核因子—κB与大肠肿瘤细胞凋亡及其调控基因关系的研究

目的;通过观察大肠腺瘤、腺癌和正常组织中的细胞凋亡及其凋亡调控基因Bcl-2,Bcl-Ⅺ和核因子－κB的表达状态,探讨核因子－κB在大肠癌发病过程中的作用。方法：利用DNA缺口末端标记技术和NF－κB,Bcl-2,Bcl-Ⅺ蛋白免疫组化染色,原位检测30例大肠腺瘤和30例大肠腺癌中凋亡细胞和NF－κB,Bcl-2,Bcl-Ⅺ阳性表达细胞的密度和分布,以10例正常大肠组织作对照。结果：NF－κB,Bcl-2,Bcl-Ⅺ蛋白的表达率和表达强度腺癌和腺瘤高于正常组织（P＜0．01）,腺癌高于腺瘤（P＜0．01）。腺癌和腺瘤中的凋亡细胞指数均高于正常组织（P＜0．01）,腺瘤高于腺癌（P＜0．01）。结论：NF－κB在大肠癌发病过程中可能起重要作用。     

膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53的表达变化及意义

目的观察膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53的表达变化，并探讨其临床意义。方法用流式细胞术检测3l例膀胱癌组织中的Bcl-2、PCNA、p53，并与18例正常膀胱黏膜组织作对照。PI染色法和TUNEL法分别检测上述标本的细胞周期及凋亡细胞。结果31例膀胱癌组织中，Bcl-2阳性表达率为58．1％，p53为67．7％，PCNA中强度阳性。正常膀胱黏膜组织Bcl-2阳性表达率为16．7％、p53不表达、PCNA弱阳性，两者相比，P均〈0．01。Bcl-2、PCNA、p53的表达与膀胱癌的临床分级或分期相关。膀胱癌细胞周期分布异常，19例出现DNA异倍体，s期细胞增加，但未发现明显的周期阻滞现象。膀胱癌细胞凋亡增加。结论膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53过度表达，可出现DNA异倍体，均提示预后不良。     

c-erbB-2 、bcl-2和p53在结直肠肿瘤中的表达及其临床意义

背景：c-erbB-2、bcl-2和突变型p53在结直肠腺瘤癌变过程中相互调节并发挥重要作用。目的：探讨结直肠肿瘤中c-erbB-2、bcl-2和D53蛋白的表达及其临床意义。方法：取42例结直肠腺癌、10例腺瘤和10例正常结直肠黏膜组织，以免疫组化方法检测其中c-erbB-2、bcl-2和p53蛋白的表达，分析其表达与腺癌临床病理特征的关系。结果：c-erbB-2、bcl-2和p53蛋白在腺癌、腺瘤和正常黏膜组织中的表达差异均有统计学意义（P〈0．05），bcl-2蛋白在腺癌组织中的表达低于腺瘤组织，c-erbB-2和p53蛋白在腺癌组织中的表达高于腺瘤和正常黏膜组织。c-erbB-2蛋白的表达随腺癌分化程度的降低而增高，bcl-2蛋白的表达随腺癌分化程度的降低而降低：c-erbB-2和p53蛋白的表达与淋巴结转移和Dukes分期呈正相关。腺癌组织中bcl-2与p53蛋白的表达呈负相关（rs=-0．301，P〈0．05）。结论：c-erbB-2与结直肠癌的进展、分化和转移相关。腺癌组织中p53高表达和bcl-2相对低表达提示两者可能参与了结直肠癌的发生、发展过程，bcl-2过表达可能在结直肠癌发生的早期起作用。     

喉鳞状细胞癌组织中 Beclin1、COX-2、MVD 的表达变化及意义

目的：观察Beclin1、环氧化酶-2（COX-2）、微血管密度（MVD）在喉鳞状细胞癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法60例喉鳞状细胞癌患者,手术切除肿瘤组织,取其中30例患者癌旁正常喉黏膜组织作为对照,应用免疫组织化学二步法对喉鳞状细胞癌组织及正常喉黏膜组织中Beclin1、COX-2的表达进行检测,并检测CD105的表达评估微血管密度（ MVD ）。结果喉鳞状细胞癌组织中 Beclin1、COX-2的阳性表达率分别为56．7％、76．7％,癌旁正常喉黏膜组织分别为93．3％、20．0％,两者比较,P均＜0．05。喉鳞状细胞癌组织中MVD为（14．90±7．40）条,癌旁正常喉黏膜组织为（3．16±1．02）条,两者比较,P＜0．05。 Beclin1蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达与肿瘤部位、组织分化程度有关（P均＜0．05）。 COX-2在喉癌组织中的表达与组织分化程度、临床分期和淋巴结转移有关（P均＜0．05）。 MVD在喉癌组织中的表达与淋巴结转移、浸润深度、临床分期有关（P均＜0．05）。Beclin1与MVD表达呈负相关（r＝0．825,P＜0．01）,COX-2与MVD表达呈正相关（r＝0．763,P＜0．01）,COX-2和Beclin1在喉癌组织中的表达呈负相关（r＝-0．621,P＜0．01）。结论 Beclin1在喉癌组织中表达下调及COX-2在喉癌组织中表达增强与喉癌的浸润性发展和MVD有密切关系,联合检测Beclin1、COX-2和CD105可作为判断喉癌转移潜能和预后的重要指标之一。     

大肠癌组织中Cyelin E、p27kipl和Ki-67的表达及意义

目的采用免疫组化PowerVision两步法检测137例大肠癌及其邻近正常黏膜组织中细胞周期素E（Cyclin E）、抑制因子p27kipl和核抗原-67（Ki-67）。结果：大肠癌组织中Cyclin E表达水平显著高于邻近正常黏膜组织，并与原发肿瘤浸润深度、区域淋巴结转移及TNM分期显著正相关（r分别为0．213、0．367、0．348，P均〈0．05）。大肠癌组织中p27kipl表达水平显著低于邻近正常黏膜组织，并与原发肿瘤浸润深度、区域淋巴结转移及TNM分期显著负相关（r分别为-0．345、-0.269、-0.348，P均〈0.01）。大肠癌组织中Ki-67表达水平显著高于邻近正常黏膜组织，并与区域淋巴结转移及TNM分期呈显著的正相关（r分别为0．218、0．172，P〈0．05）。大肠癌组织中Cyclin E与p27kipl表达水平显著负相关（r=-0．235，P〈0．01）；CycHn E和Ki-67表达水平显著正相关（r=0．243，P〈0．01）；大肠癌组织中p27kipl与Ki-67表达水平呈显著负相关（r=-0．172，P〈0．01）。认为Cyclin E和p27kipl是大肠癌发生及侵袭转移的正、负性因子，联合检测Cyclin E、p27kipl和Ki-67有助于判断大肠癌的生物学行为及预后判断。     

大肠腺癌组织中BAG-1及其各亚型表达的临床意义

目的探讨凋亡抑制基因BAG-1及其各亚型表达在大肠癌发生、发展中的作用。方法用免疫组织化学SABC法分别检测正常大肠黏膜组织、大肠腺癌组织中BAG-1表达情况;蛋白印迹法检测BAG-1蛋白亚型在大肠腺癌组织、正常大肠组织及大肠腺瘤组织中的表达,并比较BAG-1及其亚型与大肠腺癌临床病理特征的关系。结果免疫组化结果显示,BAG-1蛋白表达在胞质（BAG-1S和／或BAG-1M）和胞核（BAG-1L）。大肠腺癌组织BAG-1蛋白表达阳性率明显高于正常大肠黏膜（P〈0．05）。BAG-1蛋白与大肠腺癌分化程度、Duke’s分期及淋巴结转移有关（P〈0．05）;BAG-1蛋白在大肠腺癌中表达亚型是BAG-1S;BAG-1S蛋白在大肠腺癌和大肠腺瘤中的表达均显著高于正常大肠黏膜（P〈0．01）;BAG-1S与大肠腺癌的分化程度有关（P〈0．01）。结论BAG-1蛋白参与了大肠腺癌的发生发展;起主要作用的亚型是BAG-1L和BAG-1S,其中BAG-1L可能与大肠腺癌的分化程度有关。     

乳腺肿瘤中Bcl-2、p53和PCNA蛋白的表达及临床意义

目的检测Bel-2、p．53和PCNA蛋白在乳腺良、恶性病变中的表达，旨在探讨其在乳腺癌发生和发展中的作用与意义。方法应用免疫组化SP法检测103例乳腺良、恶性肿瘤中Bcl-2、p53和PCNA蛋白的表达情况。结果①Bcl-2蛋白在乳腺癌、癌前病变及良性肿瘤中的阳性表达率分别为81．4％、93．3％和66．7％，各组间有明显差异（P〈0．05），且Bcl-2蛋白在乳腺癌组织中的表达与淋巴结转移及组织学分级有相关性（P〈0．01）。②p53蛋白在乳腺癌、癌前病变及良性肿瘤中的阳性表达率分别为46．5％、23．2％和0％，各组问有明显差异（P〈0．05）。③PCNA在乳腺癌、癌前病变及良性肿瘤中的阳性表达率分别为74．4％、70．0％和70．0％，组间比较无明显差异（P〉0．05）。PCNA在乳腺癌组织中的表达与组织学分级有相关性（P〈0．01）。结论Bcl-2、p53和PCNA蛋白过表达在乳腺组织恶性转化中起重要作用。     

EphA 2蛋白在大肠腺癌中的表达及与大肠腺癌发生发展的关系

目的探讨EphA2蛋白的表达与大肠腺癌发生发展的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测154例大肠腺癌和相应正常大肠黏膜组织中EphA2蛋白的表达。结果EphA2蛋白在癌组织中的表达明显高于相应正常大肠黏膜组织（P〈0．001）。EphA2阳性染色定位于相同区域的癌细胞和血管内皮细胞，且EphA2蛋白在癌细胞与血管内皮细胞中的表达呈正相关（r=60．272。P〈0．001）。EphA2蛋白高表达与癌分化程度、浸润深度和大体类型相关（P〈0．05）。而与患者的年龄、性别、肿瘤体积及淋巴结和血行、种植性转移无关（P〉0．05）。结论EphA2蛋白的高表达与大肠腺癌的发生和浸润转移有关。     

Eph A2基因与大肠腺癌的关系及机制的研究

目的 探讨Eph A2基因在大肠腺癌转移中的作用及机制.方法 采用免疫组化（SP）技术对126例大肠腺癌组织和相应正常大肠黏膜组织中Eph A2蛋白表达进行检测;并同时测定血清ICAM-1和VCAM-1.结果 Eph A2蛋白表达在126例癌组织中明显高于正常大肠黏膜组织（P＜0.001）,Eph A2蛋白表达阳性患者中血清ICAM-1和VCAM-1均高于Eph A2表达阴性患者,亦高于正常对照组,差异有统计学意义（P＜0 05）.结论 Eph A2基因可能与大肠腺癌的发生、肿瘤细胞的迁移和浸润能力有关,其调节肿瘤细胞转移的机制可能与ICAM-1和VCAM-1有关.     

RUNX3、Bcl-2和bax蛋白在大肠癌中的表达及其意义

目的探讨大肠癌组织中RUNX3、Bcl-2和bax蛋白的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测86例大肠癌、38例不典型增生、40例大肠腺瘤中RUNX3、Bcl-2和bax蛋白的表达。结果RUNX3和bax在大肠癌中的阳性表达率分别为28．63％和34．27％,明显低于在不典型增生（86．25％和84．8％）及大肠腺瘤（82．65％和88．34％）中的表达率（P〈0．05）。大肠癌中Bcl-2的表达率（71．47％）明显高于良性病变中表达。RUNX3和bax蛋白表达与大肠癌的临床分期、淋巴结转移呈负相关。bax蛋白表达与病理分级呈负相关,Bcl-2蛋白表达与病理分级呈正相关。大肠癌组织RUNX3阳性细胞率与bax蛋白表达呈正相关（P〈0．01）,与Bcl-2蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论RUNX3、Bcl-2和bax蛋白在大肠癌的发生发展中起重要作用。     

大肠腺癌p57kip2和cyclin E蛋白表达及与临床病理关系研究

目的　探讨细胞周期调控抑制因子p5 7kip2 蛋白和cyclinE(周期蛋白E)在大肠腺癌发生发展中的作用。方法　采用免疫组化技术SP法 ,检测p5 7kip2 和cyclinE蛋白在 3 7例大肠腺癌和 2 6例正常大肠粘膜组织中的表达。结果　p5 7kip2 蛋白阳性表达率在大肠腺癌组织中为 40 5 % ,显著低于正常大肠粘膜组织 ( χ2 =5 0 3 9,P <0 0 5 ) ,并与大肠腺癌组织分化程度和淋巴结转移均有关 ( χ2 =8 914 ,χ2 =4 416,P <0 0 5 ) ;cyclinE蛋白阳性表达率在大肠腺癌组织中为 64 9% ,显著高于正常大肠粘膜组织 ( χ2 =4 2 85 ,P <0 0 5 ) ,并与大肠腺癌组织分化程度和淋巴结转移均有关 ( χ2 =8 3 97,χ2 =5 2 61,P <0 0 5 ) ;p5 7kip2 蛋白阳性表达组cyclinE蛋白阳性表达率低于p5 7kip2 蛋白阴性表达组 ,但两者之间呈负相关 ( r=-0 3 0 2 7,P <0 0 5 )。结论　p5 7kip2 蛋白的低表达和 (或 )cyclinE蛋白的高表达可能在大肠腺癌发生发展中发挥重要作用 ;p5 7kip2 和cyclinE蛋白在大肠腺癌细胞周期调控中可能存在着负反馈调节机制     

P53,P185蛋白在大肠绒毛状腺瘤及其癌变组织中的表达

目的探讨p53，p185基因在大肠绒毛状腺瘤及癌变组织中的表达及其诊断价值．方法采用微波炉、免疫组化SP方法，检测55例大肠腺癌标本，其中大肠绒毛状腺瘤癌变20例，大肠浸润性腺癌35例，12例大肠绒毛状腺瘤标本，10例大肠增生性息肉标本中P53，P185蛋白的表达情况．结果10例大肠增生性息肉，p53，p185染色均阴性．55例大肠腺癌和12例大肠绒毛状腺瘤标本中，p53染色阳性率分别为44％（23／55），8．3％（1／12）．p185染色阳性率分别为49％（26／55），17％（2／11）．比较大肠腺癌与绒毛状腺瘤p53和p185的关系，差异均有显著性（P＜0．05）．20例大肠绒毛状腺瘤癌变及35例大肠浸润性腺癌标本中，p53染色阳性率分别为60％（12／20），13％（11／35）．p185染色阳性率分别为35％（11／20），54％（19／35）．比较两者p53的关系，差异具有显著性（P＜0．05），p185的关系，差异无显著性（P＞0．05）．结论p53可作为大肠绒毛状腺瘤癌变诊断的有用指标，p185对大肠绒毛状腺瘤癌变的诊断无意义．     

survivin基因在大肠癌组织中的表达及其与bcl-2和p53基因的相关性探讨

目的 探讨survivin在大肠癌组织中的表达及其与bcl-2、p53基因表达的相关性。方法 应用免疫组织化学方法检测大肠腺癌组织中survivin及bcl-2、p53的表达,并与其在正常大肠黏膜、增生性息肉及腺瘤组织中的表达进行比较。结果survivin在正常大肠黏膜无表达,大肠腺瘤（62.5%）、大肠癌（70.9%）中survivin表达率显著高于正常大肠黏膜和增生性息肉（16.7%）（P〈0.01）;survivin表达与与肿瘤浸润深度和淋巴结转移明显相关（P均〈0.05）;大肠癌组织中bcl-2、p53基因与survivin基因表达显著相关（P均〈0.05）。结论 survivin参与了大肠癌的发生和发展,可作为判断预后的参考指标;抑癌基因p53的失活和bcl-2的表达上调与survivin基因的表达可能在大肠癌的发生、发展中起协调作用。     

大肠癌组织中PTEN和COX-2的表达及其相关性研究

目的通过对PTEN和环氧合酶-2（COX-2）在大肠癌中表达的研究，探讨PTEN和COX-2的相关性。方法应用免疫组织化学S-P法检测58例大肠癌组织及20例正常大肠组织中PTEN和COX-2的表达。结果大肠癌组织中PTEN蛋白表达显著低于正常大肠组织中表达（P〈0．01）。且与淋巴结转移及Dukes分期相关（P〈0．05），而与大肠癌组织分化程度不相关（P〉0．05）。COX-2在大肠癌中的表达显著高于正常大肠黏膜的表达（P〈0．01），与淋巴结转移及Dukes分期相关（P〈0．05），而与大肠癌组织分化程度不相关（P〉0．05）。PTEN在大肠癌中的表达与COX-2呈负相关（P〈0．05）。结论PTEN失活或蛋白表达降低与大肠癌淋巴结转移及Dukes分期相关，且与COX-2呈负相关。抑癌基因PTEN和COX-2在大肠癌的发生发展过程中起着重要的作用。     

RECK和MMP-2在大肠癌中的表达及其相互关系

目的研究RECK和MMP-2在大肠癌及正常大肠组织中的表达,探讨其在大肠癌的发生、发展和浸润转移中的作用。方法应用免疫组织化学法（SABC）检测50例大肠癌组织和20例正常大肠黏膜组织中RECK和MMP-2的表达。结果RECK在大肠癌组织中的阳性表达率为64％,明显低于在正常大肠黏膜组织中的表达（100％）（P〈0．05）,并随肿瘤病理分化程度的降低、临床Dukes分期的提高、淋巴转移的产生而降低（P〈0．05）。MMP一2在大肠癌组织中的阳性表达率为72％,明显高于在正常大肠黏膜组织中的表达（15％）（P〈0．05）,并随临床Dukes分期的提高、淋巴转移的产生而增高（P〈0．05）。大肠癌组织中RECK与MMP-2的表达呈负相关（r=-0．642,P〈0．05）。结论大肠癌组织中RECK低表达,MMP-2高表达。RECK可能在大肠癌的发生和浸润转移过程中起重要作用,有望成为预测大肠癌转移与预后的重要参考指标。     

食管鳞癌中HIF-1α、Bax、Bcl-2的表达及意义

采用RT-PCR及免疫组化技术检测食管鳞癌和其正常食管上皮中低氧诱导因子（HIF-1α）的表达，用免疫组化SP法检测Bax和Bcl-2蛋白在食管鳞癌及其正常上皮中的表达。结果：食管鳞癌中HIF-1α基因和蛋白阳性表达率分别为96．0％和94．0％，正常食管上皮中未见表达，其阳性表达与食管鳞癌的组织学分级、pTNM分期及淋巴结转移呈正相关（P均〈0．05）。Bax和Bcl-2蛋白阳性表达率分别为80．0％和76．0％，正常食管上皮中未见表达。Bax蛋白表达水平与食管鳞癌淋巴结转移呈正相关（P〈0．05），Bcl-2蛋白在不同组织学分级间表达差异显著（P〈0．01）。HIF-1α蛋白与Bax、Bcl-2蛋白之间表达呈正相关（P〈0．05）。认为HIF-1α是食管鳞癌发生发展的一个关键基因，HIF-1α、Bax、Bcl-2在食管鳞癌发生发展过程中有协同作用，联合检测这三者在食管鳞癌中的表达有助于其早期诊断、治疗和预后判断。     

EphA2基因在大肠腺癌组织中的表达

目的探讨EphA2基因在大肠腺癌组织中表达的意义.方法采用免疫组化（SP）技术对154例大肠腺癌组织和相应正常大肠黏膜组织中EphA2蛋白表达进行检测;采用逆转录-聚合酶链反应（RT PCR）技术对66例大肠腺癌手术切除新鲜癌组织和相应正常大肠黏膜组织中EphA2 mRNA的表达进行检测.结果EphA2蛋白表达在154例癌组织中明显高于正常大肠黏膜组织（P＜0.001）,且EphA2蛋白的高表达与肿瘤生长方式、组织学分级、浸润深度相关（P＜0.05）.66例大肠腺癌组织中22例EphA2 mRNA呈阳性表达,正常黏膜组织中21例EphA2 mRNA呈阳性表达,两者相比差异无统计学意义（P＞0.05）,EphA2 mRNA的表达与肿瘤患者性别、肿瘤部位、生长方式、体积、组织学分级和肿瘤转移均无相关性（P＞0.05）;但是与肿瘤患者的发病年龄和肿瘤的浸润深度相关（P＜0.05）.结论EphA2基因与大肠腺癌的发生、肿瘤细胞的迁移和浸润能力相关.     

低剂量X射线照射对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响

目的 研究低剂量照射（LDR）对荷人小细胞肺癌（NCI-H446）裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响。方法 对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射，采用原位杂交技术检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织的p53、Bcl-2、Bax的mRNA表达水平。结果 D1（75mGy）、D2（4Gy）照射后，小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达呈上升趋势，Bcl-2的mRNA表达呈下降趋势，但与假照组（0 mGy）比较，无明显差异；D1＋D2组的p53、Bax的mRNA表达明显增多，Bcl-2mRNA表达显著下降，与假照组（0mGy）比较有统计学差异（P〈0．05）。结论 LDR在一定程度上可能上调小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达，下调了Bcl-2mRNA的表达，同时对其后的大剂量照射有协同作用。     

益智防呆方对Aβ1—40诱导大鼠海马神经元凋亡相关基因表达的影响

目的观察益智防呆方对Apl-40诱导大鼠海马神经元凋亡相关基因表达的影响。方法大鼠随机分为空白组、模型组、中药小、中、大剂量组及安理申组,双侧侧脑室注射Aβ1-40复制AD大鼠模型。给药4w后提取脑内海马神经元总RNA,RT—PCR测定Caspase-3、Bcl-2、Bax及p53表达。结果与空白组比较,模型组海马神经元Bcl-2表达明显减少妒〈0．01）,Caspase-3、Bax、p53表达明显增加俨〈0．01）;与模型组比较,益智防呆方能上调海马神经元Bcl-2表达俨〈0．01）,下调Caspase-3、Bax、p53表达俨〈0．01）。结论益智防呆方对改善学习记忆障碍的机制可能与上调海马神经元Bcl-2基因表达,下调Caspase-3、Bax、p53基因表达有关。     

PTEN和突变型p53蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

采用免疫组化EnVision法,分别检测72例鼻咽癌和32例鼻咽黏膜慢性炎性组织中蛋白酪氨酸磷酸酶基因（PTEN）及突变型p53蛋白的表达情况,分析二者与鼻咽癌临床病理特征的相关性。结果PTEN、突变型p53蛋白阳性表达率在鼻咽癌组织中分别为45．8％、77．8％,在鼻咽黏膜慢性炎性组织中分别为87．5％、9．4％,P均〈0．05;二者在鼻咽癌组织中的表达呈负相关性,且与鼻咽癌临床分期及淋巴结转移相关（P〈0．05）。证实在鼻咽癌组织中存在PTEN蛋白低表达和突变型p53蛋白高表达,且二者呈负相关,此在鼻咽癌发生、发展和转移中起重要作用。