3月后处死1型糖尿病组小鼠和柠檬酸钠缓冲液对照组,取玻璃体视网膜组织,保存于液氮中。实时聚合酶链反应检测玻璃体视网膜中opticin mRNA表达,Western-blot检测opticin蛋白表达。结果:1型糖尿病组玻璃体视网膜的opticinmRNA表达量是正常组玻璃体视网的68%,P<0.01;2型糖尿病1,2,3月组玻璃体视网膜的opticin mRNA表达量分别是正常组玻璃体视网的37%,36%,27%,P<0.01;但1,2,3月组之间的差异无统计学意义,P>0.05;1型、2型糖尿病组玻璃体视网膜的opticin蛋白表达量较正常小鼠玻璃体视网膜显著下降,P<0.01。2型糖尿病的2月、3月组小鼠玻璃体视网膜mRNA和蛋白表达均低于1月组小鼠。结论:1型、2型糖尿病小鼠玻璃体视网膜中opticin的mRNA和蛋白表达量较正常小鼠显著减少,2型糖尿病组小鼠玻璃体视网膜mRNA和opticin蛋白表达随时间延长逐渐降低。说明opticin在糖尿病视网膜病变的发生机制中可能起着重要作用。     

糖尿病动物模型P物质含量的变化及其意义

目的：研究P物质在糖尿病大鼠血浆和肠道组织中的变化及意义。方法：用放射免疫法分别检测糖尿病大鼠（10只）和正常大鼠（10只）血浆和十二指肠、远端结肠组织中P物质的含量。结果：糖尿病大鼠血浆P物质含量明显低于正常对照组（P＜0．05）。十二指肠、远端结肠中含量明显高于正常对照组（P＜0．05）。结论：肠道组织中P物质的变化在糖尿病胃肠功能障碍中起一定作用。     

内皮素及其受体蛋白家族在糖尿病大鼠视网膜中的表达

[摘要] 目的 探讨内皮素-1（ET-1）、ET-2、ET-3、内皮素受体A(ETRA)、ETRB和内皮素转换酶（ECE）在8周糖尿病SD大鼠视网膜中的表达。 方法 采用限制性片段差异显示PCR（RFDD-PCR）技术建立正常和8周糖尿病大鼠视网膜基因差异表达谱,并以半定量RT-PCR和Western印迹方法分别对两组间表达存在差异的6个基因包括ET-1、ET-2、ET-3、ETRA、ETRB和ECE的表达进行验证。 结果 RFDD-PCR结果显示,糖尿病组ET-1、ET-2、ET-3、ETRA、ETRB和ECE表达上调。RT-PCR结果和Western印迹结果显示,六种基因和蛋白在糖尿病组的表达（相对D比值）高于正常组,表达差异具有统计学意义（P均 < 0.05;P均 < 0.01）。结论 ET-1、ET-2、ET-3、ETRA、ETRB和ECE在DR中呈高表达,提示六种基因可能参与了DR的发病过程。